本发明涉及热带林木的良种选育及苗木繁殖技术领域，尤其是涉及一种檀香组织培养快速繁殖微扦插育苗方法。
背景技术：
檀香(santalumalbuml)是檀香科(santalaceae)檀香属的一种常绿半寄生小乔木，原产于印度尼西亚，它是一种集药用、佛教用品、香料、精细工艺雕刻材料于一体的重要经济树种。
檀香消费已有1000多年的历史，自古世界公认为高档消费品。目前，国内外檀香资源在急剧减少，现在全球年产量不足1000吨,檀香香精产量不足1吨，市场严重供不应求。因此，檀香种植业成为新生的朝阳产业，具有很大的市场开发前景。目前，我国广东、广西、海南、云南、四川、福建等省区大力推广檀香栽培，并获得了具有经济价值的心材，但缺乏优质的檀香苗木，更缺乏檀香优良无性系，限制了檀香种植业产业的发展。选择优良母株，进行无性系繁殖是实现檀香栽培良种化和无性系化的关键技术，攻克檀香组培苗木生根难，生根培养不生根和落叶死亡，移植成活率低的问题，是檀香繁殖和栽培必须解决关键技术难题。
原有技术状况：组织培养从外植体消毒→增殖培养→生根培养→苗圃移植。利用上述方法对檀香进行快繁存在以下缺陷：
檀香为半寄生的植物，种胚萌发后不久，根系即可形成吸盘，吸附在其它植物根系上，从其它植物的根系中吸收水分和营养，这一特性决定了檀香组培诱导生根难，或者诱导形成根原基和短根后，难以继续发育形成良好的能够支撑移植成活的根系。因此，常规组培生根培养难度大，移植成活难度亦大。另外，檀香根系营养吸收能力弱，组培芽苗移植过程如何及时补充营养也是需要特别解决的技术难题。
技术实现要素：
本发明的主要目的在于提供一种檀香组培快繁微扦插育苗方法。该方法旨在解决檀香组织培养生根难、生根培养不生根和落叶死亡、移植成活率低的问题，实现田间微扦插成功，达到规模化生产优良品系苗木的目的。其主要技术是利用组织快繁的研究方法，实现规模化繁殖1/3轮伐期以上优质檀香母株的无性系芽苗，通过特殊的预生根处理，培养生长健壮不落叶、高度在3.5cm以上的健康芽苗，结合扦插技术，把组织培养和扦插繁殖有机地结合起来，实现微扦插式移植，移植生根率达60％以上。
方法如下：一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，包括如下步骤：
s1、萌芽条的培养：于秋冬季节，在树龄超过1/3轮伐期的优良种源林中根据树高、胸径和共生树数量等指标评选优树，选择优树上光照条件好，生长健壮的最接近地面的枝条进行截枝促萌处理，截枝保留40～60cm长度，去除截枝上的原萌条，次年春萌芽率可达95％；
s2、外植体消毒：在春夏季节，采集截枝萌发的20～40cm的优树萌条，剪除叶片留叶柄，1～24h内采用超声波机清水清洗10min，再在超静工作台上，以0.1g/l的汞消毒13～20min,消毒成功率达60％以上；
s3、丛芽诱导：消毒后的外植体，接入丛芽诱导培养基中诱导丛芽萌发，培养基ph值为5.8～6.2，包括改良1的ms的元素，其含量为：nh4no3350～550mg/l、kh2po4170～255mg/l、mgso4.7h2o370～550mg/l、kno31900mg/l、cacl2400mg/l、ca(no3)2.4h2o750mg/l，(nh4)2so4260mg/l，微量元素1.5ms、有机质1.0ms、激素6ba0.10～0.2mg/l、iba0.2mg/l、蔗糖30～35mg/l，继代培养条件为光照强度为2000～3000lx、光照时间为10小时/天，培养温度为22～28℃。
s4、继代培养：丛芽诱导出来后，转入檀香继代增殖培养基，培养条件除激素浓度变动外，其他条件同步骤s3，繁殖倍数可达2.5倍以上，扩繁为主的继代培养周期为30～35天，一边扩繁一边产苗的继代培养周期为40～50天。继代培养基的激素变动为：6ba0.05～0.15mg/l、iba0.10～0.15mg/l；
s5、预生根培养：选取继代培养中高度在2.5cm以上，叶片充分展开的芽苗接入预生根培养基进行预生根培养，培养25～35天后，转入炼苗温室中炼苗；
预生根培养为改良2的ms的元素，其含量为：nh4no3560～1320mg/l、kh2po4256～340mg/l、mgso47h2o148mg/l、kno3760～1520mg/l、cacl2130mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l、微量元素1ms、有机质1ms、激素ggr0.4mg/l、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l、蔗糖40～50mg/l。
