本发明涉及水产动物饲料营养配方技术，具体地说是一种高密度养殖凡纳滨对虾专用复合维生素营养剂及其制备方法。
背景技术：
凡纳滨对虾为节肢动物门、有鳃亚门、甲壳纲、软甲亚纲、十足目、游泳亚目、对虾科。该虾摄食性强、退壳周期短、生长快、肉质好、营养丰富、出肉率高，1988年由中国科学院海洋研究所从美国夏威夷引入中国，目前是我国虾类养殖产量最大的主要经济品种，年产量超过140万吨。
维生素又名维他命，即维持生命的物质，是维持动物生命活动必须的一类有机物质，也是保持动物机体健康的重要活性物质。维生素是动物营养、生长所必需的有机化合物，对机体的新陈代谢、生长、发育、健康有极重要作用。维生素在动物体内的含量很少，但不可或缺。如果长期缺乏某种维生素，就会引起生理机能障碍而使生长缓慢，或发生某种疾病。因此，饲料中维生素的含量和维持各维生素之间的平衡对动物至关重要。
目前我国设施或工厂化养虾的现代养殖模式发展迅速，其养殖密度比传统池塘养殖提高约30％以上，但相匹配的配合饲料研发滞后。以往配合饲料中维生素含量不能很好满足高密度养殖凡纳滨对虾的需求，尚存在饲料系数高，抗病力弱，以及由于维生素不平衡造成的营养浪费现象，导致养殖成本增大，经济效益降低。因此，有待于开发一种促进高密度养殖凡纳滨对虾健康生长的专用复合维生素营养剂配合饲料，以满足市场需求。
技术实现要素：
本发明目的在于提供一种高密度养殖凡纳滨对虾专用复合维生素营养剂及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种高密度养殖凡纳滨对虾专用复合维生素营养剂，营养剂由单体化合物维生素营养素物质和载体组成，按重量百分比计，35-60％的单体化合物维生素营养素物质和75-85％的载体；其中，单体化合物维生素营养素物质为维生素a、维生素d3、维生素e、维生素k3、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、烟酸、泛酸钙、生物素、叶酸和肌醇。
所述营养剂中单体化合物维生素营养素物质各自添加量为维生素a3300-1500kiu/kg，维生素d35000-8000kiu/kg，维生素e20000-30000mg/kg，维生素k33500-5400mg/kg，维生素b11700-2600mg/kg，维生素b22800-4300mg/kg，维生素b610000-15200mg/kg，维生素b122500-3750mg/kg，烟酸16750-25100mg/kg，泛酸钙8400-13000mg/kg，生物素8300-12500mg/kg，叶酸1010-1515mg/kg，肌醇16800-25300mg/kg，维生素c59500-90000mg/kg。
所述单体化合物维生素营养素物质中维生素a选自维生素a乙酸酯和/或维生素a丙酸酯；单体化合物维生素营养素物质中维生素d3选自维生素d3粉；单体化合物维生素营养素物质中维生素e选自维生素e乙酸酯(dl-α-生育粉)；维生素k3选自维生素k3粉；单体化合物维生素营养素物质中维生素b1选自硝酸硫胺素和/或盐酸硫胺素；维生素b2选自维生素b2粉；单体化合物维生素营养素物质中维生素b6选自盐酸吡哆醇；单体化合物维生素营养素物质中维生素b12选自维生素b12粉；单体化合物维生素营养素物质中烟酸选自烟酸和/或烟酰胺；单体化合物维生素营养素物质中泛酸钙选自d-泛酸钙和/或dl-泛酸钙；单体化合物维生素营养素物质中生物素选自d-生物素；单体化合物维生素营养素物质中叶酸选自叶酸粉；肌醇选自肌醇粉。
所述载体为粒径在400—600微米的玉米芯粉。
一种高密度养殖凡纳滨对虾专用复合维生素营养剂的制备方法，在无阳光直射条件下，于10-25℃，按上述比例将单体化合物维生素营养素物质混合，而后按照逐级扩大混合方法，再按照上述比例将其与载体混合均匀，混匀后搅拌3—5分钟，使其混合均匀度的变异系数cv在5％以下，分装至金箔袋内，密封避光保存备用。
所述营养剂在全价配合饲料中的添加重量比例为0.8—1.2％。
本发明具有如下创新和优点：
1.本发明是因“高密度”养殖模式而设计，部分维生素a、d、e，b族维生素b1、b2、b6、b12，以及烟酸、叶酸等添加量高于普通养殖模式，以此适应高密度养殖下对虾营养需求。
