一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基的制作方法

文档序号:11391096阅读:516来源:国知局
本发明涉及栽培技术,尤其涉及白芨组织育苗培养。
背景技术
:白芨(bletillastriata(thunb.)reichb.f.)为兰科(orchidaceae)植物白芨属多年生草本植物,以干燥块茎入药。具有收敛止血,消肿生肌的功效。对咯血、吐血、便血及外伤止血、疮疡肿毒、手足跋裂等有较好疗效,广泛用于治疗肺结核及支气管扩张咯血、胃溃疡出血等症,其白芨胶广泛应用于食品、医药和日用化学品等领域,市场需求量大增,带动大面积的白芨种植。在白芨育苗阶段,如何增加出芽量,提高育苗数量是本发明的研究主体,其常规解决办法是采用组织培养,如专利号为cn201110175931.1的发明专利“一种快速繁殖白芨苗的方法”,能够获得大量的白芨幼苗,对原球茎进行切碎后用培养基培养基培养,由于其对切碎的原球茎的愈合能力有限,故此在进行培育前需要用中毒性的洗衣粉和高毒性的升汞溶液对假鳞茎进行消毒,不仅对白芨造成污染,而且还会影响育苗的成活率。技术实现要素:为解决上述技术问题,本发明提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,具体方案为:一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖20~30g、氨基酸50~75mg、维生素1~4mg、琼脂10~25g、左旋龙脑20~40mg;溶剂为水。进一步的,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少两种。进一步的,所述氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸的组合,其比例为10∶(1~3)∶(3~5)∶(1~3)∶(2~5)。进一步的,所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12中的至少两种与肌醇的组合,进一步的,所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12、肌醇的组合,其比例为7∶(1~4)∶(4~7)∶(1~3)。进一步的,该愈伤组织培养基的每升溶液为还含有激动素10~15mg。进一步的,该愈伤组织培养基的每升溶液为还含有生长素0.1~0.3mg。进一步的,所述的生长素为5-羟-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的组合,其组合比例为10∶(1~4)∶(2~5)。本发明的有益效果在于:本发明提供的愈合培养基能够快速愈合白芨原球茎的切割面,其愈伤组织诱导率高于80%,愈伤指标数在3以上,生长率高于70%。具体实施方式下面进一步描述本发明的技术方案,但要求保护的范围并不局限于所述。实施例一本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖20g、氨基酸50mg、维生素1mg、琼脂10g、左旋龙脑20mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少两种;本实施例选择等量的甘氨酸和异亮氨酸所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12中的至少两种与肌醇的组合,本实施例选择等量的维生素b1、维生素b2与肌醇的组合。实施例二本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖30g、氨基酸75mg、维生素4mg、琼脂25g、左旋龙脑40mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少两种;本实施例选择等量的异亮氨酸和苏氨酸;所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12中的至少两种与肌醇的组合,本实施例选择等量的、维生素b2、维生素b12与肌醇的组合。实施例三本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖25g、氨基酸60mg、维生素3mg、琼脂15g、左旋龙脑30mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸中的至少两种;本实施例选择等量的苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸;维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12中的至少两种与肌醇的组合,本实施例选择等量的维生素b1、维生素b12与肌醇的组合。实施例四本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖20g、氨基酸50mg、维生素1mg、琼脂10g、左旋龙脑20mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸的组合,其比例为10∶1∶3∶1∶2。维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12、肌醇的组合,其比例为7∶1∶4∶1。实施例五本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖30g、氨基酸75mg、维生素4mg、琼脂25g、左旋龙脑40mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸的组合,其比例为10∶3∶5∶3∶5。所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12、肌醇的组合,其比例为7∶4∶7∶3。实施例六本实施例提供了一种白芨组织育苗培养的愈伤组织培养基,该愈伤组织培养基的每升溶液为含有蔗糖25g、氨基酸60mg、维生素3mg、琼脂15g、左旋龙脑30mg;溶剂为水。上述中,所述的氨基酸为甘氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、色氨酸、半胱氨酸的组合,其比例为10∶2∶4∶2∶4。所述的维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b12、肌醇的组合,其比例为7∶3∶5∶2。实施例七本实施例与实施例六不同的地方在于:该愈伤组织培养基的每升溶液为还含有激动素10~15mg。实施例八本实施例与实施例七不同的地方在于:该愈伤组织培养基的每升溶液为还含有生长素0.1~0.3mg,生长素为5-羟-iaa、萘乙酸、吲哚丁酸的组合,其组合比例为10∶(1~4)∶(2~5)。同时,为了证明本发明的有益效果,本发明还提供了以下试验例:取白芨的原球茎切成小块,用该培养基进行愈合培养,分别选择用实施例一~实施例八的培养基进行培养,标号为s1~s8,,利用spss统计分析如啊年对实验结果做回归系数的季涮和统计检验。、培养条件:原球茎先进行消毒,然后在进行切成碎块,培养温度24±1℃700勒克斯下进行培养,测试指标包括最早出现愈伤组织的时间、原球茎的愈伤率和愈伤组织的生长率;根据原球茎的伤化程度,将愈伤指数分成5级,无愈伤化为0级,愈伤化在0~25%的为1级,在26%~50%的为2级,在51%~75%的为3级,76%~100%为4级。愈合组织生长率=((收获量-接种量)/接种量)/培养时间白芨的原球茎切成小碎块后再培养基中培养30d,调查愈伤数、诱导率、平均愈伤指数、生长率。表1编号接种数愈伤数诱导率平均愈伤指数生长率s130250.833.150.75s230260.863.211.01s330240.83.210.84s430250.833.180.94s530270.93.191.21s630280.933.171.2s730270.93.191.18s830270.93.231.14通过上表可以看出,本实施例提供的愈合培养基的愈伤组织诱导率均较高,达到80%~100%,平均愈伤数达到3以上。当前第1页12
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