专利名称：一种山茱萸提取物的制备方法及其在卷烟中的应用及卷烟的制作方法
技术领域：
本发明涉及植物提取及其应用，特别是涉及一种山茱萸提取物的制备方法及其在卷烟中的应用以及包含该山茱萸提取物的卷烟。
背景技术：
山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Comus officinalis Sieb. Ct Zucc.)除去果核的干燥成熟果肉，又名蜀枣、药枣、山萸肉、枣皮、肉枣等。《本草新编》记载味酸涩，气平、微温，无毒。入肾、肝二经。列为中品，具有补益肝肾、收敛同涩的功效，用于眩晕耳鸣、肝虚寒热等症。《中国药典》各版均有收载。现代医学分析研究证明山茱萸主要含挥发性成分、环烯醚萜甘、有机酸、鞣质等成分，其中挥发性成分包含了 9种单萜烯、6种倍半萜烯、7种单萜醇、6种脂肪醇、4种单萜醛及酮、3种脂肪醛及醇、4种有机酸、8种酯类物质和15种芳香化合物。具有抗菌、调节免疫、降血糖、降血脂、抗氧化、抗癌、抗艾滋病、强心等功能，药用价值高，现已列入国家保健食品药食兼用的大名单之中。近年来，对于山茱萸中的有效成分提取，目前已经出现酶解提取、超声波提取、微波提取等高新技术，结果表明，微波、超声波及酶法都能明显缩短提取时间，提高有效成分得率，提取效果优于常规的回流提取法，但微波法不适用于热敏性物质提取，超声波提取容易受超声波衰减因素，形成超声波空白区。同时对于山茱萸中的有效成分的精制，传统工艺中主要以水提醇沉为主，但该方法耗时长、使用溶剂量大，得到的山茱萸提取物有效成分含量低。如何对提取工艺进行改进，以提高得到的山茱萸提取物有效成分的含量，是人们努力的方向。另一方面，现阶段，因为山茱萸的药理作用，国内有关山茱萸的应用研究主要集中在医药保健领域，在其他领域的应用较少，而在卷烟中的应用未见相关报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是弥补上述现有技术的不足，提出一种山茱萸提取物的制备方法及其在卷烟中的应用及卷烟，能较大幅度提高得到的山茱萸提取物中有效成分的含量，将得到的山茱萸提取物应用于卷烟制备中，能极大地改善卷烟的内在品质。本发明的技术问题通过以下的技术方案予以解决一种山茱萸提取物的制备方法，包括以下步骤
1)超声波-微波协同提取将干燥的粒度为150 420Mffl的山茱萸粉末和所述山茱萸粉末质量6 12倍的50 wt % 80 wt %的乙醇溶液一并投入超声波-微波协同萃取设备腔内进行提取；提取完成后冷却，使用150 200目的筛网过滤提取液得到滤液，将所述滤液浓缩，得浓缩液；
2)离心分离将所述浓缩液用所述浓缩液质量2 3倍的水溶解，进行离心分离，得到上清液；
3)柱色谱分离将所述上清液通过色谱柱，先用2 6倍柱体积的10wt% 30wt %乙
3醇或水洗脱杂质，再用2 6倍柱体积的50 wt % 70 wt %乙醇洗脱并收集洗脱液；
4)浓缩将步骤3)中得到的洗脱液进行浓缩，浓缩后得到的粘稠状溶液即为山茱萸提取物。优选的，所述步骤1)中所述超声波-微波协同提取时条件为超声波功率为40 350W，微波功率为10 500W，提取温度为40 80°C，提取时间为15min 40min。优选的，所述步骤2)中离心分离时离心速率为2000 8000rpm，时间为10 30mino优选的，所述步骤3)中色谱柱中的填料为聚酰胺树脂或大孔吸附树脂，用量为所述上清液质量的1 5倍，所述填料的径高比1 :4 1 :10，吸附流速为0. 5 4. OBV/h，洗脱流速为0. 5 4. OBV/h ；所述聚酰胺树脂的粒度为60 80目，所述大孔吸附树脂的类型为 AB-8，DM-301, DM-130，DS-401 中的一种。优选的，所述步骤1)中采用减压浓缩，将所述滤液浓缩至25°C时相对密度为1. 12 1. 16 ；所述步骤4)中采用减压浓缩，将所述洗脱液进行浓缩至25°C时相对密度为1. 