用于输注短暂植入的同种异体淋巴细胞的选定群体来治疗癌症的方法和组合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供用于施用同种异体淋巴细胞作为内源性肿瘤反应性CD8+T细胞的CD4+T细胞辅助的外部来源的方法和组合物。由供体淋巴细胞输注引起的CD8+T细胞的耗竭减少持续植入和移植物抗宿主疾病的风险。从输注群体中去除调控性T细胞可增进非调控性T细胞为抗肿瘤免疫力的内源性效应物提供辅助的能力。同种异体T细胞疗法通常在同种异体干细胞移植的情况下给予，其中患者接收高度免疫抑制调节，随后输注含有未经选择的成熟T细胞的群体的干细胞移植物。在本文描述的治疗中，移植物经过工程改造以将持续供体细胞植入的可能性减少到最低限度，并且抗肿瘤效应T细胞从宿主获得。
【专利说明】用于输注短暂植入的同种异体淋巴细胞的选定群体来治疗 癌症的方法和组合物
[0001] 发明背景 发明领域
[0002] 本发明大体上涉及免疫学，并且更具体地说，涉及用于治疗癌症的方法和含有同 种异体淋巴细胞的组合物。
[0003] 背景信息
[0004] 宿主的免疫系统提供迅速并特异性地发动针对致病微生物的保护性反应并且还 促成恶性肿瘤的排斥的手段。免疫反应大体上描述为包括体液反应，其中对于抗原具有特 异性的抗体由分化的B淋巴细胞产生，和细胞介导的反应，其中各种类型T淋巴细胞通过 各种机制来消除抗原。举例来说，能够识别特异性抗原的CD4(也称为CD4+)辅助T细胞 可通过释放可溶性介体如细胞因子来募集免疫系统的其他细胞参与免疫反应而作出反应。 CD8 (也称为CD8+)细胞毒性T细胞也能够识别特异性抗原并且可结合并破坏或摧毁携带抗 原的细胞或颗粒。具体地说，包括细胞毒性T淋巴细胞（CTL)反应在内的细胞介导免疫反 应对于消除肿瘤细胞和由微生物如病毒、细菌或寄生虫感染的细胞可为至关重要的。
[0005] 癌症包括广泛范围的疾病并且在世界范围内影响大约四分之一的个体。CTL反应 是有效癌症疫苗的关键特征；有效CD4T细胞辅助也可能在生成性CD8T细胞活化中发挥关 键作用，因而提供临床益处。
[0006] 关于微生物感染，疟疾、结核病、HIV-AIDS和其它病毒感染如单纯性疱疹病毒 (HSV)感染（在世界范围内，生殖器溃疡的主要病因）持续造成全球性健康问题。HSV-2发 病率在世界各地以惊人的速度增加。在美国，总HSV-2血清发病率超过20%，并且在发展中 国家中，HSV-2发病率估计在30 %与50 %之间。除了 HSV-2感染在成人中的深重负担以外， 新生儿HSV-2感染的发病率也在不断增加。甚至在治疗时，由HSV-2感染引起的新生儿脑 炎具有>15%的死亡率，并且HSV-2感染婴幼儿之中的神经系统发病率也占存活病例中的 30%至50%。与HSV-2流行病同时出现的十分明显的现实是，HSV-2感染大大增加HIV-1 获得和传播的风险。来自非洲的数据表明HSV-2感染可增加HIV传播的风险多达7倍并且 多达一半的新获得HIV病例直接归因于HSV-2感染。总体上，在HSV-2感染个体中，HIV获 得的相对风险增加超过2倍。
[0007] 新出现的证据暗示在对于由癌症独特表达的抗原具有特异性的淋巴细胞中，癌症 诱导无反应状态。然而，此无反应状态应能够逆转。一些人肿瘤由CD8+T细胞浸润，并且 CD8+T细胞浸润程度经常与不存在转移和存活提高相关。然而，这些CD8+T细胞可能因肿瘤 特异性CD4+T细胞的功能迟滞而不能消除癌症。
[0008] 发明概述
[0009] 本发明基于以下重大发现：输注含有CD4+T细胞的同种异体淋巴细胞可破坏宿主 抗肿瘤CD8+T细胞的耐受性，即使供体细胞不长期植入接受者中也是如此。在同种异体细 胞输注之前施用化学疗法可通过促进转移淋巴细胞的稳态扩增，且/或通过耗竭宿主调控 性T细胞和髓源性抑制细胞来增进短暂植入淋巴细胞的抗肿瘤效应。针对癌症的免疫反应 受到患者CD4+T细胞的功能缺陷所阻碍。输注同种异体淋巴细胞可提供用于内源性的肿瘤 反应性CD8+T细胞的CD4+T细胞辅助的外部来源。由供体淋巴细胞输注引起的CD8+T细胞 的耗竭减少持续植入和移植物抗宿主疾病的风险。从输注群体中去除调控性T细胞可增进 非调控性T细胞为抗肿瘤免疫力的内源性效应物提供辅助的能力。
[0010] 同种异体T细胞疗法通常在同种异体干细胞移植的情况下给予，其中患者接收高 度免疫抑制调节，随后输注含有未经选择的成熟T细胞群体的干细胞移植物。alloSCT的目 标是获得供体细胞的持续植入并且伴有移植物抗宿主疾病引起的死亡风险。在本文描述的 治疗中，移植物经过工程改造以将持续供体细胞植入的可能性减少到最低限度，并且抗肿 瘤效应T细胞从宿主获得。因此，此疗法需要在短暂供体细胞植入期间宿主和供体淋巴细 胞的独特配合。
[0011] 这是可应用于任何人类或动物癌症的治疗。本发明的变化包括：1)在输注同种异 体淋巴细胞之前给予的化疗方案的变化（可包括环磷酰胺、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、达沙替 尼、其组合；2)供体淋巴细胞来源的变化（可来自相关或不相关的供体，可包括I类或II类 HLA基因座处的限定错配；3)对于输注所选择的细胞类型的变化，如耗竭CD4+CD25+调控性 T细胞、耗竭CD8+T细胞。供体可在淋巴细胞输注之前针对限定抗原进行免疫或可离体用细 胞因子极化以富集I型（产生IFN-y)或17型（产生IL-17)T细胞。
[0012] 在第一个实施方案中，本发明提供制造同种异体淋巴细胞组合物的方法，其包括： 提供来自相对于接受者来说为同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所述外周血细胞组 合物包括CD4+T细胞、CD8+T细胞和自然杀伤细胞，其中（i)在供体抗接受者的方向中，供体 包括相对于接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因错配，并且HLA II类等位 基因错配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，并且（ii) 接受者不具有对供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体；并且通过使外周血细胞组合 物中的CD8+T细胞的数目减少至少一个数量级来从外周血细胞组合物制造同种异体淋巴 细胞组合物，其中（a)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞组合 物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，并且（b)同种异体淋巴细胞组合物中的自然 杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件是同 种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0013] 在另一个实施方案中，本发明提供由本发明方法制成的组合物。在另一个实施方 案中，本发明提供同种异体人淋巴细胞组合物，其包括：来自供体的外周血细胞组合物的 CD4+T细胞和自然杀伤细胞，其中（i)在供体抗接受者的方向中，供体包括相对于接受者的 至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因错配，并且HLA II类等位基因错配是在选自由 以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)接受者不具有对供体的人 白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数 目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50 %，（iv)基于以公斤（kg) 为单位的接受者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X10 9 个⑶4+T细胞/kg之间，（v)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等 于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)同种异体淋巴细胞组合物具有 比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组 合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0014] 本发明还提供治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括：向受试者施用淋巴细 胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法以诱导受试者的短暂淋巴细胞减少；并且随后向受试者 施用从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的第一同种异体淋巴细胞组合物，所述第 一同种异体淋巴细胞组合物包括来自供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞 和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在供体抗受试者的方向中，供体包括相对于受试者 的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因错配，并且HLA II类等位基因错配是在选自 由以下组成的组的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)受试者不具有对供体的 人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)第一同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细 胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（iv)基于以公斤 (kg)为单位的受试者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X10 5个CD4+T细胞/kg与约 1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（v)第一同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目 小于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)第一同种异体淋巴细 胞组合物具有比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞,其限制条件是第一同 种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0015] 在一个方面，在向受试者施用第一同种异体淋巴细胞组合物之后，所述方法还包 括向受试者施用连续淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭疗法以诱导受试者的短暂淋巴细 胞减少；并且随后向受试者施用从另外人同种异体供体的另外外周血细胞组合物获得的连 续同种异体淋巴细胞组合物，所述连续同种异体淋巴细胞组合物包括来自另外供体的另外 外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在另外 供体抗受试者的方向中，所述另外供体包括相对于受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因错配，并且HLA II类等位基因错配是在选自由以下组成的组的基因处： HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)受试者不具有对另外供体的人白细胞抗原有反应 性的可检测抗体，（iii)连续同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与另外外周 血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（iv)基于以公斤（kg)为单位的 受试者理想体重的另外供体⑶4+T细胞的数目在约1X10 5个⑶4+T细胞/kg与约1X109个 CD4+T细胞/kg之间，（v)连续同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等 于另外外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)连续同种异体淋巴细胞组 合物具有比另外外周血细胞组合物少至少一个数量级的⑶8+T细胞。
