用于在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法

专利名称：：用于在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法
技术领域：
：在一些实施方案中，本公开涉及使用在单子叶植物，双子叶植物，或单子叶植物和双子叶植物二者中可操作的启动子在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法。
背景技术：
：生物技术有望变革从农业到现代医药的一切事物。举例来说，遗传工程改造(geneticallyengineering)植物的方法被探索，以通过更大的干旱抵抗力和昆虫抵抗力，以及提高的产量来提高生产力。此外，作为用于人用药和兽用药(veterinarymedicine)的蛋白质(例如抗体)和其他化合物的生产的潜在的生物工厂(biofactory)，植物正在被仔细检测。然而，对于驱动植物中被关注的基因产物的表达，存在数量有限的启动子。这些启动子的一些仅在一些植物中对于驱动表达有效。其他的启动子在一些组织和/或细胞中对驱动表达有效，但对于其他组织和/或细胞则无效。
发明内容相应地，对于在植物中可操作的启动子的需求已经出现,所述在植物中可操作的启动子包括在单子叶植物，双子叶植物或单子叶植物和双子叶植物二者中可操作的启动子和/或在多种组织和/或细胞中可操作的启动子。在一些实施方案中，本公开涉及使用在单子叶植物，双子叶植物，或单子叶植物和双子叶植物二者中可操作的启动子在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法。举例来说，组合物可以包括核酸(例如，分离的和/或纯化的核酸)，所述核酸包括表达控制序列(例如启动子)。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括与选自(a)SEQIDN0:1的核苷酸1-1786，(b)SEQIDNO1的核苷酸1450-1786，(c)SEQIDNO:1，(d)SEQIDNO17,(e)SEQIDNO18,(f)SEQIDNO:26，(g)SEQIDNO:27，(h)SEQIDNO:32和/或(i)SEQIDNO:33的序列至少约85%—致的核酸序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。根据一些实施方案，表达控制序列可以在至少两种单子叶植物和至少两种双子叶植物中具有启动子活性。在一些实施方案中，核酸可以包括表达控制序列(例如SEQIDNO:1)和外源核酸，其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中可操作来驱动外源核酸的转录。根据一些实施方案，根据权利要求3的分离的核酸，其中所述外源核酸包括转基因。分离的核酸可以包括外源核酸，Ca)当被表达或被转录时，所述外源核酸改变所述植物细胞中的碳代谢和/或(b)在一些实施方案中，所述外源核酸编码有效抵御至少一种茎钻蛀昆虫的杀虫剂。根据一些实施方案,本公开涉及表达载体。举例来说，在5’至3’方向上,表达载体可以包括，甘蔗杆状病毒(SCBV)启动子(例如，(a)SEQIDNO1的核苷酸1-1786，(b)SEQIDNO:1的核苷酸1450-1786，(c)SEQIDNO1,(d)SEQIDNO17,(e)SEQIDNO:18，(f)SEQIDNO26,(g)SEQIDNO27,(h)SEQIDNO:32，和/或(i)SEQIDNO:33);外源核酸(例如转基因);以及3’终止序列，其中所述SCBV启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。根据一些实施方案，表达载体可以位于细胞中(例如细菌细胞、酵母细胞、植物细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞)。根据一些实施方案，表达载体可以包括-3至+4位置(例如，在SEQIDNO:18的核苷酸1819-1825处)为AAAATGG的核苷酸序列。在一些实施方案中，表达载体可以包括具有从约I至约200核苷酸的长度的接头(例如，在所述表达控制序列和所述外源核酸之间)。在一些实施方案中，本公开还涉及包括表达载体的细胞(例如细菌细胞、酵母细胞、植物细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞)，所述表达载体包括表达控制序列(例如SCBV启动子)。举例来说，细胞可以包括表达载体，所述表达载体具有SCBV启动子(例如，具有与SEQIDNO:1至少约85%—致的核苷酸序列);外源核酸；以及3’终止序列，其中所述SCBV启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。在一些实施方案中，外源核酸可以包括转基因。举例来说，(a)当被表达或被转录时，外源核酸可以改变所述植物细胞中的碳代谢和/或(b)外源核酸可以编码有效抵御至少一种茎钻蛀昆虫的杀虫剂。在一些实施方案中，细胞可以是植物细胞(例如，位于植物中)。细胞可以包括选自单子叶植物细胞和双子叶植物细胞的植物细胞(或植物)。单子叶植物可以选自甘鹿、芒草、芒草与甘鹿杂种、柳枝稷、燕麦、小麦、大麦、玉米、稻米、香蕉、丝兰、洋葱、芦笋、高粱及其杂种。双子叶植物可以选自咖啡、番茄、胡椒、烟草、利马豆(limabean)、拟南芥、橡胶、橙、葡萄柚、马铃薯、南瓜(squash)、豌豆以及甜菜。在一些实施方案中，植物可以包括表达载体，所述表达载体具有启动子(例如，具有与SEQIDNO:1至少约85%—致的核苷酸序列)，可操作地连接于所述启动子的外源核酸，以及3’终止序列，其中所述启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。在一些实施方案中，本公开涉及在植物中组成型地表达外源核酸的方法。举例来说，方法可以包括用植物细胞的细胞质(cytosol)接触表达盒或表达载体,其中所述表达盒或表达载体包括(i)所述外源核酸，(ii)可操作来驱动所述外源核酸的表达的表达控制序列(例如，具有与SEQIDNO1至少约85%—致的核苷酸序列的SCBV启动子)，以及(iii)可操作地连接于所述外源核酸的3’终止序列，并且其中所述植物选自由单子叶植物和双子叶植物组成的组。根据一些实施方案，接触的步骤可以包括用包括所述表达盒的颗粒以生物弹射的方式轰击(biolisticallybombard)所述细胞和/或将所述细胞与包括所述表达盒的土壤杆菌属(Agrobacterium)细胞共培养。在一些实施方案中，本公开涉及在植物中介导组成型表达核酸的方法。举例来说，方法可以包括用表达核酸转化植物(例如，植物、植物细胞、叶盘(leafdisc)、胚性愈伤组织(embryoniccalIus)),所述表达核酸(例如,表达载体)包括表达控制序列(例如，具有与SEQIDNO1至少约85%—致的核苷酸序列的启动子)，外源核酸以及3’终止序列，其中所述植物选自由单子叶植物和双子叶植物组成的组。根据一些实施方案，转化的步骤可以包括用包括所述表达盒的颗粒以生物弹射的方式轰击所述植物和/或将所述植物与包括所述表达盒的土壤杆菌属细胞共培养。在一些实施方案中，方法可以包括从转化的细胞(例如，胚性愈伤组织)再生植物，以形成所述转化的细胞的一个或更多个后代(progeny)。