鮸鱼专用饲料配合添加剂的制作方法

文档序号:17689089发布日期:2019-05-17 20:53阅读:447来源:国知局
本发明属于鮸鱼养殖
技术领域
,具体涉及鮸鱼专用饲料配合添加剂。
背景技术
:鮸鱼为鲈形目石首鱼科,体色银灰。多产东海舟山洋面。鮸鱼一般每尾体长45~55cm、体重500~1000g,最大有百余斤。分布在渤海、黄海、东海、南海等水域。鮸鱼体延长而侧扁,背、腹部浅弧形,大的个体可达10多千克、口大而微斜、体被栉鳞、鳞片细小,表层粗糙,头部被圆鳞、颌孔4个,中央颌孔及内侧颌孔呈四方形排列,无颌须。上颌外行牙和下颌内行牙扩大,呈犬牙状,内面小牙成带状群、眼圈大、眼膜透明度高红而明亮。体呈蓝灰褐色,腹部为灰白色、背鳍2个连在一起,中间有一深缺刻。鳍棘上缘为黑色,鳍条部中央有一纵行黑色条纹;胸鳍基部黄色、边缘黑色;臀鳍具2棘;尾鳍呈楔形,尾鳍的基部为黄色,其边缘颜色稍浅。鮸鱼性甘、咸、平,有养血、止血、补肾固精和消炎功效,对治疗再生障碍性贫血、吐血、肾虚遗精、痛肿、无名肿毒、乳腺炎等有效。鮸鱼肉味鲜美,为重要海产经济鱼类之一,也是经济价值较高的的鱼类,因而深受消费者和养殖者喜爱。目前由于人工高密度养殖鮸鱼,鮸鱼的免疫力、抗应激能力相对下降,容易出现病变,造成大片死亡,严重影响养殖业经济。在水产养殖行业中,为了提高养殖产量和效益,往往会使用抗生素预防和治疗鱼病,有的还利用抗生素促进鱼类生长与提高鱼类饲料的利用率。但抗生素的滥用同时为水产动物的健康成长,以及人类的食用安全埋下了深深的隐患,目前抗生素滥用已经不容忽视。技术实现要素:本发明的目的在于提供鮸鱼专用饲料配合添加剂,有助于改善鮸鱼肠道菌群并可促进肠绒毛再生,提高肠吸收效率,维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用,明显降低鮸鱼的发病率和死亡率。本发明为实现上述目的所采取的技术方案为:本发明提供一种鮸鱼专用饲料配合添加剂,其包括:(ⅰ)寡糖组合物;和/或(ⅱ)羧酸酯;和(ⅲ)蛋白酶复合物;所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物。鮸鱼专用饲料配合添加剂有助于改善鮸鱼肠道微生物菌群、促进鮸鱼肠绒毛再生、提高目的营养物质的肠吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用,还可显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率和死亡率,是一种高效的鮸鱼专用饲料配合添加剂。所述(ⅰ)寡糖组合物具有下列糖苷键分布:具有不少于8mol%α-1,6糖苷键,和不少于8mol%β-2,1糖苷键,和/或不少于8mol%β-1,3糖苷键,并且其中至少8干重%寡糖组合物的聚合度是2~6。所述(ⅰ)寡糖组合物包括:异麦芽糖-寡糖、异麦芽糖-菊粉二糖-寡糖、菊粉二塘-寡糖、软骨素二塘-寡糖、透明质二塘-寡糖、透明质二塘-异麦芽糖-寡糖、软骨素二塘-异麦芽糖-寡糖、乳糖-寡糖、乳糖-透明质二塘-寡糖、异麦芽糖-乳糖-寡糖、乳糖-菊粉二糖-寡糖、菊粉二糖-异麦芽糖-寡糖。在鮸鱼专用饲料添加剂或者饲料中施入寡糖组合物投喂鮸鱼具有有益的健康作用,有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用。