专利名称：一种利用耐高温酿酒酵母发酵生产乙醇的方法
技术领域：
本发明属于发酵技术领域，具体涉及ー种利用耐高温酿酒酵母发酵生产こ醇的方法。
背景技术：
こ醇是ー种高效、环保、可再生的燃料及汽油添加剤，大力发展燃料こ醇，不仅可以有效解决能源日益匮乏的难题，更加可以有效减少环境污染。我国传统的こ醇生产，一般以粮食为原料，不但成本高而且产量也收粮食资源的限制，产量有限，难以满足需求。木薯被誉为淀粉之王，其淀粉质量分数比玉米高，是ー种非常有竞争カ的こ醇生产原料，通过对以木薯为原料进行こ醇生产的微生物发酵条件研究，可以大幅提高木薯淀粉的こ醇转化率，提高こ醇的产量，有助于减少粮食消耗，节约资源。本专利以耐高温酿酒酵母为出发菌株，以木薯为发酵原料，对影响发酵生产こ醇的发酵温度、装液量、接种量、氮素添加量、初始PH进行了研究。
发明内容
本发明提供了ー种利用耐高温酿酒酵母发酵生产こ醇的方法，本专利以耐高温酿酒酵母为出发菌株，以木薯为发酵原料，对影响发酵生产こ醇的发酵温度、装液量、接种量、氮素添加量、初始PH进行了研究。I. ー种利用高温酿酒酵母发酵生产こ醇的方法，其特征在于发酵时，在500 mL三角瓶中装入一定量的发酵培养基，接入一定量的耐高温酿酒酵母种子液到发酵培养基中，在一定初始pH、一定温度下静止发酵。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，发酵培养基将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的α -淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150 U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min，加入一定量的(NH4) 2S04，制成发酵培养基，调节ー定pH。3.根据权利要求I所述的方法，其特征在于最佳装液量为300 mL/500 mL三角瓶。4.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，耐高温酿酒酵母种子液的制作方法从斜面上将耐高温酿酒酵母接入PDA液体培养基，活化48 h。5.根据权利要求I所述的方法，其特征在于最佳接种量为5%。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于最佳(NH4)2SO4的添加量为8 g/L。7.根据权利要求2所述的方法，最佳初始pH为5. O。8.根据权利要求I所述的方法，其特征在于最佳发酵温度为33°C。
图I发酵温度对こ醇产量的影响。图2不同装液量对こ醇产量的影响。
图3不同接种量对こ醇产量的影响。图4不同氮素添加量对こ醇产量的影响。图5不同培养基初始pH对こ醇产量的影响。
具体实施例方式下面的实施例对本发明作详细说明，但对本发明没有限制。实施例I
本实施案例说明不同发酵温度对こ醇产量的影响，在500 mL三角瓶中装入300 mL发酵培养基，发酵培养基为将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的α-淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150 U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min, 加入5 g/L的(NH4)2SO4，制成发酵培养基，初始pH为4. 5。按体积比5%的接种量将耐高温酿酒酵母种子液接入到发酵培养基中，分别在28°C、33°C、37°C、40°C下静止发酵72 h，用蒸馏法測定こ醇体积分数，得到结果如图I所示。由图I可知，当发酵温度为33°C时，こ醇的产量最大,体积分数大12. 3%，因此，确定最佳发酵温度为33°C。实施例2
本实施案例说明不同装液量对こ醇产量的影响，在500 mL三角瓶中分别装入100 mL、200 mL、300 mL、400 mL、500 mL发酵培养基，发酵培养基为将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的α -淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min，加入5 g/L的(NH4)2S04，制成发酵培养基，初始pH为
4.5。按体积比5%的接种量将耐高温酿酒酵母种子液接入到发酵培养基中，在33°C下静止发酵72 h，用蒸馏法測定こ醇体积分数，得到结果如图2所示。有图2可知，随着装液量的逐渐増大，こ醇产量先升后降，当装液量为300 mL/500mL三角瓶时，こ醇产量达到最大，因此，确定最佳装液量为300 mL/500 mL。实施例3
