专利名称：提高动物出生雄性比例的方法及其动物模型的建立的制作方法
技术领域：
本发明涉及医疗评价、药物分析领域，具体地说，是关于双酚A在制备调节动物性别比例的制剂中的用途，以及关于提高动物出生雄性比例的方法及其动物模型的建立。
背景技术：
出生性别比是某一时期内出生男婴与女婴的数量之比的反映。其数值为每100名女婴对应的男婴数，即出生性别比=男婴出生数/同期女婴出生数X100。从人口学意义上来说，出生人口性别比的正常范围在102至107之间。中国在建国初的30年中，出生人口性别比基本上维持在正常范围内，然而从1980年起中国出生人口性别比开始失调，1982年时中国出生人口性别比为108. 47，1990年达到111. 3，2000年时已经上升到116. 86,2006年更是达到119. 3，少数省份的出生人口性别比异常偏高甚至突破130。
至于人口性别比失衡的原因，学者们主要从直接原因和根本原因两个方面进行分析。根本原因即是根植于经济、文化、家族体制的男性偏好，而直接原因则是性别鉴定、人工选择性流产女婴、瞒报女婴、生育率迅速下降所造成的。由于出生性别比的正常与否关系到人口结构的平衡和社会的稳定，性别比异常升高会带来一系列的社会问题，因此我们国家非常重视这个问题，相继出台了一个个抑制出生性别比偏高的法规、条例和规定，然而出生婴儿性别比非但没有下降，却仍在一路走高，解决出生性别比偏高的有效办法仍然没有找到。事实上出生性别比归结到底是由人的自然或者生理因素决定的，它并不直接受社会经济因素的影响，那么中国持续近30年的性别比升高，是主观因素的作用(人为因素)还是自然客观因素的作用，还需要进一步的深入研究。然而目前国内学者都是仅仅依靠人口普查资料汇总就推断出性别比升高是由主观原因引起的，而忽视了客观自然因素所起的作用，即自然条件变化所引起的人的生理机能的改变而导致的原因。因此，国内性别比升高有关的很多问题并没有说清楚，也始终没有找到解决问题的办法。我们都知道，环境污染对人体健康具有巨大的危害和影响，在这些环境污染物中，对生殖健康影响最深的首推环境内分泌干扰物(EDCs)。随着工业化的发展，大量的化学物质通过废水、废气、废渣、农药等多种途径排放到环境中，污染水源、土壤、空气。由于不易降解，环境内分泌干扰物可通过生物链的层层聚集，可在生物机体内长期蓄积，最终经过人体的消化道、呼吸道、皮肤进入体内。大量实验以及流行病学的调查结果表明，EDCs可引起发育、生殖、精神、情绪等多个方面的异常。环境内分泌干扰物种类繁多，其中双酚A(BPA)是近几年公众和科学家关注较多的一种，每年，超过60亿磅的BPA用于环氧树脂和聚碳酸酯塑料的制造，进而制造成各种各样的日用产品(食物容器、婴儿奶瓶等等)。当这些物品反复使用或暴露于高温、酸、碱环境中时，BPA就会从中释放或溶出，造成双酚A也随之进入体内。由于双酚A在人类生存环境中广泛存在，因此人群的双酚A暴露是非常普遍的。BPA具有微弱的雌激素样作用。啮齿类实验动物(小鼠、大鼠)得到的绝大多数研究都表明，BPA对雄性生殖系统有害，特别是在组织形成和发育阶段如在妊娠期和新生儿期的暴露能对实验动物造成重要影响。主要包括睾丸内生精细胞、支持细胞及间质细胞受到不同程度损害，睾酮水平、精子数量、密度及活力下降，精子畸形率增高；甚至隐睾、尿道下裂的发生率也会增加。随着1979年开始的改革开放，我国经济得到飞速发展的同时，也带来了触目惊心的环境污染问题，包括大气污染、水污染、重金属污染等，于此同时，中国的出生性别比也持续不断的升高，不仅如此，根据2000年全国人口普查数据，将344个地市出生人口性别比按东、中、西部聚类比较，东部地区出生人口性别比偏高起始时间早于西部地区，同时，偏高程度也比西部地区严重，总体上表现为西部-中部-东部渐次升高。与第三、四次人口普查进行比较，出生人口性别比偏高的范围逐渐从沿海发达地区向中西部地区蔓延。这一数据与中西部大开发、中西部环境污染加重的大背景相吻合，这些数据上的一致性背后一定有某些因素在起作用。然而，目前还没有研究人员将环境内分泌干扰物BPA与中国的出生性别比升高联 系在一起，这两者之间是否具有相关性并不清楚。
发明内容
本发明的目的在于提供双酚A在制备调节动物性别比例的制剂中的用途。本发明的另一目的在于提供一种出生性别比失调的动物模型及其建立方法和应用。在本发明的第一方面，提供一种双酚A的用途，用于制备提高哺乳动物子代中雄性比例的组合物。在另一优选例中，所述的哺乳动物是非人哺乳动物。在另一优选例中，所述的哺乳动物是鼠。在本发明的另一方面，提供一种提高哺乳动物子代中雄性比例的组合物，所述的组合物含有10_20mg/ml 双酌· A ;和玉米油。在本发明的另一方面，提供所述的组合物的制备方法，包括将有效量的双酚A添加上玉米油中。在本发明的另一方面，提供一种提高非人哺乳动物子代中雄性比例的方法，包括将双酚A施用于雄性非人哺乳动物，经过一个生精周期后，再与雌性非人哺乳动物交配，繁殖产生子代，该子代中雄性非人哺乳动物的比例提高。在另一优选例中，所述的雄性非人哺乳动物是性成熟前的非人哺乳动物。在另一优选例中，所述的非人哺乳动物是小鼠，所述方法包括选用性成熟前的3周龄雄性小鼠；施用的双酹A的剂量为50mg/kg/天,连续施用7天；或在双酚A注射后5周，雄性小鼠与正常的雌性小鼠交配产生子代。在本发明的另一方面，提供一种非人哺乳动物模型，其为雄性非人哺乳动物，其被施用了双酚A。
