一种新型多肽防腐保鲜剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种防腐剂技术领域，具体设及一种新型多肤防腐剂及其制备方法和 其在水果防腐保鲜方面的新应用。
【背景技术】
[0002] 我国是世界上水果生产大国，目前我国水果的品种和产量均世界排名第一，因此， 水果生产是我国国民经济的重要支柱产业，是密切关系人民生活和出口创汇的重要产品。 但是，水果若不经过适当的保鲜处理，在储藏、运输等过程中会出现品质和风味的下降、霉 变、腐烂等问题，从而造成极大的经济损失。我国每年有8000万吨的水果腐烂，损失总价值 近800亿元。
[0003] 随着科学技术的发展，人们生活水平的提高，人们更加重视水果的新鲜度和营养 价值，对水果的食用品质提出了越来越高的要求，从而对水果保鲜技术的要求也就越来越 高，同时也逐渐重视水果防腐保鲜剂的使用。目前，在生产实践中，主要使用的是化学防腐 保鲜剂，然而频繁或过量地使用化学防腐保鲜剂会导致微生物耐药、化学防腐保鲜剂残留、 水果品质改变等问题，存在食品安全隐患，不能满足人们对高品质水果的要求，因此，安全 经济、广谱、高效、性能稳定的天然保鲜剂的开发和应用已引起人们的关注，成为了食品科 学研究和应用的一个热点。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种安全卫生，天然无毒，高效广谱，性能稳定的新型的多 肤防腐保鲜剂，另一个目的是提供该防腐保鲜剂在水果防腐保鲜领域的广泛应用。该新型 的多肤防腐保鲜剂W纯牛奶为原料，添加经过处理之后的西藏开菲尔粒进行发酵，然后分 离纯化得到的一种新型多肤防腐保鲜剂。它对金黄色葡萄球菌、沙口氏菌、大肠杆菌等水果 腐败菌和对相橘青霉菌、相枯绿霉菌、慕枝霜疫霉菌菌、慕枝炭痘病菌等水果采后病原真菌 具有很好的抑制效果，并对慕枝、龙眼、相枯、香蕉等水果中显示出显著的防腐保鲜活性。
[0005] 为实现上述目的，本发明的实施方案为:一种新型多肤防腐保鲜剂，由包括W下步 骤的方法制成： (1) 将对数后期的西藏开菲尔粒接种至纯牛奶中，30~40°C下密封静态发酵培养24~36 小时，至部分凝乳产生； (2) 加入与步骤（1)所得发酵乳等体积的纯牛奶，摇晃之后，在无菌环境下吸取液态发 酵乳，于MC固态培养基及MRS固态培养平板上用无菌涂布器分别涂布，然后密封培养； (3) 培养完毕后，将培养皿中的菌落及培养基加入至纯牛奶中，同时，添加碳源和氮源， 充分揽拌使各物质混匀，放置在30~35°C发酵65~75小时； (4) 发酵完成后，发酵乳离屯、10~20min，除去沉淀，得到含有新型多肤防腐剂的上清液； 巧)调节含有天然新型多肤防腐剂的上清液的pH为2~5,于8~10°C保持60~120min，然后 再离屯、，得到含有新型多肤防腐剂的沉淀； (6)将沉淀干燥成粉末状后冷冻保存，即得天然新型多肤防腐剂； 步骤(1)中，所述西藏开菲尔粒在牛奶中的接种量为8~15%; 作为优化，步骤(2)中，所述吸取液态发酵乳的体积为3mL，密封培养的溫度为28~35°C。
[0006] 作为优化，步骤(2)中，加入牛奶中的MC固态培养基及MR徊态培养平板比例为1:3 ~6,培养基与牛奶的质量比为8~12%。进一步优化的是，步骤(3)中，加入牛奶中的MC固态培 养基及MRS固态培养平板比例为1:3,培养基与牛奶的质量比为12%， 作为优化，步骤(3)中，所述培养完毕的标志是培养皿表面出现圆形稍扁平的微黄色单 菌落，菌落周围产生清晰巧圈。其中碳源为薦糖、葡萄糖和乳糖，质量配比为1~2: 3~7:0~3， 碳源与牛奶的的质量比为5~10%，所述的氮源为蛋白腺和酵母粉，质量配比为3~5:7~5,氮源 与牛奶的的质量比为4~8%。进一步优化的是，所述碳源与牛奶的质量体积比为3.84:100，薦 糖、葡萄糖、乳糖的质量配比为2:7:1，所述氮源与牛奶的质量体积比为2.47:100,蛋白腺、 酵母粉的质量配比为3:7。进一步优化的发酵溫度35°C，发酵时间75小时。