所述(ⅱ)羧酸酯选自:根据式1的乳酰羧酸酯,式1:r1-coo-[-ch(ch3)-coo]n-r2或/和其ba、be、mn(ⅱ)、ca、na、nh4或co(ii)盐,根据式2的乙醇酰羧酸酯,式2:r1-coo-[-ch2-coo]n-r2或/和其ba、be、mn(ⅱ)、ca、na、nh4或co(ⅱ)盐,在以上式中,r1选自氯苯基或溴苯基,r2选自c2~c10烷基或者烯基链,并且n表示数值为1~10的整数;上述羧酸酯产品应用于鮸鱼专用饲料或者饲料添加剂中,可显著增强鮸鱼的抗细菌活性,其在鮸鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用,并且有助于提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,增大经济效益。所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物,所述有效蛋白酶混合物的比例超过所述蛋白酶复合物的活性的75%,所述有效蛋白酶混合物的蛋白酶中,一种蛋白酶具有7.4左右的等电点,和另一种蛋白酶具有8.3左右的等电点;蛋白酶复合物有助于促进鱼类比如鮸鱼肠绒毛再生,并因此大大地改善目的营养物质的肠吸收,从而显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率,尤其是死亡率。作为优选,所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为7.4左右的蛋白酶具有82000~90000安森单位/mg蛋白质的比活性。作为优选,所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为8.3左右的蛋白酶具有20000~25000安森单位/mg蛋白质的比活性。作为优选,所述(ⅲ)蛋白酶复合物作为饲料添加剂的补充物用于鮸鱼专用饲料中,所述饲料添加剂以粉末、液体或其他任何适合与饲料组合物混合的形式存在。作为优选,为了获得(ⅲ)蛋白酶复合物,培养疏绵状丝孢菌菌株并过滤发酵液,然后着手进行通过超滤和等电聚焦来提取蛋白酶复合物,最后将所获得的蛋白酶复合物冻干粉碎,具体包括:发酵:从初筛培养基平板中挑选有透明圈的单菌落(菌株所产蛋白酶可分解培养基中底物蛋白,因此菌落周围呈现透明圈现象),划线分离;纯化后的菌株转接至盛有发酵产酶培养基的发酵摇瓶中,在0.3体积的无菌空气/培养基体积/分钟的通气,并在发酵产酶培养基ph为7.2~7.5、温度为40~45℃、转速为150~200r/min条件下恒温发酵4~6d,离心后取上清液;超滤:超滤借助于具有50kda截止阈值的膜来进行,超滤进行3~10小时;等电聚焦:分别控制溶液ph值为7.4±0.1和8.3±0.1进行等电聚焦,即获得占多数的具有7.4左右等电点(pi)的蛋白酶,和以较少比例,具有8.3左右等电点(pi)的蛋白酶;冻干粉碎后即得(ⅲ)蛋白酶复合物。作为对本发明的进一步优选,发酵产酶培养基包括下列重量含量的物质:180~240目玉米芯木聚糖0.18~0.2%、苏糖醇0.012~0.014%、胰蛋白胨1.8~3%、酵母浸粉0.3~0.5%、硝酸钠0.1~0.2%、kh2po40.5~0.6%、k2hpo40.15~0.2%、mgso40.03~0.05%,自然ph;发酵产酶培养基中特殊粒径的碳源有助于高酶活蛋白酶的产出,合适粒径的碳源可使微生物自身生长繁衍与摇瓶中的溶氧量形成平衡,也可避免碳源颗粒过细而与其他营养物质形成粘度较大的悬浊液并进而影响菌株代谢产物的产生,降低产酶水平;此外,发酵产酶培养基中添加特殊配比的玉米芯木聚糖与苏糖醇对高酶活蛋白酶的产出具有诱导刺激作用,可大大加速疏绵状丝孢菌菌株对等电点为7.4左右的高活性蛋白酶的分泌与析出,从而在维持整体蛋白酶复合物的含量的基础上显著提高等电点为7.4左右的蛋白酶的占比,从整体上提高蛋白酶复合物的活性。