在另一优选例中，所述的非人哺乳动物模型的子代中，雄性动物的比例高于雌性动物(雄性个数与雌性个数的比值高于I. 18)。所述的非人哺乳动物模型的用途，用于筛选可调节哺乳动物子代中雄性比例的物质。在本发明的另一方面，提供一种筛选可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质的方法，所述方法包括步骤(I)将候选物质给予非人哺乳动物，所述的非人哺乳动物是施用了(较佳地在性成熟之前施用了)双酚A的雄性非人哺乳动物；(2)将(I)的雄性非人哺乳动物与雌性非人哺乳动物交配，繁殖产生子代，检测子代动物的性别比例；若雄性与雌性的性别比例趋于正常(雄性个数与雌性个数的比值接近 于1，如在1-1. 08之间)，则说明所述候选物质是可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质。在另一优选例中，步骤(I)包括在测试组中，将候选物质给予施用了双酚A的雄性非人哺乳动物；和/或步骤⑵包括检测测试组子代动物的性别比例，并与对照组比较，其中所述的对照组是不给予候选物质的施用了双酚A的雄性非人哺乳动物；如果测试组中子代雄性个数与雌性个数的比值在统计学上小于对照组(或与对照组相比，测试组中子代雄性个数与雌性个数的比值更接近于I)，则表明该候选物质是可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质。本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
图1、F1代雄雌性别比柱状图。统计了双酚A(BPA)组的Fl代452只小鼠，对照组(CON) Fl代265只小鼠，双酚A组的Fl代性别比(雄性雌性)为118.8 100，对照组Fl代性别比为101. 42 100，T检验显示，两组之间的P = O. 0474 (P < O. 05)，即两组的性别比差异具有统计学上的意义。
具体实施例方式本发明人在研究中出乎意料地发现，以双酚A(BPA)施用于性成熟之前的雄性哺乳动物，可使得该雄性哺乳动物的子代中雄性子代比例的增加。因此，给予双酚A的动物可作为动物模型，应用于筛选调节哺乳动物子代性别比例、预防性别比例失调的药物。双酹A及其用途双酚A (BPA)学名2，2-二(4_羟基苯基)丙烷，简称二酚基丙烷。白色晶体，熔点156 158°C。主要用于制备环氧树脂和聚碳酸酯，其钾盐或钠盐是生产聚砜的原料。双酚A的化学结构式如下
权利要求
1.一种双酚A的用途，其特征在于，用于制备提高哺乳动物子代中雄性比例的组合物。
2.如权利要求I所述的用途，其特征在于，所述的哺乳动物是非人哺乳动物。
3.一种提高哺乳动物子代中雄性比例的组合物，其特征在于，所述的组合物含有 10-20mg/ml双酚A ;和玉米油。
4.权利要求3所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括将有效量的双酚A添加上玉米油中。
5.一种提高非人哺乳动物子代中雄性比例的方法，其特征在于，包括 将双酚A施用于雄性非人哺乳动物，经过一个生精周期后，再与雌性非人哺乳动物交配，繁殖产生子代，该子代中雄性非人哺乳动物的比例提高。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的雄性非人哺乳动物是性成熟前的非人哺乳动物。
7.一种非人哺乳动物模型，其特征在于，其为雄性非人哺乳动物，其被施用了双酚A。
8.权利要求7所述的非人哺乳动物模型的用途，用于筛选可调节哺乳动物子代中雄性比例的物质。
9.一种筛选可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质的方法，其特征在于，所述方法包括步骤 (1)将候选物质给予非人哺乳动物，所述的非人哺乳动物是施用了双酚A的雄性非人哺乳动物； (2)将(I)的雄性非人哺乳动物与雌性非人哺乳动物交配，繁殖产生子代，检测子代动物的性别比例；若雄性与雌性的性别比例趋于正常，则说明所述候选物质是可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤(I)包括在测试组中，将候选物质给予施用了双酚A的雄性非人哺乳动物；和/或 步骤(2)包括检测测试组子代动物的性别比例，并与对照组比较，其中所述的对照组是不给予候选物质的施用了双酚A的雄性非人哺乳动物；如果测试组中子代雄性个数与雌性个数的比值在统计学上小于对照组，则表明该候选物质是可预防哺乳动物子代中雄性比例失调的潜在物质。
全文摘要
本发明提供了提高动物出生雄性比例的方法及其动物模型的建立。本发明人将化合物双酚A施用于雄性小鼠，其产生子代出生雄性别比升高，即有更多的雄性子代。该动物模型可用于筛选预防出生性别比失调的药物及效果评价。
文档编号A01K67/027GK102961367SQ201110255750
公开日2013年3月13日 申请日期2011年8月31日 优先权日2011年8月31日
发明者李润生, 李玉华, 王健, 刘媛媛, 段斐 申请人:上海市计划生育科学研究所