根据一些实施方案，方法可以包括培养和/或培育转化的细胞的后代。根据一些实施方案，本公开涉及包括表达控制序列的分离的核酸(例如分离的和/或纯化的核酸)。举例来说，表达控制序列可以包括SEQIDNO:33的核苷酸632-716的序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。在一些实施方案中，表达控制序列可以具有足够的长度(例如，多于约O.3kb，多于约O.4kb,多于约O.5kb,多于约O.6kb,多于约O.7kb,和/或多于约O.8kb),以使在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中作为表达控制序列是可操作的。举例来说，表达控制序列可以是至少约O.75kb。在一些实施方案中，核酸(例如，分离的和/或纯化的核酸)可以包括表达控制序列，所述表达控制序列具有选自由SEQIDNO30,SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合组成的组的序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。举例来说，核酸可以包括(例如，在5’至3’方向上)表达控制序列，从约I至约75个核苷酸长度的接头，以及起始密码子，所述表达控制序列包括SEQIDN0:30序列和SEQIDNO:31序列，所述SEQIDN0:30序列和SEQIDNO:31序列由约630个核苷酸的间隔区(spacer)分隔,其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。在一些实施方案中，接头可以具有与SEQIDNO32的核苷酸778-805的序列至少约85%，至少约90%，至少约95%，至少约98%，和/或至少约99%的一致性。根据一些实施方案，间隔区可以具有与SEQIDNO32的核苷酸96-726的序列至少约85%，至少约90%，至少约95%，至少约98%，和/或至少约99%的一致性。表达控制序列可以在其5’端包括具有与SEQIDNO:32的核苷酸1_44的序列至少约85%，至少约90%，至少约95%，至少约98%，和/或至少约99%的一致性的序列。在一些实施方案中，本公开还涉及用于表达期望量的关注的基因产物(例如蛋白质)的表达体系。举例来说，表达体系可以包括具有两个或更多个表达控制序列的核酸、表达盒、细胞和/或植物，所述表达控制序列的每个可操作地连接于编码关注的基因产物(例如，蛋白质)的编码序列(例如，转基因)。根据一些实施方案，表达体系可以包括具有两个或更多个表达盒的植物，所述表达盒的每个包括表达控制序列(例如，启动子)，编码关注的基因产物(例如，蛋白质)的编码序列，和/或一个或更多个终止子，其中每个表达控制序列(例如，启动子)与其他一个或多个表达控制序列不同，和/或编码关注的基因产物(例如，蛋白质)的所述编码序列的每个拷贝与编码序列的其他一个或多个拷贝基本上一致和/或一致。表达控制序列(例如，启动子)可以包括在植物中可操作的任意启动子，举例来说，所述启动子包括玉米泛素I(ubiquitinl)启动子(具有或不具有热激元件(heatshockelement,hse))，甘蔗富含脯氨酸的蛋白质的启动子，甘蔗延伸因子Ια启动子，甘蔗茉莉酸酯诱导启动子，甘蔗杆状病毒启动子，甘蔗O-转甲基酶启动子，和/或其组合。表达体系可以包括具有2、3、4、5或更多个启动子的植物，所述启动子的每个独立地选自由玉米泛素I启动子(具有或不具有热激元件)，甘蔗富含脯氨酸的蛋白质启动子，甘蔗延伸因子Ia启动子，甘鹿茉莉酸酯诱导启动子，甘鹿杆状病毒启动子，甘鹿O-转甲基酶启动子,和/或其组合组成的组，并且所述启动子的每个可操作地连接于(例如，反式)编码关注的基因产物(例如，蛋白质)的编码序列(例如，转基因)，其中编码关注的基因产物(例如，蛋白质)的编码序列的每个拷贝与其他一个或多个拷贝基本上一致和/或一致。在一些实施方案中，关注的编码序列可以包括在本公开中弓I用的任意编码序列。附图简要说明本公开的一些实施方案可以通过部分地参考本公开和所附附图而被理解，其中图1图示说明用于根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的载体；图2图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的载体；图3图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的GUS表达，与在35S启动子的控制下的GUS表达相比较；图4图示说明示出根据本公开的具体实施例的实施方案的转基因植物叶中的GUS活性的柱状图；图5图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的载体；图6A图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗幼叶中的⑶S表达；图6B图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗幼叶(卷(roll))中的⑶S表达；图6C图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗茎中的⑶S表达；图6D图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甜高粱(sweetsorghum)幼叶中的GUS表达；图6E图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的烟草叶中的⑶S表达；图6F图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的利马种子中的⑶S表达；图6G图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗幼叶中的GFP表达；图6Η图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗幼叶(卷)中的GFP表达；图61图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甘蔗茎中的GFP表达；图6J图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的甜高粱幼叶中的GFP表达；图6Κ图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的烟草叶中的GFP表达；以及图6L图示说明在根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的控制下的利马豆种子中的GFP表达。