本发明还提供一种鮸鱼专用饲料,所述鮸鱼专用饲料中含有基础饲料和鮸鱼专用饲料配合添加剂,所述基础饲料包含:31~35wt%的蛋白质;22~24wt%的脂肪;0.06~0.09wt%的核苷酸和/或核苷;2.3~5.0wt%可消化的含硫氨基酸;0.3~0.5wt%的总有效钙;0.32~0.4wt%的总有效磷;0.3~0.35wt%的钠。所述鮸鱼专用饲料配合添加剂包含:(ⅰ)寡糖组合物;和/或(ⅱ)羧酸酯;和(ⅲ)蛋白酶复合物;所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物。本发明的有益效果为:1)在鮸鱼专用饲料添加剂或者饲料中施入寡糖组合物投喂鮸鱼具有有益的健康作用,有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用;2)羧酸酯产品应用于鮸鱼专用饲料或者饲料添加剂中,可显著增强鮸鱼的抗细菌活性,其在鮸鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用,并且有助于提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,增大经济效益;3)蛋白酶复合物有助于促进鱼类比如鮸鱼肠绒毛再生,并因此大大地改善目的营养物质的肠吸收,从而显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率,尤其是死亡率;4)发酵获取蛋白酶复合物时,在发酵产酶培养基中加入特殊粒径的碳源有助于高酶活蛋白酶的产出,合适粒径的碳源可使微生物自身生长繁衍与摇瓶中的溶氧量形成平衡,也可避免碳源颗粒过细而与其他营养物质形成粘度较大的悬浊液并进而影响菌株代谢产物的产生,降低产酶水平;5)发酵产酶培养基中添加特殊配比的玉米芯木聚糖与苏糖醇对高酶活蛋白酶的产出具有诱导刺激作用,可大大加速疏绵状丝孢菌菌株对等电点为7.4的高活性蛋白酶的分泌与析出,从而在维持整体蛋白酶复合物的含量的基础上显著提高高活性蛋白酶的占比,从整体上提高蛋白酶复合物的活性。本发明采用了上述技术方案提供鮸鱼专用饲料配合添加剂,弥补了现有技术的不足,设计合理,操作方便。具体实施方式以下结合实施例对本发明作进一步详细描述:实施例1:一种鮸鱼专用饲料配合添加剂,其包括:(ⅰ)寡糖组合物;和/或(ⅱ)羧酸酯;和(ⅲ)蛋白酶复合物;所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物。鮸鱼专用饲料配合添加剂有助于改善鮸鱼肠道微生物菌群、促进鮸鱼肠绒毛再生、提高目的营养物质的肠吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用,还可显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率和死亡率,是一种高效的鮸鱼专用饲料配合添加剂。所述(ⅰ)寡糖组合物具有下列糖苷键分布:具有8mol%α-1,6糖苷键和8mol%β-2,1糖苷键,和8mol%β-1,3糖苷键,并且其中8干重%寡糖组合物的聚合度是2。所述(ⅰ)寡糖组合物包括:异麦芽糖-寡糖和异麦芽糖-菊粉二糖-寡糖和菊粉二塘-寡糖和菊粉二糖-异麦芽糖-寡糖。在鮸鱼专用饲料添加剂或者饲料中施入寡糖组合物投喂鮸鱼具有有益的健康作用,有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用。所述(ⅱ)羧酸酯包括:根据式1的乳酰羧酸酯,式1:r1-coo-[-ch(ch3)-coo]2-r2和其ba盐,根据式2的乙醇酰羧酸酯,式2:r1-coo-[-ch2-coo]3-r2和ca盐,在以上式中,r1为氯苯基,式1的r2为c2烷基链,式2的r2为c4烷基链;上述羧酸酯产品应用于鮸鱼专用饲料或者饲料添加剂中,可显著增强鮸鱼的抗细菌活性,其在鮸鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用,并且有助于提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,增大经济效益。