专利名称：肉色曲霉菌及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及分离的真菌菌株及其在动物饲料中的用途。
背景技术：
反刍动物特别适于利用植物细胞壁，而由动物引起的该降解在经济上有很高的重 要性。然而，即使是在理想的饲养条件下，在整个消化道中，细胞壁的消化率通常也不到 65% (Van Soest，1994)。鉴于在草料干物质中，植物细胞壁通常占到40-70% (Van Soest， 1994)，提高瘤胃纤维(ruminal fibre)降解度的尝试已成为多年的研究焦点领域。尽管在开发提高蛋白质及能量利用的产品上已取得很多进展，草料领域却几乎止 步不前(Cruywagen，1999)。近期在采用纤维蛋白溶解酶作为反刍动物饲料添加剂的饲喂实 验中取得的阳性反应使得该课题在过去几年中受到很多研究的关注(Yang等，1999 ；Kung 等，2000)。日粮组合物(Beauchemin等，1995)及添加该酶的日粮成分(McAllister等， 1999)看上去会影响其有效性。在过去，酶添加剂可引起动物阳性反应，但仍未完全了解反刍动物中外源酶的作 用方式(Columbatto等，200 。这可能是由于加入的酶能刺激瘤胃中纤维的消化(Wallace 等，2001)，并提高反刍动物整个消化道的消化率(Yang等，1999)。已有研究报导，采用酶 添加剂可提高体重增长，同时提高主要由草料构成的反刍动物日粮的消化率(Beauchemin 等，1995 ；Feng 等，1996)。本申请人目前鉴定了一种真菌菌株，所述菌株产生能提高动物饲料消化率的酶。
发明内容
根据本发明第一个实施方式，提供了 一种分离的肉色曲霉(Aspergillus carneus)真菌菌株，命名为肉色曲霉(van Tiegham) Blockwitz (CBS 116150，保藏日 为2004年9月13日)。所述真菌菌株可产生多种外源纤维蛋白溶解酶(exogenous fibrolytic enzyme)。所述酶能增进细胞壁降解，由此提高动物饲料(如麦秆、反刍动物饲 料、鱼饲料或家禽饲料)的消化率。所述真菌菌株还可产生其他能提高所述动物饲料消化 率的蛋白质、生长因子和糖。根据本发明第二个实施方式，提供了一种发酵上述真菌菌株而得的培养物上清 液。所述培养物上清液可包括一种或多种外源纤维蛋白溶解酶，如β-木聚糖酶、β-内切 葡聚糖酶、β -甘露聚糖酶、β -葡糖苷酶、α -阿拉伯呋喃糖苷酶、β -木糖苷酶和/或阿 魏酸酯酶。所述上清液也可包括其他蛋白质、糖和/或生长因子。根据本发明第三个实施方式，提供了一种培养上述真菌菌株而得的培养物上清液 的提取物，所述提取物包括一种或多种外源纤维蛋白溶解酶，如β-木聚糖酶、β-内切葡 聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、β-木糖苷酶和/或阿魏 酸酯酶，任选地，所述提取物也可包括其他蛋白质、糖和/或生长因子。根据本发明再一个实施方式，提供了一种动物饲料添加剂，所述添加剂包括上述的真菌菌株和/或由该真菌菌株产生的一种或多种外源纤维蛋白溶解酶。
所述饲料添加剂可用于反刍动物饲料、家禽饲料或鱼饲料。
所述饲料添加剂可以是液体或粉末形式。根据本发明再一个实施方式，提供了 一种经上述饲料添加剂处理的动物饲料。所述饲料可以是反刍动物饲料、家禽饲料或鱼饲料。所述饲料可以是草料饲料(如麦秆)或浓缩饲料(如颗粒饲料)。根据本发明再一个实施方式，提供了一种提高动物饲料消化率的方法，所述方法 包括用上述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料添加剂处理所述动物饲料的步骤。所述真菌菌株及它的酶和其他产物可降解动物饲料中的细胞壁。所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料添加剂可以约Iml酶/kg动物饲料 至约20ml酶/kg动物饲料的含量用于动物饲料中，更优选的含量为约5ml酶/kg动物饲料 至约IOml酶/kg动物饲料，特别优选的含量为约5ml酶/kg动物饲料。所述饲料可在饲喂动物前约6小时至约M小时进行处理，更优选在饲喂前约18 小时进行处理。所述饲料可在颗粒化前进行处理。根据本发明再一个实施方式，提供了一种提高动物体重增长的方法，所述方法包 括在将动物饲料饲喂给动物前，用实质如上所述的真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料 添加剂处理所述动物饲料的步骤。
