一种从沙蚕中制备天然抗氧化剂的方法与流程

本发明属于生物制品领域的一种从沙蚕中制备天然抗氧化剂的方法。

背景技术：

沙蚕在分类学上属于环节动物门、多毛纲、游走目、沙蚕科，俗称海虫、海蛆、海蜈蚣、海蚂蝗。我国的沙蚕种类有约80多种，经济种类和用于养殖的品种主要有：日本刺沙蚕、多刺围沙蚕、双齿围沙蚕等。喜栖息于有淡水流入的沿海滩涂、潮间带中区到潮下带的沙泥中，幼虫食浮游生物，成虫以腐植质为食。沙蚕有很高的营养价值，在水产养殖中得到广泛应用。沙蚕（nereid）英文名—clamworm，属环节动物门，多毛纲叶须虫目的1科，经济价值较高。

沙蚕体长圆柱形,两侧对称、后端尖,具许多（80～200多个）体节。可分为头部、躯干部和尾部。头部发达，由口前叶和围口节两个主要部分组成。口前叶为伸于口前方的圆三角形或圆锥形肉质叶突，具2对简单的圆形眼,1～2个前伸的头触手和其前端腹侧两个大的分节的触角。围口节为一大的环状节，腹面具横长的口，其两侧具3～4对触须，肌肉质的吻可由口伸出，吻前端具1对几丁质大颚,吻表面平滑或具几丁质颚齿或软乳突；躯干部有许多结构相似的体节，每个体节两侧具外伸的肉质扁平突起，即疣足。疣足多为双叶型具内足刺，外有刺状或镰状复型刚毛；尾部为虫体最后1节或数节,亦称肛节，具一对肛须、肛门开口于肛节末端背面。刚毛有毒腺，刺到皮肤有红肿疼痛的现象。

沙蚕营养丰富，不仅是鱼虾嗜食的饵料生物，也可以作为优良的钓饵。沿海居民还视生殖腺成熟的沙蚕为营养珍品。干制后，煮汤白如牛奶，味极鲜美，且浓度大，有“天然味精”之称。油炸后酥松香脆，为下酒佳肴。沙蚕无论在国内或出口，都十分畅销。近几年，沙蚕研究的比较多的是从它身上提取的一些活性成分，例如抑菌肽，沙蚕素等。，

另外，由于沙蚕具有良好的环境适应性，一些研究人员把它作为生态关键物种来指示环境污染程度。

文献还报道了沙蚕体内自有的一套抗氧化系统，报道了沙蚕能够很好的防止铅离子的毒害，具有很好的抗氧化功能,但文章没有报道该抗氧化系统如何制备成抗氧化剂制品的方法和相关报道。本发明的目的是提供一种从沙蚕中制备天然抗氧化剂的方法,以弥补已有报道的不足。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种从沙蚕中制备天然抗氧化剂的方法，所制备的天然抗氧化剂具有清除自由基的作用，可用于医药和食品的抗氧化保护,也可作为食品添加剂和保健品用于体内清除自由基，预防肌体衰老等。

本发明采用沙蚕为唯一原料，如日本刺沙蚕、多刺围沙蚕、双齿围沙蚕等，原材料是天然海洋生物，是营养价值丰富的食材，制备过程不需要添加其他有毒副作用的化学试剂和助剂，制备过程绿色环保，没有环境污染，产品绿色，可降解吸收，安全无副作用。

本发明采用原料是沙蚕，如日本刺沙蚕、多刺围沙蚕、双齿围沙蚕等，但不局限于这三种沙蚕原料，所有沙蚕在本发明中的制备技术方法是相同的。

本发明中采用的原料是新鲜健康沙蚕，经过海水阴湿环境处理，用干净海水暂养，用去离子水冲洗，去除表面杂质和粘液，然后用于本发明中沙蚕天然抗氧化剂的制备。

本发明中采用沙蚕经过海水阴湿环境存放处理的时间为1-7天，用海水暂养的时间为1-3天，用去离子水冲洗，去除表面杂质和粘液后，迅速捞出用于沙蚕天然抗氧化剂的制备，也可以-20℃冰冻保存备用。

本发明中首先将沙蚕切成段状，然后用组织匀浆器进行匀浆处理，进一步超声破碎，破碎后加入向体系中加入去离子水，静置浸泡提取，加热分离，过滤得到第一粗提液和第一提取残渣。