所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物,所述有效蛋白酶混合物的比例占所述蛋白酶复合物的活性的76%,所述有效蛋白酶混合物的蛋白酶中,一种蛋白酶具有7.4的等电点,和另一种蛋白酶具有8.3的等电点;蛋白酶复合物有助于促进鱼类比如鮸鱼肠绒毛再生,并因此大大地改善目的营养物质的肠吸收,从而显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率,尤其是死亡率。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为7.4的蛋白酶具有82000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为8.3的蛋白酶具有20000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物作为饲料添加剂的补充物用于鮸鱼专用饲料中,所述饲料添加剂以粉末形式与饲料组合物混合。为了获得(ⅲ)蛋白酶复合物,培养疏绵状丝孢菌菌株并过滤发酵液,然后着手进行通过超滤和等电聚焦来提取蛋白酶复合物,最后将所获得的蛋白酶复合物冻干粉碎,具体包括:发酵:从初筛培养基平板中挑选有透明圈的单菌落划线分离,纯化后的菌株转接至盛有发酵产酶培养基的发酵摇瓶中,在0.3体积的无菌空气/培养基体积/分钟的通气,并在发酵产酶培养基ph为7.2、温度为40℃、转速为150r/min条件下恒温发酵4d,离心后取上清液;超滤:超滤借助于具有50kda截止阈值的膜来进行,超滤进行3小时;等电聚焦:分别控制溶液ph值为7.3和8.2进行等电聚焦,即获得占多数的具有7.4左右等电点(pi)的蛋白酶,和以较少比例、具有8.3左右等电点(pi)的蛋白酶;冻干粉碎后即得(ⅲ)蛋白酶复合物。所述发酵产酶培养基包括下列重量含量的物质:180目玉米芯木聚糖0.18%、苏糖醇0.012%、胰蛋白胨1.8%、酵母浸粉0.3%、硝酸钠0.1%、kh2po40.5%、k2hpo40.15%、mgso40.03%,自然ph;发酵产酶培养基中特殊粒径的碳源有助于高酶活蛋白酶的产出,合适粒径的碳源可使微生物自身生长繁衍与摇瓶中的溶氧量形成平衡,也可避免碳源颗粒过细而与其他营养物质形成粘度较大的悬浊液并进而影响菌株代谢产物的产生,降低产酶水平;此外,发酵产酶培养基中添加特殊配比的玉米芯木聚糖与苏糖醇对高酶活蛋白酶的产出具有诱导刺激作用,可大大加速疏绵状丝孢菌菌株对等电点为7.4的高活性蛋白酶的分泌与析出,从而在维持整体蛋白酶复合物的含量的基础上显著提高等电点为7.4的蛋白酶的占比,从整体上提高蛋白酶复合物的活性。对比例1:对比例1和实施例1基本相同,不同之处在于:发酵产酶培养基中未含有苏糖醇。实施例2:一种(ⅰ)寡糖组合物具有下列糖苷键分布:具有15mol%α-1,6糖苷键和12mol%β-2,1糖苷键,并且其中10干重%寡糖组合物的聚合度是6。所述(ⅰ)寡糖组合物包括:异麦芽糖-乳糖-寡糖、乳糖-菊粉二糖-寡糖和菊粉二糖-异麦芽糖-寡糖。在鮸鱼专用饲料添加剂或者饲料中施入寡糖组合物投喂鮸鱼具有有益的健康作用,有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用。