专利名称：绢纺原料精练用除油菌株的分离技术的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，属纺织原料的初加工技术领域。
背景技术：
绢纺原料的精练是为了去除原料中的大部分丝胶、油脂、杂质等，充分发挥丝纤维固有的光泽和手感，同时尽量保持丝纤维原有的物理机械性能。精练的质量直接影响到后工序能否正常进行、产品质量的优劣及生产成本的高低，精练方法的不同影响到工人的劳动强度、劳动环境及对环境的污染。
目前，绢纺行业生产上常用的精练方法有皂碱法、腐化练法和生物酶法。皂碱法是传统的精练方法，系采用化学药剂促进脱胶除油，速度快、产量高，但对纤维损伤重，对重油原料的油脂去除较难，往往为了加强除油而导致残胶率偏低、生产成本的提高，并且化学药剂对环境污染较大。生物酶法就是用生物酶制剂直接作用于绢纺原料，可提高劳动生产率、改善劳动环境、减少环境污染且对纤维作用缓和，但现有的生物酶制剂成本高、可选品种少，不适于工厂大批量生产的应用。
腐化练法是利用自然环境中存在的微生物的作用对绢纺原料脱胶除油，是一个自然发酵过程。腐化体系由多种微生物组成，有些是有用菌种，有些是无用菌种甚至是有害菌种。该法在生产中的控制得当时，具有独特的除油功能，生产成本低，排放的练液与生态环境相容性好，可生物降解。但生产周期长，劳动生产率低，生产过程中产生臭气，卫生条件差，且原料残胶率偏低，产品质量不稳定。
发明内容
本发明的目的是提供一种适合绢纺原料精练除油的菌株的分离技术，得到的菌株用于精练可提高绢纺原料的精练质量，减少精练时间，改善劳动环境，减少环境污染。
本发明为绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于按如下步骤进行(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样，腐烂蚕蛹等供分离除油菌株用；(2)除油菌株的初步筛选采用双层琼脂平板法接种，将培养基A和样品液在平板上涂布接种，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；(3)除油菌株的复筛将菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于绢纺原料而使原料残油率为最低的菌种，即为除油菌株；(4)除油菌株的保存将分离出的除油菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上置于冰箱中保存。
所述培养基A的配方可为上层水1000ml，牛肉膏1.0～10.0g，蛋白胨1～10g，NaCl 1.0～6.0g，琼脂15.0～20.0g，pH6.5～9.0；下层水1000ml，橄榄油1～10ml，琼脂15.0～20.0g，pH6.5～9.0。
所述培养基B的配方可为水1000ml；绢纺原料80g；(NH4)2SO41.0～10.0g；K2HPO41.0～10.0g；NaCl 1.0～6.0g；pH7.0～9.0。
所述牛肉膏蛋白胨培养基的配方可为水1000ml，牛肉膏1.0～5.0g，蛋白胨1～10g，NaCl 1.0～6.0g，琼脂15.0～20.0g，pH7.0～9.0。
所述初步筛选工序中平板涂布接种的接种量可为0.05～0.2ml，接种温度为30～45℃，培养时间为1～4天。
所述复筛工序中摇床的摇动速度可为100～300r/min，培养温度为30～45℃，培养时间为24～96h。
所述除油菌株在冰箱中的保存温度可为0～10℃。
所述的培养基A，培养基B，摇瓶，斜面等可分别在灭菌锅内灭菌20～30min，灭菌锅的蒸汽压力为0.7～1.2kg/cm2。
本发明在对现有腐化练练液中微生物类群进行分析，并通过对多种分离方法进行比较实验的基础上，形成独特的分离技术，筛选出了适合绢纺原料精练除油的优势菌株，与现有技术相比，具有筛选效果明显、易观察、操作简便等突出优点和积极效果。筛选出的优势除油菌株可直接作用于绢纺原料的除油，解决了现有技术生产周期长、劳动环境差、产品质量不稳定的缺点，能有效提高精练质量，减少精练时间，提高劳动生产率，改善劳动环境，减少环境污染。
具体实施例方式
实施例1(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化24小时后的液体，供分离除油菌株用。
(2)除油菌株的初步筛选除油菌株的筛选方法用双层琼脂平板法。将器皿及培养基A分别于1kg/cm2灭菌20min。灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为0.1ml。37℃，培养1～3天。得到三种形态的除油菌的菌落。
培养基A的配方为上层水1000ml，牛肉膏3.0g，蛋白胨5g，NaCl 5.0g，琼脂17.0g，pH7.5；下层水1000ml，橄榄油5ml，琼脂17.0g，pH7.5。
(3)除油菌株的复筛将器皿及培养基B分别于1kg/cm2灭菌20min，然后接种。再将接种好的摇瓶置于摇床上培养，控制温度39℃，摇动速度220r/min，培养64h后取出，测定原料残油率，得到残油率最低的菌种。
培养基B的配方为水1000ml；绢纺原料80g；(NH4)2SO45g；K2HPO45.0g；NaCl2.0g；pH8.0；(4)通过上述方法得到优势除油菌株。
实施例2(1)待分离样品的准备采集绢纺厂土样1g，加入99ml无菌水，稀释振荡后供分离除油菌株用。
(2)除油菌株的初步筛选除油菌株的筛选方法用双层琼脂平板法。
