专利名称：一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法
技术领域：
本发明属菌株分离的制备领域，特别是涉及一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法。
背景技术：
蚕丝精练的目的是去除原料中的大部分丝胶、油脂和杂质等，充分发挥蚕丝纤维固有 的光泽和手感，同时尽量保持蚕丝原有的物理机械性能。精练的质量直接影响倒后续工序 能否正常进行、产品质量的优劣及生产成本的高低，精练方法的不同影响到工人的劳动强 度、劳动环境及对环境的污染。
目前，蚕丝生产中常用的精练方法有皂碱法和生物酶法。皂碱法是传统的精练方法， 采用化学药剂促使蚕丝脱胶除油，速度快、产量高，但对纤维损伤大，且污染环境严重。 生物酶法就是用生物酶制剂直接作用于蚕丝原料，使其脱胶除油，可提高劳动生产率、减 少环境污染，对纤维损伤也小，但现有的生物酶制剂成本高，可选品种少，不适于工厂大 批量生产。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，本发明筛选 出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，能有效提高精练质量，减少精练时间，提高劳动生 产率，减少环境污染，降低生产成本，该分离方法效果明显、易观察、操作简便。
本发明的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，包括
(1) 待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；
(2) 脱胶菌株的初歩筛选采用高蛋白培养基平板法，将培养基A和样品液在平板
上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上37'C恒温
培养ld，于冰箱中1 1(TC保存；
(3) 脱胶菌株的复筛将上述菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养， 得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；
(4) 将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上37'C恒温培养ld，于冰 箱中1 1(TC保存。
所述的培养基A配方为可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g, KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 l,0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水lOOOmL;所述的培养基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 L0 10.0g， NaCl L0 5.0g， pH6.0 8.0，水lOOOmL;
所述的牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g, NaCl 1.0 6.0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL;
所述步骤(2)中的平板涂布接种的接种量为0.05 0.2mL，接种温度30 45°C ，培养 时间1 3d;
所述步骤(3)中的摇床转速为100 300r/min，培养温度为30 45°C，培养时间l
5d;
所述的培养基A，培养基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分别在灭菌锅内灭菌20 30min，灭菌锅压力为0.7 1.2Kg/cm2。 有益效果
(1) 本发明筛选出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，能有效提高精练质量，减少
精练时间，提高劳动生产率，减少环境污染，降低生产成本；
(2) 该分离方法效果明显、易观察、操作简便。
具体实施例方式
下面结合具体实施例，进一歩阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而 不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人 员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。
实施例1
(1) 待分离样品的准备采集绢纺原料腐化24h后的液体，供分离脱胶菌株用
(2) 脱胶菌株的初步筛选脱胶菌株的筛选方法用高蛋白平板涂布分离法，将培养
皿及培养基A分别于1Kg/cn^灭菌20min，灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为 O.lmL， 37°C，培养l 3d,得到五种形态的脱胶菌的菌落；
培养基A配方为可溶性淀粉8.0g，酵母高3.0g，酪蛋白6.0g， KH2PO41.0g， MgS04 0.2g，琼脂20.0g， pH7.0，水lOOOmL;
(3) 脱胶菌株的复筛将摇瓶及培养基B分别于lKg/cr^灭菌20min，然后接种，再 将接种好的摇瓶置于摇床上培养，温度37。C,转速200r/min，培养72h后取出，测定原料的残胶率，得到残胶率最低的菌株，
培养基B配方为蚕丝原料lO.Og， K2HPO41.0g， KH2PO44.0g, NaC12.0g， pH7.0， 水lOOOmL;
(4)通过上述方法得到优势脱胶菌株。
实施例2
(1) 待分离样品的准备采集绢纺厂土样lg，加入无菌水99mL，振荡稀释后供分离 脱胶菌用；
(2) 脱胶菌株的初歩筛选脱胶菌株的筛选方法用高蛋白平板涂布分离法，将培养 皿及培养基A分别于1Kg/ci^灭菌20min，灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为 0.2mL， 39°C，培养3 5d。得到四种形态的脱胶菌的菌落；
培养基A配方为可溶性淀粉10.0g，酵母高5.0g,酪蛋白10.0g， KH2P04 2.0g， MgS04 0.5g，琼脂18.0g， pH8.0，水1000mL;
G)脱胶菌株的复筛将摇瓶及培养基B分别于lKg/cn^灭菌20min，然后接种，再 将接种好的摇瓶置于摇床上培养，温度39。C,转速220r/min，培养84h后取出，测定原 料的残胶率，得到残胶率最低的菌株；
培养基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HPO42.0g， KH2PO46.0g， NaCl l.Og， pH8.0， 水濯OmL;
(4)通过上述方法得到优势脱胶菌株。
权利要求
1. 一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，包括(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；(2)脱胶菌株的初步筛选采用高蛋白培养基平板法，将培养基A和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上37℃恒温培养1d，于冰箱中1～10℃保存；(3)脱胶菌株的复筛将上述菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；(4)将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上37℃恒温培养1d，于冰箱中1～10℃保存。
2. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述的培养基A配方为可溶性淀粉1.0 10.0g，酵母高1.0 5.0g，酪蛋白5.0 10.0g， KH2PO40.1 2.0g， MgSO40.1 1.0g，琼脂15.0 20.0g, pH6.0 9.0，水1000mL。
3. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述的培养 基B配方为蚕丝原料25.0g， K2HP04 0.2 5.0g， KH2P04 1.0 10.0g， NaCl 1.0 5.0g， pH6.0 8.0，水1000mL。
4. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述的牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏1.0 5.0g，蛋白胨1.0 10.0g，NaCl 1.0 6.0g，琼脂15.0 20.0g， pH6.0 9.0，水1000mL。
5. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述步骤(2) 中的平板涂布接种的接种量为0.05 0.2mL，接种温度30 45r，培养时间1 3d。
6. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述步骤(3) 中的摇床转速为100~300r/min,培养温度为30 45°C，培养时间l 5d。
7. 根据权利要求1所述的一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，其特征在于所述的培养 基A,培养基B，三角瓶，牛肉膏蛋白胨斜面分别在灭菌锅内灭菌20 30min，灭菌锅压 力为0.7 1.2Kg/cm2。
全文摘要
本发明涉及一种蚕丝精练用脱胶菌株的分离方法，包括(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样；(2)脱胶菌株的初步筛选采用高蛋白培养基平板法，将培养基A和样品液在平板上涂布接种、培养，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；(3)脱胶菌株的复筛将上述菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于蚕丝而使原料残胶率为最低的菌种，即为脱胶菌种；(4)将分离出的脱胶菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，于冰箱中1～10℃保存。本发明筛选出的菌株可直接作用于蚕丝精练脱胶，精练时间短，环境污染少，生产成本低，该分离方法效果明显、易观察、操作简便。
文档编号C12N1/00GK101412964SQ200810203499
公开日2009年4月22日 申请日期2008年11月27日 优先权日2008年11月27日
发明者劳继红, 单世宝, 李东梅, 杨雪霞 申请人:东华大学