[0016] 本发明还提供制造施用至人接受者的同种异体淋巴细胞组合物的方法，其包括： 提供来自相对于接受者为同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所述外周血细胞组合物 包括一定数目的CD4+T细胞、一定数目的CD8+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i) 供体具有相对于存在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于接受 者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选 自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，并且（iii)接受者不具有对 供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体；并且通过使外周血细胞组合物中的CD8+T细 胞的数目减少至少一个数量级来从外周血细胞组合物制造同种异体淋巴细胞组合物，其中 (a)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞 的数目的差异小于约50%，并且（b)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小 于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件是同种异体淋巴细胞组 合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0017] 在另一个实施方案中，本发明提供用于施用至人接受者的从人同种异体供体的外 周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括：来 自供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中 (i)供体具有相对于存在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于 接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是 在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)接受者不具有对 供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细 胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤 (kg)为单位的接受者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X105个CD4+T细胞/kg与约 1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小 于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合 物具有比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴 细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0018] 本发明还提供用于施用至人接受者的从人同种异体供体的外周血细胞组合物获 得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括：来自供体的外周血细 胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)供体具有相对于 不存在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于接受者的至少一个 人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成 的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)接受者不具有对供体的人白细胞抗 原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血 细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的接 受者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T 细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周 血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合物具有比外周 血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的 ⑶4+T细胞未离体活化。
[0019] 在一个实施方案中，本发明提供用于治疗受试者的疾病或病状的试剂盒，所述试 剂盒包括：淋巴细胞组合物，其中受试者是人接受者；以及纳米颗粒组合物，其包括包含不 存在于人接受者体内的抗原的纳米颗粒。
[0020] 此外，存在治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括向受试者施用从人同种异 体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合 物包括来自供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细 胞，其中（i)供体具有相对于存在于受试者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包 括相对于受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基 因匹配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)受试者 不具有对供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的 ⑶4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基 于以公斤（kg)为单位的受试者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X105个CD4+T细 胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细 胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋 巴细胞组合物具有比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同 种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0021] 在一个方面，本发明提供治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括向肿瘤中注 入纳米颗粒组合物，其中所述纳米颗粒组合物包括包含不存在于受试者体内的抗原的纳 米颗粒，由此将抗原引入受试者体内；向受试者施用从人同种异体供体的外周血细胞组合 物获得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括来自供体的外周 血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)供体具有 相对于抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于受试者的至少一个人白细胞抗原 (HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处： HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)受试者不具有对供体的人白细胞抗原有反应性的 可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中 的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的受试者理想体重的 供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间， (vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中 的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合物具有比外周血细胞组合物少 至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离 体活化。
[0022] 附图简述
[0023] 图1展示BMT之后的相同五个患者的红细胞压积，其中锯齿状部分反映输注效应 (曲线图）。
[0024] 图2展示非植入DLI诱导抗肿瘤免疫力（曲线图）。
[0025] 图3a展示植入作为疫苗的供体细胞加上alio⑶4延长存活（曲线图）。图3b展 示具有供体CD4+T细胞嵌合体和移植后天数的曲线图。
[0026] 图4展示使用白细胞分离产物和放血样本的CD8耗竭的验证操作（流式细胞术结 果）。
[0027] 发明详述
[0028] 本公开至少部分地产生于以下重大发现：对于癌症的免疫反应受到患者⑶4+T细 胞的功能缺陷所阻碍。输注同种异体淋巴细胞可提供用于内源性肿瘤反应性CD8+T细胞的 CD4+T细胞辅助的外部来源。由供体淋巴细胞输注引起的CD8+T细胞的耗竭减少持续植入 和移植物抗宿主疾病的风险。从输注群体中去除调控性T细胞可增进非调控性T细胞为抗 肿瘤免疫力的内源性效应物提供辅助的能力。同种异体T细胞疗法通常在同种异体干细胞 移植的情况下给予，其中患者接收高度免疫抑制调节，随后输注含有未经选择的成熟T细 胞的群体的干细胞移植物。在本文描述的治疗中，移植物经过工程改造以将持续供体细胞 植入的可能性减少到最低限度，并且抗肿瘤效应T细胞从宿主获得。因此，此疗法需要在短 暂供体细胞植入期间宿主和供体淋巴细胞的独特配合。
[0029] 在一个实施方案中，本发明提供制造用于施用至人接受者的同种异体淋巴细胞组 合物的方法，优选地，供体和接受者不是同一人。所述方法包括提供来自相对于接受者为 同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所述外周血细胞组合物包括一定数目的CD4+T细 胞、一定数目的CD8+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，一些自然杀伤细胞具有CD8+抗原 并且可通过"减少"步骤来去除；然而，本发明的优选淋巴细胞组合物包括来自供体的至少 一些自然杀伤细胞。在一方面，（i)在供体抗接受者方向上，供体包括相对于接受者的至少 一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因错配（HLA II类等位基因错配在供体抗接受者方向 上，即，"移植物抗宿主方向上），并且HLA II类等位基因错配是在如HLA-DRBUHLA-DQB1或 HLA-DPB1等基因处。接受者不具有对于供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体（在这 种情况下，"可检测抗体"使用进行此确定的标准方法来定义（例如，接受者不具有可通过补 体依赖性细胞毒性来检测的针对供体HLA分子的抗体，在流式细胞交叉匹配测定中，阳性 结果是不合需要的，或在固相免疫测定中，3000或更大的平均荧光强度（MFI)是不可接受 的）。
[0030] 同种异体淋巴细胞组合物通过使外周血细胞组合物中的⑶8+T细胞的数目减 少至少一个数量级来从外周血细胞组合物制得，其中（a)同种异体淋巴细胞组合物中的 ⑶4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约50%。在一个 优选实施例中，淋巴细胞组合物中的CD4+数目/CD8+T细胞数目的比率优选地大于或等于 约30。一些实施方案的实例包括但不限于以下每公斤接受者理想体重的剂量：包括105个 ⑶4+细胞的淋巴细胞组合物通常具有不大于3. 2X 103个⑶8+细胞、106个⑶4+细胞通常 具有不大于3. 2X 104个CD8+细胞，107个CD4+细胞通常具有不大于3. 2X 105个CD8+细 胞，108个⑶4+细胞通常具有不大于3. 2X 106个⑶8+细胞，并且5X 108个⑶4+细胞通常 具有不大于1.6X 107个⑶8+细胞。
[0031] 同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞组合 物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体 活化。减少一个数量级，优选地约两个数量级，更优选地约五个数量级。在一个实施方案中， CD8+细胞的数目减少约2. 5个数量级（例如，使用磁性珠粒细胞分选方法）。
