专利名称：脂肪干细胞分离装置的制作方法
技术领域：
本创作是有关于一种纯化分离用的装置，尤指一种可以用于分离脂肪干细胞的分
1 装直O
背景技术：
脂肪组织遍布皮下与内脏，具有储存能量、维持体温、保护脏器等功能。脂肪组织 与血液的份量在人体中可于正常生理状况下产生显著变化而不致于致死的组织，脂肪组织 也是唯一可以在移除数千毫升，而不会对身体造成伤害的组织。近年来肥胖人口增加，除了饮食控制以及加强运动之外，抽脂手术成为迅速去除 脂肪组织的手段。过去抽取出的脂肪组织有回填入人体作为微整型用，但大都因自体吸收 后，效果不彰，无法维持长时间。然而，近年来已知脂肪组织中存在有具有分化潜能的脂肪 干细胞，脂肪干细胞与其它来源的干细胞相似，于具有一定适当的生长因子的环境中，可以 分化成特化的细胞，以供应用于组织工程与细胞治疗当中。然而，现有技术分离脂肪细胞的方法需要昂贵的仪器或繁复的步骤，才能由抽脂 手术所取出的脂肪组织中分离出脂肪干细胞，因此现有技术仍缺乏一可简易的、整合性的、 有效率的且经济的分离脂肪干细胞的技术。
发明内容有鉴于现有技术的分离脂肪干细胞的技术过于繁复且需要昂贵仪器，本创作的主 要目的在于提供一种可以纯化脂肪组织当中具有分化潜能的干细胞的分离装置，其不仅容 易操作，亦具有容易制造、成本低廉、可抛弃避免重复使用、不会因污染而发生交叉感染等 优点。为了达到上述目的，本创作是提供一种脂肪干细胞分离装置，其包括一管柱，其 具有一管体，管体内形成有一容室，管体的顶端设有一进料口，管体的底部形成有一出口 部，出口部具有一通孔与容室相通；以及至少一滤膜层，该滤膜层是设于管体内位于进料口 与出口部之间，并将该容室分隔成至少二隔间。前述的滤膜层具有一孔径，该孔径介于500与700纳米之间，较佳的，，该孔径 介于100与200纳米之间，而其上涂布有而其上涂布有选自于下列者所构成的群组的抗 体抗-Stro-I 抗体(Anti-Mro-l antibody)、抗-CD34 抗体(Anti_CD34 antibody)、 抗-CD15 抗体(Anti-CD15 antibody)、抗-CDl 17 抗体(Anti_CD117 antibody)、抗-CD133 抗体(Anti-CD133 antibody)、抗-Flk-I 抗体(Anti-Flk-l antibody)、抗 _gly_A 抗体 (Anti-gly-A antibody)、抗-HLA-DR 抗体(Anti_HLA_DR antibody)以及其等的组合。如此技术领域中所知者，依据Rodriguez、Anne-Marie等人研究指出，所述的脂肪 干细胞表现的细胞表面标记(cell surface marker)为CD44+、CD49b+、CD105+、CD90+、CD13+、 Stro-l\ CD34\ CD15\ CDl Flk-Γ、gly-A\ CD133\ HLA-DR-以及 HLA-I1 。较佳的，本创作是提供一种脂肪干细胞分离装置[0010]前述的滤膜层上亦可涂布有选自于下列者所构成的群组的抗体抗-CD44抗体 (Anti-CD44 antibody)、抗-CD55抗体(Anti_CD55 antibody)、抗-CD105抗体(Anti_CD105 antibody)、抗-CD13 抗体(Anti_CD13 antibody)、抗-CD29 抗体(Anti_CD29 antibody)、 抗-CD73 抗体(Anti-CD73 antibody)、抗-CD9 抗体(Anti_CD9 antibody)、抗-CM4 抗体 (Anti-CD54 antibody)、抗-CD96 抗体(Anti_CD96 antibody)、抗-CD10 抗体(Anti-CDlO antibody)、抗-CD57 抗体(Anti_CD57 antibody)、抗-CD146 抗体(Anti_CD146 antibody) 以及其等的组合。使用时，可让脂肪组织自进料口进入管体内，接而让脂肪组织所含的组织液与血 水部份先由出口部流出，继而放入脂肪分解酵素及缓冲液混合反应，使脂肪组织中的脂肪 分解，而令含有细胞的混合液通过涂布有各种抗体的滤膜层，而带有为抗体所辨识的特定 细胞标记的细胞将会被滤膜层上的抗体所捕捉，而使得未表现前述特定细胞标记的细胞 (包含所欲的脂肪干细胞)，最终自出口部的通孔流出，而达到分离脂肪干细胞的目的，作 为负性筛选(negativescreening)。或者，令含有细胞的混合液通过涂布有各种抗体的滤膜 层，而带有为抗体所辨识的特定细胞标记的细胞将会被滤膜层上的抗体所捕捉，而使得表 现有特定细胞标记的细胞(包含所欲的脂肪干细胞)附着于滤膜层上，之后再以溶液冲刷 已附着于滤膜层上的脂肪干细胞，多重专一抗体可以增加筛选的专一性，但却减少需要脂 肪干细胞的筛选数量，据初步研究显示每毫升脂肪组织经每毫升酵素分解后再透过本装置 筛选，可达每毫升十万个脂肪干细胞。由于前述脂肪干细胞分离装置，具有使用方便且便于制造、成本低廉，因而可抛弃 不重复使用，可避免交叉感染的危险，因而具有简易、安全、有效并经济的优点。
