一种提高人参种子萌发率的培养基的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物组织培养技术领域，特别设及一种提高人参种子萌发率的培养 基。
【背景技术】
[0002] 人参是被子植物口双子叶植物纲离瓣花亚纲五加科，多年生草本植物，生长于密 林，多分布于黑龙江、吉林、迂宁和河北北部深山中，含有10多种人参皂武，W及人参快醇、 多种氨基酸和维生素，是名贵的中草药材。
[0003] 然而人参种子成熟后会积累大量抑制萌发的物质，阻止人参种子萌发，使人参种 子进入深度休眠，造成人参无菌播种萌发率极低，难W满足市场和科研的需求。
【发明内容】
[0004] 基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种提高人参种子萌发率的培养基，W MS培养基为基础培养基，并添加2-ip(异戊締基腺嚷岭）、NAA(糞乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵 果汁提取物、琼脂粉和白砂糖，利用秋葵果汁提取物中含有一种促进型他感物质 Lepidimoide，可W促进人参种子萌发，具有种子萌发率高、萌发时间短的优点。
[0005] -种提高人参种子萌发率的培养基，其WMS培养基为基础培养基，并添加2-ip(异 戊締基腺嚷岭）、NAA(糞乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵果汁提取物、琼脂粉和白砂糖。
[0006] 2-19(异戊締基腺嚷岭）的浓度为1-4111旨/1、酷4(糞乙酸）的浓度为0.1-0.4 111邑/1、 6八3(赤霉素)的浓度为0.05-0.2 111曰/1、秋葵果汁提取物的浓度为20-100曰/1，琼脂粉的浓度 为8-12g/L、白砂糖的浓度为25-35g/L。
[0007] 2-ip(异戊締基腺嚷岭）的浓度为1.5-2.5mg/L、NAA(糞乙酸）的浓度为0.2-0.3 mg/L、GA3(赤霉素）的浓度为0.08-0.12 mg/L、秋葵果汁提取物的浓度为30-80g/L，琼脂粉 的浓度为9-lOg/L、白砂糖的浓度为28-32g/L。
[000引快速诱导人参愈伤组织培养基的pH值为5.8-6.8。
[0009] 秋葵果汁提取物中含有一种促进型他感物质Lepidimoide,可W促进人参种子萌 发。
[0010] -种上述提高人参种子萌发率的培养基使用的秋葵果汁提取物的制作方法，其包 括W下步骤： 步骤Sio，取秋葵果实，用自来水冲洗干净，对秋葵果实进行表面消毒，并放于无菌环境 下； 步骤S20,将消毒完毕的秋葵果实使用2000rpm/60s的速度棒成果汁，向果汁中加入冰 水并溫和揽拌12小时； 步骤S30，向步骤S20所得的半成品加入等体积的甲醇，揽拌，过滤，收集沉淀，并于50°C 真空环境中干燥两日，获得栋色凝块即为秋葵果汁提取物。
[0011] 所述的秋葵果实为没成熟的秋葵果实。
[0012]步骤SlO的表面消毒包括步骤Sll，使用75%酒精浸泡30s，用蒸馈水冲洗4次;还包 括步骤Sl 2，使用0.1%的升隶溶液浸泡5分钟，用蒸馈水冲洗4次。
[0013]步骤S30过滤是在化g/cm2的压力下进行过滤。
[0014] 本发明的有益效果是:在培养基中添加了秋葵果汁提取物，秋葵果汁提取物中含 有大量的促进型他感物质L邱idimoide，L邱idimoide可W促进人参种子萌发，提高人参无 菌播种的萌发率，缩短萌发时间。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合具体实施例对本发明作进一步描述。
[0016] 实施例一:制备秋葵果汁提取物。
[0017] 取化g秋葵果实，用自来水冲洗干净，使用75%酒精浸泡30s，用蒸馈水冲洗4次，再 使用0.1%的升隶溶液浸泡5分钟，用蒸馈水冲洗4次，并放于超净工作台中。
[0018] 将上述消毒完毕的秋葵果实使用2000rpm/60s的速度棒成果汁，向果汁中加入IOL 冰水溫和揽拌12小时。
[0019] 向上述所得的半成品中加入等体积的甲醇，揽拌，在3kg/cm2的压力下进行过滤， 收集沉淀，并于50°C真空环境中干燥两日，获得50g栋色凝块即为秋葵果汁提取物。
[0020] 实施例二:配制提高人参种子萌发率的培养基。
[0021] 根据表1所示的MS培养基配方W及表2所示的提高人参种子萌发率的培养基配方， 制备本发明所述的提高人参种子萌发率的培养基。
[0022] 用天平分别称取MS培养基中的各成分W及2-1口、魁4、643、琼脂粉和白砂糖，置于 S角瓶中，加入适量纯化水，揽拌溶解，定容至1000血，并调节抑值至6.3。将S角瓶封口，置 于高压灭菌锅中，于12rc灭菌21min，然后于超净工作台中，待培养基溫度下降至60°C左右 加入实施例一制作好的秋葵果汁提取物，揽拌均匀，分装至组织培养瓶中，自然冷却，待其 凝固后将组织培养瓶封口，备用。