s6、炼苗培养：预生根培养的时间因季节而异，为25～35天后，而后，无需转接培养基，直接转入光照强度为5000～10000lx的炼苗温室中炼苗，炼苗时间为15～30天。当芽苗高度≥4cm以上时，及时移植，减少练苗时间过长，污染率升高，降低瓶苗出瓶率；
s7、微扦插移植：适宜于微扦插移植的基质配方为：蛭石：泥碳土：黄心土的体积比为8：1：1。微扦插前用0.5％高锰酸钾消毒基质，微扦插后每星期使用不同杀菌剂进行病害防治。因檀香组培芽苗微扦插生根时间长，常规施肥不能及时补充所需的养分。预生根芽苗移植20天后，每星期叶面喷施1次1/4ms～1/3ms的大量元素溶液补充养分。移植23天后，每10天叶面喷施1次1.5～2.0ms微量元素溶液。檀香组培芽苗微扦插移植后，前期应注意保湿和叶面喷雾，并覆盖遮阳网降低光照强度，随后逐渐减少喷雾次数和加强光照。移植2～2.5个月后，移植生根率可达60％以上。
优选的，步骤s1中，8年生以上入选优树，最接近地面的枝条截枝保留40～60cm长度，次年春萌芽率95％以上。
优选的，步骤s2中，外植消毒：采集优树截枝上的萌条，1～24h内采用超声波机清洗，用1mg/l的汞消毒13～20min,消毒成功率达60％以上。
优选的，步骤s3、s4中的继代增殖倍数达到2.5倍以上。培养条件为光照强度2000～3000lx、光照时间10小时/天，培养温度22～28℃。改良1的培养基元素含量为：nh4no3350～550mg/l、kh2po4170～255mg/l、mgso4.7h2o.370～550mg/l、kno31900mg/l、cacl2400mg/l、ca(no3)2.4h2o750mg/l，(nh4)2so4260mg/l，微量元素1.5ms、有机质1.0ms、激素6ba0.05～0.2mg/l、iba0.2mg/l、蔗糖30～35mg/l；
优选的，在步骤s5中，改良2预生根培养基包含如下含量的元素，nh4no3560～1320mg/l、kh2po4256～340mg/l、mgso4.7h2o148mg/l、kno3760～1520mg/l、cacl2130mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l，微量元素1.0ms、有机质1.0ms、激素ggr0.4mg/l、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l、蔗糖40～45mg/l。
优选的，步骤s6、s7中，蛭石：泥碳土：黄心土体积比为8：1：1的基质为微扦插最佳基质。移植20天后，每星期叶面喷施一次1/4～1/3ms大量元素、1.5～2.0ms微量元素为补肥最佳方式，2个半月后，移植生根率可达60％以上。
本发明效果及优点：
1、采用树龄1/3轮伐期以上檀香优树为繁殖材料，可繁殖出檀香优良无性系苗木，从而实现檀香栽培的无性系化和良种化，最终可大幅度提高檀香人工林的生长量和木材品质，大幅度提高檀香栽培的经济效益。
2、通过特定的丛芽诱导、继代培养及预生根培养基三个培养基的研制，实现高繁殖的增殖倍数及高质量的预生根瓶苗，降低生产成本，提高生产效益。
3、通过特定的微扦插移植基质：蛭石：泥碳土：黄心土＝8：1：1、特定的养分补充、杂菌控制、水分管控等系列技术措施，实现微扦插移植生根率达60％以上。
4、本发明实现组织培养和扦插繁殖有机地结合，突破檀香生根培养不生根或生根难的瓶颈，实现规模化生产。
5、本发明操作简单、成本低，生产周期短。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
实施例1：一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，包括如下步骤：
实施单位：本实验室檀香培养材料的采取点：湛江
s1、萌芽条的培养：在2010秋季，选择8年生以上的3株优树，选择光照条件好，生长健壮的离地面最接近的枝条截枝，保留40～60cm长度，并清净截枝上的原萌条。
s2、外植消毒：次年采取20～40cm的优树萌条，剪除叶片留叶柄，12h内采用超声波机清洗10min，并在超静工作台上，用0.1mg/l的汞消毒13～20min,消毒成功率达60％以上。
s3、丛芽诱导：消毒后的外植体，接入丛芽诱导培养基中，培养基ph值为5.8～6.2，包括改良1的ms的元素，其含量为：nh4no3350～550mg/l、kh2po4170～255mg/l、mgso4。7h2o370～550mg/l、kno31900mg/l、cacl2400mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l，(nh4)2so4260mg/l、微量元素1.5ms、有机质1.0ms、激素6ba0.10～0.2mg/l、iba0.2mg/l、蔗糖30～35mg/l；继代培养条件为光照强度为2000～3000lx、光照时间10小时/天，培养温度22～28℃。