20 1. 40。通过步骤1)的浓缩，得到的浓缩液除掉了大部分溶剂，但仍具有较大的流动性，便于步骤2)中的水能更好的溶解；经过步骤4)的减压浓缩控制，得到的提取物产品能达到一定的粘稠度，且仍具有一定的流动性，该状态下提取物产品中一般不需要添加防腐剂就能保存较长时间，即使得浓缩后的山茱萸提取物有着更好的稳定性。一种山茱萸提取物，采用上述任意一项所述的方法制备得到。一种根据权利要求上述任意一项所述的方法得到的山茱萸提取物在卷烟中的应用，将所述山茱萸提取物单独配成溶液或者配入常规烟草香料中以加香或加料的方式喷洒于烟草物料中。优选的，将所述山茱萸提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，按烟草物料质量的0. 1%-1%喷洒于烟草物料中。优选的，所述有机溶剂为丙二醇、山梨醇、木糖醇和甘油中的一种，或者其中任意两种以上的混合液。一种卷烟，所述卷烟中添加有根据上述任意一项所述的方法得到的山茱萸提取物。本发明与现有技术对比的有益效果是将超声波和微波提取有机结合，充分利用超声波的空化作用和微波的高能作用，在低温常压条件下进行超声波-微波协同提取山茱萸，使得山茱萸中的有效成分能提取得较为完全，在通过柱色谱分离之前设置离心步骤，使得提取液具有更高的澄清度和稳定性，可避免在上柱时堵塞填料，降低层析效率的情况；同时采用柱色谱分离，利用填料树脂的特异性吸附作用，通过梯度洗脱，可选择性除掉大部分在后续会影响烟草加香效果的鞣质等大分子物质，确保山茱萸提取物中有效成分的含量；本发明的山茱萸的提取方法，除使用水和乙醇外，不添加任何有害化学试剂进行辅助提取，不污染环境、提取工艺简单、操作时间短，使整个生产过程中高效，适于工业化实施。另一方面，将本发明制备方法所得到的山茱萸提取物应用于卷烟中，使用方便，能提高卷烟烟气的质量和档次感，使烟气丰富、甜润、改善口感余味。
具体实施例方式
4
下面结合具体实施方式
对本发明做进一步详细说明。在一个实施例中，山茱萸提取物的制备方法，包括以下步骤1)超声波-微波协同提取将干燥的粒度为150 420Mm的山茱萸粉末和所述山茱萸粉末质量6 12倍的50wt % 80 wt %的乙醇溶液一并投入超声波-微波协同萃取设备腔内进行提取；提取完成后冷却，使用150 200目的筛网过滤提取液得到滤液，将所述滤液浓缩，得浓缩液；2)离心分离将所述浓缩液用所述浓缩液质量2 3倍的水溶解，进行离心分离，得到上清液；3)柱色谱分离将所述上清液通过色谱柱，先用2 6倍柱体积的10wt% 30 wt %乙醇或水洗脱杂质，再用2 6倍柱体积的50 wt % 70 wt %乙醇洗脱并收集洗脱液；4)浓缩将步骤3)中得到的洗脱液进行浓缩，浓缩后得到的粘稠状溶液即为山茱萸提取物。在另一些实施例中，可以采用以下的优选条件中的一种或多种
步骤1)中超声波-微波协同提取时条件为超声波功率为40 350W，微波功率为10 500W，提取温度为40 80°C，提取时间为15min 40min。步骤2)中离心分离时离心速率为2000 8000rpm，时间为10 30min。步骤3)中色谱柱中的填料为聚酰胺树脂或大孔吸附树脂，用量为所述上清液质量的1 5倍，所述填料的径高比1 :4 1 10，吸附流速为0. 5 4. OBV/h,洗脱流速为0. 5 4. OBV/h ；所述聚酰胺树脂的粒度为60 80目，所述大孔吸附树脂的类型为AB-8，DM-301，DM-130，DS-401 中的一种。步骤1)中采用减压浓缩，将所述滤液浓缩至25°C时相对密度为1. 12 1. 16 ；步骤4)中采用减压浓缩，将所述洗脱液进行浓缩至25°C时相对密度为1. 20 1. 40。原料的处理将待提取的山茱萸原料在40 70°C条件下进行烘干，并粉碎至粒度为150 420Mm的粗粉。将原料粉碎为粗粉，使得山茱萸在后续提取中有更高的提取率。以下通过更优选的实施例对本发明进行详细说明。实施例1