[0023] 表1 MS培养基的成分及其用量。
[0024] 表2提高人参种子萌发率的培养基的成分及其用量。
[0025] 实施例本发明所述的提高人参种子萌发率的培养基的测试。
[00%]按实施例二所述的方法配制提高人参种子萌发率的培养基，备用。
[0027]取颗粒饱满的成熟人参种子，使用10°C的冷水对人参种子进行浸泡20小时，取出 种子，并于超净工作台中将种子用质量浓度为75%的酒精浸泡30秒，用无菌水冲洗4次，再用 质量浓度为0.12%的升隶溶液消毒6分钟，再用无菌水冲洗4次。
[0028]将消毒完毕的人参种子接种到上述配制好的提高人参种子萌发率的培养基中，并 放入人工气候箱中培养，培养条件为光暗周期为Hh光照/1化黑暗、光照强度为2000-23001UX的条件下培养，培养到第15天时开始有第一颗种子萌发，培养22天后，超过90%的人 参种子萌发，诱导成无菌苗，种子萌发率高达93%，比常规诱导方法的萌发率高，常规诱导方 法平均萌发时间在25天W后，使用本发明提供的提高人参种子萌发率的培养基可W缩短诱 导时间。
【主权项】
1. 一种提高人参种子萌发率的培养基，其特征在于，其以MS培养基为基础培养基，并添 加2-ip(异戊烯基腺嘌呤）、NAA(萘乙酸）、GA3(赤霉素）、秋葵果汁提取物、琼脂粉和白砂糖。2. 根据权利要求1所述的一种提高人参种子萌发率的培养基，其特征在于，2-ip(异戊 烯基腺嘌呤）的浓度为1 _4mg/L、NAA(萘乙酸）的浓度为0.1 -0.4 mg/L、GA3(赤霉素）的浓度 为0.05-0.2 11^/1、秋葵果汁提取物的浓度为20-10(^/1，琼脂粉的浓度为8-128/1、白砂糖 的浓度为25-35g/L。3. 根据权利要求1所述的一种提高人参种子萌发率的培养基，其特征在于，2-ip(异戊 烯基腺嘌呤）的浓度为1.5-2.5mg/L、NAA(萘乙酸）的浓度为0.2-0.3 mg/L、GA3(赤霉素）的 浓度为〇.〇8-〇.12 11^/1、秋葵果汁提取物的浓度为3〇-8(^/1，琼脂粉的浓度为9-1(^/1、白 砂糖的浓度为28-32g/L。4. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参种子萌发率的培养基，其特征在 于，所述的提高人参种子萌发率的培养基的pH值为5.8-6.8。5. 根据权利要求1至3其中之一所述的一种提高人参种子萌发率的培养基，其特征在 于，所述的秋葵果汁提取物中含有一种促进型他感物质Lepidimoide，可以促进人参种子萌 发。6. -种上述提高人参种子萌发率的培养基使用的秋葵果汁提取物的制作方法，其特征 在于，其包括以下步骤： 步骤S10，取秋葵果实，用自来水冲洗干净，对秋葵果实进行表面消毒，并放于无菌环境 下； 步骤S20,将消毒完毕的秋葵果实使用2000rpm/60s的速度榨成果汁，向果汁中加入冰 水并温和搅拌12小时； 步骤S30,向步骤S20所得的半成品加入等体积的甲醇，搅拌，过滤，收集沉淀，并于50°C 真空环境中干燥两日，获得棕色凝块即为秋葵果汁提取物。7. 根据权利要求5所述的一种上述提高人参种子萌发率的培养基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，所述的秋葵果实为没成熟的秋葵果实。8. 根据权利要求5所述的一种上述提高人参种子萌发率的培养基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，步骤S10的表面消毒包括步骤S11，使用75%酒精浸泡30s，用蒸 馏水冲洗4次;还包括步骤S12，使用0.1%的升萊溶液浸泡5分钟，用蒸馏水冲洗4次。9. 根据权利要求5所述的一种上述提高人参种子萌发率的培养基使用的秋葵果汁提取 物的制作方法，其特征在于，步骤S30过滤是在3kg/cm 2的压力下进行过滤。
【专利摘要】本发明提供一种提高人参种子萌发率的培养基，属于植物组织培养技术领域，其以MS培养基为基础培养基，并添加2-ip（异戊烯基腺嘌呤）、NAA（萘乙酸）、GA3（赤霉素）、秋葵果汁提取物、琼脂粉和白砂糖，利用秋葵果汁提取物中含有一种促进型他感物质Lepidimoide，可以促进人参种子萌发，具有种子萌发率高、萌发时间短的优点。
【IPC分类】A01G31/00
【公开号】CN105660330
【申请号】CN201610033521
【发明人】何志铿
【申请人】黄庆辉
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2016年1月19日