本发明涉及能够以提高的效率提取包含于木通种子的有效成分的提取方法及利用其的功能性食品。
背景技术：
：现代人因污染的大气质量及西方化的饮食、饮酒、压力、不规则的食事等原因受到如癌症、免疫力弱化、成人病、胃肠疾病、高血压、糖尿病、心血管疾病、疲劳累积等受到多种疾病的困扰。由此，随着对胃疾病的预防、治疗的关心提高，用于此的健康功能食品的需要增加。尤其，最近不仅对维生素、矿物质制剂的关心增加，而且对长时间服用也无副作用的加工天然物质的食品或对利用天然物质提取物的健康功能食品的关心更加增加。在这种健康功能食品的有效成分中，特别受到瞩目的是皂苷(saponin)。皂苷作为分布于植物界的三萜或类固醇类配糖体的总称，是具有产生泡沫的特性的天然表面活性物质。众所周知，通常皂苷为人参、红参的有效成分，但是还存在于大豆、大葱、沙参、桔梗、水芹菜、大蒜、洋葱、葛等很多植物，还在木通种子中大量含有。众所周知，皂苷(saponin)起到减少胆固醇，并且增加免疫力的功能，并呈现多种药理活性效果，如心血管疾病的预防及治疗、免疫力增强作用、抗癌作用、炎症缓和、糖尿抑制、动脉硬化及高血压的预防、肝功能促进、疲劳恢复、抗氧化作用、抗炎活性、免疫增强作用等。木通作为属于双子叶植物纲毛茛目木通科木通属的蔓目，分布于在韩国全部地区、日本、中国等。学名为akebiaquinata，还被称为林下婦人、木通及通草，木通果实还被称为燕覆子。主要栖息于山谷或山沟，盘藤于相邻的树木或依靠岩石生长。由于叶子和果实的形状特异，因此还用作造景用，根、茎及果实均可食用。9月或10月结果，果肉为弯曲的椭圆形，长度为6㎝至10㎝左右，具有非常厚的皮子。在完全成熟的情况下，果实的皮儿破开，从而具有漏出熟透的瓤和黑色种子的特性。作为茎和根，秋天进行采集，来在阴凉处晒干后，煮茶喝，作为果实，秋天采集成熟的果实来生用或在阴凉处晒干后，煮茶喝。并且，作为嫩叶，通过焯嫩叶来当野菜吃，成熟的果实可作为水果吃。在韩医学上，木通的茎和根还用作药材，众所周知，具有利尿作用、抗菌作用及抗炎作用。在木通果实含有如皂苷、齐墩果酸(oleanolicacid)等有效成分，尤其，与茎、根相比，皂苷在种子中含有得多。在韩国授权专利10-0573375中公开了，还利用木通种子提取物来提供具有抗癌活性的组合物，但是在上述中存在未充分地利用木通种子中含有的皂苷的问题。并且，当前在木通的茎和根的情况下，受到韩医学的影响活跃地进行用于利用茎和根的研究，在木通果实的情况下，与木通的茎或根相比有研究不足的实际情况。对此，本申请人通过多种研究提高木通种子的皂苷提取效率，从而达到利用其的功能性食品的开发。现有技术文献专利文献韩国授权专利10-0573375技术实现要素：本发明的目的在于，提供提高皂苷提取效率的木通种子提取物的制备方法。本发明的另一目的在于，提供利用皂苷含量高来得到功能性更加提高的、木通提取物的食品。本发明的木通提取物的制备方法可包括：步骤a)，对包含木通种子及木通果肉的原料进行熟成的步骤；以及步骤b)，利用乙醇提取液，从熟成的上述原料提取含有皂苷作为有效成分的提取物。相对于1重量份的木通种子，上述原料可包含0.5重量份至5重量份的木通果肉。在上述熟成步骤中，温度可以为20℃至60℃。相对于1重量份的木通种子，上述原料包含0.05重量份至0.2重量份的生姜。上述原料还可包含选自由人参、山参、桔梗、沙参、葛及山药组成的组中的一种或两种以上的添加物。更详细地，在本发明的提取中上述步骤b)可包括：步骤b1)，向步骤a)中熟成的原料添加乙醇提取液，来照射超声波；以及步骤b2)，对上述步骤b1)的生成物进行离心分离后，回收上清液来制备提取物。并且，在上述步骤b2)中，可将去除上清液的残留物用作上述步骤a)的原料，来将上述步骤b1)及步骤b2)反复2次以上。在上述步骤b1)中，可照射超声波20分钟至60分钟。并且，可提供利用根据本发明的方法制备而成的提取物的功能性食品。本发明的木通提取方法具有利用木通的果肉提高木通种子的皂苷提取效率的优点，并具有利用生姜更加提高木通种子的皂苷提取效率的优点。并且，由此具有可提供功能性提高的健康功能食品的优点。具体实施方式以下，通过实施例更详细说明本发明。只是，以下实施例及制备例用于例示本发明，本发明并不限定于以下实施例及制备例。并且，在本发明中使用的术语在本发明中无特别的其他定义的情况下，将本发明所属