s4、继代培养：丛芽诱导出来后，转入檀香继代增殖培养基，培养条件除激素浓度变动外，其他条件同步骤s3，扩繁为主的继代培养周期为30天，一边扩繁一边产苗的继代培养周期为45天，继代培养基的激素变动为：激素6ba0.05～0.15mg/l、iba0.10～0.15mg/l；培养条件同s3
s5、预生根培养：选取继代培养中高度在2.5cm以上，叶片充分展开的芽苗接入预生根培养基进行预生根培养，培养25～35天后，转入炼苗温室中炼苗，改良2的ms元素预生根培养基，包含如下含量的元素，：nh4no3560～1320mg/l、kh2po4256～340mg/l、mgso47h2o148mg/l、kno3760～1520mg/l、cacl2130mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l，微量元素1ms、有机质1ms、激素ggr0.4mg/l、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l，40～50mg/l蔗糖。
s6、炼苗培养：预生根芽苗培养25～35天后，转入光照强度为5000～10000lx的炼苗温室中炼苗，炼苗时间为15～30天，当芽苗高度≥4cm以上时，及时移植，减少练苗时间过长，污染率升高，降低瓶苗出瓶率；
s7、微扦插移植：采用蛭石：泥碳土：黄心土体积比为8：1：1的微扦插基质，微扦插前用0.5％高锰酸钾消毒基质。经过预生根培养和炼苗的芽苗移植后3～5天全盖薄膜，并遮盖两层75％的遮阳网，每日打开喷雾4次；第5～10天打开薄膜保留遮阳网，自动喷雾6次/日，每次10秒；第11～20天保留一层75％的遮阳网，自动喷雾5次/日，每次10秒；20天后自动喷雾4次/日，每次10秒。移植后每星期使用1/1000的不同杀菌剂进行病害防治。移植20天后，采用1/3ms大量元素补充养分，以后每星期补充一次。移植23天后，补充2ms中量元素及微量元素，以后10天补充一次。移植2个半月后，移植生根率达60％以上。
实施例2：一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，包括如下步骤：
实施单位：本实验室培养材料采取点：高要县蛟塘村
s1、萌芽条的培养：2015年10月，从高要蛟塘村8年生种源林中，选择4株优树，选择光照条件好，生长健壮的离地面最接近的枝条截枝，保留40～60cm长度，并清净截枝上的原萌条。
s2、外植消毒：2016年7月采取20～40cm的优树萌条，剪除叶片留叶柄，12h内采用超声波机清洗10min，并在超静工作台上，用0.1mg/l的汞消毒13～20min,消毒成功率达60％以上。
s3、丛芽诱导：消毒后的外植体，接入丛芽诱导培养基中，培养基ph值为5.8～6.2，包括改良1的ms的元素，其含量为：nh4no3350～550mg/l、kh2po4170～255mg/l、mgso47h2o370～550mg/l、kno31900mg/l、cacl2400mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l，(nh4)2so4260mg/l、微量元素1.5ms、有机质1.0ms、激素6ba0.10～0.2mg/l、iba0.2mg/l、蔗糖30～35mg/l；
继代培养条件为光照强度为2000～3000lx、光照时间10小时/天，培养温度22～28℃。
s4、继代培养：丛芽诱导出来后，转入檀香继代增殖培养基，培养条件除激素浓度变动外，其他条件同步骤s3，扩繁为主的继代培养周期为30天，一边扩繁一边产苗的继代培养周期为50天，继代培养基的激素变动为：激素6ba0.05～0.15mg/l、iba0.10～0.15mg/l；培养条件同s3
s5、预生根培养：选取继代培养中高度在2.5cm以上，叶片充分展开的芽苗接入预生根培养基进行预生根培养，培养25～35天后，转入炼苗棚中炼苗，改良2的ms元素预生根培养基，包含如下含量的元素：nh4no3560～1320mg/l、kh2po4256～340mg/l、mgso47h2o148mg/l、kno3760～1520mg/l、cacl2130mg/l、ca(no3)24h2o750mg/l，微量元素1ms、有机质1ms、激素ggr0.4mg/l、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l，40～50mg/l蔗糖。