2.本发明是针对凡纳滨对虾这一优良养殖品种而设计的专用维生素营养剂，各元素添加量的设置综合考虑了对虾的营养素需求量和元素间相互作用，是在对虾维生素需求基础上的进一步优化。
3.本发明不仅从营养与饲料学方面，使各专用复合维生素营养剂间平衡、适量、协同和稳定，而且从系统论与生态学角度，很大程度上促进高密度养殖对虾生长代谢、免疫抗病与水处理设备、水生态、无公害之间的协调与和谐，既实现产品的低成本、低污染，又获得理想的生长速度、养殖总体效益最高和可持续性，从而成为真正的“一高两低(高效益、低污染、低成本)”特色饲料产品。
4.本发明技术先进、可操作性强、市场需求大。本发明经试验研究获得，科技含量高，结合实际紧密，效果真实可靠，操作方便，属适合高密度养殖的全新对虾生态高值饲料专用特效复合维生素营养剂适配技术产品。
5.根据品种、养殖模式、生产条件、市场要求、地方原料、设备工艺等的特点和差异，进行生态适宜性组合、高技术调控配制。将本发明适宜配制的专用复合维生素营养剂按0.8—1.2％重量添加到确定的生态高值配合饲料中，使用双螺杆压条机挤压配制成颗粒饲料。将所得饲料进行实际高密度养殖条件下动物生长、消化等综合试验和测定，证明该配合饲料的实际饲养效果效应。根据实验效果对配方进行小幅调整、修改和完善后，最终确定本发明的适宜配方及其配制技术。
总之，本发明技术先进，实际养殖试验促生长效果显著，并明显提高消化能力，提高经济效益，配方可操作性强，是适合我国国情的凡纳滨对虾高密度养殖生态高值饲料特效专用复合维生素营养剂适配技术产品，在我国对虾养殖和饲料生产中应用前景十分广阔。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样属于本申请所附权利要求书所限定的范围。
本发明营养剂维生素a3300-1500kiu/kg，维生素d35000-8000kiu/kg，维生素e20000-30000mg/kg，维生素k33500-5400mg/kg，维生素b11700-2600mg/kg，维生素b22800-4300mg/kg，维生素b610000-15200mg/kg，维生素b122500-3750mg/kg，烟酸16750-25100mg/kg，泛酸钙8400-13000mg/kg，生物素8300-12500mg/kg，叶酸1010-1515mg/kg，肌醇16800-25300mg/kg，维生素c59500-90000mg/kg。载体为玉米芯粉(粒径在400—600微米范围内)，重量比例范围为40-65％。制作工艺：根据各专用复合维生素营养剂有效成分重量比例和化合物中维生素含量比例，计算出各化合物添加量，在10-25℃以下、无阳光直射的室内，按照逐级扩大混合方法，与载体混合均匀，然后在专用不锈钢搅拌器中搅拌3—5分钟，使其混合均匀度的变异系数cv在5％以下，最后分装入金箔袋内，密封避光保存备用。本发明技术产品在高密度养殖试验条件下，动物生长性能佳，促消化效果明显，在我国凡纳滨对虾养殖和饲料生产中应用前景广阔。
实施例1：
营养剂在全价配合饲料中的添加重量比例为1.2％。按此配比，配合饲料中维生素a、d3、e、k3、b1、b2、b6、b12、烟酸、泛酸钙、生物素、叶酸、肌醇、维生素c的含量分别为(mg/kg或iu/kg)：6000.00iu/kg、8000.00iu/kg、120.00、40.00、20.00、27.00、120.00、0.30、200.00、100.00、2.00、12.00、200.00、250。
营养剂为单体化合物维生素营养素物质与载体组成，按重量百分比计，15.40％的单体化合物维生素营养素物质和84.60％的载体；其中，载体为玉米芯粉。
配制10kg营养剂的具体配方为：取维生素a(纯度为500kiu/g)10.00g，维生素d3(纯度为500kiu/g)13.33g，维生素e(纯度为50％)200.00g，维生素k3(纯度为94％)35.46g，维生素b1(纯度为98％)17.01g，维生素b2(纯度为80％)28.13g，维生素b6(纯度为99％)101.01g，维生素b12(纯度为1％)25.00g，烟酸(纯度为99.5％)167.50g，泛酸钙(纯度为99％)84.18g，生物素(纯度为2％)83.33g，叶酸(纯度为99％)10.10g，肌醇(纯度为99％)168.35g，维生素c(纯度为35％)595.24g，玉米芯粉8.46kg。