技术领域：
的普通技术人员的知识水平为基准，并省略与使本发明的本质变得模糊的公知技术相关的说明。本发明的“木通”是指学名为akebiaquinata，木通果实、果肉、果皮及种子是指在收获期采集成熟的木通果实、果肉、果皮及种子。本申请人为了提高提取在木通种子中含有的皂苷的提取效率，长时间进行研究，其结果，发现如下：在对几乎不含有皂苷的木通果肉和木通种子一同进行熟成来提取的情况下，木通种子的皂苷提取效率显著提高。进而，对木通种子和木通果肉一同进行熟成，来制备提取物的情况下，提高了如枯萎的减少、清凉感减少等官能度。本发明的木通提取物的制备方法可包括：步骤a)，对包含木通种子及木通果肉的原料进行熟成的步骤；以及步骤b)，添加乙醇提取液，来从熟成的上述原料提取含有皂苷作为有效成分的提取物。如上所述，众所周知，在木通的种子、果皮、皮儿、果肉等中，在木通的种子中存在皂苷，在其他部分皂苷含量几乎甚微。由此，通常当提取在木通含有的皂苷时，将木通种子作为对象进行提取。但是，在利用木通的种子提取皂苷的情况下，对其提取效率具有局限性，从而即使在木通种子中含有大量的皂苷，也因低的提取效率，导致未能充分的利用在木通种子中含有的皂苷而扔掉的问题。如上所述，本申请人为了提高木通种子中含有的皂苷的提取效率，进行长时间的研究，其结果，虽然在木通果肉中几乎不存在皂苷，但是在木通种子中添加木通果肉来进行熟成的情况下，可显著地提高在木通种子中含有的皂苷的提取效率。实际上，在木通种子中添加木通果肉，并进行熟成后提取的情况下，与只是对木通种子进行熟成，来提取的情况相比，可实现最高提取效率达到170％的提高。还未明确查明对这种现象的原因，但是如下进行推测：木通果肉的规定的成分破坏木通种子的细胞膜，来提高皂苷的提取效率。本发明的木通种子或木通果肉可以为干燥粉末、经粉碎的木通种子或木通果肉、或切成片的木通种子或木通果肉，但并不限定与此。并且，本发明的木通的提取可利用混合木通种子及果肉或木通果实本身。根据本发明的一实施例，相对于1重量份的木通种子，上述原料可包含0.5重量份至5重量份的木通果肉，优选地，可包含0.7重量份至2重量份，更优选地，可包含0.9重量份至1.5重量份。优选地，为了呈现皂苷的提取效率的提高，相对于1重量份的木通种子可添加0.5重量份以上的木通果肉，在添加过多的果肉的情况下，不再提高木通种子的提取效率，有可能妨碍提取，因此，优选地，相对于1重量份的木通种子，添加小于5重量份的果肉。并且，本发明的上述原料作为用于在木通种子、木通果肉中提高提取效率的添加剂还可包含生姜。为了进一步提高木通种子的皂苷提取效率，添加多种添加剂，以添加剂对木通种子的提取效率产生的影响进行检讨，其结果，发现如下：添加生姜来进行熟成及提取的情况下，竟然还进一步提高木通种子的皂苷提取效率。如上所述，将木通果肉与木通种子一同进行熟成及提取，从而与仅利用木通种子的情况相比，可实现提取效率达到170％的的提高，进而，与木通种子一同还添加生姜进行熟成的情况下，与仅对木通种子及木通果肉进行提取的情况相比，可实现最大达到120％的提取效率的提高。即，在原料含有木通果肉、木通种子及生姜的情况下，与仅使用木通种子的情况相比，可实现最大提取效率达到200％的提高。