图7Α图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗茎杆(stalk)中的⑶S表达；图7B图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗叶中的⑶S表达；图7C图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗根中的⑶S表达；图8A图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗茎杆中的⑶S表达；图SB图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗茎杆中的⑶S表达；图SC图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗茎杆中的⑶S表达；图8D图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗茎杆中的⑶S表达；图9A图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的载体(SEQIDNO19)；图9B图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体B)的载体(SEQIDNO20)；图9C图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体C)的载体(SEQIDNO21)；图9D图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体D)的载体(SEQIDNO22)；图9E图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体E)的载体(SEQIDNO23)；图9F图示说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体F)的载体(SEQIDNO24)；图1OA图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子；图1OB图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体B)；图1OC图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体C)；图1OD图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体D)；图1OE图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体E)；图1OF图示说明根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体F)；图1lA图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒转化的甘蔗叶中的EYFP表达；图1lB图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒(包括缺失B)转化的甘蔗叶中的EYFP表达；图1lC图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒(包括缺失C)转化的甘蔗叶中的EYFP表达；图1lD图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒(包括缺失D)转化的甘蔗叶中的EYFP表达；图1lE图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒(包括缺失E)转化的甘蔗叶中的EYFP表达；以及图1lF图示说明用根据本公开的实施例的实施方案的表达盒(包括缺失F)转化的甘蔗叶中的EYFP表达。序列表简要说明本公开的一些实施方案可以通过部分地参考本公开和所附序列表而被理解，其中SEQIDNO:1说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子；SEQIDNO:2说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗杆状病毒启动子，⑶S编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:3说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘鹿杆状病毒启动子，增强的YFP编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:4说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括35S启动子，⑶S编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:5说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括35S启动子，增强的YFP编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:6说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括E35S启动子，增强的YFP编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:7说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(无hse(热激元件)的mUbil)，⑶S编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:8说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(无hse的mUbil)，增强的YFP编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:9说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子，GUS编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:10说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括泛素启动子，增强的YFP编码序列，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO11说明根据本公开的具体实施例的实施方案的P-2PCR引物；SEQIDNO12说明根据本公开的具体实施例的实施方案的P_W3FPCR引物；SEQIDNO13说明根据本公开的具体实施例的实施方案的P-W4FPCR引物；SEQIDNO14说明根据本公开的具体实施例的实施方案的P-W1RPCR引物；SEQIDNO:15说明根据本公开的具体实施例的实施方案的SCBV/Prom/FPCR引物；SEQIDNO16说明根据本公开的具体实施例的实施方案的SCBV/Prom/RPCR引物；SEQIDNO:17说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘蔗杆状病毒启动子;SEQIDNO:18说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘蔗杆状病毒启