准确称取200g山茱萸，在45°C烘干，并粉碎至粒度为250Mm的粗粉，加入1. 6kg浓度为70 %的乙醇溶液，超声波-微波协同萃取15min，超声波功率50W，微波功率300W，恒温^°C，提取液经200目筛网过滤，减压浓缩至25°C时相对密度为1. 12，得浓缩液；用2倍浓缩液质量的水溶解浓缩液，在离心速率为4000rpm下离心分离20min，得上清液；上清液通过聚酰胺树脂动态吸附，吸附脱流为lBV/h，加样完成后，先用5倍柱体积的20%的乙醇洗脱杂质，再用4倍柱体积的70%的乙醇洗脱，收集用70wt%的乙醇洗脱得到的洗脱液，其中聚酰胺树脂的用量为上清液质量的1. 5倍，粒度为60 80目，填料的径高比为1:8，洗脱流速为lBV/h ；洗脱液经过减压浓缩至25°C时相对密度为1. 25，即为山茱萸提取物I。实施例2
准确称取200g山茱萸，在50°C烘干，并粉碎至粒度为420Mm的粗粉，加入1. 2kg浓度为50%的乙醇溶液，超声波-微波协同萃取25min，超声波功率50W，微波功率250W，恒温60°C，提取液经200目筛网过滤，减压浓缩至25°C时相对密度为1. 15，得浓缩液；用2倍浓缩液质量的水溶解浓缩液，在离心速率为6000rpm下离心分离lOmin，得上清液；上清液通过AB-8大孔吸附树脂动态吸附，吸附流速为0. 5BV/h,上样完成后，先用5倍柱体积的20%乙醇洗脱杂质，再用4倍柱体积的80%乙醇洗脱，收集洗脱液，其中AB-8大孔吸附树脂的用量为上清液的2倍，填料的径高比为1:4，洗脱流速为0. 5BV/h ；洗脱液经过减压浓缩至25°C时相对
5密度为1.31，即为山茱萸提取物II。实施例3
准确称取200g山茱萸，在65°C烘干，并粉碎至粒度为250Mm的粗粉，加入1.2 kg浓度为75%的乙醇溶液，超声波-微波协同萃取30min，超声波功率50W，微波功率400W，恒温60°C，提取液经200目筛网过滤，减压浓缩至25°C时相对密度为1. 12，得浓缩液；用2倍浓缩液质量的水溶解浓缩液，在离心速率为5000rpm下离心分离15min，得到上清液；上清液通过DM-130大孔吸附树脂动态吸附，吸附流速为2. 5BV/h BV/h,上样完成后，先用5倍柱体积的水洗脱杂质，再用5倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集洗脱液，其中DM-130大孔吸附树脂的用量为总提取液的3倍，粒度为60 80目，填料的径高比为1:10，洗脱流速为2. 5BV/h ；洗脱液经过减压浓缩至25°C时相对密度为1. 33，即为山茱萸提取物III。实施例4
一种山茱萸提取物，采用上述任意一个实施例的方法制备得到。实施例5
一种山茱萸提取物在卷烟中的应用，将采用上述任意一个实施例的方法制备得到的山茱萸提取物单独配成溶液或者配入常规烟草香料中以加香或加料的方式喷洒于烟草物料中。将山茱萸提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，其中，有机溶剂可为丙二醇、山梨醇、木糖醇或甘油，或者其中任意2种以上的混合液，在制备卷烟前，将山茱萸提取物稀释液按烟草物料质量的0. 1%_1%喷洒在烤烟烟叶表面，按常规的卷烟工艺进行处理，即在喷施山茱萸提取物的稀释液后，将烤烟烟丝贮存4小时，再经过切丝、烘丝、加香、贮丝、卷接和包装工序制成卷烟成品。实施例6
试验测试将上述实施例1、2和3中制得的山茱萸提取物I、II、III均用50%的丙二醇溶液稀释至10倍，然后喷洒在同一种空白(未加香加料)烤烟烟丝表面，添加量分别为烟丝重量的0. 1%、0. 2%、0. 5%、1. 0%。同时以未喷洒山茱萸提取物的烤烟烟丝为对照样，后续处理按常规的卷烟工艺进行，即在喷施山茱萸提取物的稀释液后，将烤烟烟丝贮存4小时，再经过切丝、烘丝、加香、贮丝、卷接和包装工序制成卷烟成品，由8人组成的评吸小组分别对上述样品进行评吸对比，结果如下表
