专利名称：一种功能有机肥的复合微生物菌剂及制备方法
技术领域：
本发明公开了一种功能有机肥的复合微生物菌剂及制备方法。
背景技术：
日本、美国、澳大利亚等国家已经开始利用专门的微生物菌剂对畜禽粪进行高温堆制发酵处理，但他们的菌剂都是单一菌或简单的复合菌，往往只能对生物有机肥中的一项或几项指标进行改良，目前尚未见有对防治农作物病虫灾害达到明显效果的复合微生物菌剂。
国内外微生物肥料发展存在一些不合理的问题，特别是国内一些有机肥生产厂。如盲目地认为肥料中加入菌的种类越多越好而将互相拮抗菌放在一起；发酵设备不完善；工艺不先进；生产技术低下；产品质量不稳定；微生物复合肥料中化肥比例大，名不符实等等。
微生物菌种肥料行业的发展趋势是功能微生物菌种肥料(例如驱虫防病微生物菌种肥料)。采用本发明的功能微生物菌种生产的有机肥，具有可持续的“绿色减灾”驱虫防病和高效的双重作用，可以预防和长期控制果蔬植物生长的病虫害，提高果蔬植物品质，并且能够有效地恢复和保持土壤的生态平衡。
经过检索有关专利文献，目前尚未检索到与本发明专利相同的有机肥的复合微生物菌剂及其制备方法。
发明目的本发明的目的是要提供一种采用好氧、厌氧、兼氧类微生物经混合培养而成，能有效地防治农作物病虫灾害，效果明显的一种复合微生物菌剂。
本发明的另一个目的是要提供一种生产上述复合微生物菌剂的方法。
发明内容
本发明的技术特征在于所述的一种功能有机肥的微生物菌剂，考虑到能有效地防治农作物病虫灾害，设计成主要由枯草芽孢杆菌、泾阳链霉菌、保加利亚乳杆菌，蜡样芽孢杆菌，巨大芽孢杆菌，粪肠球菌复合而成的复合微生物菌剂，所述的各菌种的含量根据农作物病虫灾害实际情况进行调节、配伍。
本发明的技术特征在于所述的一种功能有机肥的微生物菌剂制备方法包括以下步骤1)菌种保藏菌珠在琼脂平板，合适的环境条件下生长，用悬浮培养基收集菌体，每个安瓿瓶中加入0.2ml菌悬液。烧灼口塞棉花，真空干燥，火灼封口，-70℃冰箱保存。
2)平板接种打开保藏菌种的安瓿瓶，加入0.1ml营养发酵液配制菌悬液，划线接种平板，在培养箱中培养，对活力下降菌珠进行复壮。
3)摇瓶培养500ml摇瓶中，装培养液150-200ml，灭菌，从平板中接种单菌落，或从斜面中接种孢子悬液，在摇床中振荡培养。
4)20L种子罐培养按照5％接种量，从摇瓶接种种子罐，设定不同菌珠生长特性，设定合适生产温度，通气量和搅拌电机转速。
5)发酵至合适浓度转接500L发酵罐，按5％接种量接种。
6)收集菌体利用压力压送发酵液从发酵罐到转筒式离心机收集菌体，本厂设为6000转/分筒式离心机两台。
7)添加保护剂并乳化利用脱脂奶粉，磷酸氢钾和磷酸二氢钾缓冲剂系统，蔗糖，吐温-80，味精等为主要成分的保护剂配方同菌体混合，利用匀浆器乳化。
8)冷冻干燥乳化后放入冻干机，设定程序，在真空状态下，-40℃快速冷冻，逐渐升温升华水份，干燥，过程中通过插入电极测温度和水份变化。
9)粉碎冻干后取出块状菌体，利用食品粉碎机，打成粉末。
10)测活菌数利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。
11)配伍按照主要菌种每公斤发酵原始肥料中108的标准，根据活菌数不同的菌粉，混合。
12)包装按照40g/包，用于生产1吨有机肥的标准，装入铝箔袋，用真空包装机真空封装。
本发明的优点是具有可持续的“绿色减灾”驱虫防病和高效的双重作用，可以预防和长期控制果蔬植物生长的病虫害，提高果蔬植物品质，并且能够有效地恢复和保持土壤的生态平衡。
具体实施例方式实施例1针对生姜的姜温病，制备方法包括以下步骤1、菌种保藏菌珠在琼脂平板，合适的环境条件下生长，用悬浮培养基收集菌体，每个安瓿瓶中加入0.2ml菌悬液。烧灼口塞棉花，真空干燥，火灼封口，-70℃冰箱保存。
2、平板接种打开保藏菌种的安瓿瓶，加入0.1ml营养发酵液配制菌悬液，划线接种平板，在培养箱中培养，对活力下降菌珠进行复壮。
3、摇瓶培养500ml摇瓶中，装培养液150-200ml，灭菌，从平板中接种单菌落，或从斜面中接种孢子悬液，在摇床中振荡培养。
4、20L种子罐培养按照5％接种量，从摇瓶接种种子罐，设定不同菌珠生长特性，设定合适生产温度，通气量和搅拌电机转速。
5、发酵至合适浓度转接500L发酵罐，按5％接种量接种。
6、收集菌体利用压力压送发酵液从发酵罐到转筒式离心机收集菌体，本厂设为6000转/分筒式离心机两台。
7、添加保护剂并乳化利用脱脂奶粉，磷酸氢钾和磷酸二氢钾缓冲剂系统，蔗糖，吐温-80，味精等为主要成分的保护剂配方同菌体混合，利用匀浆器乳化。
8、冷冻干燥乳化后放入冻干机，设定程序，在真空状态下，-40℃快速冷冻，逐渐升温升华水份，干燥，过程中通过插入电极测温度和水份变化。
9、粉碎冻干后取出块状菌体，利用食品粉碎机，打成粉末。
10、测活菌数利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。