动子;SEQIDNO:19说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子的载体(野生型PSK-SCBV21-EYFP-Nos)；SEQIDNO:20说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体B)的载体；SEQIDNO:21说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体C)的载体；SEQIDNO:22说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体D)的载体；SEQIDNO:23说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体E)的载体；SEQIDNO:24说明具有根据本公开的具体实施例的实施方案的启动子(缺失突变体F)的载体；SEQIDNO:25说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子(缺失B)；SEQIDNO:26说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子(缺失C)；SEQIDNO27说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子(缺失D)；SEQIDNO:28说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子(缺失E)；SEQIDNO:29说明根据本公开的具体实施例的实施方案的甘鹿杆状病毒启动子(缺失F)；SEQIDNO30说明根据本公开的具体实施例的实施方案的转录起始位点(TSS1);`SEQIDNO31说明根据本公开的具体实施例的实施方案的转录起始位点(TSS2);SEQIDNO:32说明根据本公开的具体实施例的实施方案的具有TSSl和TSS2的甘鹿杆状病毒启动子；SEQIDNO33说明根据本公开的具体实施例的实施方案的具有TSS2的甘蔗杆状病毒启动子；SEQIDNO34说明根据本公开的具体实施例的实施方案的正向PCR引物Fl；SEQIDNO35说明根据本公开的具体实施例的实施方案的正向PCR引物F2；SEQIDNO36说明根据本公开的具体实施例的实施方案的反向PCR引物Rl；SEQIDNO37说明根据本公开的具体实施例的实施方案的反向PCR引物R2；SEQIDNO:38说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗杆状病毒启动子，牛溶菌酶编码序列，35S终止子，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:39说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(不具有热激元件)，牛溶菌酶编码序列，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:40说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(不具有热激元件)，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:41说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(不具有热激元件)，高粱花叶病毒蛋白质的5’非翻译区，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:42说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括玉米泛素启动子(不具有热激元件)，牛溶菌酶编码序列，35S终止子，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:43说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗富含脯氨酸的启动子(不具有5’UTR(非翻译区))，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:44说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗富含脯氨酸的启动子(不具有5’UTR),高粱花叶病毒蛋白质的5’非翻译区，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:45说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗富含脯氨酸的启动子(不具有5’UTR)，牛溶菌酶编码序列，35S终止子，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:46说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗延伸因子Iα启动子，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒;SEQIDNO:47说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘蔗延伸因子Iα启动子，牛溶菌酶编码序列，35S终止子，以及NOS终止子的表达盒；SEQIDNO:48说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括茉莉酸酯应答的(responsive)启动子,牛溶菌酶编码序列，以及35S终止子的表达盒；SEQIDNO:49说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括茉莉酸酯应答的启动子，牛溶菌酶编码序列，高粱花叶病毒蛋白质的3’非翻译区，以及35S终止子的表达盒；以及SEQIDNO:50说明根据本公开的具体实施例的实施方案的包括甘鹿杆状病毒启动子，牛溶菌酶编码序列，35S终止子，以及NOS终止子的表达盒。具体实施例方式在一些实施方案中，本公开涉及使用在单子叶植物，双子叶植物，或单子叶植物和双子叶植物二者中可操作的启动子在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法。举例来说，本公开涉及包括甘蔗杆状病毒(SCBV)启动子的表达控制序列(例如，启动子)、表达盒、表达载体、微生物和/或植物。根据一些实施方案，表达控制序列可以(a)在选自根、叶、茎、花、种子、果实和/或块茎(tuber)的器官中组成型地有活性或条件性地有活性，和/或(b)在选自表皮、周皮、薄壁组织、厚角组织、厚壁组织、木质部、韧皮部和/或分泌结构的组织中有活性。在一些实施方案中，可以在方法、组合物、体系和/或生物体中包括表达控制序列，以在植物中(例如，在甘蔗中)改变碳代谢(例如，在蔗糖积累组织中)和/或表达蛋白质(例如，杀虫蛋白)。根据一些实施方案，可以在方法、组合物、体系和/或生物体中包括表达控制序列以改进害虫耐受度和/或疾病耐受度和/或疾病抵抗力(例如，水稻)。