一种拟南芥/盐芥的无菌嫁接方法与流程

文档序号:11866699阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种拟南芥/盐芥的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤如下:

(1)砧木准备:将盐芥种子经消毒处理后,播种于含有琼脂粉的1/2MS培养基上,层积1周后转入长日照光照条件下培养,萌发后7-10天作为砧木苗;

(2)接穗准备:待盐芥萌发时,将拟南芥种子进行消毒处理,并播种于含有琼脂粉的1/2MS培养基上,层积或直接置于长日照条件下培养,萌发后3-5天作为接穗;

(3)无菌条件下进行拟南芥和盐芥之间的嫁接;

(4)嫁接体培养:将嫁接好的拟南芥/盐芥复合体置于短日照条件下培养6-8天;

(5)嫁接苗的移栽:将嫁接成功的嫁接苗移栽至水培营养液或营养土中继续培养。

2.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,采用相同的方法对种子进行消毒处理,具体的消毒方法为:用浓度为0.5%的NaClO消毒6-8分钟,然后用无菌水清洗4-6次。

3.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,所述1/2MS培养基中琼脂的含量为1-1.5%;优选为1.2%。

4.根据权利要求1或3所述的无菌嫁接方法,其特征在于,1/2MS培养基中的琼脂为Sigma琼脂。

5.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,长日照培养的条件为:16h光照/8h黑暗,光照条件下的温度为21-23℃,黑暗条件下的温度为18-20℃,光强为8000lux,相对湿度大于70%。

6.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(3)中,所述嫁接的方法为:将萌发后7-10天的盐芥的真叶及生长点切去,只保留两片子叶作为砧木;将萌发后3-5天的拟南芥下胚轴距上端1/4处切下作为接穗,嫁接到盐芥砧木上。

7.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(4)中,短日照培养的条件为:8h光照/16h黑暗,光照条件下的温度为21-23℃,黑暗条件下的温度为18-20℃,光强为8000lux,相对湿度大于70%。

8.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(4)中,所述水培营养液为1/2Hogland营养液;所述营养土是由土、蛭石和珍珠岩按质量比3:2:1制成。

9.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,所述的种子消毒、播种和嫁接过程均是在无菌超净台中操作。

10.根据权利要求1所述的无菌嫁接方法,其特征在于,步骤(3)中,采用双面刀片切去盐芥的真叶及生长点。

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