[0032] 在一方面，其中如果供体和接受者是AB0血型不相容的并且外周血细胞组合物包 括一定数目的红细胞，那么制造同种异体淋巴细胞组合物还包括减少红细胞数目。如本文 使用，"AB0血型不相容"是指当接受者具有相对于供体的主要AB0红细胞不相容性时，例 如，接受者是血型〇并且供体是血型A、B或AB，接受者是A型并且供体是B型或AB型，或 接受者是B型并且供体是A型或AB型。
[0033] 在一方面，红细胞的数目包括小于或等于约50ml压积。例如，小于或等于约50ml 压积，优选地小于或等于约30ml压积，此外"压积"应加以定义，例如，淋巴细胞组合物的离 心产生50ml或更小压积的红细胞；也可筛选淋巴细胞组合物的测量体积样品以提供压缩 血细胞的按比例代表性体积。
[0034] 在一方面，同种异体淋巴细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目与外周血细胞组合物 中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约20%。在一些实施方案中，⑶4+T细胞小于约50%， 小于约40%，优选地小于约20%，更优选地小于约10%。在一些实施方案中，可执行⑶4+T 细胞的离体扩增，在这些实施方案中CD4+T细胞的数目可极大地超过原始数目。这类扩增 是替代实施方案。
[0035] 在一些实施方案中，从供体获得的CD4+T细胞未有意地扩增或有意地离体分化。 有意地扩增或有意地分化不同于仅仅是方法的副作用（并非有意的、不注意的）的CD4+T 细胞的扩增或分化，例如，CD4+T细胞可有时通过接触到塑料、这类不注意的事件的其它实 例而经历分化。在另一个实施方案中，进一步限制条件是干细胞在对于接受者为同种异体 的外周血细胞组合物供体体内没有经历动员。
[0036] 在一些方面，减少外周血细胞组合物中的CD8+T细胞包括使用与磁性颗粒相关联 的抗CD8+抗体或抗CD8+抗体加上补体。外周血细胞组合物可为例如全血产物或单采产物。 此外，供体抗接受者方向上的HLA II类等位基因错配可为HLA-DRB1处的错配。供体抗接 受者方向上的对于HLA II类等位基因错配的此限制是例如"移植物抗宿主方向"，其中同种 异体供体抗接受者方向上的至少一个HLA II类等位基因错配还包括同种异体供体与接受 者的一个或多个第一近亲之间的相同HLA II类等位基因错配，这对于保持从第一近亲至接 受者的骨髓移植的机会；理想地，供体与接受者之间的所有错配不存在于潜在家族骨髓供 体与接受者之间。
[0037] 在一些方面，进行一个或多个选择特征的筛选并且对于选自由接受者、供体和一 个或多个潜在同种异体供体组成的组的受试者来执行筛选。举例来说，针对感染物抗原的 血清反应性来筛选选择特征。感染物抗原选自由以下组成的组：人免疫缺陷病毒（HIV)抗 原、肝炎病毒抗原和巨细胞病毒抗原。欲筛选的重要试剂包括例如HIV-1抗原、HIV-2抗原、 甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗原、CMV抗原、感染性疾病等。如果 病毒或感染物或其抗原是治疗标靶，那么不排除具有针对此试剂的所需CD4+介导免疫反 应的供体。
[0038] 在一方面，感染物抗原是巨细胞病毒抗原，对接受者和供体加以筛选，并且在接受 者或供体中没有巨细胞病毒抗原的血清反应性。在一方面，病毒抗原是流感抗原并且流感 抗原是血凝素抗原或神经氨酸酶抗原。
[0039] 在另一方面，针对一种以上HLA II类等位基因来筛选选择特征。在某些情况下， 基于在一种以上HLA II类等位基因处、在潜在同种异体供体抗接受者方向上、潜在同种异 体供体与接受者之间的最大化错配来选择潜在同种异体供体，并且将潜在同种异体供体选 为供体。在某些情况下，针对一个或多个HLA I类等位基因来筛选选择特征。
[0040] 可基于最小化一种以上HLA I类等位基因处、潜在同种异体供体与接受者之间的 错配来选择潜在同种异体供体，并且将潜在同种异体供体选为供体。
[0041] 在一个实施方案中，本发明提供通过如本文描述的本发明方法获得的用于施用至 人接受者的同种异体淋巴细胞组合物。
[0042] 如果接受者对于CMV抗原是血清阳性的，那么供体状态不重要。在某些实施方 案中，其中供体未针对存在于接受者体内或将要递送至接受者的抗原进行免疫接种，递送 CD4+T细胞辅助取决于接受者细胞上的同种异体HLA II类分子的供体CD4+T细胞识别。出 于例证本发明的这些实施方案的目的的"理想供体"的实例则在HLA II类等位基因（尤其， HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1)处完全错配并且对于I类等位基因来说完全匹配（以最 大化接受者中的供体细胞的存活并且最小化针对I类分子的同种抗体形成）。此外，理想供 体与同种异体干细胞移植的潜在供体的接受者的第一近亲的不共享HLA完全错配。
[0043] 在一个实施方案中，存在从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体 淋巴细胞组合物用于施用至人接受者，所述同种异体淋巴细胞组合物包括来自供体的外周 血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在供体抗接 受者的方向中，供体包括相对于接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因错 配，并且HLA II类等位基因错配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1 和HLA-DPB1，（ii)接受者不具有对供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)同 种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目 的差异小于约50% (包括但不限于小于约50%、小于约40%、优选小于约20%、更优选小 于约10% )。此外，"外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约50%"意指外 周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目加或减小于50%。举例来说,如果外周血细胞组合 物中的⑶4+T细胞的数目是1X10 5个⑶4+细胞，那么"外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞 的数目的差异小于约50%"意指^4+1'细胞的数目在1.5乂10 5与0.5乂105之间。在组合物 中，基于以公斤（kg)为单位的接受者的理想体重（理想体重（IBW)是基于身高。对于男性， IBW = 50+2. 3kg/英寸，在5英尺内。对于女性，IBW = 45. 5+2. 3kg/英寸，在5英尺内）的 供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X10 9个⑶4+T细胞/kg之间（在 一个优选实施方案中，在约1X106个⑶4+T细胞/kg与约5X10 8个⑶4+T细胞/kg之间）； (v)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中的 自然杀伤细胞的数目，并且（vi)同种异体淋巴细胞组合物具有比外周血细胞组合物少至 少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体 活化。
[0044] 还提供治疗人受试者的疾病或病状的方法，包括将淋巴细胞减少性（在本发明的 这一方面的一些实施方案中，需要提供淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法来促进所 施用淋巴细胞组合物的稳态扩增和分化；在其它实施方案中，需要治疗也为骨髓细胞减少 性的（即，抑制或耗竭抑制性骨髓群体包括髓源性抑制细胞、肿瘤相关巨噬细胞和或N2嗜 中性粒细胞）非致淋巴细胞衰竭的疗法施用至受试者以诱导受试者的短暂淋巴细胞减少； 随后向受试者施用从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的第一同种异体淋巴细胞 组合物，所述第一同种异体淋巴细胞组合物包括来自供体的外周血细胞组合物的一定数目 的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在供体抗受试者的方向中，供体包括相 对于受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因错配，并且HLA II类等位基因错 配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)受试者不具 有对供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)第一同种异体淋巴细胞组合物中 的⑶4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约50%，（iv) 基于以公斤（kg)为单位的受试者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X10 5个CD4+T细 胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（v)第一同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤 细胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)第一同种 异体淋巴细胞组合物具有比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞，其限制条 件是第一同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0045] 虽然不希望受具体理论约束，但是输注的CD4+细胞为其它细胞类型提供信号，主 要是受试者的CD8+、巨噬细胞和/或增进这些细胞在受试者中的细胞毒性功能的抗原呈递 细胞（受试者的耐受CD4+/受试者的排出CD8+);通过此方法的治疗疾病或病状的实例应 例示为至少治疗骨髓增生异常综合征。
[0046] 在一方面，淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法包括用选自由以下组成的组 的一种或多种细胞减少性试剂来治疗受试者：烷化剂、烷基磺酸盐、亚硝基脲、三氮烯、抗代 谢物、嘧啶类似物、嘌呤类似物、长春花生物碱、表鬼白毒素、抗生素、二溴甘露醇、脱氧精胍 菌素、二甲基马利兰和塞替派。在一方面，淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法包括用 烷化剂治疗受试者并且烷化剂是环磷酰胺。在一方面，在将第一同种异体淋巴细胞组合物 施用至受试者之后，所述方法还包括将抗肿瘤单克隆抗体或抗肿瘤单克隆抗体/药物缀合 物施用至受试者。
[0047] 在一方面，提供用于治疗受试者的疾病或病状的试剂盒，试剂盒包括：如本文描述 的淋巴细胞组合物，其中受试者是人接受者；和纳米颗粒组合物，其包括包含不存在于人接 受者体内的抗原的纳米颗粒。在一方面，纳米颗粒还包括细胞因子，例如，白介素或干扰素。 细胞因子可为白介素并且选自由以下组成的组：IL_2、IL-7、IL-12和IL-15。细胞因子可 为干扰素例如干扰素Y、干扰素0、干扰素a、干扰素、t、干扰素Q和复合干扰素。
[0048] 纳米颗粒可还包括选自由以下组成的组的化合物：趋化因子、成像剂、光天线分 子、热天线分子和Toll样受体配体、促进⑶4+T细胞分化成I型（例如产生IFN- Y )⑶4+记 忆T细胞的配体、诱导抗原呈递细胞（例如，抗CD40抗体或适体）活化的受体的配体。此 夕卜，纳米颗粒可包括将纳米颗粒靶向输送至肿瘤细胞或抗原呈递细胞的试剂。
[0049] 在一方面，方法还包括施用抗肿瘤单克隆抗体并且抗肿瘤单克隆抗体选自由以 下组成的组：利妥昔单抗、西妥昔单抗、曲妥珠单抗和培妥珠单抗。在一方面，本发明包括 施用抗肿瘤单克隆抗体/药物缀合物并且抗肿瘤单克隆抗体/药物缀合物选自由以下组 成的组：布妥昔单抗维多汀（brentuximab vedotin)、吉妥珠单抗奥佐米星（gemtuzumab ozogamicin)、曲妥珠单抗艾美坦辛（trastuzumab emtansine)、伊妥珠单抗奥佐米星 (inotuzumab ozogamicin)、格雷帕珠单抗维多汀（glembatumumab vedotin)、罗佛珠单抗 莫登素（lorvotuzumab mertansine)、坎妥珠单抗莫登素（cantuzumab mertansine)和米拉 珠单抗-多柔比星（milatuzumab-doxorubicin)。在一些方面，首先施用同种异体淋巴细胞 组合物，然后将化学治疗剂施用至受试者。举例来说，化学治疗剂选自由以下组成的组：达 沙替尼、尼罗替尼、帕纳替尼、伊马替尼、拉帕替尼和维莫德吉。