甘鹿杆状病毒(Sugarcanebacilliformvirus,SCBV)属于花挪菜病毒科(Caulimoviridae)Badnavirus属。那些属于Badnavirus属的物种的病毒体具有无包膜(non-enveloped)的杆状颗粒。血清学上，SCBV与香蕉条斑病毒(Bananastreakvirus,BSV)相关联。SCBV的基因组由7600bp大小的单一的双链DNA组成，所述DNA编码三个可读框(openreadingframe),所述可读框的转录由存在于0RF3的3’部分和接近ORFl的5’端之间的单一启动子介导。SCBVMor分离株的启动子可以在单子叶植物和双子叶植物二者中是有活性的。来自其他Badnavirus属(例如水稻东格鲁病杆状病毒(Ricetungrobacilliformvirus),鸭妬草属黄花叶病毒(Commelinayellowmosaicvirus),香蓮条斑病毒和芋杆状病毒(Tarobacilliformvirus))的启动子已经进行外源基因表达测试。在一些实施方案中，来自这些病毒的启动子对于在单子叶植物中的转基因表达可以是有用的，因为上述Badnavirus属感染单子叶植物。尽管看起来来自RTBV、CoYMV和TaBV的启动子典型地在维管组织中是有活性的，来自SCBV和BSV的启动子介导外源基因的组成型表达。SCBV与BSV紧密关联并且可以在不同SCBV分离株之间表现出相当大的序列变异性。在由SCBV感染的高贵鹿(Sacchaumofficinarum)克隆的SCBV启动子区中可以存在相似的序列变异性。尽管由S.officinarumIrengMaleng克隆的PCR衍生的(PCR-derived)启动子序列仅显示出与另一SCBVIrengMaleng分离株(SCBVIM-12)的启动子序列53%的序列同源性，该PCR衍生的启动子显示出与BSV启动子区74%的序列同源性。在位于德克萨斯里奥格兰德谷中部的甘蔗田中的SCBV发病率的初步筛选证实了在该区的甘蔗田中SCBV是普遍的。来自SCBV阳性的商业化的甘蔗杂种CP72-1210的SCBV启动子已经被分离、纯化和克隆。其启动子活性已经在各种单子叶植物和双子叶植物中以及转基因甘蔗植物中被证实。表汰控制序列在一些实施方案中，表达控制序列可以包括一个或更多个启动子，一个或更多个操纵基因，一个或更多个增强子，一个或更多个核糖体结合位点，和/或其组合。举例来说，表达控制序列可以包括核酸，所述核酸具有(a)在单子叶植物、双子叶植物、或单子叶植物和双子叶植物二者中的启动子活性，以及(b)与SEQIDNO1多于约70%一致、与SEQIDNO1多于约75%—致、与SEQIDNO1多于约80%—致、与SEQIDNO1多于约81%—致、与SEQIDNO1多于约82%—致、与SEQIDNO1多于约83%—致、与SEQIDNO:1多于约84%—致、与SEQIDNO1多于约85%—致、与SEQIDNO1多于约86%—致、与SEQIDNO1多于约87%—致、与SEQIDNO1多于约88%—致、与SEQIDNO1多于约89%一致、与SEQIDNO:1多于约90%—致、与SEQIDNO:1多于约92%—致、与SEQIDNO:1多于约94%—致、与SEQIDNO1多于约96%—致、与SEQIDNO1多于约98%—致，和/或与SEQIDNO:1多于约99%—致的核苷酸序列。根据一些实施方案，与SEQIDNO1在全长上不是100%—致的序列可以具有在目标核酸的长度上分散(例如，均匀地，随意地(haphazardly))的变异点和/或变异区。举例来说，表达控制序列可以包括与SEQIDNO1100%一致的序列的一个或更多个区(例如，在TATA盒、CCAAT盒，和/或TSS模体(motif)中或与之接近)以及低于100%—致的长度和/或序列的一个或更多个区。举例来说，表达控制序列可以包括与SEQIDNO:1的核苷酸1-1450约95%—致的区(在长度和/或序列上)以及与SEQIDNO1的核苷酸1450-1786100%—致的区。根据一些实施方案，表达控制序列可以与(a)SEQIDNO1的核苷酸1-1786，(b)SEQIDNO17,(c)SEQIDNO18,(d)SEQIDNO26,(e)SEQIDNO27,(f)SEQIDNO:32，和/或(g)SEQIDNO33共享(share)相似性(例如，如在上文公开的从多于约70%至100%的一致性)。举例来说，表达控制序列可以与SEQIDNO26,SEQIDNO:27、SEQIDNO:32和/或SEQIDNO:33多于约85%—致；与SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:32和/或SEQIDNO33多于约95%—致；和/或与SEQIDNO:2、SEQIDNO:27、SEQIDNO:32和/或SEQIDNO33多于约98%—致。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括TSSl(SEQIDN0:30),TSS2(SEQIDNO:31)或TSSl和TSS2二者。举例来说，表达控制序列可以至少约O.76kb长，其中，TSSl的5’端(如果存在)在-760位置的100个核苷酸之内，并且TSS2的5’端(如果存在)在-80位置的100个核苷酸之内。举例来说，表达控制序列可以至少约O.7kb长，其中，TSSl的5’端(如果存在)在表达控制序列的5’端的100个核苷酸之内，并且TSS2的5’端(如果存在)在-80位置的100个核苷酸之内。在一些实施方案中，TSS2(如果存在)可以被这样放置所述TSS2不延伸越过起始密码子。在一些实施方案中，TSSl可以是TSS2的5’。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括由间隔区(例如，多于约500个核苷酸、多于约550个核苷酸、多于约600个核苷酸和/或多于约650个核苷酸)分隔的TSSl和TSS2，从约I至约75个核苷酸长的接头，和/或起始密码子。举例来说，间隔区可以具有与SEQIDNO32的核苷酸96-726的序列多于约85%的一致性、多于约90%的一致性、多于约95%的一致性、和/或多于约98%的一致性。举例来说，接头可以具有与SEQIDN0:32的核苷酸778-805的序列多于约85%的一致性、多于约90%的一致性、多于约95%的一致性、和/或多于约98%的一致性。表达控制序列可以还包括(例如，TSSl的5’)具有与SEQIDNO:32的核苷酸1_44的序列多于约85%—致性的序列。根据一些实施方案，表达控制序列可以包括SEQIDNO:1的片段。举例来说，表达控制序列可以包括为转录起始位点上游(例如，核苷酸1787的上游)的SEQIDNO1的部分。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括具有与SEQIDNO:1的核苷酸1-1786至少70%一致性的核酸。根据一些实施方案，表达控制序列可以包括在病毒中(例如，植物病毒)发现的核酸序列。举例来说，根据一些实施方案，表达控制序列可以包括SCBV启动子、水稻东格鲁病杆状病毒启动子、鸭妬草属黄花叶病毒启动子、香蕉条斑病毒启动子、芋杆状病毒启动子和/或其组合。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括具有SEQIDNO:1的核苷酸序列的核酸。