[0013]图1是本创作的--较佳实施例的结构示意图[0014]符号说明[0015](10)管柱(11)管体[0016](111)进料口(112)出口部[0017](113)顶盖(114)隔间[0018](12)滤膜层(20)进料管[0019](30)底盖
具体实施方式
本创作的一种脂肪干细胞分离装置，如图1所示，其包含一管柱(10)，其具有一 管体(U)以及至少一滤膜层(12)，其中管体(11)内形成有一容室，管体(11)的顶端设有 一顶盖(113)；顶盖(113)设有一进料口(111)，该进料口(111)可与一进料管QO)相连 通；而管体(11)的底端形成有一出口部(112)，出口部(11 具有一通孔与容室相通，可供 流体通过，管体(11)的出口部(11 的外壁面上形成有一外螺纹段，可供与一具有内螺纹 的底盖(30)相互螺合而固定，以形成封闭的容室；以及至少一滤膜层(12)，该滤膜层(12) 的周缘是与管体(11)的内壁紧密结合，以令该容室分隔成至少二隔间(114)。前述滤膜层(1 上形成有复数孔隙，可供适当大小的物质通过，并且该滤膜层具有一孔径，该孔径介于500与700纳米(nm)之间；较佳的，介于100与200纳米之间。依据本创作，所述的进料口(111)具有一内管，内管的顶端突伸于顶盖(113)外， 内管的底端突伸于前述管体(11)的容室内，并且内管的顶端形成有一外螺纹，可供套设一 具有一内螺纹的进料管00)；亦或内管的顶端形成有一内螺纹，可供套设一具有外螺纹的 进料管(20)。在本创作的一较佳的实施例中，管柱(10)具有一滤膜层(12)，而该滤膜层(12)上 涂布有选自于下列者所构成的群组的抗体抗-Stro-I抗体、抗-CD34抗体、抗-CD15抗 体、抗-⑶117抗体、抗-⑶133抗体、抗-Flk-I抗体、抗-gly-A抗体、抗-HLA-DR抗体以及
其等的组合。在本创作的一较佳的实施例中，管柱(10)具有一滤膜层(12)，该滤膜层(12)上 涂布有抗-Stro-I抗体、抗-CD34抗体、抗-CD15抗体、抗-CD117抗体、抗-CD133抗体、 抗-Flk-I抗体、抗-gly-A抗体以及抗-HLA-DR抗体。因此，前述不表现该细胞标记的细 胞，亦即 Mro-Γ、CD34-、CD15-、CD117\ Flk-Γ、gly-A—、CD133-、HLA-DIT 的脂肪干细胞得以 通过滤膜层(12)而到达出口部(112)。在本创作的一较佳的实施例中，管柱(10)具有复数滤膜层(12)，各滤膜层(12)上 分别涂布有选自于下列者所构成的群组的抗体抗-Stro-I抗体、抗-CD34抗体、抗-CD15 抗体、抗-⑶117抗体、抗-⑶133抗体、抗-Flk-I抗体、抗-gly-A抗体以及抗-HLA-DR抗体。使用时，可将脂肪组织自进料口(111)注入至管体(11)的容室内，接而让脂肪组 织内含的组织液或血水从出口部(11 流出，继而将前述底盖(30)盖设于管体(11)的出 口部(112)，并将可分解脂肪的酵素及缓冲液注入管体(11)内与脂肪组织形成一混合液， 令脂肪与酵素反应而分解，并将底盖(30)打开，较佳的是使出口部(112)的通孔与一负压 环境相连接，而使混合液通过各滤膜层(1 并依序通过各个隔间(114)，而带有为抗体所 辨识的特定细胞标记的细胞(诸如CD34+的细胞)，会被涂布于滤膜层(1 上的抗体(诸 如抗-CD34抗体)所捕捉，而使得不表现该细胞标记的细胞(诸如CD34-的细胞)得以通 过滤膜层(12)，而到达出口部(112)，进而通过通孔而流出，所得的流出液当中即含有分离 出的脂肪干细胞，依据初步研究显示每毫升脂肪组织经每毫升酵素分解后再透过本装置筛 选，可达每毫升十万个脂肪干细胞。在本创作的一较佳的实施例中，本创作的一种脂肪干细胞分离装置具有四滤膜 层，其中包括一第一滤膜层，其涂布有抗-⑶44抗体、抗-⑶55抗体、抗-⑶105抗体；一第 二滤膜层，其涂布有抗-CD13抗体、抗-CD^抗体、抗-CD73抗体；一第三滤膜层，其涂布有 抗-CD9抗体、抗-CM4抗体、抗-CD96抗体；以及一第四滤膜层，其涂布有抗-CDlO抗体、 抗-⑶57抗体、抗-⑶146抗体。