加热回流lh，过滤，滤液减压浓缩干燥，得厚朴提 取物。
[0029] 苍耳子提取物的制备：称取粉碎的苍耳干燥果实10Kg，用5倍量的50%乙醇进行 提取，加热回流保持微沸，提取1次，提取时间为3h，过滤，滤液减压浓缩干燥，得苍耳子提 取物。
[0030] 将上述制备的商陆提取物0. 〇〇5Kg、厚朴提取物0. 005Kg、苍耳子提取物0.0 lKg 混合均匀，再加入乳化剂DBS-Ca0.0 5Kg、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚0. 08Kg和助溶剂（环己 酮）〇. IKg搅拌均匀制成油相，再加入0. 75Kg水，搅拌至均相0/W型乳化液，得植物源农药 复方陆朴微乳剂。
[0031] 实施例3
[0032] 商陆总皂苷的制备：称取粉碎的商陆根粗粉10Kg，用10质量倍的95%乙醇溶液浸 提4次，每次浸提10h，合并浸提液过滤，浓缩得浸膏，将浸膏分散于等质量的水中加热使其 充分溶解得到水溶液，加热温度为60°C，趁热过滤水溶液并用正丁醇萃取，合并正丁醇萃取 液，加入100g活性炭加热回流约30分钟，静置过夜，过滤除去活性炭残澄，收集滤液，蒸干 即得商陆总皂苷。
[0033] 厚朴提取物的制备：称取厚朴粗粉10Kg，用10质量倍的95%乙醇溶液进行提取4 次，每次提取1小时，提取液浓缩至相对密度为1. 3,加入等体积的2% NaOH溶液调节pH值 至10-11，静置此后过滤，滤液加2%的盐酸溶液调pH值为1~2,静置过夜，过滤，得沉淀， 水洗至中性，干燥，加150质量倍的环己烷加热回流3h，过滤，滤液减压浓缩干燥，得厚朴提 取物。
[0034] 苍耳子提取物的制备：称取粉碎的苍耳干燥果实10Kg，用10质量倍的98%乙醇进 行提取，加热回流保持微沸，提取4次，每次lh，过滤，滤液减压浓缩干燥，得苍耳子提取物。
[0035] 将上述制备的商陆提取物0. 05Kg、厚朴提取物0. 05Kg、苍耳子提取物0.1 Kg混 合均匀，再加入乳化剂DBS-Ca 0. 15Kg、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚0. 2Kg和助溶剂（环己 酮）0. 25Kg搅拌均匀制成油相，再加入0. 20Kg水，搅拌至均相0/W型乳化液，得植物源农药 复方陆朴微乳剂。
[0036] 实施例4
[0037] 将实施例1制备的植物源农药复方陆朴微乳剂进行抑制烟草赤星病菌活性测定：
[0038] 供试烟草赤星病菌株为Al号（湖北省农科院植病室提供）。
[0039] 实验方法与结果
[0040] 1.植物源农药复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌孢子萌发的活性试验 [0041] 采用滤纸片法测定复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌孢子萌发的活性。用水将复方 陆朴微乳剂分别稀释成原液的200、300、400、500、1000体积倍，分别用灭菌滤纸片（直径 4mm)浸上述系列稀释液后，放入涂好烟草赤星病菌孢子的培养基平板上，以浸无菌水滤纸 片为空白对照（CK)，置温箱内28°C培养8d，无菌水洗下各处理分生孢子，在血球计数板显 微下测定各处理产孢量，重复试验3次，根据公式：产孢量抑制率（％) = (CK)产孢量-处 理产孢量）/CK产孢量XlOO %，计算产孢量抑制率。结果见表1。
[0042] 表1对烟草赤星病菌孢子萌发的影响结果（CK = 22. 73xl06个）
[0043]
[0044] 试验结果表明，复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌孢子萌发有显著地抑制作用，以 稀释200倍时抑制活性最高，达到91. 23%，随药剂被稀释的倍数的增加，其产孢抑制能力 会有所下降。
[0045] 2.复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌菌丝生长的活性试验
[0046] 采用菌丝生长速率法测定复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌丝生长的活性。将复方 陆朴微乳剂用水稀释后与培养基混合，制成浓度分别为原液稀释的200、300、400、500、1000 倍的含药平板，在平板中央接入同一批烟草赤星病菌饼，以无药平板为空白对照（CK)，温箱 内28°C培养5d后，用游标卡尺十字交叉法测定抑菌圈直径；继续培养到8d后，以无菌水洗 下各处理分生孢子，在血球计数板显微下测定各自产孢量。试验重复3次。按照公式：抑 菌效果（％)=(空白对照菌落直径-处理菌落直径）八空白对照菌落大小-菌饼直径） x100 % ;产孢量抑制率（％) =(空白对照产孢量-处理产孢量）/空白对照产孢量X 100%， 分别计算抑菌效果和产孢量抑制率。结果见表2和表3。