根据一些实施方案，与35S启动子相比，表达控制序列可以可操作来驱动细胞中的核酸序列(例如，编码序列)的更高表达(例如，从约5%更高至约50%更高、从约50%更高至约500%更高)。举例来说，表达的度量标准可以包括出现率和/或基因产物的积累(例如，RNA和/或蛋白质)和/或自一个或更多个时间点起(例如，起始点和/或发展阶段后的经过时间)的基因产物的总积累量。在一些实施方案中，基因产物的比较试验(comparativeassay)可以是定性的、半定量的和/或定量的。比较试验可以间接和/或直接评定基因产物的存在和/或量。在一些实施方案中，表达控制序列可以对一种或更多种刺激物(例如，一种或更多种小分子、一种或更多种植物防御诱导剂、机械损伤、温度、压力)敏感。举例来说，表达控制序列的活性可以在感染病毒(例如，杆状病毒)时被增强或抑制。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括光应答元件、铜应答元件、水杨酸应答元件、植物生长素应答元件、硫应答元件和/或脱水应答元件。模体的识别可以通过可获得的模体预测软件(例如日本国立农业科学研究所的PLACE数据库)和/或实验数据获知。根据一些实施方案，本公开涉及一个或更多个表达控制序列，所述表达控制序列像SEQIDNO:1的核苷酸-1816至-1的核苷酸序列，和/或所述表达控制序列可操作来在至少一种单子叶植物和/或至少一种双子叶植物中介导表达。举例来说，表达控制序列可以包括与SEQIDNO:1在一个或更多个位置处不同的核酸序列。在一些实施方案中，与SEQIDNO1不同的表达控制序列的实施例可以包括来自一种或更多种杆状病毒分离株的启动子。根据一些实施方案，在严格条件下，表达控制序列可以与具有SEQIDN0:1的核苷酸序列的核酸杂交。举例来说，严格条件可以包括(a)4XSSC，65°C，接下来O.1XSSC,65°C，60分钟，和/或(b)50%甲酰胺、4XSSC，65°C。在一些实施方案中，表达控制序列可以包括具有SEQIDNO:1的序列的核酸和在至少一种单子叶植物和/或至少一种双子叶植物中具有介导表达能力的核酸的缺失片段(deletionfragment)。得益于本公开的本领域普通技术人员可以制备具有SEQIDNO1的序列的核酸的一个或更多个缺失片段。可以通过使用表达控制序列的启动子或元件作为查询序列，使用GappedBLAST算法(Altschul等，1997年，核酸研究(Nucl.AcidsRes.)25:3389-3402)(BL0SUM62矩阵，gap成本(cost)为11,存留(persistence)成本每个残基为I并且期望值(Evalue)为10)进行数据库搜索来识别具有像SEQIDNO:1的序列的表达控制序列。根据一些实施方案，可以通过任何可利用的方法来评估序列一致性。举例来说，可以在FASTA应用程序套件中(Pearson和Lipman,1988年，美国科学院院刊(Proc.Nat.Acad.Sc1.)85:2444-24448；Pearson,1990年，酶学方法(MethodsinEnzymology)183:63-98)用ALIGN(全球比对)或LALIGN(本地同源性比对)(BL0SUM50矩阵并且gap罚分为_16、_4)来比较两个序列。可以根据ClustalW(Larkin等，2007年，生物信息学(Bioinformatics)23(21):2947-2948),BLAST、FASTA或相似的算法来评估序列相似性。表汰盒和载体在一些实施方案中,本公开涉及表达载体和/或表达盒,所述表达载体和/或表达盒用于在细胞中表达核酸序列(例如，编码序列)并包括表达控制序列，并且所述核酸序列可操作地连接于所述表达控制序列。在一些实施方案中，盒可以包括能够表达特定的编码序列的核苷酸序列，所述特定的编码序列被插入以便成为可操作地连接于在所述核苷酸序列中存在的一个或更多个表达控制序列。因此，举例来说，根据一些实施方案，表达盒可以包括被期望在植物种子中表达的异源编码序列。在一些实施方案中，本公开涉及表达载体，举例来说，所述表达载体可以包括具有表达控制序列和可操作地连接于所述表达控制序列的编码序列的核酸。在允许编码序列表达(例如，转录)的条件下，表达载体可以与细胞(例如，植物细胞)接触。根据一些实施方案，在允许编码序列在由植物细胞衍生的一个细胞和/或多个细胞中表达的条件下，表达控制序列可以与植物细胞(例如，胚细胞、干细胞、愈伤组织细胞)接触。在一些实施方案中，在允许表达载体的至少一部分在细胞的后代中遗传的条件下，表达载体可以与细胞(例如，植物细胞)接触。表达载体的实施例可以包括(并非限制)在图1、图2、图5和图9中示出的载体。根据一些实施方案，表达载体可以包括一个或更多个筛选标记(selectablemarker)。举例来说，当载体在细菌宿主、酵母宿主和/或植物宿主中时，表达载体可以包括用于筛选的标记(markerforselection)。根据一些实施方案，本公开涉及表达盒，举例来说，所述表达盒可以包括具有表达控制序列和可操作地连接于所述表达控制序列的编码序列的核酸。表达盒可以被包括在表达载体中。在一些实施方案中，编码序列可以包括在至少一种植物细胞中可表达的任何编码序列。举例来说，编码序列可以包括人类的序列(例如，抗体序列)，非人类动物的序列，植物的序列，酵母的序列，细菌的序列，病毒的序列(例如，植物病毒，动物病毒和/或疫苗序列)，人造序列，其反义(antisense)序列，其片段，其变异体和/或其组合。根据一些实施方案，编码序列可以包括糖运输基因和/或糖积累基因。糖运输基因的实施例可以包括(并非限制)二糖转运体(例如，蔗糖转运体)和/或单糖转运体。在一些实施方案中，编码序列可以包括编码具有杀虫活性、抗菌活性和/或抗病毒活性的一种或更多种基因产物的序列。可以具有杀虫活性、抗菌活性和/或抗病毒活性的基因产物的实施例可以包括(并非限制)抗生物素蛋白、植物杀虫蛋白质(例如，Vip3A)、来自苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)的杀虫结晶蛋白质(例如，CryUCryIAb>Cry2>Cry9)、豌豆蛋白(例如PAlb)、hirsutellinA、凝集素(例如，smowdroplily凝集素、大蒜凝集素、洋葱凝集素)、淀粉酶抑制剂(例如，ct淀粉酶抑制剂)、arcelins(例如,来自豆类的arcelins)、蛋白酶抑制齐U、溶菌酶(例如，牛溶菌酶、人溶菌酶、软体动物溶菌酶)、防御素、壳多糖酶、β_1，3-葡聚糖酶、其变异体，和/或其组合。根据一些实施方案，编码序列可以包括用于形成和/或修饰聚合物的酶。用于形成和/或修饰聚合物的酶的实施例可以包括(并非限制)聚羟基脂肪酸酯合酶、4-羟基丁酸酰基-CoA转移酶、其变异体和/或其组合。在一些实施方案中，编码序列可以包括编码水解纤维素的一种或更多种酶的序列。水解纤维素的酶的实施例包括(并非限制)纤维素酶、内切葡聚糖酶(例如，内切0_1，4葡聚糖酶)、葡糖苷酶(例如β葡糖苷酶)，水解酶(例如β-1,4-葡聚糖纤维二糖水解酶)、外切纤维素酶(exocellulases))、其变异体和/或其组合。在一些实施方案中，编码序列可以包括编码形成和/或修饰糖(例如，蔗糖、海藻糖、山梨糖醇、果聚糖、果糖、塔格糖、三氯蔗糖)的一种或更多种酶的序列。形成和/或修饰糖的酶的实施例可以包括(并非限制)海藻糖-6-磷酸盐合酶(TPS)和海藻糖-6-磷酸盐磷酸酶(TPP)。