本发明中将沙蚕切断后匀浆处理，转速5000-10000rpm，10-15min，进一步超声破碎10-20min，破碎后加入向体系中加入的去离子水是沙蚕重量10-100倍，静置温度是4℃-45℃浸泡提取时间是8-20h，加热分离的条件是沸腾温下60-90min。

本发明中采用向第一提取残渣中加入去离子水，静置1-5小时，加去离子水的量是沙蚕重量的5-50倍，煮沸5-30分钟，过滤，得到第二粗提液和第二提取残渣。

本发明中将第一粗提液和第二粗提液合并，4℃-10℃低温静置5-10小时，过滤除去不容物，收集滤液，用超滤膜浓缩，冰冻干燥，密封保存，得到本发明的沙蚕天然抗氧化剂制品。

本发明采用了水相浸泡提取、煎煮分离法，超滤膜浓缩和冰冻干燥技术，不使用其他化学试剂，操作过程简单，工艺稳定性能好，提取率高。本发明制造的抗氧化产品保存稳定，具有良好的抗氧化活性，能明显清除超氧阴离子等自由基，因此，本产品在医药、保健等方面都具有良好研究和应用前景。并用以下具体实施例进一步阐明本发明的过程。

具体实施方式

沙蚕经过海水阴湿环境存放，海水暂养后，称取新鲜沙蚕1份，去离子水冲洗，去除表面杂质以及血液。剪刀将沙蚕剪断成段状，匀浆、超声。30份去离子水中37℃浸泡过夜，浸泡过夜的沙蚕煮沸30min，待冷却过后加去离子水15份继续煮沸直至沙蚕骨架呈现白色状，将混合物用双层纱布过滤3次，完全去除杂质，将收集的滤液低温静置1-5小时，浓缩后冷冻干燥，所得产品置于4℃冰箱保存。

以下几个具体实施例为例进一步给出本发明的制造方法。

实施例1

将日本刺沙蚕置于海水阴湿环境中处理1天，海水暂养1天。取沙蚕1份，去离子水冲洗，去除表面杂质以及血液。将沙蚕个体剪断后5000rpm匀浆15min，超声破碎10min。30份去离子水洗净浸泡过夜后，煎煮1h，冷却后加去离子水15份继续煮沸20min，将两次煎煮液混合，冷却后4℃静置5h，浓缩后冷冻干燥，即得到沙蚕抗氧化产品，产品为棕色粘稠状，收率为13.63%。

实施例2

将多刺围沙蚕置于海水阴湿环境中处理7天，海水暂养3天。取沙蚕1份，去离子水冲洗，去除表面杂质以及血液。将沙蚕个体剪断后10000rpm匀浆25min，超声破碎20min。30份去离子水洗净浸泡过夜后，煎煮1h，冷却后加去离子水15份继续煮沸20min，将两次煎煮液混合，冷却后4℃静置5h，浓缩后冷冻干燥，即得到沙蚕抗氧化产品，产品为红棕色粘稠状，收率为10.80%。

实施例3

将双齿围沙蚕置于海水阴湿环境中处理3天，海水暂养2天。取沙蚕1份，去离子水冲洗，去除表面杂质以及血液。将沙蚕个体剪断后5000rpm匀浆15min，超声破碎10min。30份去离子水洗净浸泡过夜后，煎煮1h，冷却后加去离子水15份继续煮沸20min，将两次煎煮液混合，冷却后4℃静置5h，浓缩后冷冻干燥，即得到沙蚕抗氧化产品，产品为红棕色粘稠状，收率为11.68%。

实施例4

将日本刺沙蚕、多刺围沙蚕、双齿围沙蚕分别置于海水阴湿环境中处理3天，海水暂养2天。取混合沙蚕1份，去离子水冲洗，去除表面杂质以及血液。将沙蚕个体剪断后10000rpm匀浆20min，超声破碎20min。30份去离子水洗净浸泡过夜后，煎煮1h，冷却后加去离子水15份继续煮沸20min，将两次煎煮液混合，冷却后4℃静置5h，浓缩后冷冻干燥，即得到沙蚕抗氧化产品，产品为深红棕色粘稠状，收率为19.66%。

抗氧化研究

本发明中探究了产物对超氧阴离子以及羟基自由基的清除率，其结果图标如下：

图1，沙蚕提取物对超氧阴离子的清除。图2，沙蚕提取物对羟基自由基的清除。

由实验结果证明，随着材料浓度的增加，其对超氧阴离子和羟基自由基的清除率都是增加的，在40mg/ml时达到了60%，说明其具有明显的抗氧化作用，因此在医药、保健等方面都具有良好研究和应用前景。