[0050] 在一方面，在将第一同种异体淋巴细胞组合物施用至受试者之后，所述方法还包 括将单克隆抗体/CD4+T细胞表位缀合物施用至受试者。在一个方面，在向受试者施用第一 同种异体淋巴细胞组合物之后，所述方法还包括向受试者施用连续淋巴细胞减少性非致淋 巴细胞衰竭的疗法以诱导受试者的短暂淋巴细胞减少；随后向受试者施用从另外人同种异 体供体的另外外周血细胞组合物获得的连续同种异体淋巴细胞组合物，所述连续同种异体 淋巴细胞组合物包括来自另外供体的另外外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和 一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在另外供体抗受试者的方向中，所述另外供体包括相 对于受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因错配，并且HLA II类等位基因错 配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)受试者不具 有对另外供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)连续同种异体淋巴细胞组合 物中的CD4+T细胞的数目与另外外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约 50%，（iv)基于以公斤（kg)为单位的受试者理想体重的另外供体CD4+T细胞的数目在约 1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（V)连续同种异体淋巴细胞组 合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于另外外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数 目，并且（vi)连续同种异体淋巴细胞组合物具有比另外外周血细胞组合物少至少一个数 量级的CD8+T细胞。此方法的限制条件是连续同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离 体活化。在将第一同种异体淋巴细胞组合物施用至受试者之后，所述方法还包括施用阻断T 细胞中的负信号转导的试剂。阻断T细胞中的负信号转导的试剂选自由以下组成的组：抗 ro-i抗体、伊匹木单抗、抗ro-L2抗体和ro-i融合蛋白质。疾病或病状选自由以下组成的 组：癌症、自身免疫病症、器官移植、同种异体移植物排斥和病毒感染。举例来说，疾病或病 状是癌症并且癌症是骨髓增生异常综合征。
[0051] 在一个实施方案中，本发明提供制造用于施用至人接受者的同种异体淋巴细胞组 合物的方法，其包括提供来自相对于接受者为同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所 述外周血细胞组合物包括一定数目的⑶4+T细胞、一定数目的⑶8+T细胞和一定数目的自 然杀伤细胞，其中（i)供体具有相对于存在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii) 供体包括相对于接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类 等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，并且 (iii)接受者不具有对供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体；并且通过减少外周血 细胞组合物中的CD8+T细胞的数目至少一个数量级来从外周血细胞组合物制造同种异体 淋巴细胞组合物，其中（a)同种异体淋巴细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目与外周血细胞 组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，并且（b)同种异体淋巴细胞组合物中的 自然杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件 是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
[0052] 在一方面，存在于接受者中的抗原选自由以下组成的组：赘生性抗原（赘生性抗 原是与赘生物相关联的抗原，其中赘生物定义为任何新的和异常细胞生长，尤其是细胞复 制不受控制并且渐进性的生长。赘生物可为良性、恶性前或恶性，并且癌症是恶性赘生物。 因此，所有癌症抗原是赘生性抗原但是并非所有赘生性抗原是癌症抗原。赘生性独特型 (Id)是肿瘤特异性目标，例如，在其细胞表面上表达此分子的那些B细胞恶性肿瘤中，例 如，淋巴瘤或多发性骨髓瘤，并且包括病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原和非人类 动物抗原。
[0053] 在一方面，潜在同种异体供体基于最小化一种以上HLA II类等位基因处潜在同种 异体供体与接受者之间的错配来选自一个或多个潜在同种异体供体，并且将潜在同种异体 供体选为供体。潜在同种异体供体基于最小化一种或多种HLA I类等位基因处潜在同种异 体供体与接受者之间的错配来选自一个或多个潜在同种异体供体，并且将潜在同种异体供 体选为供体。
[0054] 在一方面，供体对其具有免疫力的存在于接受者中的抗原是病毒抗原并且病毒抗 原选自由以下组成的组：人乳头状瘤病毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱 疫病毒（KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。举例来 说，病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原并且人乳头状瘤病毒抗原是E6或E7抗原性肽。在一 方面，同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细 胞的数目的差异小于约20%。
[0055] 在一个实施方案中，提供从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体 淋巴细胞组合物用于施用至人接受者，所述同种异体淋巴细胞组合物包括来自供体的外周 血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)供体具有相 对于存在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于接受者的至少一 个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组 成的组的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)接受者不具有对供体的人白细胞 抗原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周 血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的接 受者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X10 5个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T 细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周 血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合物具有比外周 血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的 ⑶4+T细胞未离体活化。
[0056] 本发明提供从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞组 合物用于施用至人接受者，所述同种异体淋巴细胞组合物包括：来自供体的外周血细胞组 合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)供体具有相对于不存 在于接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于接受者的至少一个人白 细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组 的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)接受者不具有对供体的人白细胞抗原有 反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与外周血细胞 组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的接受者 理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞 /kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于外周血细胞 组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合物具有比外周血细胞 组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T 细胞未离体活化。
[0057] 本发明提供治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括向受试者施用从人同种异 体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合 物包括来自供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细 胞，其中（i)供体具有相对于抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于受试者的至 少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是在选自由以 下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)受试者不具有对供体的人 白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目 与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单 位的受试者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X10 5个⑶4+T细胞/kg与约1X109个 CD4+T细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于 外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合物具有比 外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴细胞组合 物的CD4+T细胞未离体活化。