[0047] 表2复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌抑菌试验结果（CK = 4. 237)
[0051] 将实施例2和3制备的植物源农药复方陆朴微乳剂进行抑制烟草赤星病菌活性测 定，测试结果与实施例1制备的植物源农药复方陆朴微乳剂相似。
[0052] 试验结果表明，本发明复方陆朴微乳剂对烟草赤星病菌菌丝生长抑制效果明显， 并且对赤星病菌菌落产孢量也有明显的抑制作用，且随药剂浓度增高，菌丝生长明显受到 抑制，产孢量明显减少。其中稀释200倍时其抑菌效果达到93. 50%。通过药效学试验，证 明该发明对烟草赤星病具有较好地防治作用，稀释至400倍以下可用。
【主权项】
1. 一种植物源农药复方陆朴微乳剂，其特征在于原材料各组分及其质量百分比为：2. 根据权利要求1所述的植物源农药复方陆朴微乳剂，其特征在于，所述商陆总皂苷 的制备方法为：将商陆干燥根粉碎后用5-10质量倍的乙醇溶液浸泡提取1-4次，每次提取 10-30h，将每次提取所得浸提液合并过滤，浓缩得浸膏，将浸膏分散于水中加热至充分溶解 得到水溶液，过滤所得水溶液并用正丁醇萃取，合并正丁醇萃取液，向其中加入活性炭后加 热回流5-30分钟，静置过夜，过滤除去活性炭残渣，收集滤液，蒸干即得商陆总皂苷。3. 根据权利要求1所述的植物源农药复方陆朴微乳剂，其特征在于，所述厚朴提取物 的制备方法为：将厚朴干燥根粉碎后用5-10质量倍的乙醇加热回流提取1-4次，每次提取 1-3小时，将每次提取所得滤液合并浓缩至相对密度为1. 1-1. 3,再加入NaOH溶液调节pH 值至10-11，静置后过滤，滤液用盐酸溶液调节pH值为1-2,静置过夜，过滤得沉淀，将沉淀 水洗至中性，干燥，再加80-150质量倍的环己烷加热回流l-3h，过滤后将滤液减压浓缩干 燥，得厚朴提取物。4. 根据权利要求1所述的植物源农药复方陆朴微乳剂，其特征在于，所述苍耳子提取 物的制备方法为：将干燥苍耳子粉碎后用5-10质量倍的乙醇溶液进行提取，加热回流保持 微沸，每次提取l_3h，提取1-4次，将提取液合并过滤后将滤液减压浓缩干燥即得苍耳子提 取物。5. 根据权利要求2-4任一所述的植物源农药复方陆朴微乳剂，其特征在于，所述乙醇 溶液体积浓度为50-98%。6. -种根据权利要求1-5任一所述的植物源农药复方陆朴微乳剂的制备方法，其特征 在于：先将商陆总皂苷、厚朴提取物和苍耳子提取物混合混匀，再加入十二烷基苯磺酸钙、 苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚和环己酮，搅拌均匀制成油相，再加水稀释，搅拌得到均相0/W型 乳化液即植物源农药复方陆朴微乳剂，其中各原料质量百分比为：商陆总皂苷0. 5-5% ;厚 朴提取物〇. 5-5% ;苍耳子提取物1-10% ;十二烷基苯磺酸钙5-15% ;苯乙烯基苯酚聚氧乙 烯醚 8-20% ;环己酮 10-25% ;水 20-75%。7. 根据权利要求1-5任一所述的植物源农药复方陆朴微乳剂在防治烟草赤星病方面 的应用，其特征在于：将所述植物源农药复方陆朴微乳剂稀释至400倍以下喷洒于烟草表 面。
【专利摘要】本发明涉及一种植物源农药复方陆朴微乳剂及其制备方法，原材料各组分及其质量百分比为：商陆总皂苷0.5-5％；厚朴提取物0.5-5％；苍耳子提取物1-10％；十二烷基苯磺酸钙5-15％；苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚8-20％；环己酮10-25％；水20-75％。其制备方法为：先将商陆总皂苷、厚朴提取物和苍耳子提取物混合混匀，再加入十二烷基苯磺酸钙、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚和环己酮，搅拌均匀制成油相，再加水稀释，搅拌得到均相O/W型乳化液。本发明主要材料组分来源于纯天然中药，对人、畜安全，不易引起昆虫病菌抗药性，易于降解，顺应了农业可持续发展和人类对自身健康要求的需要，是一种绿色环保型植物源农药制剂。
【IPC分类】A01N25/04, A01N65/12, A01P7/04, A01P3/00
【公开号】CN104886163
【申请号】CN201510345686
【发明人】卢金清, 江汉美, 郭胜男
【申请人】湖北中医药大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月19日