还未明确查明对这种现象的原因，但是如下进行推测：木通果肉的规定的成分破坏木通种子的细胞膜，来提高皂苷的提取效率。作为原料包含的生姜可以为干燥粉末、生姜片、生姜汁等，但并不限定与此。根据本发明的一实施例，相对于1重量份的木通种子，上述原料可包含0.05重量份至0.2重量份的生姜，优选地，可包含0.07重量份至0.13重量份，更优选地，可包含0.08重量份至0.12重量份。为了呈现木通种子的皂苷的提取效率的提高，相对于1重量份的木通种子可添加0.05重量份以上的木通生姜，在添加过多的生姜的情况下，不再提高提取效率，反而有可能妨碍提取，因此，优选地，添加0.2重量份以下。并且，在本发明的熟成步骤中，熟成温度可以为20℃至60℃，优选地，可以为30℃至50℃，更优选地，可以为35℃至45℃。在包含木通的原料的熟成温度为40℃的情况下，与在小于20℃下进行熟成的情况相比，可实现提取效率达到200％以上的提高。通过上述，可知木通果肉或生姜对木通种子产生的作用受到根据温度的显著影响。本发明的熟成可在原料的2倍重量至10倍重量的纯化水中进行，但是并不限定于此。并且本发明的乙醇提取液是指由c1至c4的乙醇或50重量百分比至95重量百分比的c1至c4的乙醇和作为其他部分的水形成的溶液。优选地，是指由50重量百分比至95重量百分比的乙醇或甲醇和作为其他部分的由水形成的溶液，更优选地，可以是由70重量百分比至90重量百分比的乙醇和作为其他部分的水形成的溶液。在本发明名的另一实施例的木通的提取中，上述步骤b)可以为步骤b1)，向步骤a)的熟成的原料添加乙醇提取液后，照射超声波；以及步骤b2)，对上述步骤b1)的生成物进行离心分离后，回收上清液来制备提取液。可将步骤b2)的去除上清液的残留物用作上部步骤b1的原料，来添加乙醇提取液后，将上述步骤b1)及步骤b2)反复2次以上。优选地，可反复2次。为了提高木通种子的皂苷提取效率，进行更多的研究，其结果，作为用于提高提取效率的方法，当进行利用提取液的提取时，在照射超声波的情况下，木通种子的提取效率得到提高。通常，当进行利用超声波的植物的提取时，超声波的照射进行3小时至72小时。但是本发明的超声波照射为20分钟至60分钟，优选地，是30分钟至50分钟时更有效。具体地，当提取木通种子时，在照射超声波的情况下，与未照射超声波的情况下相比，实现最大330％的效率提高。更详细地，在将超声波照射20分钟的情况下，实现最大270％的提取效率，在照射40分钟的情况下，实现310％的提取效率的提高，在照射60分钟的情况下，实现330％的提取效率的提高。通过上述可知超声波的照射时间对木通种子的皂苷提取效率产生显著的影响。在照射小于10分钟的超声波的情况下，不能呈现皂苷提取效率的提高，在照射60分钟以上的超声波的情况下，可产生破坏提取物的其他有效成分的问题。并且，基于本发明的一实施例的超声波可以为10khz至50khz。在超声波小于10khz的情况下，未呈现提取效率的提高效果，在大于50khz的情况下，存在破坏提取物内其他有效成分的可能性。进而，在离心分离后去除上清液的残留物中，再次添加乙醇提取液来提取的情况下，具有可利用存在于残留物中扔掉的皂苷的优点。并且，本发明的木通提取物的有效成分为皂苷d“saponind”，具体地，使以下化学式1的“白头翁皂苷d(pulsatillasaponind)”。化学式1：在本发明一实施例的木通的提取中，追加地，还包含其他植物来进行熟成后可进行提取。具体地，可包含选自由人参、山参、桔梗、沙参、葛及山药组成的组中的一种或两种以上。在还添加如人参、山参、桔梗、沙参、葛、山药等植物，来进行熟成后提取的情况下，可与木通提取物一同摄取上述植物具有的有效成分，从而可实现制备功能性更加得到提高的食品。