一种(ⅱ)羧酸酯为:根据式1的乳酰羧酸酯,式1:r1-coo-[-ch(ch3)-coo]2-r2和其na盐,根据式2的乙醇酰羧酸酯,式2:r1-coo-[-ch2-coo]4-r2和其nh4盐;在以上式中,式1的r1为氯苯基,式1的r2为c3烯基链,式2的r1为溴苯基,式2的r2为c4烷基链;上述羧酸酯产品应用于鮸鱼专用饲料或者饲料添加剂中,可显著增强鮸鱼的抗细菌活性,其在鮸鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用,并且有助于提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,增大经济效益。一种(ⅲ)包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物,通过培养疏绵状丝孢菌而获得,所述有效蛋白酶混合物的比例占所述蛋白酶复合物的活性的82%,所述有效蛋白酶混合物的蛋白酶中,一种蛋白酶具有7.4的等电点,和另一种蛋白酶具有8.3的等电点;蛋白酶复合物有助于促进鱼类比如鮸鱼肠绒毛再生,并因此大大地改善目的营养物质的肠吸收,从而显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率,尤其是死亡率。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为7.4左右的蛋白酶具有85000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为8.3左右的蛋白酶具有22000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物作为饲料添加剂的补充物用于鮸鱼专用饲料中,所述饲料添加剂以粉末形式与饲料组合物混合。为了获得(ⅲ)蛋白酶复合物,培养疏绵状丝孢菌菌株并过滤发酵液,然后着手进行通过超滤和等电聚焦来提取蛋白酶复合物,最后将所获得的蛋白酶复合物冻干粉碎,具体包括:1发酵:从初筛培养基平板中挑选有透明圈的单菌落,划线分离;纯化后的菌株转接至盛有发酵产酶培养基的发酵摇瓶中,在0.3体积的无菌空气/培养基体积/分钟的通气,并在发酵产酶培养基ph为7.5、温度为45℃、转速为200r/min条件下恒温发酵6d,离心后取上清液;2超滤:超滤借助于具有50kda截止阈值的膜来进行,超滤进行10小时;3等电聚焦:分别控制溶液ph值为7.5和8.4进行等电聚焦,即获得占多数的具有7.4左右等电点(pi)的蛋白酶,和以较少比例,具有8.3左右等电点(pi)的蛋白酶;冻干粉碎后即得(ⅲ)蛋白酶复合物。发酵产酶培养基包括下列重量含量的物质:240目玉米芯木聚糖0.2%、苏糖醇0.014%、胰蛋白胨3%、酵母浸粉0.5%、硝酸钠0.2%、kh2po40.6%、k2hpo40.2%、mgso40.05%,自然ph;发酵产酶培养基中特殊粒径的碳源有助于高酶活蛋白酶的产出,合适粒径的碳源可使微生物自身生长繁衍与摇瓶中的溶氧量形成平衡,也可避免碳源颗粒过细而与其他营养物质形成粘度较大的悬浊液并进而影响菌株代谢产物的产生,降低产酶水平;此外,发酵产酶培养基中添加特殊配比的玉米芯木聚糖与苏糖醇对高酶活蛋白酶的产出具有诱导刺激作用,可大大加速疏绵状丝孢菌菌株对等电点为7.4左右的高活性蛋白酶的分泌与析出,从而在维持整体蛋白酶复合物的含量的基础上显著提高等电点为7.4左右的蛋白酶的占比,从整体上提高蛋白酶复合物的活性。一种鮸鱼专用饲料配合添加剂,其包括上述:(ⅰ)寡糖组合物,和(ⅱ)羧酸酯,和(ⅲ)蛋白酶复合物;所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物。