营养剂制备：在10-25℃左右、无阳光直射条件下将上述单体化合物维生素营养素物质按比例混合，而后按照逐级扩大混合方法，与载体混合均匀，混匀后搅拌3—5分钟，使其混合均匀度的变异系数cv在5％以下，粒径在400—600微米范围内，分装至金箔袋内，即得到凡纳滨对虾专用配合饲料维生素添加剂10kg，密封避光保存备用。
实施例2
与实施例1不同之处在于：
营养剂在全价配合饲料中的添加重量比例为1.0％。按此配比，配合饲料中维生素a、d3、e、k3、b1、b2、b6、b12、烟酸、泛酸钙、生物素、叶酸、肌醇的含量(mg/kg或iu/kg)与实施例1相同。
营养剂为单体化合物维生素营养素物质与载体组成，按重量百分比计，18.50％的单体化合物维生素营养素物质和81.50％的载体；其中，载体为玉米芯粉。
配制10kg营养剂的具体配方为：取维生素a(纯度为500kiu/g)12.00g，维生素d3(纯度为500kiu/g)16.00g，维生素e(纯度为50％)240.00g，维生素k3(纯度为94％)42.55g，维生素b1(纯度为98％)20.41g，维生素b2(纯度为80％)33.75g，维生素b6(纯度为99％)121.21g，维生素b12(纯度为1％)30.00g，烟酸(纯度为99.5％)201.01g，泛酸钙(纯度为99％)101.01g，生物素(纯度为2％)100.00g，叶酸(纯度为99％)12.12g，肌醇(纯度为99％)202.02g，维生素c(纯度为35％)714.29g，玉米芯粉8.15kg。
营养剂制备：在10-25℃左右、无阳光直射条件下将上述单体化合物维生素营养素物质按比例混合，而后按照逐级扩大混合方法，与载体混合均匀，混匀后搅拌3—5分钟，使其混合均匀度的变异系数cv在5％以下，粒径在400—600微米范围内，分装至金箔袋内，即得到凡纳滨对虾专用配合饲料维生素添加剂10kg，密封避光保存备用。
实施例3
与实施例1不同之处在于：
营养剂在全价配合饲料中的添加重量比例为0.8％。按此配比饲料中维生素a、d3、e、k3、b1、b2、b6、b12、烟酸、泛酸钙、生物素、叶酸、肌醇的含量(mg/kg或iu/kg)与实施例1相同。
营养剂为单体化合物维生素营养素物质与载体组成，按重量百分比计，23.10％的单体化合物维生素营养素物质和76.90％的载体；其中，载体为玉米芯粉。
配制10kg营养剂的具体配方为：取维生素a(纯度为500kiu/g)15.00g，维生素d3(纯度为500kiu/g)20.00g，维生素e(纯度为50％)300.00g，维生素k3(纯度为94％)53.19g，维生素b1(纯度为98％)25.51g，维生素b2(纯度为80％)42.19g，维生素b6(纯度为99％)151.52g，维生素b12(纯度为1％)37.50g，烟酸(纯度为99.5％)251.26g，泛酸钙(纯度为99％)126.26g，生物素(纯度为2％)125.00g，叶酸(纯度为99％)15.15g，肌醇(纯度为99％)252.53g，维生素c(纯度为35％)892.86g，玉米芯粉7.69kg。
营养剂制备：在10-25℃左右、无阳光直射条件下将上述单体化合物维生素营养素物质按比例混合，而后按照逐级扩大混合方法，与载体混合均匀，混匀后搅拌3—5分钟，使其混合均匀度的变异系数cv在5％以下，粒径在400—600微米范围内，分装至金箔袋内，即得到凡纳滨对虾专用配合饲料维生素添加剂10kg，密封避光保存备用。
应用实例
1试验材料与方法
1.1试验材料
1.1.1试验设计与动物分组
在室内流水高密度养殖(2.3-3.9kg/m3)条件下，进行单因素随机动物试验，即2个不同日粮的处理组。其中的复合维生素分别为华罗和本发明的产品，编号分别为a组、b组。每个处理4个重复。