本发明的木通的提取物可摄取提取物本身或进行颗粒化、胶囊化来摄取或可用作其他食品的添加物，在作为其他食品的添加物使用的情况下，可根据通常的方法适当地使用。在将木通的提取物用作添加物的情况下，在食品中可添加0.01重量百分比至50重量百分比的木通提取物，但是可根据使用目的适当地调节添加量。本发明的添加木通提取物的食品并不特别受到限制，作为具体例，有肉类、香肠、火腿、其他加工肉、巧克力、糖类、快餐类、饼干类、面包、比萨、方便面、其他面类、口香糖类、包括冰淇淋类的乳制品、饮料、茶、清凉剂、酒精饮料及维生素复合剂等。本发明的健康功能食品中的饮料与通常的饮料相同，可含有各种香味剂或天然碳水化合物等作为追加成分。天然碳水化合物可以为如下：单糖，如葡萄糖、果糖等；二糖，如麦芽糖、蔗糖等；以及多糖，如糊精、环糊精等；糖醇，如木糖醇、山梨糖醇及赤藓糖醇等。以下，通过实施例对本发明进行详细说明。以下实施例是用于便于理解本发明的具体例示，本发明并不局限于以下实施例。实施例1.根据木通果肉粉末比率的皂苷提取效率的提高在1g的木通种子粉末中，分别混合0g的木通果肉粉末(比较例1)、0.3g的木通果肉粉末(实施例1-1)、0.5g的木通果肉粉末(实施例1-2)、0.7g的木通果肉粉末(实施例1-3)、1.0g的木通果肉粉末(实施例1-4)、1.5g的木通果肉粉末(实施例1-5)、2.0g的木通果肉粉末(实施例1-6)后，放入于10ml的纯化水，并在45℃温度下，熟成5小时。其中，通过添加80重量百分比的乙醇、20重量百分比的水及20ml的提取液，来进行搅拌，并将30khz的超声波照射30分钟。之后，在3000rpm下，经过20分钟的离心分离，来回收上清液，从而制备第一提取物。在去除上清液的上述残留物上，还添加30ml的上述提取液，来搅拌30分钟，并照射30khz的超声波，来进行离心分离后，回收上清液从而制备第二次提取物。掺合上述第一提取物和第二提取物，来进行减压干燥后，在100ml的纯化水中溶解，从而进行冷冻干燥。之后利用高性能液相色谱(waters，waters2695高效液相色谱系统(hplcsystem))，测定皂苷的含量，以表1来表示。表1木通种子粉末木通果肉粉末皂苷含量比较例11g0g5.27mg实施例1-11g0.3g6.52mg实施例1-21g0.5g7.45mg实施例1-31g0.7g8.26mg实施例1-41g1.0g8.68mg实施例1-51g1.5g8.49mg实施例1-61g2.0g8.37mg实施例1-71g3.0g8.21mg实施例2.生姜的皂苷提取效率的提高在1g的木通种子、1g的木通果肉中，分别混合0g的生姜(实施例2-1)、0.03g的生姜(实施例2-2)、0.05g的生姜(实施例2-3)、0.1g的生姜(实验例2-4)、0.15g的生姜(实施例2-5)、0.2g的生姜(实施例2-6)、0.3g的生姜(实施例2-7)后，与实施例1相同的方法进行试验，来测定皂苷的含量，然后以表2来表示。表2实施例3.基于熟成温度的皂苷提取效率的提高向50ml的纯化水放入5g的木通种子粉末和5g的木通果肉粉末的混合物，分别在0℃(实施例3-1)、25℃(实施例3-2)、30℃(实施例3-3)、35℃(实施例3-4)、40℃(实施例3-5)、45℃(实施例3-6)、50℃(实施例3-7)、55℃(实施例3-8)及60℃(实施例3-9)温度下熟成5小时。其中，添加70ml的含有80重量百分比的乙醇及20重量百分比的水的提取液，来进行搅拌，并将30khz的超声波照射30分钟。之后，在3000rpm中，经过20分钟的离心分离，来回收上清液，从而制备第一提取物。在去除上清液的上述残留物上，还添加100ml的上述提取液，来搅拌30分钟，并照射30khz的超声波，来进行离心分离后，回收上清液从而制备第二次提取物。