专利名称：一种用于贴壁细胞培养的新型滚芯式转瓶装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种用于提高动物细胞贴壁培养产率的新型转瓶培养装置。
背景技术：
转瓶(roller bottle)培养技术(也称“滚瓶技术”)，是指采用滚动的圆柱形培养瓶系统来培养贴壁依赖性动物细胞。转瓶培养可以利用瓶子的几乎全部内壁表面进行细胞培养。尽管在任一时间仅有15-20％的内表面积被培养液覆盖，瓶子的转动使细胞与培养液、空气交替接触。这种方式降低了所需培养基的体积，并且利用瓶内较大的顶部空间维持足够的氧气需要。由于转瓶培养技术是一种多过程系统，因此存在劳动强度大，单位体积提供细胞生长的表面积小，按体积计算细胞产量低，人力资源与材料使用效率不高，监测和控制环境条件受到限制等缺点。但是，由于其结构简单、投资少，技术成熟，重现性好，放大只是简单地增加转瓶数量等特点，因此转瓶系统目前仍是生产厂商在规模生产中仍广为采用的技术方法。为充分提高转瓶系统的生产效率，国内外针对增加转瓶的内表面积都曾进行了一些研究。目前已经报道的美国专利有US4962033，US5101013，US5527705；中国专利有CN2106834u和CN2040101u。已经研发出的技术方案主要有以下几种(1)螺旋转瓶(SpiraCel)；Bibby Sterilin公司使用的Spiracel转瓶是一种螺旋聚苯乙烯转瓶，使用时细胞在螺旋中的均匀分步非常重要，否则会造成生长非常不平衡，产量也会很低。由于镜检时只能看到螺旋外部的细胞，如果细胞分布不均匀有可能造成假象。(2)玻璃管Bellco-Corbeil培养系统；这是在转瓶内装填有由硅氧烷分隔环分离的平行小玻璃管组成。通过储液瓶向交替进行正反向360度旋转的培养瓶中灌注培养液。(3)BibbySterilin(Corning)公司的ESRB转瓶或Ashby Scientific和Integra Biosciences的ImmobaSil转瓶。这是采用了表面有起伏的转瓶，以求能够在相同直径下增大培养的表面积。上述这些产品必须采用专门的制作工艺生产，不仅制作成本高，而且如果生产中需要重复使用，则必须进行烦琐的清洗和消毒工序。此外，对于已经采用传统转瓶(roller bottle)的生产厂家来说，如果要更换成上述这些转瓶，就意味着原有的大量瓶子要全部淘汰，这无疑是巨大的浪费。
本实用新型所采用的技术方案是为了有效的增加转瓶(roller bottle)的贴壁表面积，在现有的培养瓶中增加一个壁上有孔、内装有固相载体的滚芯。滚芯内的载体由玻璃微球或合成材料构成，当滚芯被放置在转瓶内进行细胞培养时，随着转瓶的转动，滚芯在瓶内也进行滚动。被培养的细胞不仅能够在转瓶的瓶壁上生长，同时也可以借助于滚芯内部的载体表面进行生长。转瓶与滚芯构成了一套新型的滚芯式转瓶培养装置。本实用新型能够在不改变原有基本培养设备和工艺的条件下，为细胞提供更大的贴壁面积。由于本实用新型转瓶装置的滚芯制作简单，使用容易，成本低廉，可以重复使用。采用本装置改进后，不仅不会造成原有培养瓶的大量废弃，对原来的生产工艺也不需要做大的调整，就可以有效的增加贴壁细胞的培养产率。
以下结合附图和实施例对本实用新型作进一步说明。
图1为新型转瓶装置的原理示意图图2为滚芯的结构示意图实施步骤在图1中，本实用新型转瓶装置主要是由传统的培养转瓶(roller bottle)(1)和滚芯(2)构成。
在图2所示实施例中，滚芯(2)是由端头罗帽(3)、管体(4)和固相载体(5)组成。在滚芯(2)的管体(4)外壁上布满0.1-5毫米不规则小孔，滚芯两端d的端头罗帽(3)的最大外径应大于管体(4)的外径，使滚芯(2)在转瓶(1)内滚动时仅有端头区域接触转瓶(1)内壁。管体的中部有孔部分不会接触瓶壁。滚芯(2)的总长度要略小于转瓶(1)的直壁部分的长度，两端端头最大部分的直径应小于转瓶(1)瓶口直径，使滚芯(2)能够顺利的从瓶口放入转瓶(1)内或取出。使用时，在滚芯(2)内装入大于壁孔的固相载体，固相载体的材料是(但不限于是)玻璃、陶瓷、纤维素、壳聚糖、葡聚糖、明胶或各种高分子聚合材料。经过预处理和消毒后，将滚芯自转瓶瓶口放入转瓶中，当转瓶滚动时，滚芯也会在瓶内随着一起滚动。加入培养液和细胞种，置转瓶机上进行转瓶培养，被培养的细胞能够同时利用转瓶的内壁和滚芯内的固相载体进行贴壁生长。
权利要求1，一种用于提高动物细胞贴壁培养产率的新型滚芯式转瓶培养装置，其特征是由转瓶(1)和装有固相载体的滚芯(2)构成，滚芯中的固相载体表面和转瓶内壁能够同时为细胞培养提供贴壁表面积。
2，一种根据权利要求1所述的装置，其特征在于滚芯(2)是由端头罗帽(3)、管体(4)、固相载体(5)组成。
3，一种根据权利要求1所述的装置，其特征在于在滚芯(2)的管体(4)外壁上布满0.1-5毫米直径的小孔，滚芯两端的端头罗帽(3)最大外径大于管体(4)的外径，滚芯(2)的总长度小于转瓶(1)的直壁壁长，两端端头最大部分的直径小于转瓶(1)瓶口直径。
4，一种根据权利要求1所述的装置，其特征在于在滚芯(2)内装入的固相载体材料是直径大于管体(4)壁孔的颗粒状玻璃或其他高分子聚合材料。
专利摘要本实用新型涉及一种用于提高动物细胞贴壁培养产率的新型转瓶培养装置。在培养转瓶中增加一个壁上有孔、内装有固相载体的滚芯。滚芯内的固相载体由玻璃、陶瓷、纤维素或合成材料构成，当滚芯被放置在转瓶内进行细胞培养时，随着转瓶的转动，滚芯在瓶内也进行滚动。被培养的细胞不仅能够在转瓶的瓶壁上生长，而且可以借助于滚芯内部的载体表面进行生长，能够给传统转瓶培养细胞提供了更大的贴壁面积。
文档编号C12M3/00GK2801788SQ2005200832
公开日2006年8月2日 申请日期2005年5月18日 优先权日2005年5月18日
发明者韩毅鹏, 张潇文 申请人:韩毅鹏, 张潇文