一种多拉菌素与有机磷类复配微乳剂及其制备方法
【专利说明】
[0001]【技术领域】本发明涉及一种农用复配杀虫、杀螨剂，具体地说是一种多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂及其制备方法。
[0002]【技术背景】在传统农药的使用中，主要是乳油和粉剂，在过去生产力水平不是很高的情况下，为防止病虫害起了很大的作用，但是由于乳油都是原药和乳化剂溶解在有机溶剂中形成，在使用的过程中对环境造成了很大的负担。粉剂由于在使用过程中，很容易漂移，给使用者和周围环境带来了不利的影响，开发一种新剂型，尤显重要。
[0003]微乳剂同乳油相比节省了大量有机溶剂、对人和环境安全(无溶剂本身的毒性)；闪点高、不易燃，贮藏、运输安全、挥发性小、减轻了农药的臭味、成本稍低于乳油制剂，含量越低的制剂，优势越明显。
[0004]多拉菌素是一种新型的大环内酯类化合物，对线虫、昆虫和螨均具有高效的驱杀作用，与阿维菌素作用效果和杀虫效果类似。也是一种高效、广谱性杀虫剂，对螨具有胃毒和触杀作用，并有微弱的熏蒸作用，无内吸性，但对叶片有很强的渗透作用，残效期长，不能杀卵。作用机制是刺激神经传递介质r-氨基丁酸的释放，干扰正常的神经生理活动。由于有渗透作用，受雨水影响小，对作物安全。可防治柑橘红蜘蛛、锈螨、短须螨等。有机磷类农药对害虫(害螨)毒力强，高于有机氯类杀虫剂，高于或相当于氨基甲酸酯类杀虫剂，低于拟除虫菊酯类杀虫剂，杀虫谱广，大多数兼具有触杀和胃毒作用，气温越高，表现出较高的杀虫效力，害虫耐药性发展较慢，易降解，对环境污染小，在植物体内可代谢降解而解毒，在植物体表面可经日晒或雨淋而降解，因此在农产品中残留量较低，在水中或土壤中易被水解，对环境污染小，在动物体内易代谢降解而排出体外，对人无蓄积毒性。两者相配具有强烈的杀虫、杀螨，杀卵效果。
[0005]【
【发明内容】
】本发明的目的在于提供一种多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂及其制备方法。
[0006]本发明另一个目的是提供一种多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配为原药制备高效、低毒、对环境友好的无公害杀虫、杀螨剂，可用于防治棉花、柑橘等作物上的成螨、若螨和卵以及蔬菜小菜蛾、菜青虫；水稻二化螟、稻纵卷叶螟、飞虱上的害虫。
[0007]本发明的目的通过如下技术方案实现:
[0008]一种多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂，其制备方法包含以下步骤:
[0009](I)将多拉菌素，有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配原药溶解于助溶剂中，搅拌均匀形成透明状的溶液。
[0010](2)将表面活性剂投入到第一步的溶剂中，充分溶解，形成均一的溶液。
[0011](3)将水溶液缓慢的加入第二步的溶液中并搅拌均匀，形成均一的溶液。
[0012](4)最后在第三步的溶液中加入防冻剂，搅拌成透明均一的液体。
[0013]1、所述的多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂，其特征在于所述的助溶剂选自:环己酮、DMF、甲醇、N-甲基吡咯烷酮、二甲苯中的一种。
[0014]2、所述的多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂，其特征在于所述的表面活性剂选自:十二烷基苯磺酸钙、烷基酚聚氧乙基醚、苄基酚聚氧乙基醚、苄基二甲基酚聚氧乙基醚、苯基酚聚氧乙基醚、苯丙基苯乙基酚聚氧乙基醚、烷基酚甲醛树脂聚氧乙基醚、苯乙基酚聚氧丙基醚、烷基酚聚氧乙烯醚甲醛缩合物中的一种或多种。
[0015]3、所述的多拉菌素与有机磷类(三唑磷、毒死蜱、丙溴磷、辛硫磷等)复配微乳剂，其特征在于所述的防冻剂选自:乙二醇、丙二醇、丙三醇、聚乙二醇中的一种或多种。
[0016]优选地，本发明的复配微乳剂中的多拉菌素是中国专利申请2015101288326 (其全文纳入本文参考，就好像在本文中全部重复记载过一遍)记载的含多拉菌素的组合物。使用该组合物成本不但比纯的多拉菌素低，而效果基本相同(甚至能超过)纯的多拉菌素。所述含多拉菌素的组合物可以通过如下方法制备:
[0017](I)将链霉菌(优选是链霉菌D126株)接种于种子培养基(优选所述种子培养基的配方:葡萄糖15g，鹿糖5g，大豆粉15g，酵母粉5g，pH 7.0，用蒸饱水定容至1L)中培养(优选以30°C培养)，得菌种活化物；
[0018](2)将菌种活化物接种于扩大培养基(优选所述扩大培养基的配方；葡萄糖10g，鹿糖10g，大豆粉15g，酵母粉5g，pH 7.0，用蒸饱水定容至1L)中培养(优选以30°C培养)，得扩大培养物；
[0019](3)将扩大培养物接种于发酵培养基(优选所述发酵培养基的配方:玉米粉50g，大豆粉 50g，CaCO3 5g，NaCl 3g，K2HPO4 2g，MgSO4 lg，生物素 0.05g，pH 7.0，用蒸馏水定容至1L)中培养(优选以28°C培养)，得发酵培养物；和，
[0020](4)过滤发酵培养物，保留菌体，加入有机溶剂(优选是醇，如甲醇或乙醇)，浸提后过滤，收集滤液并加入NaCl水溶液(优选饱和NaCl水溶液)稀释有机溶剂(优选稀释有机溶剂浓度至15?35% (V/V))，析出沉淀后过滤，收集沉淀并干燥。
[0021]优选在该方法中，种子培养基的体积 < 扩大培养基的体积 < 发酵培养基的体积，优选种子培养基、扩大培养基和发酵培养基的体积比为1: 15?25: 100?200;在步骤
(4)中，菌体的重量和有机溶剂的体积之比(g/mL)为1: 2?8，优选为1: 3?6 ;含多拉菌素的组合物中多拉菌素的含量为75?85%，优选为77?83%;和/或，含多拉菌素的组合物还含有杂质A和杂质B，优选杂质A的含量为6?9%，也优选杂质B的含量为2?4%。其中，杂质A是该方法制备的含多拉菌素的组合物的HPLC图谱上的17?18min处的峰所对应的成分；杂质B是该方法制备的含多拉菌素的组合物的HPLC图谱上的12.9?13.9min处的峰所对应的成分。如无相反指示，HPLC条件是:HPLC层析柱填料:Hypersil0DS2 5 ym ;层析柱尺寸:4.6*250mm ;进样量；20 μ I ;流动相(体积比):甲醇:乙腈:水=67: 15: 18