[0058] 本发明的组合物和方法可针对广泛范围的癌症和肿瘤类型来使用，包括但不限于 膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结直肠癌、宫颈癌、胃肠癌、生殖泌尿癌、头和颈癌、肺癌、卵巢癌、前 列腺癌、肾脏癌、皮肤癌和睾丸癌。更具体地讲，可通过本文所述的组合物和方法治疗的癌 症包括但不限于以下：心脏癌症，包括，例如肉瘤，例如，血管肉瘤，纤维肉瘤，横纹肌肉瘤和 脂肪肉瘤；粘液瘤；横纹肌瘤；纤维瘤；脂肪瘤和畸胎瘤；肺癌，包括，例如，支气管癌，例如 鳞状细胞、未分化小细胞、未分化大细胞和腺癌；肺泡和细支气管癌；支气管腺瘤；肉瘤；淋 巴瘤；软骨瘤型错构瘤；和间皮瘤；胃肠癌，包括，例如，食道癌，如鳞状细胞癌，腺癌，平滑 肌肉瘤和淋巴瘤；胃癌，例如，癌，淋巴瘤和平滑肌肉瘤；胰腺癌，例如导管腺癌，胰岛瘤，胰 高血糖素瘤，胃泌素瘤，类癌瘤，以及舒血管肠肽瘤；小肠癌，例如，腺癌，淋巴瘤，类癌瘤， 卡波济氏肉瘤，平滑肌肉瘤，血管瘤，脂肪瘤，神经纤维瘤和纤维瘤；大肠癌，如腺癌，管状 腺瘤，绒毛状腺瘤，错构瘤和平滑肌肉瘤；泌尿生殖道的癌症，包括，例如，肾癌，如腺癌，威 廉氏肿瘤（肾母细胞瘤），淋巴瘤和白血病；膀胱和尿道癌，如鳞状细胞癌，移行细胞癌和 腺癌；前列腺癌，例如，腺癌和肉瘤；睾丸癌，如精原细胞瘤，畸胎瘤，胚胎癌，畸胎癌，绒毛 膜癌，肉瘤，间质细胞癌，纤维瘤，纤维腺瘤，腺瘤样瘤和淋巴瘤；肝癌，包括，例如，肝细胞 瘤，例如，肝细胞癌；胆管癌；肝母细胞瘤；血管肉瘤；肝细胞腺瘤；和血管瘤；骨癌，包括， 例如，骨原性肉瘤（骨肉瘤），纤维肉瘤,恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤因氏肉瘤，恶性 淋巴瘤（网状细胞肉瘤），多发性骨髓瘤,恶性巨细胞瘤脊索瘤，骨软骨瘤（骨软骨外生骨 疣），良性软骨瘤，软骨母细胞瘤，软骨肌瘤样纤维瘤，骨样骨瘤和骨巨细胞瘤；神经系统的 癌症，包括，例如，颅骨癌症，如骨瘤，血管瘤，肉芽肿，黄色瘤，和畸形性骨炎；脑膜癌，如脑 膜瘤，脑膜肉瘤和神经胶质瘤；脑癌，如星形细胞瘤，髓母细胞瘤，神经胶质瘤，室管膜瘤，生 殖细胞瘤（松果体瘤），多形胶质母细胞瘤，少突神经胶质细胞瘤，神经鞘瘤，视网膜母细胞 瘤和先天性肿瘤；和脊髓癌，例如，神经纤维瘤，脑膜瘤，神经胶质瘤和肉瘤；妇科癌症，包 括，如子宫癌，例如子宫内膜癌；子宫颈的癌症，例如，宫颈癌，和预肿瘤宫颈发育不良；卵 巢的癌症，如卵巢癌，包括浆液性囊腺癌，粘液性囊腺癌，未分类癌，颗粒腱鞘细胞瘤，睾丸 支持间质细胞瘤，无性细胞瘤和恶性畸胎瘤；外阴的癌症，如鳞状细胞癌，上皮内癌，腺癌， 纤维肉瘤和黑色素瘤；阴道癌症，如透明细胞癌，鳞状细胞癌，葡萄状肉瘤和胚胎性横纹肌 肉瘤；和输卵管癌，例如癌；血液系统癌症，包括，例如，血癌，如急性髓细胞性白血病，慢性 髓细胞性白血病，急性淋巴细胞性白血病，慢性淋巴细胞性白血病，骨髓增生性疾病，多发 性骨髓瘤和骨髓增生异常综合征，何杰金氏淋巴瘤，非何杰金氏淋巴瘤（恶性淋巴瘤）和华 氏巨球蛋白血症；皮肤癌，包括，例如，恶性黑色素瘤，基底细胞癌，鳞状细胞癌，卡波济氏肉 瘤，痣发育异常痣，脂肪瘤，血管瘤，皮肤纤维瘤，瘢痕瘤，银屑病；和肾上腺的癌症，包括，例 如，神经母细胞瘤。在某些实施方案中，当疾病是癌症时，它可包括例如肺癌肿瘤、乳腺癌肿 瘤、前列腺癌肿瘤、脑癌肿瘤或皮肤癌肿瘤。
[0059] 本发明的组合物也可与现有治疗癌症方法，例如化疗、照射或手术组合施用。因 此，进一步提供治疗癌症的方法，包括将有效量的本发明组合物施用至需要这类治疗的个 体，其中将有效量的至少另一种癌症化学治疗剂施用至个体。合适的化学治疗剂的实例 包括以下任何一种：阿巴瑞克，阿地白介素，阿仑单抗，阿利维A酸，别嘌呤醇，六甲蜜胺， 阿那曲唑，三氧化二砷，门冬酰胺酶，阿扎胞苷，贝伐单抗，贝沙罗汀，博来霉素，硼替佐米 (bortezombi)，硼替佐米（bortezomib)，静脉内白消安，口服白消安，卡普睾酮，卡培他滨， 卡钼，卡莫司汀，西妥昔单抗，苯丁酸氮芥，顺钼，克拉屈滨，氯法拉滨，环磷酰胺，阿糖胞苷， 达卡巴嗪，更生霉素，达肝素钠，达沙替尼，柔红霉素，地西他滨，地尼白介素，地尼白介素融 合毒素（denileukin diftitox)，右雷佐生，多西紫杉醇，阿霉素，屈他雄酮丙酸酯，依库珠 单抗，表柔比星，埃罗替尼，雌莫司汀，磷酸依托泊苷，依托泊苷，依西美坦，柠檬酸芬太尼， 非格司亭，氟尿苷，氟达拉滨，氟尿嘧啶，氟维司群，吉非替尼，吉西他滨，吉妥珠单抗奥唑米 星，醋酸戈舍瑞林，组氨瑞林乙酸酯，替伊莫单抗，伊达比星，异环磷酰胺，伊马替尼甲磺酸 酸，重组人干扰素a 2a，伊立替康，拉帕替尼二甲苯磺酸酸，来那度胺，来曲唑，亚叶酸钙，醋 酸亮丙瑞林，左旋咪唑，洛莫司汀，氮芥，醋酸甲地孕酮，美法仑，巯嘌呤，甲氨蝶呤，甲氧沙 林，丝裂霉素C，米托坦，米托蒽醌，诺龙苯丙酸酯，奈拉滨，诺非单抗，奥沙利钼，紫杉醇，帕 米膦酸，帕尼单抗，培门冬酶，培非司亭，培美曲塞二钠，喷司他丁，哌泊溴烷，普卡霉素，丙 卡巴肼，喹吖因，拉布立酶，利妥昔单抗，索拉非尼，链佐星，舒尼替尼，马来酸舒尼替尼，他 莫昔芬，替莫唑胺，替尼泊苷，睾内酯，沙利度胺，硫鸟嘌呤，塞替派，托泊替康，托瑞米芬，托 西莫单抗，曲妥珠单抗，维A酸，尿嘧啶氮芥，戊柔比星，长春碱，长春新碱，长春瑞滨，伏立 诺他和唑来膦酸盐。
[0060] 在本文描述的本发明方法中，任选地在向受试者施用同种异体淋巴细胞组合物之 前，所述方法还包括施用耗竭或抑制髓源性抑制细胞的疗法。耗竭或抑制髓源性抑制细胞 的疗法可包括施用选自由以下组成的组的药物：例如达沙替尼、5-氟尿嘧啶、泰索帝、氯膦 酸盐和吉西他滨。任选地，在向受试者施用同种异体淋巴细胞组合物之前，所述方法还包括 施用耗竭或抑制肿瘤相关巨噬细胞的疗法。任选地，在向受试者施用同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭调控性T细胞的疗法。耗竭调控性T细胞的疗法可包 括施用选自由以下组成的组的药物：环磷酰胺、地尼白介素融合毒素和达利珠单抗。
[0061] 在另一个实施方案中，本发明提供治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括向 肿瘤中注入纳米颗粒组合物（纳米颗粒可注入或输注至受试者体内，其中纳米颗粒还包 括靶向输送剂，并且靶向输送剂结合至靶细胞例如分散/非定域肿瘤（例如淋巴瘤或白血 病），其中直接注射至所有可能位点是不实际或不可行的），其中所述纳米颗粒组合物包括 包含不存在于受试者体内的抗原的纳米颗粒，由此将抗原引入受试者体内；向受试者施用 从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋 巴细胞组合物包括来自供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的 自然杀伤细胞，其中（i)供体具有相对于抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)供体包括相对于 受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因匹配并且HLA II类等位基因匹配是 在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)受试者不具有对 供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iv)同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细 胞的数目与外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤 (kg)为单位的受试者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X10 5个CD4+T细胞/kg与约 1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（vi)同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小 于或等于外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)同种异体淋巴细胞组合 物具有比外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞；其限制条件是同种异体淋巴 细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。在一方面，抗原是非人类动物抗原并且非人类动物 抗原是匙孔血蓝蛋白抗原。在另一方面，抗原是病毒抗原并且病毒抗原选自由以下组成的 组：人乳头状瘤病毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV)抗原、 甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。
[0062]本发明的组合物可通过各种途径来施用至个体，例如，口服、局部、肠胃外、阴道 内、全身、肌肉内、直肠或静脉内。在某些实施方案中，组合物与药用载剂一起配制。优选地， 组合物是静脉内施用。
[0063]在一些实施方案中，组合物与其它抗病毒或抗癌疗法组合，如施用抗病毒或抗癌 齐U、辐射疗法、光线疗法或免疫疗法。抗病毒或抗癌剂可在同一制剂或单独制剂中与本发明 组合物一起施用，以增强治疗。在这些实施方案中，组合物和其它疗法可在同一时间（同 时）或在单独时间（依序）施用，只要其以具有所需效应的方式并且在时间上充分接近来 施用即可。
[0064] 以下实施例旨在说明而不是限制本发明。 实施例
[0065]骨髓增生异常综合征（MDS)是以血细胞的增生异常和无效骨髓产生以及转化成 急性白血病的可变风险为特征的一组不同恶性干细胞病症。这些病症可重新患上或在暴露 于潜在致突变的化疗之后数年出现。
[0066]在美国今年诊断大约12, 000-20, 000个新的MDS病例，中值发病年龄在60与72 岁之间。骨髓增生异常综合征的当前治疗结果是使人失望的。如通过国际预后评分系统 (IPSS)确定的年龄、体能状态和疾病风险类别通常确定治疗方式的选择。具有良好或极好 体能状态并且处于IPSS中间-2或高风险类别中的〈60岁的患者主要考虑进行高强度疗 法，因为这些IPSS类别分别赋予1. 2和0. 4年的中值存活。高强度疗法定义为要求住院治 疗，包括化疗和造血细胞移植的密集组合。
[0067]处于低或中间-1类别中的患者总体上考虑进行低强度疗法。这些疗法包括可在 门诊病人诊所中施用的疗法，如造血生长因子、分化诱导剂、生物反应调节剂和低强度化 疗。具有不佳体能状态的患者考虑进行支持性护理或低强度疗法。
[0068]实施例1-IDE设各
[0069] 用于此试验中的研究剂是具有CliniMACSv⑶8试剂的CliniMACS系统，用于富 集或耗竭来自人血液产物的⑶8+T细胞的医疗设备。用于选择⑶8+细胞的CliniMACS.i 系统包括四个主要组成部分：l)CliniMACSK⑶8试剂-连接至针对人⑶8的鼠科抗体 的胶状超顺磁性葡聚糖铁珠粒；2)CliniMACSplus仪器-处理血液样品（细胞产物）的软 件控制仪器；3)CliniMACSx导管集，（标准或LS)-具有两个专有细胞选择柱的一次性 使用、无菌、抛弃式导管集；和4)CliniMACStPBS/EDTA缓冲液-无菌、等渗磷酸缓冲 ImM EDTA盐水溶液，用作用于体外制备血细胞的外部洗涤和传输液。所述系统利用磁性细 胞分选(MACS、)，一种分离许多细胞类型的强大工具，以选择性富集或耗竭所感兴趣的细 胞群体。在这种情况下，⑶8+T细胞用连接至超顺磁性颗粒的单克隆抗体标记，然后通过传 经CliniMACS系统来从血液产物中耗竭，所述CliniMACS系统并入有强永磁铁和去除标记 细胞的具有铁磁基体的分离柱。值得注意的是，此试验中的治疗剂，耗竭了 CD8+T细胞的血 细胞来自设备并且不欲含有设备的任何组分。
[0070] 实施例2-短暂棺入供体淋巴细朐诱导临床肿瘤反应
[0071] 迄今为止，只有两种疗法能够延长患有MDS的患者的存活。第一种疗法，即同种异 体BMT实现一些长期治愈，以及疾病进展的延迟。由于年龄、供体可用性和合并症，此疗法 只可适用于小部分受影响患者。第二种疗法是甲基转移酶抑制剂，5-阿扎胞苷。与支持性 护理单独相比，此疗法已被证明可延长中值存活7个月10。一些患有MDS的患者对于免疫 抑制方案有反应，如环孢素、抗胸腺细胞球蛋白（ATG)或类固醇，并且血液计数持续增加。 此结果类似于再生障碍性贫血，其中免疫抑制治疗自身免疫组分导致血细胞减少。以特异 性靶向免疫系统的试剂获得的有利结果表明MDS是对于免疫调节敏感的疾病。ATG、环孢素 和类固醇的益处的一个潜在解释是这些药物通过选择性抑制或杀灭抑制抗肿瘤免疫力的 淋巴细胞来将内源性抗肿瘤免疫反应的活性去屏蔽。存在针对MDS的隐秘、内源性免疫反 应的另外潜在证据发现于我们的非清髓性、部分HLA错配（半相合）同种异体骨髓移植术 试验中，其中尽管移植排斥，但五个患者经历疾病反应。所有五个患者具有骨髓胚细胞百分 比的至少短暂减少，并且各自在移植之前依赖于红细胞+/_小板输注的五个患者中的三个 变得不依赖于输注。表1展示，尽管在BMT之后30天不存在供体细胞植入，五个患者中的 至少三个具有在BMT之后持续至少六个月的髓胚细胞减少。
[0072]表 1
【权利要求】
1. 一种制造同种异体淋巴细胞组合物的方法，其包括： 提供来自相对于接受者为同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所述外周血细胞 组合物包括⑶4+T细胞、⑶8+T细胞和自然杀伤细胞，其中（i)在所述供体抗所述接受者 的方向中，所述供体包括相对于所述接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基 因错配，并且所述HLA II类等位基因错配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、 HLA-DQB1和HLA-DPB1，并且（ii)所述接受者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反应性 的可检测抗体；并且 通过使所述外周血细胞组合物中的CD8+T细胞的数目减少至少一个数量级来从所述 外周血细胞组合物制造所述同种异体淋巴细胞组合物，其中（a)所述同种异体淋巴细胞组 合物中的CD4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约 50%，并且（b)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于所述外 周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件是所述同种异体淋巴细胞组合物的 所述CD4+T细胞未离体活化。
