专利名称：一种具有抗新城疫病毒活性的鹅源基因rig-i及其应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种具有抗新城疫病毒(Newcastle diseasevirus, NDV)活性的鹅源基因序列，以及该基因的应用。
背景技术：
新城疫是一种对禽类有高度传染性和致死性的传染病，由于鸡是最易感的鸟类，所以该病常对养禽业造成巨大的损失。该病由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起，NDV为副黏病毒科腮腺炎病毒属的成员，为单股负链不分节段有囊膜RNA病毒。模式识别受体(pattern recognition receptors, PRR)是宿主重要的天然免疫系统，可识别多种微生物成分，如病毒的核酸等，迅速启动多种信号级联反应，合成一系列的细胞因子，包括I型干扰素和炎性细胞因子，在抗病毒先天性免疫中发挥重要的作用。其中，RIG-1 样受体(RIG-1 like receptor, RLR)为一类存在与胞内的 PRR(包括RIG-1，MDA5,LGP2)，主要负责识别RNA病毒，激活信号通路产生I型IFNs以及炎性细胞因子。鹅在中国作为一种重要的经济动物， 在我国各地均有饲养。鹅作为水禽虽然近年来不断有发生新城疫的报道，但相对于陆生禽类，其对NDV有较强的抵抗力，但对其抗病毒先天性的免疫研究还较少。鹅是否存在RLR以及其是否发挥生物学功能并不清楚。本发明首次对鹅的RIG-1基因进行扩增，并通过将鹅RIG-1转染293T及DFl细胞，观察对NDV复制的影响，以及对NDV感染导致的鹅内源性RIG-1的变化进行检测，发现鹅RIG-1在抗NDV先天性免疫中具有一定作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有鹅源抗新城疫病毒基因RIG-1。本发明的再一目的在于抗新城疫病毒基因RIG-1的应用。为了实现本发明目的，本发明所述的一种具有鹅源抗新城疫病毒基因RIG-1，其鹅源基因RIG-1 mRNA的序列如SEQ ID N0.1所示，全长2805bp。其中，本发明由所述基因RIG-1编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示。具有鹅源抗新城疫病毒基因gRIG-1结构域(gRIG-1 CARD)的核苷酸序列如SEQID N0.3 所示。由所述基因gRIG-1结构域(gRIG-1 CARD)编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDN0.4所示。RIG-1核苷酸序列，如SEQ ID N0.1所示:
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权利要求
1.一种具有抗新城疫病毒活性的鹅源基因RIG-1，其特征在于，鹅源基因RIG-1 mRNA的序列如SEQ ID N0.1所示。
2.根据权利要求1所述基因RIG-1编码的蛋白。
3.根据权利要求2所述的蛋白，其氨基酸序列如SEQID N0.2所示。
4.根据权利要求1所述的具有鹅源抗新城疫病毒基因RIG-1，其特征在于，所述基因gRIG-1结构域的核苷酸序列如SEQ ID N0.3所示。
5.根据权利要求4所述基因RIG-1编码的蛋白。
6.根据权利要求2
7.含有权利要求1
8.含有权利要求7
9.根据权利要求1NDV产品中的应用。所述的蛋白，其氣基酸序列如SEQ ID N0.4所不。或4所述基因的重组载体质粒。所述的重组载体质粒转化的宿主细胞。-6任意一项所述具有鹅源抗新城疫病毒`基因RIG-1在用于制备抗
全文摘要
本发明提供一种具有抗新城疫病毒活性的鹅源基因RIG-I，其基于鸭源RIG-I基因，扩增了鹅源RIG-I基因mRNA序列，发现两者同源性达到93.8%。本发明将全长gRIG-I(gRIG-Ifull)和gRIG-ICARD结构域(gRIG-ICARD)，转染细胞进行过表达，证实外源表达的gRIG-I可发挥抗NDV效应。用3种NDV病毒分别感染原代鹅胚成纤维细胞(GEF)和2周龄的扬州鹅检测gRIG-ImRNA水平；发现GEF感染NDV后gRIG-ImRNA水平均出现了上调。感染NDV后鹅的肺和气囊组织中gRIG-ImRNA水平均出现了上调，并且体外和体内实验中病毒生长均受到了抑制。
文档编号C12N1/19GK103173455SQ20121028189
公开日2013年6月26日 申请日期2012年8月9日 优先权日2012年8月9日
发明者丁铲 申请人:中国农业科学院上海兽医研究所