试验在天津海发珍品实业发展有限公司进行，试验用鱼购于天津立达水产有限公司，从来源和批次相同的虾池中挑选健康、无畸形、体重相近(6.2±0.2g)的凡纳滨对虾240尾，随机分配到8个养殖圆桶(体积为80l)中，初始养殖密度为2.3kg/m3。
1.1.2试验饲料设制
试验基础饲料组成及营养成分见表1。a组的复合维生素为华罗海水鱼专用维生素，其它原料均为市售国产产品。b组的复合维生素为本发明实施例3配方，添加量为0.8％。原料混匀、超微粉碎后，经双螺杆压条机制成直径为2mm的颗粒配合饲料，60℃烘干至恒重。粉碎过筛后，选取1.2-1.6mm的作为对虾试验料。
表1试验基础饲粮组成及主要营养成分
1.1.3饲养管理
养殖桶中配备气石，连续充气，盖塑料网防逃。水温25±2℃，盐度35±2‰。每天6：00、11：30、17：30和21：30饲喂四次，记录摄食量及死淘数等情况。养殖试验过程中根据对虾摄食情况，及时调整投饵量。试验共进行74天(其中正式实验60天)，结束时停食12小时，选取蜕皮间期的对虾，每桶取12尾，用滤纸轻轻吸干体表水分，测量体长、体质量，置冰盘上解剖取样。
1.2检测指标与方法
1.2.1生长指标
增重率wgr(％)＝100×(lnw2-lnw1)/w2
特定生长率sgr(％)＝100×(lnw2-lnw1)/t
饲料系数fcr＝c/(w2-w1)
存活率(％)＝100×(w2-w1)/w2
公式中，w1为试验开始时每尾对虾的平均湿重(g)；w2为试验结束时每尾对虾的平均湿重(g)；c为试验每尾对虾的平均总摄食量(风干重，g)；t为试验天数(d)。
1.2.2消化酶指标及测定方法
解剖取样得到不同饲料组凡纳滨对虾的肝胰脏组织，用于测定蛋白酶、脂肪酶及淀粉酶活力。测定方法及原理如下：
(2)胰蛋白酶：胰蛋白酶能催化水解底物精氨酸乙酯的酯链，使其在253nm处吸光度值升高，根据吸光度的变化可以计算出酶的活力。
(3)脂肪酶：甘油三酯和水制成的胶乳，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊特性。胶束中的甘油三脂在脂肪酶作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而减低。减低的速率与脂肪酶活力有关。
(4)淀粉酶：淀粉酶水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖和糊精，在底物浓度已知并且过量的情况下，加入碘液与未水解的淀粉结合成蓝色复合物，测定吸光值推算出水解的淀粉量，从而计算出淀粉酶的活力。
1.2.3统计分析方法
本次实验所有数据结果通过统计软件spss11.5进行方差分析，采用lsd法进行多重比较。显著性水平为p＜0.05。
2试验结果
2.1生长性能
表2本发明饲料配方对高密度养殖凡纳滨对虾生长性能的影响
(注：表中上标相邻字母表示差异显著(p<0.05)，无字母表示差异不显著(p>0.05)，其它表格同。)
如表2所示，b组凡纳滨对虾生长速度明显快于a组，增重率、特定生长率分别显著高于a组34.63％、24.74％(p＜0.05)，饲料系数比a组显著降低16.45％(p＜0.05)，存活率间无显著差异(p>0.05)。
2.2肝胰脏消化酶活力
肝胰脏消化酶活力测定结果如表3。其中脂肪酶活力差异不显著(p>0.05)。蛋白酶、淀粉酶活力b组分别比a组显著提高7％、38.5％(p＜0.05)。
表3高密度养殖凡纳滨对虾肝胰脏消化酶活力
3.小结
(1)本试验对凡纳滨对虾生长性能的测定和分析表明，使用本发明产品比使用华罗专用维生素能够显著提高增重率34.63％(p＜0.05)，并且显著降低饲料系数16.45％(p＜0.05)。
(2)消化酶活力测定表明，使用本发明产品能够显著提高肝胰脏淀粉酶活力，比使用华罗专用维生素提高38.5％，并且肝胰脏蛋白酶的活力显著提高7％(p＜0.05)。
综上所述，使用本发明产品，即高密度养殖凡纳滨对虾专用复合维生素营养剂的全价颗粒饲料后，能显著提高增重率、降低饲料系数、提高饲料利用率、减少养殖成本和养殖环境污染。同时，还可提高消化酶活力，促进对虾对饲料的消化，提高饲料利用率，加快对虾生长，从而提高养殖效益。