[0007] 作为优化，步骤(4)中，所述的离屯、分离转速为3000~50(K)r/min;进一步优化的离 屯、分离的转速为4500;r/min。
[0008] 作为优化，步骤（5)中，所述的过滤是利用200~500目的滤布进行过滤；所述pH为 2.2，于8~10°(3保持12〇111111; 作为优化，步骤(6)中，所述的干燥是烘箱干燥或者真空冷冻干燥。进一步优化的是，采 用烘箱干燥，溫度为50 ± 3°C，冷冻保存溫度为-18 ± 2°C。
[0009] 本发明还提供一种新型多肤防腐剂的在水果保鲜中的使用方法，包括:将水果浸 泡入加水稀释后的新型多肤防腐剂中，天然新型多肤防腐剂与水的质量比为0.05~0.3: 100，先浸泡5~15min后拱出，然后渐干，常溫储藏或冷藏。
[0010] 本发明确认所获得的新型多肤防腐剂活性经牛津杯实验检测分析，发现其对对金 黄色葡萄球菌、沙口氏菌、大肠杆菌等水果腐败菌和对相橘青霉菌、相枯绿霉菌、慕枝霜疫 霉菌菌、慕枝炭痘病菌等水果采后病原真菌具有显著的抑制效果。同时，其对光、热稳定，且 保存期长，为其在水果防腐保鲜领域的广泛应用奠定了良好的基础。
[0011] 本发明的优点在于：（1)本发明所得的新型多肤防腐剂是从由西藏开菲尔的发酵 乳中分离纯化得到的，安全卫生，天然无毒，有效减少化学药剂对人类的危害；（2)本发明所 得的新型多肤防腐剂的生产工艺简单，操作简便，产量高，并且发酵培养基主要成分为纯牛 奶，成本低，适用产业化生产，有显著的经济效益；（3)本发明所得的新型多肤防腐剂对金黄 色葡萄球菌、沙口氏菌、大肠杆菌等水果腐败菌和对相橘青霉菌、相枯绿霉菌、慕枝霜疫霉 菌菌、慕枝炭痘病菌等水果采后病原真菌具有显著的抑制效果，抗菌谱广。同时，其对光、热 稳定，且保存期长，使其在水果防腐保鲜领域的具有很大的潜在应用价值。（4)本发明所得 的新型多肤防腐剂能够最大限度的保存水果的营养成分及口感，并起到良好的护色效果， 延长其货架期，同时也为目前主要依靠化学杀菌剂来防治水果采后病害发生的技术难题提 供参考。
【具体实施方式】
[0012] 下面给出本发明的实施例，具体阐述本发明。
[001引实施例1: 新型多肤防腐保鲜剂的制备方法： 将西藏开菲尔粒接种至纯牛奶于30°C下密封静态发酵培养24小时后，至部分凝乳产 生。然后加入发酵乳等体积的纯牛奶，摇晃之后，在无菌环境下吸取3mL液态发酵乳，于MC固 态培养基及MRS固态培养平板上用无菌涂布器分别涂布并于30°C密封培养。待培养皿表面 出现圆形稍扁平的微黄色单菌落，菌落周围产生清晰巧圈时，将培养皿中的菌落及培养基 加入至纯牛奶中并加入碳源及氮源，于35°C发酵时间75小时。其中，MC固态培养基平板与 MRS固态培养平板的数量比为1:3,培养基与牛奶的质量比为12%，碳源与牛奶的质量体积比 为3.84:100,薦糖、葡萄糖、乳糖的比例为2:7:1，氮源与牛奶的质量体积比为2.47:100,蛋 白腺、酵母粉的比例为3:7。发酵完成后，发酵乳4500r/min离屯、10~20min，除去沉淀，得到含 有新型多肤防腐剂的上清液。接着调节含有天然新型多肤防腐剂的上清液的抑为2.2并于8 ~l0°C保持120min，再离屯、，得到含有新型多肤防腐剂的沉淀。最后，将沉淀与50°C烘箱干 燥，便得到天然新型多肤防腐剂的粉末。
[0014] 将西藏开菲尔粒接种至纯牛奶于30°C下密封静态发酵培养24小时后，至部分凝 乳产生。然后加入发酵乳等体积的纯牛奶，摇晃之后，在无菌环境下吸取3mL液态发酵乳，于 MC固态培养基及MRS固态培养