权利要求
1.一种山茱萸提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)超声波-微波协同提取将干燥的粒度为150 420Mffl的山茱萸粉末和所述山茱萸粉末质量6 12倍的50 wt % 80 wt %的乙醇溶液一并投入超声波-微波协同萃取设备腔内进行提取；提取完成后冷却，使用150 200目的筛网过滤提取液得到滤液，将所述滤液浓缩，得浓缩液；2)离心分离将所述浓缩液用所述浓缩液质量2 3倍的水溶解，进行离心分离，得到上清液；3)柱色谱分离将所述上清液通过色谱柱，先用2 6倍柱体积的10wt% 30wt %乙醇或水洗脱杂质，再用2 6倍柱体积的50 wt % 70 wt %乙醇洗脱并收集洗脱液；4)浓缩将步骤3)中得到的洗脱液进行浓缩，浓缩后得到的粘稠状溶液即为山茱萸提取物。
2.根据权利要求1所述的山茱萸提取物的制备方法，其特征在于所述步骤1)中所述超声波-微波协同提取时条件为超声波功率为40 350W，微波功率为10 500W，提取温度为40 80°C，提取时间为15min 40min。
3.根据权利要求1所述的山茱萸提取物的制备方法，其特征在于所述步骤2)中离心分离时离心速率为2000 8000rpm，时间为10 30min。
4.根据权利要求1所述的山茱萸提取物的制备方法，其特征在于所述步骤3)中色谱柱中的填料为聚酰胺树脂或大孔吸附树脂，用量为所述上清液质量的1 5倍，所述填料的径高比1 :4 1 :10，吸附流速为0. 5 4. OBV/h，洗脱流速为0. 5 4. OBV/h ；所述聚酰胺树脂的粒度为60 80目，所述大孔吸附树脂的类型为AB-8，DM-301，DM-130，DS-401中的一种。
5.根据权利要求1所述的山茱萸提取物的制备方法，其特征在于所述步骤1)中采用减压浓缩，将所述滤液浓缩至25°C时相对密度为1. 12 1. 16 ；所述步骤4)中采用减压浓缩，将所述洗脱液进行浓缩至25°C时相对密度为1. 20 1. 40。
6.一种山茱萸提取物，其特征在于采用权利要求1-5任意一项所述的方法制备得到。
7.一种根据权利要求1-5任意一项所述的方法得到的山茱萸提取物在卷烟中的应用，其特征在于将所述山茱萸提取物单独配成溶液或者配入常规烟草香料中以加香或加料的方式喷洒于烟草物料中。
8.根据权利要求7所述的山茱萸提取物在卷烟中的应用，其特征在于将所述山茱萸提取物用无毒无刺激性气味的有机溶剂进行稀释，稀释倍数为10-15倍，按烟草物料质量的0. 1%-1%喷洒于烟草物料中。
9.根据权利要求8所述的山茱萸提取物在卷烟中的应用，其特征在于所述有机溶剂为丙二醇、山梨醇、木糖醇和甘油中的一种，或者其中任意两种以上的混合液。
10.一种卷烟，其特征在于所述卷烟中添加有根据权利要求1-5任意一项所述的方法得到的山茱萸提取物。
全文摘要
本发明公开了一种山茱萸提取物的制备方法及其提取物在卷烟中的应用，其中山茱萸提取物通过以下方法制得山茱萸—超声波-微波协同提取—提取液浓缩—离心分离—柱色谱分离—浓缩得山茱萸提取物；将本发明制备方法所得到的山茱萸提取物应用于卷烟制备中，使用方便，能提高卷烟烟气的质量和档次感，使烟气丰富、甜润、改善口感余味。本法结合了超声波、微波振动匀化的优点，使样品介质内各点受到的作用一致，目标萃取物范围广泛，降低目标物与样品基体的结合力，加速目标物从固相进入溶剂相的过程，处理样品量大；提取完成后再经条件温和的柱层析精制得到山茱萸提取物，为卷烟加香提供了一种新的天然烟用香原料。
文档编号A24B15/18GK102389162SQ201110222590
公开日2012年3月28日 申请日期2011年8月4日 优先权日2011年8月4日
发明者余汉谋, 叶晓青, 姜兴涛, 李庆廷, 肖海鸿 申请人:深圳波顿香料有限公司, 深圳烟草工业有限责任公司