图1是用于羔羊体内实验的AB0374真菌酶组合物的谱图。图2是D6hne Merino羔羊每周及累计体重增长的图示，饲喂所述羔羊的日粮中 含有用不同水平的酶上清液(Abo 374)及阴性对照处理的麦秆(实施例1)。图3是D6hne Merino羔羊每周及累计体重增长的图示，饲喂所述羔羊的低浓缩 物肥育日粮(finishing diet)和高浓缩物肥育日粮中含有用Abo 374、Cattle-Ase及阴性 对照处理的麦秆(实施例2)。图4是(A)颗粒化日粮及(B)非颗粒化日粮的酶处理对DShne Merino羔羊每 两周体重增长的影响的图示(实施例3)。
具体实施例方式本发明记载了一种分离的真菌菌株的分离及表征，所述菌株被命名为肉色曲 霉(van Tiegham)Blockwitz (CBS 116150，保藏日为2004年9月13日)(本文也命名为 AB0374)，本发明还记载了该菌株具有这样的能力，S卩，将动物饲料(如麦秆、反刍动物饲 料、鱼饲料或家禽饲料)增强到在将所述动物饲料给予动物后足以引起动物体重增长提高 的程度。所述真菌培养物是从南非东开普(Eastern Cape)的鱼河平原(Fish River Plains)(大约内陆IOOkm处)的碱性土壤中分离而得。在把饲料颗粒化前，可将所述真菌菌株产生的含有酶和其它化合物的组合物用 于所述动物饲料，通常可以约Iml酶/kg动物饲料至约20ml酶/kg动物饲料的含量用于动物饲料中，更优选的含量为约5ml酶/kg动物饲料至约IOml酶/kg动物饲料，特别优选的 含量为约5ml酶/kg动物饲料。鉴定形杰学角度采用标准的形态学标准，利用Klich (2002)、Domsch等(1980)及Thom等(1951) 中的线索，鉴定该分离株为肉色曲霉(Aspergillus carneus)。该发现也与所述菌种的天然 栖息地相符，所述菌种尤其在温暖的可耕土壤中分布广泛。表1培育10天后的宏观特征
权利要求
1.一种分离的肉色曲霉(Aspergillus ca rneus)真菌菌株，命名为肉色曲霉(van Tiegham) Blockwitz (CBS 保藏编号 116150)。
2.如权利要求1所述的真菌菌株，所述真菌菌株产生多种外源纤维蛋白溶解酶。
3.如权利要求2所述的真菌菌株，其中，所述纤维蛋白溶解酶选自于由β-木聚糖酶、 β -内切葡聚糖酶、β -甘露聚糖酶、β -葡糖苷酶、α -阿拉伯呋喃糖苷酶、β -木糖苷酶及 阿魏酸酯酶组成的组。
4.如权利要求2或3所述的真菌菌株，其中，所述酶能提高动物饲料的消化率。
5.如权利要求4所述的真菌菌株，其中，所述动物饲料是麦秆。
6.如权利要求4所述的真菌菌株，其中，所述动物饲料是反刍动物饲料。
7.如权利要求4所述的真菌菌株，其中，所述动物饲料是鱼饲料。
8.如权利要求4所述的真菌菌株，其中，所述动物饲料是家禽饲料。
9.一种通过培养CBS保藏编号为116150的真菌菌株而得的培养物上清液。
10.如权利要求9所述的培养物上清液，所述上清液含有多种外源纤维蛋白溶解酶。
11.如权利要求10所述的培养物上清液，其中，所述纤维蛋白溶解酶选自于由β-木聚 糖酶、β -内切葡聚糖酶、β -甘露聚糖酶、β -葡糖苷酶、α -阿拉伯呋喃糖苷酶、β -木糖 苷酶及阿魏酸酯酶组成的组。
12.一种通过培养CBS保藏编号为116150的真菌菌株而得的培养物上清液的提取物， 所述提取物含有多种外源纤维蛋白溶解酶。
13.如权利要求12所述的提取物，其中，所述纤维蛋白溶解酶选自于由β-木聚糖酶、 β -内切葡聚糖酶、β -甘露聚糖酶、β -葡糖苷酶、α -阿拉伯呋喃糖苷酶、β -木糖苷酶 及 阿魏酸酯酶组成的组。
14.一种动物饲料添加剂，所述添加剂含有CBS保藏编号为116150的真菌菌株和/或 由所述真菌菌株产生的多种外源纤维蛋白溶解酶。
15.如权利要求14所述的饲料添加剂，所述添加剂用于反刍动物饲料。
16.如权利要求14所述的饲料添加剂，所述添加剂用于家禽饲料。
17.如权利要求14所述的饲料添加剂，所述添加剂用于鱼饲料。
18.如权利要求14-17中任一项所述的饲料添加剂，所述添加剂是液体形式。