11、配伍按照主要菌种每公斤发酵原始肥料中108的标准，根据活菌数不同的菌粉，混合，其中枯草芽孢杆菌5×108、泾阳链霉菌1×108、保加利亚乳杆菌2×108、蜡样芽孢杆菌4×108、巨大芽孢杆菌1×108、粪肠球菌5×108复合而成的复合微生物菌剂。
12、包装按照40g/包，用于生产1吨有机肥的标准，装入铝箔袋，用真空包装机真空封装。
实施例2针对香蕉赤霉病，制备方法包括以下步骤1、菌种保藏菌珠在琼脂平板，合适的环境条件下生长，用悬浮培养基收集菌体，每个安瓿瓶中加入0.2ml菌悬液。烧灼口塞棉花，真空干燥，火灼封口，-70℃冰箱保存。
2、平板接种打开保藏菌种的安瓿瓶，加入0.1ml营养发酵液配制菌悬液，划线接种平板，在培养箱中培养，对活力下降菌珠进行复壮。
3、摇瓶培养500ml摇瓶中，装培养液150-200ml，灭菌，从平板中接种单菌落，或从斜面中接种孢子悬液，在摇床中振荡培养。
4、20L种子罐培养按照5％接种量，从摇瓶接种种子罐，设定不同菌珠生长特性，设定合适生产温度，通气量和搅拌电机转速。
5、发酵至合适浓度转接500L发酵罐，按5％接种量接种。
6、收集菌体利用压力压送发酵液从发酵罐到转筒式离心机收集菌体，本厂设为6000转/分筒式离心机两台。
7、添加保护剂并乳化利用脱脂奶粉，磷酸氢钾和磷酸二氢钾缓冲剂系统，蔗糖，吐温-80，味精等为主要成分的保护剂配方同菌体混合，利用匀浆器乳化。
8、冷冻干燥乳化后放入冻干机，设定程序，在真空状态下，-40℃快速冷冻，逐渐升温升华水份，干燥，过程中通过插入电极测温度和水份变化。
9、粉碎冻干后取出块状菌体，利用食品粉碎机，打成粉末。
10、测活菌数利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。
11、配伍按照主要菌种每公斤发酵原始肥料中108的标准，根据活菌数不同的菌粉，混合，其中枯草芽孢杆菌5×108、泾阳链霉菌2×108、保加利亚乳杆菌2×108、蜡样芽孢杆菌4×108、巨大芽孢杆菌1×108、粪肠球菌5×108复合而成的复合微生物菌剂。
权利要求
1.一种功能有机肥的复合微生物菌剂及制备方法，所述的微生物菌剂包括由枯草芽孢杆菌、泾阳链霉菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、粪肠球菌复合而成的微生物菌剂，其特征是所述的一种功能有机肥的微生物菌剂制备方法包括以下步骤1)菌种保藏菌珠在琼脂平板，合适的环境条件下生长，用悬浮培养基收集菌体，每个安瓿瓶中加入0.2ml菌悬液。烧灼口塞棉花，真空干燥，火灼封口，-70℃冰箱保存。2)平板接种打开保藏菌种的安瓿瓶，加入0.1ml营养发酵液配制菌悬液，划线接种平板，在培养箱中培养，对活力下降菌珠进行复壮。3、摇瓶培养500ml摇瓶中，装培养液150-200ml，灭菌，从平板中接种单菌落，或从斜面中接种孢子悬液，在摇床中振荡培养。4)20L种子罐培养按照5％接种量，从摇瓶接种种子罐，设定不同菌珠生长特性，设定合适生产温度，通气量和搅拌电机转速。5)发酵至合适浓度转接500L发酵罐，按5％接种量接种。6)收集菌体利用压力压送发酵液从发酵罐到转筒式离心机收集菌体，本厂设为6000转/分筒式离心机两台。7)添加保护剂并乳化利用脱脂奶粉，磷酸氢钾和磷酸二氢钾缓冲剂系统，蔗糖，吐温-80，味精等为主要成分的保护剂配方同菌体混合，利用匀浆器乳化。8)冷冻干燥乳化后放入冻干机，设定程序，在真空状态下，-40℃快速冷冻，逐渐升温升华水份，干燥，过程中通过插入电极测温度和水份变化。9)粉碎冻干后取出块状菌体，利用食品粉碎机，打成粉末。10)测活菌数利用系列稀释法涂布平板，计算活菌数。11)配伍按照主要菌种每公斤发酵原始肥料中108的标准，根据活菌数不同的菌粉，混合。12)包装按照40g/包，用于生产1吨有机肥的标准，装入铝箔袋，用真空包装机真空封装。
全文摘要
本发明公开了一种功能有机肥的复合微生物菌剂及制备方法，它主要由枯草芽孢杆菌、泾阳链霉菌、保加利亚乳杆菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、粪肠球菌复合而成，它的制备方法保存菌种、平板接种、摇瓶种子液培养、20L种子罐培养、500L发酵罐生产、离心机收集菌体、菌体添加保护剂并乳化、真空冷冻干燥、粉碎、菌粉活菌数计数、菌种配伍、真空包装、－20℃低温产品保存、销售使用。本发明的优点是可以预防和长期控制果蔬植物生长的病虫害，提高果蔬植物品质，并且能够有效地恢复和保持土壤的生态平衡。
文档编号C12R1/125GK1844359SQ20061002598
公开日2006年10月11日 申请日期2006年4月24日 优先权日2006年4月24日
发明者陈汉民 申请人:上海汇仁复合有机肥料有限公司