专利名称：一种解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法
技术领域：
本发明属于食用菌菌种领域，特别涉及一种解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法。
背景技术：
菌种退化通常是指在较长时期传代保藏后，菌株的ー个或多个生理性状和形态特征逐渐減退或消失的现象。菌种退化的本质是染色体的变异。在生产实践中常会遇到菌种退化的问题，有的是菌种的发酵カ(如糖、氮的消耗)或繁殖力(如孢子的产生)下降，有的是发酵产品的得率降低，这些都给生产带来很不利的影响。菌种退化的原因是多方面的，但必须将其与培养条件变化而导致的菌种形态和生理上的变异区别开来，因为优良菌种的生产性能是和发酵エ艺条件密切相关的。此外，杂菌污染也会造成菌种退化的假象，产量也会下降。总体来说，菌种退化的原因有两方面一是菌种保藏不妥，ニ是菌种生长的要求没有得 到满足，或是遇到某些不利条件，或是失去某些需要的条件。此外，还有经诱变得来的新菌株发生回复突变，从而丧失新的特性的情況。现有技术中，解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法较多，包括在液体发酵中，将气体搅拌代替机械搅拌，天然有机物代替化学试剂、专用母种代替传统母种。但菌性变异退化问题没有得到彻底解決，尤其是没有一个系统的解决问题方法来针对于多种原因引起的变异退化问题。
发明内容
本发明提供了ー种能够系统的解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法。本发明的一种解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法，其中液体菌种为蘑菇液体菌种，具体方法包括如下步骤使用高效诱变剂步骤，高效诱变剂包括伊曲康唑和雷帕霉素，二者占所述营养液体的重量百分比为0. 5-5%伊曲康唑和1-7%的雷帕霉素；及如下步骤中的ー种或几种低温保藏菌种步骤，所述低温保藏菌种步骤是指将菌种置于1_3°C培养，或置于液氮在超低温条件下保藏；调节培养条件步骤，所述调节培养条件步骤包括根据菌种个体差异来减少菌种移接次数，移接次数最多3次；分离纯化步骤，所述分离纯化步骤包括有性孢子分离与无性组织分离步骤，所述有性孢子分离是在毎次出菇后，挑选符合本品种特征的优良子实体进行组织分离，毎年进行一次孢子分离，并经出菇鉴定后，选择性状优良者再进行无性组织分离；所述有性孢子分离与无性组织分离为交替使用。本步骤，是以有性繁殖来发现好的变异菌株，用组织分离来巩固这些优良菌株的遗传。本发明的雷帕霉素(RAPA)是大环内酯类免疫抑制剂，结构式如下
权利要求
1.一种解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法，所述液体菌种包括蘑菇液体菌种，其特征在于，所述方法包括 使用高效诱变剂步骤，所述高效诱变剂包括伊曲康唑和雷帕霉素，二者占所述营养液体的重量百分比为O. 5-5%伊曲康唑和1-7%的雷帕霉素； 及如下步骤中的一种或几种 低温保藏菌种步骤，所述低温保藏菌种步骤是指将菌种置于I 3°C培养，或置于液氮在超低温条件下保藏； 调节培养条件步骤，所述调节培养条件步骤包括根据菌种个体差异来减少菌种移接次数，移接次数最多3次； 分离纯化步骤，所述分离纯化步骤包括有性孢子分离与无性组织分离步骤，所述有性孢子分离是在每次出菇后，挑选符合本品种特征的优良子实体进行组织分离，每O. 5-1.5年进行一次孢子分离，并经出菇鉴定后，选择性状优良者再进行组织分离；所述有性孢子分离与无性组织分离为交替使用。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括复壮步骤，所述复壮步骤包括选择菌种适合的培养基、培养温度、环境、pH、防止杂菌污染，避免多品种混合栽培。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述蘑菇包括口蘑、香菇、草菇、金针菇、猴头、平菇、凤尾菇、鲍鱼菇、滑菇。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，每I年进行一次孢子分离。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为金针菇，所述伊曲康唑的用量是2%、所述雷帕霉素的用量是4%。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为口蘑，所述伊曲康唑的用量是O.5%、所述雷帕霉素的用量是7%。
7.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为香菇，所述伊曲康唑的用量是5%、所述雷帕霉素的用量是1%。
8.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为滑菇，所述伊曲康唑的用量是5%、所述雷帕霉素的用量是5%。
9.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为猴头，所述伊曲康唑的用量是4%、所述雷帕霉素的用量是3%。
10.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述蘑菇为平菇，所述伊曲康唑的用量是5%、所述雷帕霉素的用量是2%。
全文摘要
本发明涉及一种解决液体菌种营养液体菌性变异退化的方法，特别是涉及蘑菇液体液体菌种的方法，包括使用高效诱变剂步骤，其中高效诱变剂包括伊曲康唑和雷帕霉素，二者占所述营养液体的重量百分比为0.5-5%伊曲康唑和1-7%的雷帕霉素；还可包括低温保藏菌种步骤、调节培养条件步骤、分离纯化步骤。本发明以伊曲康唑和雷帕霉素作为高效诱变剂为核心方法，诱变作用较温和，同时优化了菌种保藏条件、营养液体的营养条件、传代次数条件、纯化条件等，实验证明,对各类蘑菇的液体菌种营养液体菌性变异退化问题能够基本解决，具有显著地经济价值，获得高产菌株。
文档编号A01G1/04GK103004474SQ20121059398
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月31日 优先权日2012年12月31日
发明者陶军, 胡亚鹏 申请人:陕西众兴菌业科技有限公司