一种楤木的种苗快速繁殖的方法
【专利摘要】本发明公开了一种楤木的种苗快速繁殖的方法，涉及一种生物技术应用领域，具体方法如下：第一步是取楤木的顶端休眠芽为外植体，先用自来水冲洗干净，再用70％酒精浸泡，再放入0.1％升汞的溶液中消毒，最后用无菌水冲洗干净；第二步是将消毒好的外植体切成0.5～1cm的小块，接种在准备好的诱导培养基上培养，培养条件为：光强1500～20001x，温度(25±1℃)，12h光照，待分化出不定芽；第三步是将诱导出的不定芽转接到继代培养基上进行增殖培养，使芽苗长得更加健壮；第四步是将分化的不定芽接种到生根培养基中，待有不定根生出即可准备移栽，移栽后成活率可达80％以上。本发明方法简单易行，操作简单，且繁殖速度快，适合工厂化育苗。
【专利说明】一种锪木的种苗快速繁殖的方法
【技术领域】
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[0001]本发明涉及一种生物技术应用领域，是一种利用植物组织离体培养技术，用于一种惚木的种苗快速繁殖的方法。
【背景技术】
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[0002]惚木别鸟不宿、百鸟不栖、刺桐，为五加科落叶灌木获小乔木。小枝疏生细刺，被黄绒毛。2?3回羽状复叶互生；羽片有小叶5?13枚，基部有小叶一对；小叶片卵形、宽卵形或卵状椭圆形，先端渐尖或短渐尖，基部圆形或近心形缘具细锯齿。伞形花序再组成顶生大型圆锥花序，主轴长30cm以上，一级分枝在主轴上总状排列，花梗明显，花白色；果球形，具5棱，熟时黑色或紫黑色。花期6-8月，果期9-10月。产于全国各地，生于向阳坡、沟谷中、林缘或路边旷地，灌丛中。我国华北、华中、华东、华南、西南等地均有分布。惚木具有食用和药用价值，富含蛋白质、脂肪、还原糖、维生素及15种氨基酸和多种矿物质；有滋阴润燥、补中益气、祛风湿、散瘀结、消肿毒、健胃、活血等功效。
[0003]近年来，受生态环境的变化和市场需求增加等因素的影响，现有的野生惚木的资源存量正在迅速减少，已引起人们的普遍关注。惚木自然繁殖率较低，再生能力差。惚木虽能开花结籽，可以进行有性繁殖，但种子繁殖变异率较大，商品性降低，且繁殖率很低。生产上主要采用无性繁殖，枝条或根段进行扦插繁殖，但往往造成资源的浪费与植被的破坏，且扦插育苗成活率低，成本高。
【发明内容】
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[0004]本发明的目的就是针对现有技术的不足，而提供一种惚木的种苗快速繁殖的方法。本发明具有简单易行，操作简单，且繁殖速度快，适合工厂化育苗的优点。
[0005]本发明的技术解决措施如下:
[0006]一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤:(I)小块茎尖的备用；(2)外植体诱导和继代培养；(3)芽苗接种生根培养基。
[0007]所述小块茎尖备用的方法为:于2?3月取惚木的顶端的休眠芽为外植体，先将嫩枝芽水洗干净后，先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用无菌水冲洗4?5次，用无菌干滤纸吸去残留水分，在超净工作台上用无菌解剖刀剥去茎尖外面的芽鳞片，并切成0.5?Icm的小块备用。
[0008]所述外植体诱导和继代培养的方法为:将上述的外植体接种到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01 ?0.l)mg/L NAA,O ?0.5mg/L IBA,O ?0.5mg/L 2-4D 的 MS 培养基上进行诱导、分化和继代培养基，四周左右就可以形成不定芽，待苗长到2?3cm时，将苗分成单株，转接到培增殖培养基上；蔗糖的质量分数为30克每升，琼脂的质量分数为7克每升，pH 为 5.8。
[0009]所述芽苗接种生根培养基的方法为:将诱导出的芽苗接种到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O ?0.5) mg/L IBA、(O ?0.5) mg/L NAA、(O ?0.5)mg/LIBM、(O ?3g/L)活性炭的1/2MS的生根培养基上，一个月可分化出I?3条粗壮的不定根，即可移栽。
[0010]所述培养基的培养条件为:光强1500?20001x，温度(25±1°C )，12h光照；各阶段的培养基附加物质，不同浓度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM组合，形成一套快繁体系，同时在生根培养基中加入了 IBM和活性炭物质。
【具体实施方式】
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[0011]以下结合具体实施例来对本发明作进一步的描述，但本发明所要求保护的范围并不局限于实施方式所涉及之范围。
[0012]实例1:
[0013]将惚木的休眠芽水洗干净后，先用70%乙醇浸泡lmin，再用0.1%升汞消毒5min，用无菌水冲净外植体表面，在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5?Icm左右的小块，置于培养基MS+1.5mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA上进行培养，再将诱导出的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L IBA+0.01mg/L NAA的生根培养基上，经过4周左右，会长出I?3条左右的新根，即可移栽。
[0014]实例2:
[0015]将惚木的嫩枝芽水洗干净后，先用70%乙醇浸泡lmin，再用0.1%升汞消毒8min，用无菌水冲净外植体表面，在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5?Icm左右的小块，置于培养基MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA上进行培养，再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L IBM+0.2mg/L NAA+2g/L活性炭的生根培养基上进行生根，经过4周左右，幼苗会长出I?3条左右的新根，即可移栽。
[0016]实例3:
[0017]将惚木的嫩芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒1min,用无菌水冲净外植体表面，在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5?Icm左右的小块，置于培养基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2-4D上进行培养，再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培养基上进行生根，经过一个月左右，幼苗会长出I?3条左右的新根，即可移栽。
[0018]实例4:
[0019]将惚木的嫩芽水洗干净后,先用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升萊消毒7min,用无菌水冲净外植体表面，在超净工作台上用无菌解剖刀将茎尖切成厚度0.5?Icm左右的小块，置于培养基MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L IBA+0.2mg/L 2_4D上进行培养，再将诱导的不定芽接种在1/2MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的生根培养基上进行生根，经过一个月左右，幼苗会长出I?3条左右的新根，即可移栽。
【权利要求】
1.一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤:(1)小块茎尖的备用；(2)外植体诱导和继代培养；(3)芽苗接种生根培养基。
2.根据权利要求1所述的一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述小块茎尖备用的方法为:于2?3月取惚木的顶端的休眠芽为外植体，先将嫩枝芽水洗干净后，先用70%乙醇浸泡30s?Imin,再用0.1 %升萊消毒5?1min,用无菌水冲洗4?5次,用无菌干滤纸吸去残留水分，在超净工作台上用无菌解剖刀剥去茎尖外面的芽鳞片，并切成0.5?Icm的小块备用。
3.根据权利要求1所述的一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述外植体诱导和继代培养的方法为:将上述的外植体接种到附加(1.0?2.0)mg/L 6-BA、(0.01?0.l)mg/L NAA,O?0.5mg/L IBA,O?0.5mg/L 2-4D的MS培养基上进行诱导、分化和继代培养基，四周左右就可以形成不定芽，待苗长到2?3cm时，将苗分成单株，转接到培增殖培养基上；蔗糖的质量分数为30克每升，琼脂的质量分数为7克每升，pH为5.8。
4.根据权利要求1所述的一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述芽苗接种生根培养基的方法为:将诱导出的芽苗接种到附加(O?0.5)mg/L6-BA、(O?0.5)mg/LIBA、(O ?0.5)mg/L NAA、(O ?0.5)mg/L IBM、(O ?3g/L)活性炭的 1/2MS 的生根培养基上，一个月可分化出I?3条粗壮的不定根，即可移栽。
5.根据权利要求3或4所述的一种惚木的种苗快速繁殖的方法，其特征在于:所述培养基的培养条件为:光强1500?20001x，温度(25±1°C )，12h光照；各阶段的培养基附加物质，不同浓度的6-BA、IBA、NAA、2-4D、IBM组合，形成一套快繁体系，同时在生根培养基中加入了 IBM和活性炭物质。
【文档编号】A01H4/00GK104255498SQ201410505669
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月28日 优先权日:2014年9月28日
【发明者】陈丽萍, 鱼南洋, 张志友, 韩明丽, 赵根, 李艳冬, 谭宏, 胡亮 申请人:湖州市农业科学研究院