本实施案例说明不同接种量对こ醇产量的影响，在500 mL三角瓶中装入300 mL发酵培养基，发酵培养基为将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的α-淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150 U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min，加入5 g/L的(NH4)2SO4，制成发酵培养基，初始pH为4. 5。分别按体积比2. 5%、5%、7· 5%、10%的接种量将耐高温酿酒酵母种子液接入到发酵培养基中，在33°C下静止发酵72 h，用蒸馏法測定こ醇体积分数，得到结果如图3所示。由图3可知，接种量为5%时，こ醇产量最大，こ醇体积分数为12. 6%,因此确定最佳接种量为5%。实施例4
本实施案例说明不同氮素添加量对こ醇产量的影响，在500 mL三角瓶中装入300 mL发酵培养基，发酵培养基为将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的α-淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150 U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min,加入I g/L、5 g/L、8g/L的(NH4)2SO4,制成发酵培养基，初始pH为4. 5。分别按体积比5%的接种量将耐高温酿酒酵母种子液接入到发酵培养基中，在33°C下静止发酵72 h，用蒸馏法測定こ醇体积分数，得到结果如图4所示。由图4可知，随着氮素添加量的不断増大，こ醇产量也随之増大，当添加量为8 g/L吋，こ醇体积分数达到最大，因此，确定最佳氮素添加量为8 g/L。实施例5
本实施案例说明不同培养基初始PH对こ醇产量的影响，在500 mL三角瓶中装入300mL发酵培养基，发酵培养基为将200 g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15U/L的α -淀粉酶，于95°C液化90 min,加入终浓度为150 U/L的糖化酶，于65°C糖化30min，加入8g/L的(NH4)2S04，制成发酵培养基，初始pH分别调整为3. 5,4. 0,4. 5,5. 0,5. 5。分别按体积比5%的接种量将耐高温酿酒酵母种子液接入到发酵培养基中，在33°C下静止发酵72 h，用蒸馏法測定こ醇体积分数，得到结果如图5所示。
由图5可知，当初始pH为5. O时，こ醇体积分数达到最大，因此,确定最佳初始pH为 5. O。
权利要求
1.一种利用耐高温酿酒酵母发酵生产乙醇的方法，其特征在于发酵时，在500 mL三角瓶中装入一定量的发酵培养基，接入一定量的耐高温酿酒酵母种子液到发酵培养基中，在一定初始pH、一定温度下静止发酵。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，发酵培养基将200g/L木薯淀粉于60°C糊化30 min，加入终浓度为15 U/L的a -淀粉酶，于95°C液化90 min，加入终浓度为150U/L的糖化酶，于65°C糖化30 min，加入一定量的(NH4) 2S04，制成发酵培养基，调节一定pH。
3.根据权利要求I所述的方法，其特征在于最佳装液量为300mL/500 mL三角瓶。
4.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，耐高温酿酒酵母种子液的制作方法从斜面上将耐高温酿酒酵母接入PDA液体培养基，活化48 h。
5.根据权利要求I所述的方法，其特征在于接种量为5%。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于(NH4)2SO4的添加量为8g/L。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于初始pH为5.O。
8.根据权利要求I所述的方法，其特征在于发酵温度为33°C。
全文摘要
本发明提供了一种利用耐高温酿酒酵母发酵生产乙醇的方法，本专利以耐高温酿酒酵母为出发菌株，以木薯为发酵原料，对影响发酵生产乙醇的发酵温度、装液量、接种量、氮素添加量、初始pH进行了研究。
文档编号C12R1/865GK102703517SQ201210212279
公开日2012年10月3日 申请日期2012年6月26日 优先权日2012年6月26日
发明者周雪琴 申请人:太仓市周氏化学品有限公司