2. 如权利要求1所述的方法，其中如果所述供体和接受者是ABO血型不相容的并且所 述外周血细胞组合物包括一定数目的红细胞，那么制造所述同种异体淋巴细胞组合物还包 括减少所述红细胞数目。
3. 如权利要求2所述的方法，其中红细胞的数目包括小于或等于约50ml压积。
4. 如权利要求1所述的方法，其中所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数 目与所述外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约20%。
5. 如权利要求1所述的方法，其进一步限制条件为从所述供体获得的CD4+T细胞未有 意地扩增或有意地离体分化。
6. 如权利要求1所述的方法，其中减少所述外周血细胞组合物中的所述CD8+T细胞包 括使用与磁性颗粒相关联的抗CD8+抗体或抗CD8+抗体加上补体。
7. 如权利要求1所述的方法，其中所述外周血细胞组合物是全血产物或单采产物。
8. 如权利要求1所述的方法，其中在所述供体抗所述接受者方向上的所述HLA II类等 位基因错配是在HLA-DRB1处的错配。
9. 如权利要求1所述的方法，其中所述提供还包括针对一个或多个选择特征进行筛选 并且对于选自由所述接受者、所述供体和一种或多种潜在同种异体供体组成的组的受试者 来执行所述筛选。
10. 如权利要求9所述的方法，其中针对感染物抗原的血清反应性来筛选选择特征。
11. 如权利要求10所述的方法，其中所述感染物抗原选自由以下组成的组：人免疫缺 陷病毒（HIV)抗原、肝炎病毒抗原和巨细胞病毒抗原。
12. 如权利要求11所述的方法，其中所述感染物抗原是巨细胞病毒抗原，对所述接受 者和所述供体加以筛选，并且在所述接受者或所述供体中没有所述巨细胞病毒抗原的血清 反应性。
13. 如权利要求9所述的方法，其中针对一种以上HLA II类等位基因来筛选选择特征。
14. 如权利要求13所述的方法，其中基于最大化在所述一种以上HLA II类等位基因 处、在所述潜在同种异体供体抗所述接受者方向上、所述潜在同种异体供体与所述接受者 之间的错配来选择潜在同种异体供体，并且将所述潜在同种异体供体选为所述供体。
15. 如权利要求9所述的方法，其中针对一个或多个HLA I类等位基因来筛选选择特 征。
16. 如权利要求15所述的方法，其中基于最小化所述一种以上HLA I类等位基因处、所 述潜在同种异体供体与所述接受者之间的错配来选择潜在同种异体供体，并且将所述潜在 同种异体供体选为所述供体。
17. -种通过如权利要求1所述的方法获得的用于施用至人接受者的同种异体淋巴细 胞组合物。
18. -种同种异体人淋巴细胞组合物，其包括： 来自供体的外周血细胞组合物的CD4+T细胞和自然杀伤细胞，其中（i)在所述供体 抗所述接受者的方向中，所述供体包括相对于所述接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因错配，并且所述HLA II类等位基因错配是在选自由以下组成的组的基因处： HLA-DRBUHLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)所述接受者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反 应性的可检测抗体，（iii)所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与所述外 周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（iv)基于以公斤（kg)为单位 的所述接受者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（v)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于 或等于所述外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)所述同种异体淋巴细 胞组合物具有比所述外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞； 其限制条件是所述同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
19. 如权利要求18所述的淋巴细胞组合物，其中所述外周血细胞组合物包括一定数目 的红细胞并且红细胞的数目包括小于或等于约50ml压积。
20. 如权利要求18所述的淋巴细胞组合物，其进一步限制条件为从所述供体获得的 CD4+T细胞未有意地扩增或有意地离体分化。
21. 如权利要求18所述的淋巴细胞组合物，其中所述外周血细胞组合物是全血产物或 单采产物。
22. 如权利要求18所述的淋巴细胞组合物，其中所述HLA II类等位基因错配是选 自由以下组成的组的两个或更多个HLA II类等位基因的错配：HLA-DRB1、HLA-DPB1和 HLA-DQB1。
23. 如权利要求18所述的淋巴细胞组合物，其中在所述供体抗所述接受者方向上的所 述HLA II类等位基因错配是在HLA-DRB1处的错配。
24. -种治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括： 向所述受试者施用淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法以诱导所述受试者的短 暂淋巴细胞减少；并且 随后向所述受试者施用从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的第一同种异体 淋巴细胞组合物，所述第一同种异体淋巴细胞组合物包括来自所述供体的外周血细胞组合 物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在所述供体抗所述受试 者的方向中，所述供体包括相对于所述受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基 因错配，并且所述HLA II类等位基因错配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、 HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)所述受试者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反应性的可 检测抗体，（iii)所述第一同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与所述外周血 细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（iv)基于以公斤（kg)为单位的 所述受试者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个 CD4+T细胞/kg之间，（v)所述第一同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于 或等于所述外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vi)所述第一同种异体淋 巴细胞组合物具有比所述外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞，其限制条件 是所述第一同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
25. 如权利要求24所述的方法，其中所述淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法 包括用选自由以下组成的组的一种或多种细胞减少性试剂来治疗所述受试者：烷化剂、烷 基磺酸盐、亚硝基脲、三氮烯、抗代谢物、嘧啶类似物、嘌呤类似物、长春花生物碱、表鬼臼毒 素、抗生素、二溴甘露醇、脱氧精胍菌素、二甲基马利兰和塞替派。
26. 如权利要求25所述的方法，其中所述淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法包 括用烷化剂治疗所述受试者并且所述烷化剂是环磷酰胺。
27. 如权利要求24所述的方法，其中在将所述第一同种异体淋巴细胞组合物施用至所 述受试者之后，所述方法还包括将抗肿瘤单克隆抗体或抗肿瘤单克隆抗体/药物缀合物施 用至所述受试者。
28. 如权利要求27所述的方法，其中所述方法还包括施用所述抗肿瘤单克隆抗体并且 所述抗肿瘤单克隆抗体选自由以下组成的组：利妥昔单抗、西妥昔单抗、曲妥珠单抗和培妥 珠单抗。
29. 如权利要求27所述的方法，其中所述方法还包括施用所述抗肿瘤单克隆抗体/药 物缀合物并且所述抗肿瘤单克隆抗体/药物缀合物选自由以下组成的组：布妥昔单抗维多 汀、吉妥珠单抗奥佐米星、曲妥珠单抗艾美坦辛、伊妥珠单抗奥佐米星、格雷帕珠单抗维多 汀、罗佛珠单抗莫登素、坎妥珠单抗莫登素和米拉珠单抗-多柔比星。
30. 如权利要求24所述的方法，其中在将所述第一同种异体淋巴细胞组合物施用至所 述受试者之后，所述方法还包括将化学治疗剂施用至所述受试者。
31. 如权利要求30所述的方法，其中所述化学治疗剂选自由以下组成的组：达沙替尼、 尼罗替尼、帕纳替尼、伊马替尼、拉帕替尼和维莫德吉。
32. 如权利要求24所述的方法，其中在将所述第一同种异体淋巴细胞组合物施用至所 述受试者之后，所述方法还包括将单克隆抗体/CD4+T细胞表位缀合物施用至所述受试者。
33. 如权利要求24所述的方法，其中在将所述第一同种异体淋巴细胞组合物施用至所 述受试者之后，所述方法还包括 向所述受试者施用连续淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法以诱导所述受试者 的短暂淋巴细胞减少；并且 随后向所述受试者施用从另外人同种异体供体的另外外周血细胞组合物获得的连续 同种异体淋巴细胞组合物，所述连续同种异体淋巴细胞组合物包括来自所述另外供体的另 外外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)在所 述另外供体抗所述受试者的方向中，所述另外供体包括相对于所述受试者的至少一个人白 细胞抗原（HLA) II类等位基因错配，并且所述HLA II类等位基因错配是在选自由以下组 成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（ii)所述受试者不具有对所述另外 供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iii)所述连续同种异体淋巴细胞组合物中 的CD4+T细胞的数目与所述另外外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约 50%，（iv)基于以公斤（kg)为单位的所述受试者理想体重的另外供体CD4+T细胞的数目 在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（v)所述连续同种异体淋 巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于所述另外外周血细胞组合物中的自然 杀伤细胞的数目，并且（vi)所述连续同种异体淋巴细胞组合物具有比所述另外外周血细 胞组合物少至少一个数量级的⑶8+T细胞。
34. 如权利要求33所述的方法，其限制条件是所述连续同种异体淋巴细胞组合物的 ⑶4+T细胞未离体活化。
35. 如权利要求24所述的方法，其中在将所述第一同种异体淋巴细胞组合物施用至所 述受试者之后，所述方法还包括施用阻断T细胞中的负信号转导的试剂。
36. 如权利要求35所述的方法，其中所述阻断T细胞中的负信号转导的试剂选自由以 下组成的组：抗ro-i抗体、伊匹木单抗、抗ro-L2抗体和ro-i融合蛋白质。
37. 如权利要求24所述的方法，其中所述疾病或病状选自由以下组成的组：癌症、自身 免疫病症、器官移植、同种异体移植物排斥和病毒感染。
38. 如权利要求37所述的方法，其中所述疾病或病状是癌症并且所述癌症是骨髓增生 异常综合征。