根据一些实施方案，编码序列可以包括编码用于形成或修饰甜菜碱、聚胺、脯氨酸、海藻糖、其变异体、和/或其组合的酶的序列。在一些实施方案中，编码序列可以包括起始密码子、内含子、和/或翻译终止序列。根据一些实施方案，编码序列可以包括一种或更多种天然或人造编码序列(例如，编码单一蛋白质或嵌合体(chimera))。根据一些实施方案，表达盒可以可选地包括终止序列。在一些实施方案中，表达控制序列被用来构建表达盒，在5’至3’方向上,所述表达盒包括(a)表达控制序列(例如，SCBV启动子)，(b)异源基因或编码序列，或者在所述表达控制序列的控制下与原生植物基因互补的序列，和/或(C)3’终止序列(例如，包括多聚腺苷化位点的终止序列)。在一些实施方案中，表达盒的实施例可以包括SEQIDN0:2、SEQIDNO3,SEQIDNO:19的核苷酸710-3538、SEQIDN0:21的核苷酸674-2472、SEQIDNO:22的核苷酸674-2377、SEQIDNO:38,SEQIDNO:50和/或与其具有至少约98%和/或至少约99%—致性的序列。表达盒可以被包括在各种各样的自主复制载体中以便构建表达载体。举例来说，可以通过将表达控制序列连接到要被表达的序列(例如，编码序列)来构建表达盒。一些用于构建表达盒的技术对于本领域技术人员来说是公知的。举例来说，对于连接DNA片段，各种各样的策略是可利用的，所述策略的选择取决于DNA片段末端的性质。包含目标启动子TATA盒的限制和/或缺失片段可以在正向上被连接于无启动子的异源基因或编码序列，例如GUS的编码序列。如得益于本公开的本领域普通技术人员可以领会的，表达控制序列和/或其部分可以通过其他手段被提供，例如，化学合成或酶促合成。根据一些实施方案，在5’至3’方向上，核酸可以包括表达控制序列、接头(可选)以及编码序列。在一些实施方案中，接头可以是从约I个核苷酸至约200个核苷酸的长度和/或可以包括一个或更多个限制性位点。可操作地连接于表达控制序列的核酸序列(例如，编码序列)的表达水平可以被接头的长度和/或序列，和/或编码序列的5’序列影响。举例来说，表达水平可以被从约-4位置至约+4位置的序列影响。在一些实施方案中，在5’至3’方向上，核酸可以包括表达控制序列、接头以及编码序列，其中-4至+4位置的序列包括选自表I不出的序列的序列。根据一些实施方案，在5’至3’方向上,核酸可以包括表达控制序列和编码序列，其中-4至+4位置的序列包括选自表I示出的序列的序列。在一些实施方案中，与其他-3至-1序列相比，为AAA的-3至-1序列可以与较高(例如，最高)的表达水平相关联。与其他+1至+4序列(例如，ATGC、ATGA、ATGT)相比，为ATGG的+1至+4序列可以与较闻(例如，最闻)的表达水平相关联。表1.可选的衔接点(Jun`ction)序列权利要求1.一种分离的核酸，所述核酸包括表达控制序列，所述表达控制序列具有选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:1、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO26,SEQIDNO27,SEQIDNO30,SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO:33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。2.根据权利要求1的分离的核酸，其中所述表达控制序列在至少两种单子叶植物和至少两种双子叶植物中具有启动子活性。3.一种分离的核酸，所述分离的核酸包括(a)表达控制序列，所述表达控制序列具有选自由SEQIDNOUSEQIDNOUSEQIDNO17,SEQIDNO18,SEQIDNO26,SEQIDNO:27、SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列jP(b)外源核酸，其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中可操作来驱动外源核酸的转录。4.根据权利要求3所述的分离的核酸，其中所述外源核酸包括转基因。5.根据权利要求3所述的分离的核酸，其中当被表达或被转录时，所述外源核酸改变所述植物细胞中的碳代谢。6.根据权利要求3所述的分离的核酸，其中所述外源核酸编码有效抵御至少一种茎钻蛀昆虫的杀虫剂。7.一种表达载体，在5’至3’方向上，所述表达载体包括具有SEQIDNO1的核苷酸序列的甘蔗杆状病毒(SCBV)启动子；外源核酸；以及3’终止序列，其中所述SCBV启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。8.根据权利要求7所述的表达载体，其中所述外源核酸包括转基因。9.根据权利要求7所述的表达载体，其中所述表达载体位于细菌细胞中。10.根据权利要求7所述的表达载体，其中所述表达载体位于植物细胞中。11.根据权利要求7所述的表达载体，其中-3至+4位置的核苷酸序列是AAAATGG。12.根据权利要求7所述的表达载体，还包括表达控制序列的3’、所述外源核酸的5’接头，并且具有从约I至约200核苷酸的长度。13.—种包括表达载体的细菌细胞，所述表达载体具有SCBV启动子，所述SCBV启动子具有选自由SEQIDNO:1、SEQIDNOUSEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列；外源核酸；以及3’终止序列，其中所述SCBV启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。14.一种包括表达载体的植物细胞,所述表达载体具有启动子，所述启动子具有选自由SEQIDNOUSEQIDNOUSEQIDNO17,SEQIDNO18,SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列；可操作地连接于所述启动子的外源核酸；以及3’终止序列，其中所述启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。15.根据权利要求14所述的植物细胞，其中所述外源核酸包括转基因。16.根据权利要求14所述的植物细胞，其中当被表达或被转录时，所述外源核酸改变所述植物细胞中的碳代谢。17.根据权利要求14所述的植物细胞，其中所述外源核酸编码有效抵御至少一种茎钻蛀昆虫的杀虫剂。18.根据权利要求14所述的植物细胞，其中所述植物细胞位于植物中。19.根据权利要求18所述的植物细胞，其中所述植物是单子叶植物。20.根据权利要求18所述的植物细胞，其中所述植物选自由甘蔗、芒草、芒草与甘蔗杂种、柳枝稷、燕麦、小麦、大麦、玉米、稻米、香蕉、丝兰、洋葱、芦笋、高粱及其杂种组成的组。21.根据权利要求18所述的植物细胞，其中所述植物是双子叶植物。22.根据权利要求18所述的植物细胞，其中所述植物选自由咖啡、番茄、胡椒、烟草、利马豆、拟南芥、橡胶、橙、葡萄柚、马铃薯、葡萄柚、马铃薯、南瓜、豌豆以及甜菜组成的组。23.