19.如权利要求14-17中任一项所述的饲料添加剂，所述添加剂是粉末形式。
20.一种经权利要求14-19中任一项所述的饲料添加剂处理的动物饲料。
21.如权利要求20所述的动物饲料，所述饲料为反刍动物饲料。
22.如权利要求20所述的动物饲料，所述饲料为家禽饲料。
23.如权利要求20所述的动物饲料，所述饲料为鱼饲料。
24.如权利要求21所述的动物饲料，所述饲料为草料饲料。
25.如权利要求M所述的动物饲料，其中，所述草料饲料是麦秆。
26.如权利要求20-23中任一项所述的动物饲料，所述饲料为浓缩饲料。
27.如权利要求20-23中任一项所述的动物饲料，所述饲料为颗粒饲料。
28.如权利要求27所述的动物饲料，在颗粒化前，用饲料添加剂处理所述动物饲料。
29.如权利要求20-28中任一项所述的动物饲料，所述饲料中，所述饲料添加剂的含量 为约Iml饲料添加剂/kg动物饲料至约20ml饲料添加剂/kg动物饲料。
30.如权利要求20-28中任一项所述的动物饲料，所述饲料中，所述饲料添加剂的含量 为约5ml饲料添加剂/kg动物饲料至约IOml饲料添加剂/kg动物饲料。
31.如权利要求20-28中任一项所述的动物饲料，所述饲料中，所述饲料添加剂的含量 为约7. 5ml饲料添加剂/kg动物饲料。
32.一种提高动物饲料消化率的方法，所述方法包括用CBS保藏编号为116150的真菌 菌株、如权利要求9-11中任一项所述的培养物上清液、如权利要求12或13所述的提取物 或如权利要求14-19中任一项所述的饲料添加剂处理所述动物饲料的步骤。
33.如权利要求32所述的方法，其中，所述真菌菌株和/或它的酶降解所述动物饲料中 的细胞壁。
34.如权利要求32或33所述的方法，其中，所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲 料添加剂以约lml/kg动物饲料至约20ml/kg动物饲料的含量应用于所述动物饲料。
35.如权利要求32或33所述的方法，其中，所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲 料添加剂以约5ml/kg动物饲料至约10ml/kg动物饲料的含量应用于所述动物饲料。
36.如权利要求32或33所述的方法，其中，所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲 料添加剂以约7. 5ml/kg动物饲料的含量应用于所述动物饲料。
37.如权利要求32-36中任一项所述的方法，其中，在将所述饲料颗粒化前，用所述真 菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料添加剂处理所述动物饲料。
38.如权利要求32-37中任一项所述的方法，其中，在将所述动物饲料饲喂给动物前约 6小时至约M小时，用所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料添加剂处理所述动物饲 料。
39.如权利要求32-38中任一项所述的方法，其中，在将动物饲料饲喂给动物前约18小 时，用所述真菌菌株、培养物上清液、提取物或饲料添加剂处理所述动物饲料。
40.一种提高动物体重增长的方法，所述方法包括用CBS保藏编号为116150的真菌菌 株、如权利要求9-11中任一项所述的培养物上清液、如权利要求12或13所述的提取物或 如权利要求14-19中任一项所述的饲料添加剂处理动物饲料的步骤。
全文摘要
本发明记载了一种新的肉色曲霉(Aspergillus carneus)真菌菌株，命名为肉色曲霉(van Tiegham)Blockwitz(CBS 116150，保藏日为2004年9月13日)。所述真菌菌株产生多种能增进细胞壁降解的外源纤维蛋白溶解酶，由此提高动物饲料，如麦秆、反刍动物饲料、鱼饲料或家禽饲料的消化率。本发明还记载了含有这些酶的产品，如培养物上清液、饲料添加剂及动物饲料。
文档编号A23K1/165GK102098927SQ200980120316
公开日2011年6月15日 申请日期2009年4月1日 优先权日2008年4月1日
发明者伯纳德·亚历山大·普赖尔, 克里斯蒂安·维赫默·克鲁瓦根, 维尔默赫伯·范-齐尔, 阿尔弗雷德·博塔 申请人:斯坦陵布什大学