39. -种制造用于施用至人接受者的同种异体淋巴细胞组合物的方法，其包括： 提供来自相对于所述接受者为同种异体的人供体的外周血细胞组合物，所述外周血细 胞组合物包括一定数目的⑶4+T细胞、一定数目的⑶8+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞， 其中（i)所述供体具有相对于存在于所述接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii) 所述供体包括相对于所述接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且 所述HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和 HLA-DPB1，并且（iii)所述接受者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗 体；并且 通过使所述外周血细胞组合物中的CD8+T细胞的数目减少至少一个数量级来从所述 外周血细胞组合物制造所述同种异体淋巴细胞组合物，其中（a)所述同种异体淋巴细胞组 合物中的CD4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约 50%，并且（b)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于所述外 周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，其限制条件是所述同种异体淋巴细胞组合物的 ⑶4+T细胞未离体活化。
40. 如权利要求39所述的方法，其中所述HLA II类等位基因匹配包括HLA-DRB1处的 匹配。
41. 如权利要求39所述的方法，其中所述HLA II类等位基因匹配包括HLA-DRB1、 HLA-DQB1 和 HLA-DPB1 处的匹配。
42. 如权利要求39所述的方法，其中如果所述供体和接受者是ABO血型不相容的并且 所述外周血细胞组合物包括一定数目的红细胞，那么制造所述同种异体淋巴细胞组合物还 包括减少所述红细胞数目。
43. 如权利要求42所述的方法，其中所述红细胞的数目包括小于或等于约50ml压积。
44. 如权利要求39所述的方法，其中存在于所述接受者中的抗原选自由以下组成的 组：赘生性抗原、赘生性独特型、病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原和非人类动物 抗原。
45. 如权利要求44所述的方法，其中所述抗原是赘生性抗原并且所述赘生性抗原是肿 瘤抗原。
46. 如权利要求39所述的方法，其中所述提供还包括针对一个或多个选择特征进行筛 选并且对于选自由所述接受者、所述供体和一种或多种潜在同种异体供体组成的组的受试 者来执行所述筛选。
47. 如权利要求46所述的方法，其中针对感染物的血清反应性来筛选选择特征。
48. 如权利要求47所述的方法，其中所述感染物抗原选自由以下组成的组：人免疫缺 陷病毒（HIV)抗原、肝炎病毒抗原和巨细胞病毒抗原。
49. 如权利要求48所述的方法，其中所述感染物抗原是巨细胞病毒抗原，对所述接受 者和所述供体加以筛选，并且在所述接受者或所述供体中没有所述巨细胞病毒抗原的血清 反应性。
50. 如权利要求46所述的方法，其中选择特征是针对一种以上HLA II类等位基因来筛 选一种或多种潜在同种异体供体。
51. 如权利要求50所述的方法，其中潜在同种异体供体基于最小化所述一种以上HLA II类等位基因处、所述潜在同种异体供体与所述接受者之间的错配来选自所述一种或多种 潜在同种异体供体，并且将所述潜在同种异体供体选为所述供体。
52. 如权利要求46所述的方法，其中选择特征是针对一种或多种HLA I类等位基因来 筛选一种或多种潜在同种异体供体。
53. 如权利要求52所述的方法，其中潜在同种异体供体基于最小化所述一种或多种 HLA I类等位基因处、所述潜在同种异体供体与所述接受者之间的错配来选自所述一个或 多个潜在同种异体供体，并且将所述潜在同种异体供体选为所述供体。
54. 如权利要求39所述的方法，其中所述供体针对存在于所述接受者中的所述抗原进 行了免疫接种。
55. 如权利要求39所述的方法，其中所述供体具有针对存在于所述接受者中的所述抗 原的预先存在的CD4+T细胞免疫力。
56. 如权利要求39所述的方法，其中所述供体对其具有免疫力的存在于所述接受者中 的所述抗原是病毒抗原并且所述病毒抗原选自由以下组成的组：人乳头状瘤病毒抗原、爱 泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝 炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。
57. 如权利要求56所述的方法，其中所述病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原并且所述人 乳头状瘤病毒抗原是E6或E7抗原性肽。
58. 如权利要求39所述的方法，其中所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的 数目与所述外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约20%。
59. 如权利要求39所述的方法，其进一步限制条件为从所述供体获得的CD4+T细胞未 有意地扩增或有意地离体分化。
60. 如权利要求39所述的方法，其中减少所述外周血细胞组合物中的所述CD8+T细胞 包括使用与磁性颗粒相关联的抗CD8+抗体或抗CD8+抗体加上补体。
61. 如权利要求39所述的方法，其中所述外周血细胞组合物是全血产物或单采产物。
62. 如权利要求39所述的方法，其中存在于所述接受者中的所述抗原由于将包含所述 抗原的纳米颗粒引入所述接受者中而存在于所述接受者体内，其中在引入所述纳米颗粒之 前，所述抗原不存在于所述接受者体内。
63. -种通过如权利要求39所述的方法获得的用于施用至人接受者的同种异体淋巴 细胞组合物。
64. -种用于施用至人接受者的从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异 体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括： 来自所述供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤 细胞，其中（i)所述供体具有相对于存在于所述接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力， (ii)所述供体包括相对于所述接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配 并且所述HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1 和HLA-DPB1，（iii)所述接受者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗 体，（iv)所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中 的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的所述接受者理想体 重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之 间，（vi)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于所述外周血细 胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)所述同种异体淋巴细胞组合物具有比所述 外周血细胞组合物少至少一个数量级的⑶8+T细胞； 其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
65. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中存在于所述接受者中的抗原选自由以 下组成的组：赘生性抗原、赘生性独特型、病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原和寄生虫抗原。
66. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述抗原是赘生性抗原并且所述赘生 性抗原是肿瘤抗原。
67. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述供体对其具有免疫力的存在于所 述接受者中的所述抗原是病毒抗原并且所述病毒抗原选自由以下组成的组：人乳头状瘤病 毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱疹病毒（KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗 原、乙型肝炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。
68. 如权利要求67所述的淋巴细胞组合物，其中所述病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原 并且所述人乳头状瘤病毒抗原是E6或E7抗原性肽。
69. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中如果所述供体和接受者是ABO血型不 相容的并且所述外周血细胞组合物包括一定数目的红细胞，那么制造所述同种异体淋巴细 胞组合物还包括减少所述红细胞数目。
70. 如权利要求69所述的淋巴细胞组合物，其中所述红细胞的数目包括小于或等于约 50ml压积。
71. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述HLA II类等位基因匹配包括 HLA-DRB1处的匹配。
72. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述HLA II类等位基因匹配包括 HLA-DRB1、HLA-DQB1 和 HLA-DPB1 处的匹配。
73. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述同种异体淋巴细胞组合物没有对 于巨细胞病毒抗原的免疫反应性。
74. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述同种异体淋巴细胞组合物中的 ⑶4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约20%。
75. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其进一步限制条件为从所述供体获得的 CD4+T细胞未有意地扩增或有意地离体分化。
76. 如权利要求64所述的淋巴细胞组合物，其中所述外周血细胞组合物是全血产物或 单采产物。
77. -种用于施用至人接受者的从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异 体淋巴细胞组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括： 来自所述供体的外周血细胞组合物的一定数目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤 细胞，其中（i)所述供体具有相对于存在于所述接受者体内的抗原的CD4+T细胞免疫力， (ii)所述供体包括相对于所述接受者的至少一个人白细胞抗原（HLA)II类等位基因匹配 并且所述HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处：HLA-DRBUHLA-DQB1 和HLA-DPB1，（iii)所述接受者不具有对所述供体的人白细胞抗原有反应性的可检测抗 体，（iv)所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中 的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的所述接受者理想体 重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个⑶4+T细胞/kg之 间，（vi)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或等于所述外周血细 胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)所述同种异体淋巴细胞组合物具有比所述 外周血细胞组合物少至少一个数量级的⑶8+T细胞； 其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
78. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中所述抗原选自由以下组成的组：赘生 性抗原、病毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原和非人类动物抗原。
79. 如权利要求78所述的淋巴细胞组合物，其中所述抗原是非人类动物抗原并且所述 非人类动物抗原是匙孔血蓝蛋白抗原。
80. 如权利要求78所述的淋巴细胞组合物，其中所述抗原是病毒抗原并且所述病毒抗 原选自由以下组成的组：人乳头状瘤病毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱 疹病毒（KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗原和流感抗 原。