一种包括表达载体的植物，所述表达载体具有启动子，所述启动子具有选自由SEQIDNOUSEQIDNOUSEQIDNO17,SEQIDNO18,SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:30,SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列；可操作地连接于所述启动子的外源核酸；以及3’终止序列，其中所述启动子在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有足以表达所述外源核酸的启动子活性。24.根据权利要求23所述的植物，其中当被表达或被转录时，所述外源核酸改变所述植物细胞中的碳代谢。25.根据权利要求23所述的植物，其中所述外源核酸编码有效抵御至少一种茎钻蛀昆虫的杀虫剂。26.根据权利要求23所述的植物，其中所述植物是单子叶植物。27.根据权利要求23所述的植物，其中所述植物选自由甘蔗、芒草、芒草与甘蔗杂种、柳枝稷、燕麦、小麦、大麦、玉米、稻米、香蕉、丝兰、洋葱、芦笋、高粱及其杂种组成的组。28.根据权利要求23所述的植物，其中所述植物是双子叶植物。29.根据权利要求23所述的植物，其中所述植物选自由咖啡、番茄、胡椒、烟草、利马豆、拟南芥、橡胶、橙、葡萄柚、马铃薯、葡萄柚、马铃薯、南瓜、豌豆以及甜菜组成的组。30.一种在植物中组成型地表达外源核酸的方法，所述方法包括用所述植物的细胞的细胞质接触表达盒或表达载体，其中所述表达盒或表达载体包括(i)所述外源核酸，(ii)SCBV启动子，所述SCBV启动子包括选自由SEQIDNO:1、SEQIDNO:1、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:26、SEQIDNO27,SEQIDNO:30,SEQIDNO:31,SEQIDNO:32、SEQIDNO:33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列，并且可操作来驱动所述外源核酸的表达，以及(iii)可操作地连接于所述外源核酸的3’终止序列，并且其中所述植物选自由单子叶植物和双子叶植物组成的组。31.根据权利要求28所述的方法，其中所述接触的步骤还包括用包括表达盒的颗粒以生物弹射的方式轰击所述细胞。32.根据权利要求28所述的方法，其中所述接触的步骤还包括将所述细胞与包括所述表达盒的土壤杆菌属细胞共培养。33.根据权利要求30所述的方法，其中所述植物是单子叶植物。34.根据权利要求30所述的方法，其中所述植物选自由甘蔗、芒草、芒草与甘蔗杂种、柳枝稷、燕麦、小麦、大麦、玉米、稻米、香蕉、丝兰、洋葱、芦笋、高粱及其杂种组成的组。35.根据权利要求30所述的方法，其中所述植物是双子叶植物。36.根据权利要求30所述的方法，其中所述植物选自由咖啡、番茄、胡椒、烟草、利马豆、拟南芥、橡胶、橙、葡萄柚、马铃薯、葡萄柚、马铃薯、南瓜、豌豆以及甜菜组成的组。37.一种在植物中介导组成型表达核酸的方法，所述方法包括用表达核酸转化所述植物，所述表达核酸包括启动子，所述启动子具有选自由SEQIDNOUSEQIDNO:1、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO26,SEQIDNO27,SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合的核苷酸1-1786组成的组的序列，外源核酸，以及3’终止序列，其中所述植物选自由单子叶植物和双子叶植物组成的组。38.根据权利要求37所述的方法，所述表达核酸包括表达载体。39.根据权利要求37所述的方法，其中转化的步骤还包括用包括所述表达盒的颗粒以生物弹射的方式轰击所述植物。40.根据权利要求37所述的方法，其中转化的步骤还包括将所述植物与包括所述表达盒的土壤杆菌属细胞共培养。41.根据权利要求37所述的方法，还包括转化胚性愈伤组织。42.根据权利要求37所述的方法，还包括从胚性愈伤组织再生植物。43.根据权利要求37所述的方法，还包括转化植物细胞。44.根据权利要求43所述的方法，还包括培育所述转化的植物的后代。45.根据权利要求37所述的方法，其中所述植物是单子叶植物。46.根据权利要求37所述的方法，其中所述植物选自由甘蔗、芒草、芒草与甘蔗杂种、柳枝稷、燕麦、小麦、大麦、玉米、稻米、香蕉、丝兰、洋葱、芦笋、高粱及其杂种组成的组。47.根据权利要求37所述的方法，其中所述植物是双子叶植物。48.根据权利要求37所述的方法，其中所述植物选自由咖啡、番爺、胡椒、烟草、利马豆、拟南芥、橡胶、橙、葡萄柚、马铃薯、葡萄柚、马铃薯、南瓜、豌豆以及甜菜组成的组。49.一种包括表达控制序列的分离的核酸，所述表达控制序列具有SEQIDNO:33的核苷酸632-716的序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。50.根据权利要求49所述的分离的核酸，其中所述表达控制序列是至少约O.75kb。51.一种包括表达控制序列的分离的核酸，所述表达控制序列具有选自由SEQIDNO:30、SEQIDNO:31、SEQIDNO:32、SEQIDNO33及其组合组成的组的序列；其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。52.—种分离的核酸，在5’至3’方向上，所述分离的核酸包括包括SEQIDNO:30序列和SEQIDNO:31序列的表达控制序列，所述SEQIDNO:30序列和SEQIDNO:31序列由约630个核苷酸的间隔区分隔；从约I至约75个核苷酸长度的接头；以及起始密码子，其中所述表达控制序列在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中具有启动子活性。53.根据权利要求52所述的分离的核酸，其中所述接头具有与SEQIDNO:32的核苷酸778-805的序列至少约85%的一致性。54.根据权利要求53所述的分离的核酸，其中所述间隔区具有与SEQIDNO:32的核苷酸96-726的序列至少约85%的一致性。55.根据权利要求54所述的分离的核酸，其中所述表达控制序列在其5’端包括具有与SEQIDNO:32的核苷酸1_44的序列至少约85%的一致性的序列。全文摘要在一些实施方案中，本公开涉及使用在单子叶植物和/或双子叶植物中可操作的表达控制序列(ECS)在植物中表达基因产物的组合物、生物体、体系和方法。举例来说，(i)分离的核酸可以包括ECS(例如，甘蔗杆状病毒启动子)和可选的，可操作地连接于所述ECS的外源核酸(ExNA)；(ii)表达载体可以包括ECS；ExNA；以及可选的3’终止序列，其中所述ECS具有足以在至少一种单子叶植物和至少一种双子叶植物中表达所述ExNA的启动子活性；(iii)微生物、植物细胞或植物可以包括分离的核酸；(iv)用于在植物(例如，单子叶植物和/或双子叶植物)中组成型地表达ExNA的方法可以包括将表达载体与所述植物的细胞的细胞质接触，其中所述表达载体包括所述ExNA和可操作来驱动所述ExNA表达的ECS；和/或(v)在植物(例如，单子叶植物和/或双子叶植物)中介导组成型表达核酸的方法可以包括用包括ECS，ExNA和3’终止序列的表达核酸转化所述植物。文档编号C12N15/82GK103052712SQ201180034249公开日2013年4月17日申请日期2011年5月10日优先权日2010年5月10日发明者E·T·米尔可夫,J·W·派克,S-J·高申请人:德克萨斯A&M大学系统