专利名称：结核杆菌快速药敏筛选方法
技术领域：
本发明属于一种对结核杆菌的快速药敏筛选方法。
现有技术中对结核杆菌的药敏筛选通常是采用不同的试剂，就每一种试剂分别的对结核杆菌菌落进行检测试验，从中找到最适合抑制结核杆菌的药物，从而达到根据不同的病患者对症治疗的目的。就现有技术对结核杆菌的药敏筛选方法而言，需要较多的结核杆菌检验样本，以适应不同的药物的药敏筛选的需要。但是，由于结核杆菌的分裂、成长周期较长，通常要18个小时才分裂一次，故需要花较长的时间对结核杆菌进行培养，取得足够数量的结核杆菌后才能进行必要的筛选和检测试验。直至目前为止，国内外所有做结核杆菌(TB)药敏的方法都需要三天甚至长达一周或更多的时间才能完成。这种情况对于受结核杆菌威胁的广大人群的保健工作是很不利的。
本发明的目的是针对现有技术方法中的不足，为了解决结核杆菌药敏试验的提速目的，提出在微型聚合物的芯片上，对结核杆菌进行并行分析，以缩短分析周期，减少对结核杆菌菌种数的需要，提高结核杆菌药敏速度的方法。
本发明所述结核杆菌快速药敏筛选方法和步骤是(1)对被检样品经灭除杂菌预处理，使注入芯片内的样品中仅存活有结核杆菌，其它菌均已灭活，并适当富集；(2)所说的芯片为在聚合物上刻有多路并列通道式的分离栅；栅区的各通道上带有供结核杆菌呼吸之用的储气囊，储气囊与工作段通道之间有连通道；(3)将芯片上所有通道均置于显微摄像系统的物镜一个视场之内，以便供快速同步分离分析之用；(4)将被检样品与各种待试药剂适量混匀后，分别经各个注入口注入芯片各个相应通道入口；(5)注入的同时，借助显微镜系统监视芯片上相应通道的情况，直至视场内出现多个杆状菌后，该通道方停止注入；
(6)监测结核杆菌在药物作用下的表现；结核杆菌在药物作用下的表现，经显微摄像系统直接摄入计算机内，利用专用的软件分析各个通道栅内对应结核杆菌的表现，而得知其活动或受抑制结果；(7)得出抑制结核杆菌的药敏筛选结果。
本发明所述结核杆菌快速药敏筛选方法，提出在微型聚合物的芯片上实现对结核杆菌的分离与多路同步分析的功能，从而达到大幅度减少对结核杆菌菌数量的需要，大量减少分析所需药剂的需要，由于采用并行分析的方式，提高分析速度，并可同时对多路信号做处理，在一个视场内获取信号交由计算机分析。从而大幅度提高了结核杆菌药敏试验的速度。
附
图1结核杆菌快速药敏筛选方法中采用的芯片结构示意图。
本发明所述结核杆菌的快速药敏筛选方法是利用在聚合物上刻有多路并列通道式的分离栅2芯片1作为检验样品的载体；所说的分离栅栅区的各通道上均带有供结核杆菌呼吸之用的储气囊3，储气囊与工作段通道之间有连通道。
将芯片1上所有通道的工作段(如附
图1所示的带储气囊的直通区)均置于显微摄像系统的物镜一个视场4之内，以便供快速同步分离分析之用。
被检样品5(结核杆菌)在检验前应当作灭除杂菌处理，使注入芯片内的样品中仅存活有结核杆菌，并适当富集；将被检样品与各种不同待试药剂适量混匀后，将每一种加有检验样品的药剂分别经各注入口6注入到芯片1各个相应通道之中；注入的同时，借助显微镜系统监视芯片上相应通道的情况，直至视场4内出现多个有活动表现的杆状菌后，该通道停止注入。
被样品注入之后，经显微摄像系统监测结核杆菌在药物作用下的表现；将结核杆菌在药物作用下的表现，经显微摄像系统直接摄入计算机内，利用专用的软件分析各通道栅内对应结核杆菌的状况，从而得知其结核杆菌的活动情况或受抑制结果最终得出抑制结核杆菌的药敏筛选结果。
所说的显微摄像系统最好具有10bit或10bit以上量化精度，以保证获知目标微弱变化状况，其工作光波波段为0.4～0.95μm；所说的芯片1的照明光源可为下方，或上方，或双重倾斜施照，所用光源可为光纤束引入的卤钨灯光源。
权利要求
1.一种结核杆菌快速药敏筛选方法为(1)对被检样品经灭除杂菌预处理，使注入芯片内的样品中仅存活有结核杆菌，其它菌均已灭活；(2)所说的芯片为在聚合物上刻有多路并列通道式的分离栅；栅区的各通道上带有供结核杆菌呼吸之用的储气囊；(3)将芯片上所有通道的工作段均置于显微摄像系统的物镜一个视场之内；(4)将被检样品与各种待试药剂适量混匀后，分别经各个注入口注入芯片各个相应通道入口；(5)注入的同时，借助显微镜系统监视芯片上相应通道的情况，直至视场内出现多个有活动表现的杆状菌后，该通道方停止注入(6)监测结核杆菌在药物作用下的表现；结核杆菌在药物作用下的表现，经显微摄像系统直接摄入计算机内，利用专用的软件分析各个通道栅内对应结核杆菌的表现，而得知其活动或受抑制结果。(7)得出抑制结核杆菌的药敏筛选结果。
全文摘要
本发明属于一种对结核杆菌快速药敏筛选方法。采用在刻有多路并列通道分离栅的微型聚合物的芯片上,经各注入口注入被检样品与各种待试药剂的混匀剂,在显微摄像系统物镜的一个视场内监视芯片上相应通道的情况;经显微摄像系统、计算机分析各通道栅内对应结核杆菌的表现,得知其活动或受抑制结果。本发明所述方法可对结核杆菌实现多路同步分析,并大为减少对结核杆菌菌数及分析所需药剂的需要,大幅提高结核杆菌药敏试验的速度。
文档编号C12Q1/04GK1299878SQ0013129
公开日2001年6月20日 申请日期2000年12月20日 优先权日2000年12月20日
发明者叶虎年, 程冬娥, 叶梅, 杨新立 申请人:华中科技大学