鮸鱼专用饲料配合添加剂有助于改善鮸鱼肠道微生物菌群、促进鮸鱼肠绒毛再生、提高目的营养物质的肠吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用,还可显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率和死亡率,是一种高效的鮸鱼专用饲料配合添加剂。对比例2:对比例2和实施例2基本相同,不同之处在于:发酵产酶培养基中未含有240目玉米芯木聚糖。实施例3:一种鮸鱼专用饲料配合添加剂,其包括:(ⅰ)寡糖组合物;和(ⅱ)羧酸酯;和(ⅲ)蛋白酶复合物;所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物。鮸鱼专用饲料配合添加剂有助于改善鮸鱼肠道微生物菌群、促进鮸鱼肠绒毛再生、提高目的营养物质的肠吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用,还可显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率和死亡率,是一种高效的鮸鱼专用饲料配合添加剂。所述(ⅰ)寡糖组合物具有下列糖苷键分布:具有20mol%α-1,6糖苷键,和20mol%β-2,1糖苷键,和20mol%β-1,3糖苷键,并且其中13干重%寡糖组合物的聚合度是4。所述(ⅰ)寡糖组合物包括:异麦芽糖-寡糖、异麦芽糖-菊粉二糖-寡糖、菊粉二塘-寡糖、软骨素二塘-寡糖、透明质二塘-寡糖、透明质二塘-异麦芽糖-寡糖、软骨素二塘-异麦芽糖-寡糖、乳糖-寡糖、乳糖-透明质二塘-寡糖、异麦芽糖-乳糖-寡糖、乳糖-菊粉二糖-寡糖和菊粉二糖-异麦芽糖-寡糖。在鮸鱼专用饲料添加剂或者饲料中施入寡糖组合物投喂鮸鱼具有有益的健康作用,有助于降低鱼类死亡率、改善肠道微生物菌群、提高营养物质吸收、维持胃肠道健康和/或减少对抗生素的需求,降低养殖过程中抗生素的滥用。所述(ⅱ)羧酸酯选自:根据式1的乳酰羧酸酯,式1:r1-coo-[-ch(ch3)-coo]3-r2和其mn(ⅱ)盐,根据式2的乙醇酰羧酸酯,式2:r1-coo-[-ch2-coo]6-r2和其co(ⅱ)盐,在以上式中,式1和式2的r1为溴苯基,式1的r2为c5烷基,式2的r2为c3烯基链;上述羧酸酯产品应用于鮸鱼专用饲料或者饲料添加剂中,可显著增强鮸鱼的抗细菌活性,其在鮸鱼肠道感染的预防和治疗中具有有益的作用,并且有助于提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,增大经济效益。所述(ⅲ)蛋白酶复合物为通过培养疏绵状丝孢菌而获得的包含有效蛋白酶混合物的蛋白酶复合物,所述有效蛋白酶混合物的比例占所述蛋白酶复合物的活性的85%,所述有效蛋白酶混合物的蛋白酶中,一种蛋白酶具有7.4的等电点,和另一种蛋白酶具有8.3的等电点;蛋白酶复合物有助于促进鱼类比如鮸鱼肠绒毛再生,并因此大大地改善目的营养物质的肠吸收,从而显著降低鮸鱼养殖时的料肉比,缩短养殖周期,此外,上述蛋白酶复合物有助于强化鮸鱼的免疫系统,可明显降低由细菌污染引起的鮸鱼的发病率,尤其是死亡率。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为7.4左右的蛋白酶具有88000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物中等电点为8.3左右的蛋白酶具有24000安森单位/mg蛋白质的比活性。所述(ⅲ)蛋白酶复合物作为饲料添加剂的补充物用于鮸鱼专用饲料中,所述饲料添加剂以粉末形式与饲料组合物混合。