掺合上述第一提取物和第二提取物，来进行减压干燥后，在400ml的纯化水中溶解，从而进行冷冻干燥。之后利用高性能液相色谱，测定皂苷的含量。表3熟成温度皂苷含量实施例3-120℃35.9mg实施例3-225℃47.3mg实施例3-330℃59.5mg实施例3-435℃68.7mg实施例3-540℃73.2mg实施例3-645℃70.2mg实施例3-750℃62.3mg实施例3-855℃54.9mg实施例3-960℃47.6mg实施例4.基于超声波照射时间的皂苷提取效率的提高将熟成温度设置为40℃，来与实施例3相同的方法进行，将在第一提取物制备过程及第二提取物制备过程中的超声波照射时间分别设定为0分钟(实施例4-1)、10分钟(实施例4-2)、20分钟(实施例4-3)、30分钟(实施例4-4)、40分钟(实施例4-5)、50分钟(实施例4-6)、60分钟(实施例4-7)及70分钟(实施例4-8)来进行提取。以表4来表示按各个实施例的皂苷含量。表4超声波照射时间皂苷含量实施例4-10分钟24.4mg实施例4-210分钟37.4mg实施例4-320分钟67.0mg实施例4-430分钟73.2mg实施例4-540分钟75.8mg实施例4-650分钟77.3mg实施例4-760分钟81.5mg实施例4-870分钟82.7mg实验例1.木通提取物的官能检查通过上述提取物的制备方法，制备在比较例1、实施例1-4、实验例2-4及实验例2-4中还包含0.5g的干燥人参粉末的提取物(实施例5)，来向50名20几岁至40几岁的得到训练的评价员分别服用100mg。服用后，对可分别感到的香味和味道特性，以5分尺度(1分，非常不喜欢或非常强；2分，不喜欢；3分，一般；4分，满足或好；5分，非常满足或非常好)表示后，求出其平均值以表5来表示。表5实验例2.木通提取物的活力增进效果将基于上述实验例2-4的提取物，向按男女各15名的共30名的20几岁至50几岁的普通人以每日2次，每次100mg的方式服用10天，为了比较活力增进效果，以5分尺度(5分，非常优秀；4分，优秀；3分，无差异；2分，不好；1分，非常不好)表示后，求出平均值吗，其结果表示的平均为4，标准偏差为0.73，从而可知具有疲劳恢复效果。实验例3.木通提取物的预防干膜或缓和感冒症状的效果通过设定每天服用10mg的上述实验例2-4的提取物的实验组，每天服用10mg的由面粉制备而成的胃药的对照组，来进行1年的实验。通过表示实验组和对照组的1年的感冒发病次数和感冒的持续日期，以表6来表示。其中，感冒是以低烧或高烧、咽喉痛、肌肉痛、恶寒等的症状出现两个以上的状态来进行定义。表6实验组对照组患感冒的次数2.65.3每次感冒持续日数2.78.7实验例4.木通提取物的胃肠不快感的缓和效果将呼吁胃灼热、酸水等的胃肠的不快感的10名普通人为对象，以每天2次，每次0.1的方式将基于上述实验例2-4的提取物服用一个月后，以5分尺度(1，恶化得多；2，恶化；3，无变化；4，得到改善；5，得到很多改善)表示胃灼热、干呕及胃液逆流症状的改善程度。其结果，在胃灼热的情况下，呈现平均4.4分且标准偏差0.69，在干呕及胃液逆流的情况下，呈现平均4.0分且标准偏差0.94。制备例1.木通提取物片剂的制备混合150mg的基于实验例2-4的提取物，50mg的结晶性纤维素、50mg的乳糖、3mg的硬脂酸镁及3mg的乙醇，来制备颗粒。制备例2.木通提取物胶囊剂的制备针对于200mg的基于实验例2-4的提取物、10mg的滑石、5mg的胶体二氧化硅及85mg的乳糖，以通常的胶囊剂的制备方法制备。制备例3.木通提取物饮料的制备通过混合4g的基于实验例2-4的提取物、0.5g的低聚糖、1g的高夫乳糖玉米糖浆、0.1g的柠檬酸、0.2g的维生素c及50ml的纯化水，以通常的饮料制备方法制备。当前第1页12