一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺。具体步骤如下：选用黑曲霉作为发酵生产葡萄糖氧化酶的出发菌株，对其进行红外线的诱变处理；筛选，得到高产菌株；连续3-5次对其进行传代实验，得到遗传性状稳定的菌株；放置于培养基中进行培养；运用双层纱膜进行透析；常规发酵，至少24小时；转移至发酵罐中，密封至少12小时；再次进行传代实验，3-5次，即可。所述发酵罐的体积必须与发酵物相当，体积不得超过其体积的百分之十；可以用麦芽糖替代黑曲霉。本发明的有益效果是：产酶反应活度高，变化比较平稳，有效减少了发酵过程中代谢物的产生以及其对产物合成的阻碍作用。
【专利说明】一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化物质的制备方法，具体来说，是指一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺。
【背景技术】 [0002]葡萄糖氧化酶(G I u c ο s eOxidase，简称G0D)系统名为β _D_葡萄糖:氧化还原酶(EC1.1.3.4)它能专一地将β -D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢。葡萄糖氧化酶是酶【技术领域】中一种非常重要的酶，由于葡萄糖氧化酶与生命重要物质葡萄糖和氧的密切关系，导致了它在科研、医药和食品工业生产上广泛的应用。20世纪初Maximou在黑曲霉培养物中发现吸氧酶系统。1924年Malliard发现了葡萄糖酸。1928年，Muller用黑曲霉菌丝体压制进行葡萄糖酸形成的酶学研究，探明在葡萄糖存在时能消耗氧，并命名为葡萄糖氧化酶，把它归入脱氢酶。以后许多研究者对该酶的性质作了大量的工作，尤其对葡萄糖氧化酶的辅基一黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作了深入的研究，并给予详细的说明。BentleyNeubergar应用同位素1802.2180明确了在有过氧化氢酶存在下的一系列试验。Keilin等对黑曲霉的葡萄糖氧化酶的动力学及其作用形式也作了较详细的研究。1961年国际生化协会酶委员会将该酶的系统名称叫做(β -D-萄萄糖-氧化还原酶(EC1.1.3.4)。
【发明内容】
[0003]为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案:
一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺，具体步骤如下:
选用黑曲霉作为发酵生产葡萄糖氧化酶的出发菌株，对其进行红外线的诱变处理； 筛选，得到高产菌株；
连续3-5次对其进行传代实验，得到遗传性状稳定的菌株；
放置于培养基中进行培养；
运用双层纱膜进行透析；
常规发酵，至少24小时；
转移至发酵罐中，密封至少12小时；
再次进行传代实验，3-5次，即可。
[0004]本发明中，所述发酵罐的体积必须与发酵物相当，体积不得超过其体积的百分之十。
[0005]本发明中，可以用麦芽糖替代黑曲霉。
[0006]本发明的有益效果是:产酶反应活度高，变化比较平稳，有效减少了发酵过程中代谢物的产生以及其对产物合成的阻碍作用。
【具体实施方式】
[0007]—种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺，具体步骤如下:选用黑曲霉作为发酵生产葡萄糖氧化酶的出发菌株，对其进行红外线的诱变处理； 筛选，得到高产菌株；
连续5次对其进行传代实验，得到遗传性状稳定的菌株；
放置于培养基中进行培养；
运用双层纱膜进行透析；
常规发酵，24小时；
转移至发酵罐中，密封12小时；
再次进行传代实验，3次，即可。
[0008]所述发酵罐的体积必须与发酵物相当，体积为其体积的百分之十。
[0009]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺，其特征在于，具体步骤如下: 选用黑曲霉作为发酵生产葡萄糖氧化酶的出发菌株，对其进行红外线的诱变处理； 筛选，得到高产菌株； 连续3-5次对其进行传代实验，得到遗传性状稳定的菌株； 放置于培养基中进行培养； 运用双层纱膜进行透析； 常规发酵，至少24小时； 转移至发酵罐中，密封至少12小时； 再次进行传代实验，3-5次，即可。
2.如权利要求1所述的一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺，其特征在于，所述发酵罐的体积必须与发酵物相当，体积不得超过其体积的百分之十。
3.如权利要求1所述的一种对葡萄糖氧化酶进行发酵的工艺，其特征在于，可以用麦芽糖替代黑 曲霉。
【文档编号】C12R1/685GK103642764SQ201310588356
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月21日 优先权日:2013年11月21日
【发明者】周懂懂 申请人:周懂懂