为了获得(ⅲ)蛋白酶复合物,培养疏绵状丝孢菌菌株并过滤发酵液,然后着手进行通过超滤和等电聚焦来提取蛋白酶复合物,最后将所获得的蛋白酶复合物冻干粉碎,具体包括:1发酵:从初筛培养基平板中挑选有透明圈的单菌落(菌株所产蛋白酶可分解培养基中底物蛋白,因此菌落周围呈现透明圈现象),划线分离;纯化后的菌株转接至盛有发酵产酶培养基的发酵摇瓶中,在0.3体积的无菌空气/培养基体积/分钟的通气,并在发酵产酶培养基ph为7.4、温度为42℃、转速为180r/min条件下恒温发酵5d,离心后取上清液;2超滤:超滤借助于具有50kda截止阈值的膜来进行,超滤进行5小时;3等电聚焦:分别控制溶液ph值为7.4和8.3进行等电聚焦,即获得占多数的具有7.4左右等电点(pi)的蛋白酶,和以较少比例,具有8.3左右等电点(pi)的蛋白酶;冻干粉碎后即得(ⅲ)蛋白酶复合物。发酵产酶培养基包括下列重量含量的物质:200目玉米芯木聚糖0.18%、苏糖醇0.012%、胰蛋白胨2%、酵母浸粉0.4%、硝酸钠0.15%、kh2po40.55%、k2hpo40.18%、mgso40.04%,自然ph;发酵产酶培养基中特殊粒径的碳源有助于高酶活蛋白酶的产出,合适粒径的碳源可使微生物自身生长繁衍与摇瓶中的溶氧量形成平衡,也可避免碳源颗粒过细而与其他营养物质形成粘度较大的悬浊液并进而影响菌株代谢产物的产生,降低产酶水平;此外,发酵产酶培养基中添加特殊配比的玉米芯木聚糖与苏糖醇对高酶活蛋白酶的产出具有诱导刺激作用,可大大加速疏绵状丝孢菌菌株对等电点为7.4左右的高活性蛋白酶的分泌与析出,从而在维持整体蛋白酶复合物的含量的基础上显著提高等电点为7.4左右的蛋白酶的占比,从整体上提高蛋白酶复合物的活性。对比例3:对比例3和实施例3基本相同,不同之处在于:发酵产酶培养基中不含有200目玉米芯木聚糖和苏糖醇。实验例:1、分别检测实施例1~3和对比例1~3中(ⅲ)蛋白酶复合物中的一种等电点为7.4左右的蛋白酶和另一种等电点为8.3左右的蛋白酶的各自占比和比活性,统计如表1所示。表1实施例1~3和对比例1~3蛋白酶的占比和比活性由表1可知,本发明的优选实施例1~3中,pi为7.4左右的高活性蛋白酶的占比较高,而且其活性较为稳定,较大程度地提升了(ⅲ)蛋白酶复合物的整体的酶活性。2、一种鮸鱼专用饲料,所述鮸鱼专用饲料中含有基础饲料和鮸鱼专用饲料配合添加剂,所述基础饲料包含:32wt%的蛋白质、22wt%的脂肪;0.08wt%的核苷酸、4wt%可消化的含硫氨基酸、0.4wt%的总有效钙、0.35wt%的总有效磷和0.3wt%的钠。所述鮸鱼专用饲料配合添加剂分别选自实施例1~3和对比例1~3。将上述6种鮸鱼专用饲料分别投喂给养殖鮸鱼,其他因素完全一致,投喂4个月后,分别测量鮸鱼的平均体长和平均体重以及死亡率,统计结果如表2所示。表2鮸鱼的养殖情况统计测定项目实施例1实施例2实施例3对比例1对比例2对比例3平均体长(cm)40.541.643.035.534.233.8平均体重(g)855.1860.9905.5705.8710.6700.2死亡率(%)0.5%1.0%0.5%3.5%4.0%4.5%由表2可知,鮸鱼的平均体长、平均体重和成活率均显著优于对比例,说明本发明中的鮸鱼专用饲料配合添加剂可有效地提高鮸鱼的生长速率,降低料肉比与养殖周期,是一种高效、经济的鮸鱼专用饲料配合添加剂。上述实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术,故在此不再详细赘述。以上实施方式仅用于说明本发明,而并非对本发明的限制,本领域的普通技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,还可以做出各种变化和变型。因此,所有等同的技术方案也属于本发明的范畴,本发明的专利保护范围应由权利要求限定。当前第1页12
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