81. 如权利要求80所述的淋巴细胞组合物，其中所述病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原 并且所述人乳头状瘤病毒抗原是E6或E7抗原性肽。
82. 如权利要求80所述的淋巴细胞组合物，其中所述病毒抗原是流感抗原并且所述流 感抗原是血凝素抗原或神经氨酸酶抗原。
83. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中如果所述供体和接受者是ABO血型不 相容的并且所述外周血细胞组合物包括一定数目的红细胞，那么制造所述同种异体淋巴细 胞组合物还包括减少所述红细胞数目。
84. 如权利要求83所述的淋巴细胞组合物，其中所述红细胞的数目包括小于或等于约 50ml压积。
85. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中所述HLA II类等位基因匹配包括 HLA-DRB1处的匹配。
86. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中所述HLA II类等位基因匹配包括 HLA-DRB1、HLA-DQB1 和 HLA-DPB1 处的匹配。
87. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中所述同种异体淋巴细胞组合物没有对 于巨细胞病毒抗原的免疫反应性。
88. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中所述同种异体淋巴细胞组合物中的 ⑶4+T细胞的数目与所述外周血细胞组合物中的⑶4+T细胞的数目的差异小于约20%。
89. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其进一步限制条件为从所述供体获得的 CD4+T细胞未有意地扩增或有意地离体分化。
90. 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物,其中所述外周血细胞组合物是全血产物或 单采产物。
91. 一种用于治疗受试者的疾病或病状的试剂盒，所述试剂盒包括： 如权利要求77所述的淋巴细胞组合物，其中受试者是人接受者；并且 纳米颗粒组合物，其包括包含不存在于所述人接受者体内的抗原的纳米颗粒。
92. 如权利要求91所述的试剂盒，其中所述纳米颗粒还包括细胞因子。
93. 如权利要求92所述的试剂盒，其中所述细胞因子是白介素或干扰素。
94. 如权利要求93所述的试剂盒，其中所述细胞因子是白介素并且选自由以下组成的 组：IL-2、IL-7、IL-12 和 IL-15。
95. 如权利要求93所述的试剂盒，其中所述细胞因子是干扰素并且选自由以下组成的 组：干扰素 Y、干扰素0、干扰素 a、干扰素、t、干扰素 Q和复合干扰素。
96. 如权利要求91所述的试剂盒，其中所述纳米颗粒还包括选自由以下组成的组的化 合物：趋化因子、成像剂、光天线分子、热天线分子和Toll样受体配体。
97. 如权利要求91所述的试剂盒，其中所述纳米颗粒还包括将所述纳米颗粒靶向输送 至肿瘤细胞或抗原呈递细胞的试剂。
98. -种治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括： 向所述受试者施用从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞 组合物， 所述同种异体淋巴细胞组合物包括来自所述供体的外周血细胞组合物的一定数目的 CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)所述供体具有相对于存在于所述受试者 体内的抗原的CD4+T细胞免疫力，（ii)所述供体包括相对于所述受试者的至少一个人白细 胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且所述HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的 组的基因处：HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)所述受试者不具有对所述供体的人 白细胞抗原有反应性的可检测抗体，（iv)所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的 数目与所述外周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤 (kg)为单位的所述受试者理想体重的供体CD4+T细胞的数目在约1X105个CD4+T细胞/kg 与约1X109个⑶4+T细胞/kg之间，（vi)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞 的数目小于或等于所述外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)所述同种 异体淋巴细胞组合物具有比所述外周血细胞组合物少至少一个数量级的⑶8+T细胞； 其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
99. 如权利要求98所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组合 物之前，所述方法还包括向所述受试者施用淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法以诱 导所述受试者的短暂淋巴细胞减少
100. 如权利要求98所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭或抑制髓源性抑制细胞的疗法。
101. 如权利要求100所述的方法，其中所述耗竭或抑制髓源性抑制细胞的疗法包括施 用选自由以下组成的组的药物：达沙替尼、5-氟尿嘧啶、泰索帝、氯膦酸盐和吉西他滨。
102. 如权利要求98所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭或抑制肿瘤相关巨噬细胞的疗法。
103. 如权利要求98所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭调控性T细胞的疗法。
104. 如权利要求103所述的方法，其中耗竭调控性T细胞的疗法可包括施用选自由以 下组成的组的药物：环磷酰胺、地尼白介素融合毒素和达利珠单抗。
105. 如权利要求98所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之后，所述方法还包括施用药物以诱导同种异体反应性T细胞的选择性耗竭。
106. 如权利要求98所述的方法，其中所述抗原选自由以下组成的组：赘生性抗原、病 毒抗原、细菌抗原、真菌抗原和寄生虫抗原。
107. 如权利要求106所述的方法，其中所述抗原是病毒抗原并且所述病毒抗原选自 由以下组成的组：人乳头状瘤病毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱疹病毒 (KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。
108. 如权利要求107所述的方法，其中所述病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原并且所述 人乳头状瘤病毒抗原是E6或E7抗原性肽。
109. 如权利要求107所述的方法，其中所述病毒抗原是人乳头状瘤病毒抗原并且所述 疾病或病状是癌症并且所述癌症选自由以下组成的组：宫颈癌、外阴癌、阴道癌、阴茎癌、肛 门癌和口咽癌。
110. -种治疗人受试者的疾病或病状的方法，其包括： 向肿瘤中注入纳米颗粒组合物，其中所述纳米颗粒组合物包括包含不存在于所述受试 者体内的抗原的纳米颗粒，由此将所述抗原引入所述受试者体内； 向所述受试者施用从人同种异体供体的外周血细胞组合物获得的同种异体淋巴细胞 组合物，所述同种异体淋巴细胞组合物包括来自所述供体的外周血细胞组合物的一定数 目的CD4+T细胞和一定数目的自然杀伤细胞，其中（i)所述供体具有相对于所述抗原的 CD4+T细胞免疫力，（ii)所述供体包括相对于所述受试者的至少一个人白细胞抗原（HLA) II类等位基因匹配并且所述HLA II类等位基因匹配是在选自由以下组成的组的基因处： HLA-DRB1、HLA-DQB1和HLA-DPB1，（iii)所述受试者不具有对所述供体的人白细胞抗原有 反应性的可检测抗体，（iv)所述同种异体淋巴细胞组合物中的CD4+T细胞的数目与所述外 周血细胞组合物中的CD4+T细胞的数目的差异小于约50%，（v)基于以公斤（kg)为单位的 所述受试者理想体重的供体⑶4+T细胞的数目在约1X105个⑶4+T细胞/kg与约1X109个 CD4+T细胞/kg之间，（vi)所述同种异体淋巴细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目小于或 等于所述外周血细胞组合物中的自然杀伤细胞的数目，并且（vii)所述同种异体淋巴细胞 组合物具有比所述外周血细胞组合物少至少一个数量级的CD8+T细胞； 其限制条件是同种异体淋巴细胞组合物的CD4+T细胞未离体活化。
111. 如权利要求110所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括向所述受试者施用淋巴细胞减少性非致淋巴细胞衰竭的疗法以 诱导所述受试者的短暂淋巴细胞减少。
112. 如权利要求110所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭或抑制髓源性抑制细胞的疗法。
113. 如权利要求112所述的方法，其中所述耗竭或抑制髓源性抑制细胞的疗法包括施 用选自由以下组成的组的药物：达沙替尼、5-氟尿嘧啶、泰索帝、氯膦酸盐和吉西他滨。
114. 如权利要求110所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭或抑制肿瘤相关巨噬细胞的疗法。
115. 如权利要求110所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之前，所述方法还包括施用耗竭调控性T细胞的疗法。
116. 如权利要求115所述的方法，其中耗竭调控性T细胞的疗法可包括施用选自由以 下组成的组的药物：环磷酰胺、地尼白介素融合毒素和达利珠单抗。
117. 如权利要求110所述的方法，其中在向所述受试者施用所述同种异体淋巴细胞组 合物之后，所述方法还包括施用药物以诱导同种异体反应性T细胞的选择性耗竭。
118. 如权利要求110所述的方法，其中所述抗原选自由以下组成的组：赘生性抗原、病 毒抗原、细菌抗原、真菌抗原、寄生虫抗原和非人类动物抗原。
119. 如权利要求118所述的方法，其中所述抗原是非人类动物抗原并且所述非人类动 物抗原是匙孔血蓝蛋白抗原。
120. 如权利要求118所述的方法，其中所述抗原是病毒抗原并且所述病毒抗原选自 由以下组成的组：人乳头状瘤病毒抗原、爱泼斯坦巴尔病毒抗原、卡波济肉瘤相关疱疹病毒 (KSHV)抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原和丙型肝炎病毒抗原。
121. 如权利要求120所述的方法，其中所述病毒抗原是流感抗原并且所述流感抗原是 血凝素抗原或神经氨酸酶抗原。
122. 如权利要求110所述的方法，其中所述纳米颗粒还包括细胞因子。
123. 如权利要求122所述的方法，其中所述细胞因子是白介素或干扰素。
124. 如权利要求123所述的方法，其中所述细胞因子是白介素并且选自由以下组成的 组：IL-2、IL-7、IL-12 和 IL-15。
125. 如权利要求123所述的方法，其中所述细胞因子是干扰素并且选自由以下组成的 组：干扰素 Y、干扰素0、干扰素 a、干扰素、t、干扰素 Q和复合干扰素。
126. 如权利要求110所述的方法，其中所述纳米颗粒还包括选自由以下组成的组的化 合物：趋化因子、成像剂、光天线分子、热天线分子和Toll样受体配体。
127. 如权利要求110所述的方法，其中所述纳米颗粒还包括将所述纳米颗粒靶向输送 至肿瘤细胞或抗原呈递细胞的试剂。
128. 如权利要求110所述的方法，其中在从所述供体获得所述外周血细胞组合物之 前，所述供体针对所述抗原进行了免疫接种。
129.如权利要求110所述的方法，其中所述疾病或病状选自由以下组成的组：肺癌肿 瘤、乳腺癌肿瘤、前列腺癌肿瘤、脑癌肿瘤和皮肤癌肿瘤。
【文档编号】C12N5/078GK104394877SQ201380030373
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2013年3月15日 优先权日:2012年5月8日
【发明者】E·J·福克斯, H·J·西蒙斯, L·思文 申请人:约翰·霍普金斯大学