专利名称：宫颈部异常细胞检测用试剂及用该试剂检测宫颈部异常细胞的方法
技术领域：
本发明提供一种用于检测从子宫颈部采集的生物试样中所含如癌细胞或异型细 胞等异常细胞的试剂以及使用该试剂检测采自宫颈部试样中的异常细胞的方法。
背景技术：
宫颈癌是发生于子宫颈部表面上皮的癌，其大部分为扁平上皮癌。通常在宫颈癌 检查中，首先从宫颈部采集细胞，通过细胞诊断进行筛查，如果发现异常，再进行组织诊断 等精密检查。在宫颈部的组织诊断中，作为癌前病变期，根据出现在上皮内的异型细胞的出现 程度分为轻度、中度或重度三个阶段的发育异常。从重度发育异常再恶化，就进入上皮内出 现癌细胞阶段。然后，再发展为癌细胞局限于上皮层内的“原位癌”和癌细胞从上皮蔓延到 皮下组织的“浸润癌(所谓的宫颈癌)。进行细胞诊断，即筛查，以判断是否进行上述组织诊断。此细胞诊断是将采自子宫 颈部的生物样本试样涂抹在玻片上用显微镜等观察。在细胞诊断中，需要根据检查人员的观察来判断，若检测试样制备不好则有可能 看漏宫颈癌，还要依赖于检查人员的熟练技术，因此很难快速、精确地检查大量试样。而且 很可能缺乏有熟练技术的检查人员。因此，人们尝试着利用自动化系统检测从子宫颈部采集的生物试样中所含的异常 细胞，将其作为细胞诊断的补充。可用于自动化系统的异常细胞检测方法中，已知有用荧光色素染色细胞核内的 DNA，用流式细胞仪测定荧光，算出DNA量，根据算出的DNA量检测癌细胞。W. A. Linden等人(非专利文献1)用溴化乙锭染色采自宫颈部的细胞的DNA，进行 荧光测定，检测癌细胞，还在用溴乙锭染色DNA的同时，用异硫氰酸荧光素(FITC)染色蛋白 质，基于DNA量和蛋白质量检测癌细胞。B. J. Fowlkes等人(非专利文献2)则用碘化丙啶(PI)和FITC分别染色细胞核和 细胞质，用流式细胞仪测定二种荧光，根据这些荧光的强度检测癌细胞。然而，这些方法发生假阳性和假阴性的概率高，在宫颈癌自动化检测系统上的应 用未能实现。美国专利第4883867号(专利文献1)中记载了用以下通式染色并检测网织红细 胞的方法[化 1]
权利要求
1. 一种宫颈部异常细胞检测用试剂，用于检测含有米集自子宫颈部的细胞的生物试样 中所含异常细胞，其特征在于，其包含以通式(I)所示化合物或其盐 [化1]
2.根据权利要求1所述的宫颈部异常细胞检测用试剂，还包括从碘化丙啶、溴乙锭和 吖啶橙中选择的插入色素。
3.根据权利要求1所述的宫颈部异常细胞检测用试剂，其特征在于，PH为7-8.5。
4.根据权利要求1所述的宫颈部异常细胞检测用试剂，其特征在于，具有200-350m0sm 的渗透压。
5.根据权利要求1所述的宫颈部异常细胞检测用试剂，其特征在于，式(I)所示化合物 是盐，负离子是阴离子。
6.根据权利要求1所述的宫颈部异常细胞检测用试剂，其特征在于异常细胞是癌细 胞或异型细胞。
7.—种检测生物试样中异常细胞的检测方法，包括以下步骤将含有采自宫颈部的细胞的生物试样与权利要求1所述宫颈部异常细胞检测用试剂 接触，制备测定用试样；让测定用试样流过流动室，用激光照射流经流动室的测定用试样，检测测定用试样发 出的荧光；根据所检测荧光生成的荧光信号，获取细胞核的相关信息；及 根据获取的细胞核信息，检测所述试样中的异常细胞。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，细胞核相关信息是从细胞DNA量的相关信 息、细胞的染色质凝集的相关信息以及细胞核径的相关信息中选择的至少二种。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，细胞DNA量的相关信息是荧光信号的波形面积的相应值， 细胞的染色质凝集的相关信息是荧光信号的波形高度的相应值， 细胞核径的相关信息是荧光信号的波形宽度的相应值。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，异常细胞是癌细胞或异型细胞。
全文摘要
本发明涉及一种含有分子式(I)的色素的宫颈部异常细胞检测用试剂，该试剂用于检测从宫颈部采集的含细胞的活体试样中所含异常细胞。
文档编号C12Q1/04GK102112875SQ200980130218
公开日2011年6月29日 申请日期2009年7月27日 优先权日2008年7月30日
发明者森田将且, 河合昭典, 辻野幸夫 申请人:希森美康株式会社