使用时，参照上述，令可分解脂肪的酵素及缓冲液及去除血水的脂肪组织所形 成的混合液于管体(11)内反应，使经反应的混合液通过各滤膜层(12)并依序通过各个 隔间(114)，而带有为抗体所辨识的特定细胞标记的细胞(诸如⑶44+⑶55+⑶105+细胞、 CD13+CD29+CD73+ 细胞、CD9+CD54+CD96+ 细胞以及 CD10+CD57+CD146+ 细胞)，会被涂布于 滤膜层(1 上的抗体所捕捉，而使得表现该等细胞标记的细胞得以附着于滤膜层(12)上， 之后再以溶液冲刷已附着于各滤膜层(1 上的脂肪干细胞，依据初步研究显示每毫升脂肪组织经每毫升酵素分解后再透过本装置筛选，可达每毫升十万个脂肪干细胞。 虽然前述的说明及附图已揭示本创作的较佳实施例，然而必须了解的是任何可 能使用于本创作较佳实施例的修饰、增加和取代，仍不会脱离本创作权利要求所界定的精 神及范围。熟悉本技术人员将可体会本创作可能使用于很多形式、结构和材料。因此，本文 于此所揭示的实施例各个方面，都应被视为用以说明本创作，而非用以限制本创作。
权利要求1.一种脂肪干细胞分离装置，其特征在于，包含一管柱，其具有一管体，管体内形成有 一容室，管体的顶端设有一进料口，管体的底部形成有一出口部，出口部具有一通孔与容室 相通；以及至少一滤膜层，滤膜层的周缘是与管体的内壁紧密结合并设于该进料口与该出 口部之间，该容室分隔成至少二隔间。
2.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该管体的顶端设有一顶 盖，顶盖设有该进料口。
3.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该出口部的一外壁面上 形成有一外螺纹段。
4.根据权利要求2所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该出口部的一外壁面上 形成有一外螺纹段。
5.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该滤膜层具有一孔径，该 孔径介于500与700纳米之间。
6.根据权利要求2所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该滤膜层具有一孔径，该 孔径介于500与700纳米之间。
7.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该滤膜层具有一孔径，该 孔径介于100与200纳米之间。
8.根据权利要求2所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该滤膜层具有一孔径，该 孔径介于100与200纳米之间。
9.根据权利要求3所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该管柱更设有一底盖，该 底盖具有内螺纹，内螺纹与出口部的外螺纹相互螺合而固定。
10.根据权利要求4所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该管柱更设有一底盖， 该底盖具有内螺纹，内螺纹与出口部的外螺纹相互螺合而固定。
11.根据权利要求2所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，该进料口具有一穿设于 顶盖上的内管，该内管的顶端突伸于顶盖外。
12.根据权利要求11所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，更包含一进料管，该进 料管具有一内螺纹，而该内管的顶端形成有一外螺纹，并且通过该外螺纹与进料管的内螺 纹相配合以相连接。
13.根据权利要求11所述的脂肪干细胞分离装置，还包含一进料管，该进料管具有一 外螺纹，而该内管的顶端形成有一内螺纹，并且通过该内螺纹与进料管的外螺纹相配合以 相连接。
专利摘要一种脂肪干细胞分离装置，其包含一管柱，管柱的管体内形成有一容室，管体的顶端设有一进料口，管体的底部形成有一出口部，出口部具有一通孔与容室相通；以及至少一滤膜层，该滤膜层是设于管体内并且涂布有可辨识特定细胞标记的抗体，并将该容室分隔成至少二隔间。前述装置于使用时，可令脂肪分解酵素与脂肪组织由进料口进入容室中进行反应，并且通经各滤膜层而将非脂肪干细胞的细胞去除，使最终自出口部的通孔流出的流出液中含有经分离的脂肪干细胞，前述装置具有容易操作、制作成本低廉、可抛弃，进而避免重复使用而导致交叉感染等优点。
文档编号C12M1/24GK201901672SQ2010201675
公开日2011年7月20日 申请日期2010年3月31日 优先权日2010年3月31日
发明者周遵善 申请人:周遵善