专利名称：一种制备金针菇液体菌种的简易方法
技术领域：
本发明涉及一种金针菇液体菌种的制备，特别是公开一种采用简单设备进行金针菇液体菌种快速培养的方法，适用于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产。
背景技术：
金针菇(Flammulina velutipes)不仅含有蛋白质、氨基酸、维生素、矿质元素等多种营养物质，具有营养功能，而且，富含多糖、多肽、生物碱、苷类、蒜菇素、金针菇原素、冬菇素等多种生理活性物质，具有保健、防病抗癌功能，还可促进儿童健康成长和智力发育。利用金针菇生产保健食品、功能食品已为世人瞩目。随着国内外市场对金针菇产品需求的增长，其生产方式由传统的固体栽培、季节性生产模式，逐渐向设施化、工厂化、周年化、规模化生产发展。生产方式的变革使得采用制备的金针菇液体菌种栽培子实体成为发展趋势。但是金针菇子实体的栽培具有某种特殊性，相对于细菌、霉菌等微生物发酵产品的生产而言，发酵周期长、商品价值也不太高。如果建立工业微生物发酵生产设备来进行其液体菌种生产，技术要求高、设备利用率低、投资大，光配套的水、电、气、汽设备就需要几十万元以上的资金，从生产成本来看不合算。然而液体菌种的生产有其先进的地方，潜在着明显的优势，因此寻找投资少、适合个体菇农使用的金针菇液体菌种的简易制备方法具有现实意义，简便的液体菌种培养方法成为关注的热点ο
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提供一种制备金针菇液体菌种的简易方法，一种利用培养微生物的常规设备进行金针菇液体菌种制备的方法， 可克服微生物液体深层培养设备昂贵、操作复杂的缺陷，便于菇农进行金针菇液体菌种的
批量生产。为了解决上述现有技术问题，本发明所采用的技术方案是一种制备金针菇液体菌种的简易方法，该方法为采用无菌操作法将制备的金针菇菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基装量为30-50%，悬液接种量为10-15%， 然后将三角瓶放置在置于25-26°C恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为180-200转/ 分，2516°C恒温培养7-9天，形成的黄色小菌球(见图幻即为液体菌种。上述金针菇菌丝体悬液的制备方法为微生物的基本操作方法，为现有技术，是将保藏的金针菇菌种用PDA固体培养基进行试管斜面培养，试管大小为ISOmmX 18mm， 2516°C恒温培养6-7天，待形成丰满的白色菌丝，无杂菌生长后，加入无菌生理盐水，用刮铲刮下菌丝体，制成菌丝体悬液，其中，无菌生理盐水的加入量为每ISOmmX 18mm的试管制备的斜面菌种加无菌生理盐水8-12ml ；上述金针菇液体菌种培养基的配制按常规方法配制，每升含可溶性淀粉40g、 蛋白胨5g、七水硫酸镁0. 5g、磷酸二氢钾lg、葡萄糖10g、维生素BIO. 05mg、及维生素B20. 05mg, !1值6.8。上述提及的液体菌种培养基的灭菌是指将配制的培养基采用不锈钢手提式压力灭菌锅于121°C灭菌30分钟。采用本发明方法培养的液体菌种与常规培养的固体菌种进行栽培试验以棉籽壳为主要原料，按常规方法制备栽培袋，采用熟料袋栽法进行菌种栽培试验。每袋装培养料干重400g，灭菌后，分为2组，在无菌条件下，一组接种本发明方法培养的液体菌种，每袋接种量5%，另一组接种常规培养的固体菌种，每袋接种18-20g。其栽培流程如下拌料一装袋一消毒灭菌——接种——菌丝培养——搔菌一出菇一催菇生长一采收。 栽培过程中首先将培养温度控制在18 20°C。湿度控制在70% 80%，并定期进行通风换气。菌丝长满袋后分开培养(因各袋菌丝生长情况不一样)。长满后调节室内温度13 14°C、相对湿度85% 90%进行培养。待子实体萌发后，菌盖直径为Imm左右、柄长为3 5cm时，将栽培袋移入室温为4°C的控制室，进行遮光处理。当菌柄长12 15cm。 菌盖0.5 Icm时即可采收。观测记录栽培袋内菌丝生长及出菇情况，并统计头潮菇产量、总产量、出菇时间、 记录菌柄菌盖直径及测定生物学效率。(生物学效率=子实体鲜重/培养料干重X100%)。 结果见下表1 表1本发明方法培养的液体菌种与常规培养的固体菌种的栽培数据对照表
权利要求
1.一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于该方法为采用无菌操作法将制备的金针菇菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，三角瓶中培养基体积装量为30-50%，悬液接种量为10-15%，然后将三角瓶放置在置于25-26°C恒温培养箱中的磁力搅拌器上，调节转速为180-200转/分，25-26°C恒温培养7-9天，形成的黄色小菌球即为液体菌种。
2.如权利要求1所述的一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于所述金针菇菌丝体悬液的制备方法是将保藏的金针菇菌种用PDA固体培养基进行试管斜面培养， 2516°C恒温培养6-7天，待形成丰满的白色菌丝，无杂菌生长后，加入无菌生理盐水，用刮铲刮下菌丝体，制成菌丝体悬液，其中，无菌生理盐水的加入量为每ISOmmX 18mm的试管制备的斜面菌种加无菌生理盐水8-12ml。
3.如权利要求1所述的一种制备金针菇液体菌种的简易方法，其特征在于所述液体菌种培养基每升含可溶性淀粉40g、蛋白胨5g、七水硫酸镁0. 5g、磷酸二氢钾lg、葡萄糖 10g、维生素 BIO. 05mg、及维生素 B20. 05mg, pH 值 6. 8。
全文摘要
一种制备金针菇液体菌种的简易方法，是采用无菌操作法将制备的菌丝体悬液接种至装有灭菌的液体菌种培养基的三角瓶中，然后将三角瓶放置在置于恒温培养箱中的磁力搅拌器上进行恒温培养，形成的黄色小菌球即为液体菌种。本发明利用培养微生物的常规设备进行金针菇液体菌种的制备，便于菇农进行金针菇液体菌种的批量生产；以液体菌种代替固体菌种进行金针菇子实体的栽培，可以缩短发菌时间、降低生产成本、提高生产效率，满足市场的大量需求。
文档编号A01G1/04GK102349416SQ20111026492
公开日2012年2月15日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘红, 勒磊, 陈冬纯, 陈力力 申请人:湖南农业大学