培养基A的配方为上层水1000ml；牛肉膏4.0g；蛋白胨4g；NaCl 6.0g；琼脂17.0g；pH8.5。下层水1000ml；橄榄油7ml；琼脂17.0g；pH9.0。将器皿及培养基分别于1kg/cm2灭菌20min。灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为0.2ml。40℃，培养3～5天。得到三种形态的除油菌的菌落。
(3)除油菌株的复筛培养基B的配方为水1000ml；绢纺原料80g；(NH4)2SO43g；K2HPO45.0g；NaCl 2.0g；pH9.0；将器皿及培养基分别于1kg/cm2灭菌20min。然后接种。再将接种好的摇瓶置于摇床上培养，36℃；200r/min；培养72h后取出，测定原料残油率，得到残油率最低的菌种。
(4)通过上述方法得到优势除油菌株。
实施例3(1)待分离样品的准备采集腐烂的蚕蛹1g，加入99ml无菌水，稀释振荡后供分离优势除油菌株用。
(2)除油菌株的初步筛选除油菌株的筛选方法用双层琼脂平板法。
培养基A的配方为上层水1000ml；牛肉膏5.0g；蛋白胨8g；NaCl 5.0g；琼脂17.0g；pH9.0。下层水1000ml；橄榄油2ml；琼脂17.0g；pH7.0。将器皿及培养基分别于1kg/cm2灭菌20min。灭菌后倒平板，采用涂布法接种，接种量为0.1ml。45℃，培养3～5天。得到三种形态的除油菌的菌落。
(3)除油菌株的复筛培养基B的配方为水1000ml；绢纺原料80g；(NH4)2SO48.0g；K2HPO45.0g；NaCl 2.0g；pH7.0；将器皿及培养基分别于1kg/cm2灭菌20min。然后接种。再将接种好的摇瓶置于摇床上培养，100r/min，45℃培养48h后取出，测定残油率，得到残油率最低的菌种。
(4)通过上述方法得到优势除油菌株。
权利要求
1.一种绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于按如下步骤进行(1)待分离样品的准备采集绢纺原料腐化练练液或绢纺厂土样，腐烂蚕蛹供分离除油菌株用；(2)除油菌株的初步筛选采用双层琼脂平板法接种，将培养基A和样品液在平板上涂布接种，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；(3)除油菌株的复筛将菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于绢纺原料而使原料残油率为最低的菌种，即为除油菌株；(4)除油菌株的保存将分离出的除油菌株接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上置于冰箱中保存。
2.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述培养基A的配方为上层水1000ml，牛肉膏1.0～10.0g，蛋白胨1～10g，NaCl 1.0～6.0g，琼脂15.0～20.0g，pH6.5～9.0；下层水1000ml，橄榄油1～10ml，琼脂15.0～20.0g，pH6.5～9.0。
3.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述培养基B的配方为水1000ml；绢纺原料80g；(NH4)2SO41.0～10.0g；K2HPO41.0～10.0g；NaCl 1.0～6.0g；pH 7.0～9.0。
4.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述牛肉膏蛋白胨培养基的配方为水1000ml，牛肉膏1.0～5.0g，蛋白胨1～10g，NaCl 1.0～6.0g，琼脂15.0～20.0g，pH 7.0～9.0。
5.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述初步筛选工序中平板涂布接种的接种量为0.05～0.2ml，接种温度为30～45℃，培养时间为1～4天。
6.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述复筛工序中摇床的摇动速度为100～300r/min，培养温度为30～45℃，培养时间为24～96h。
7.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述除油菌株在冰箱中的保存温度为0～10℃。
8.按权利要求1所述的绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，其特征在于所述的培养基A，培养基B，摇瓶，斜面分别在灭菌锅内灭菌20～30min，灭菌锅的蒸汽压力为0.7～1.2kg/cm2。
全文摘要
一种绢纺原料精练用除油菌株的分离技术，属纺织原料的初加工技术领域，主要采用双层琼脂平板法接种，将培养基A和样品液在平板上涂布接种，得到产生透明圈的菌落，将菌落接种于牛肉膏蛋白胨斜面上，于冰箱中保存；再将菌种接种于装有培养基B的三角瓶，置于摇床上培养，得到作用于绢纺原料而使原料残油率为最低的菌种，即为除油菌株。本发明在对现有腐化练练液中微生物类群进行分析，并通过对多种分离方法进行比较实验的基础上，形成独特的分离技术，筛选出了适合绢纺原料精练除油的优势菌株，具有筛选效果明显、易观察、操作简便等优点能有效提高精练质量，减少精练时间，提高劳动生产率，改善劳动环境，减少环境污染。
文档编号D01C3/02GK1648232SQ20041009304
公开日2005年8月3日 申请日期2004年12月10日 优先权日2004年12月10日
发明者杨雪霞, 龚泰月, 劳继红, 汤跃虎, 李文娟, 徐可成, 江慧 申请人:富润集团有限公司, 东华大学