s6、炼苗培养：预生根芽苗培养25～35天后，转入光照强度为5000～10000lx的炼苗温室中炼苗，炼苗时间为15～30天，当芽苗高度≥4cm以上时，及时移植，减少练苗时间过长，污染率升高，降低瓶苗出瓶率；
s7、微扦插移植：采用蛭石：泥碳土：黄心土体积比为8：1：1的微扦插基质，微扦插前用0.5％高锰酸钾消毒基质。经过预生根培养和炼苗的芽苗移植后0～4天全盖薄膜，并遮盖两层75％的遮阳网，每日打开喷雾4次；第5～10天打开薄膜保留遮阳网，自动喷雾6次/日，每次10秒；第11～20天保留一层75％的遮阳网，自动喷雾5次/日，每次10秒；20天后自动喷雾4次/日，每次10秒。每星期使用1/1000的不同杀菌剂进行病害防治。移植20天后，采用1/4ms大量元素补充养分，以后每星期补充一次。移植23天后，补充2ms中量元素及微量元素，以后10天补充一次。移植2个半月后，移植生根率达60％以上。
实施例3：一种檀香组培快繁微扦插育苗方法，包括如下步骤：
实施单位：本实验室培养材料采取点：高明县瑶村
s1、萌芽条的培养：2015年10月，从高明县瑶村8年生种源林中，选择5株优树，选择光照条件好，生长健壮的离地面最接近的枝条截枝，保留40～60cm长度，并清净截枝上的原萌条。
s2、外植消毒：2016年7月采取20～40cm的优树萌条，剪除叶片留叶柄，12h内采用超声波机清洗10min，并在超静工作台上，用0.1mg/l的汞消毒13～20min,消毒成功率达60％以上。
s3、丛芽诱导：消毒后的外植体，接入丛芽诱导培养基中，培养基ph值为5.8～6.2，包括改良1的ms的元素，其含量为：nh4no3350～550mg/l、kh2po4170～255mg/l、mgso47h2o370～550mg/l、kno31900mg/l、cacl2400mg/l、ca(no3)27h2o750mg/l，(nh4)2so4260mg/l，微量元素1.5ms、有机质1.0ms、激素6ba0.10～0.2mg/l、iba0.2mg/l、蔗糖30～35mg/l；
继代培养条件为光照强度为2000～3000lx、光照时间10小时/天，培养温度22～28℃。
s4、继代培养：丛芽诱导出来后，转入檀香继代增殖培养基，培养条件除激素浓度变动外，其他条件同步骤s3，扩繁为主的继代培养周期为35天，一边扩繁一边产苗的继代培养周期为45天，继代培养基的激素变动为：激素6ba0.05～0.15mg/l、iba0.10～0.15mg/l；培养条件同s3。
s5、预生根培养：选取继代培养中高度在2.5cm以上，叶片充分展开的芽苗接入预生根培养基进行预生根培养，培养25～35天后，转入练苗棚中练苗，改良2的ms元素预生根培养基，包含如下含量的元素，：nh4no3560～1320mg/l、kh2po4256～340mg/l、mgso47h2o148mg/l、kno3760～1520mg/l、cacl2130mg/l、ca(no3)27h2o750mg/l、微量元素1.0ms、有机质1.0ms、激素ggr0.4mg/l、iba0.2mg/l、naa0.2mg/l、蔗糖40～50mg/l。
s6、炼苗培养：预生根芽苗培养25～35天后，转入光照强度为5000～10000lx的炼苗温室中炼苗，炼苗时间为15～30天，当芽苗高度≥4cm以上时，及时移植，减少炼苗时间过长，污染率升高，降低瓶苗出瓶率；
s7、微扦插移植：采用蛭石：泥碳土：黄心土体积比为8：1：1的微扦插基质，微扦插前用0.5％高锰酸钾消毒基质。经过预生根和炼苗的芽苗移植后0～5天全盖薄膜，并遮盖两层75％的遮阳网，每日打开喷雾4次；第6～10天打开薄膜保留遮阳网，自动喷雾6次/日，每次10秒；第11～20天保留一层75％的遮阳网，自动喷雾5次/日，每次10秒；20天后自动喷雾4次/日，每次10秒。每星期使用1/1000的不同杀菌剂进行病害防治。移植20天后，采用1/4ms大量元素补充养分，以后每星期补充一次。移植23天后，补充2ms中量元素及微量元素，以后10天补充一次。移植2个半月后，移植生根率达60％以上。
以上实施方式仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照以上实施方式对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或等同替换都不应脱离本发明技术方案的精神和范围。