专利名称：抗氧化组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于预防和/或治疗由氧化应力(stress)、伴随氧化应力而来的过早生理性细胞程序死亡现象和/或环境因素诱导的细胞程序死亡引起的病症或者疾病的组合物。
因此，该组合物可以采取饮食补充物或者药物的形式发挥作用，这依赖其支持或者预防性作用，或者严格的治疗作用，这些作用是该组合物对其施用的特定个体所要起到的作用。
本发明组合物能够有效预防或者治疗的疾病包括动脉粥样硬化、缺血再灌注性损伤、风湿性关节炎、癌症、中风、白内障和其他眼科疾病、甲状腺疾病、肝病、性功能障碍、帕金森氏症、阿尔茨海默氏病以及受病毒感染病人的各种变性病症。
氧化应力、氧化应力引起的过早发生的生理性细胞程序死亡现象和环境因素诱导的细胞程序死亡是由反应性氧物质(ROS)产生的。ROS是高反应性的物质，它形成于生理性正常代谢反应之后以及线粒体呼吸链的电子运输过程中。
氧化应力能够被抗氧化剂中和，后者通过调节发生在体内的氧化过程而在保持健康方面举足轻重。ROS的失控生成引起的氧化性损伤已经被认为是数目日益增加的临床病症的病因，例如前面所列的那些病症。
ROS介导的细胞和组织的损伤的机理主要包括脂质过氧化反应、氧化性DNA损伤和蛋白质氧化，但是也有ROS能够诱导细胞死亡的证据。实际上，内生性抗氧化系统的紊乱能够调节细胞增殖，调节可能是正向或者负向，分别导致在低过氧化物水平时刺激细胞增殖或者在高浓度下导致细胞程序死亡/细胞坏死。
因此，显而易见的是，研究能够中和这种氧化途径的化合物就可能具有相应的临床效果。均衡的人体饮食含有多种抗氧化剂，并且有强有力的证据表明那些抗氧化剂物质之间存在累加与协同作用。从临床的角度来看，这意味着使用含多个抗氧化性物质的组合物所提供的抗氧化应力的保护与单独使用每种抗氧化剂相比可能会显著改善。
本发明的主要目标就是提供这样一种组合物。
目前已经发现一种可口服或者肠胃外给药的组合物(i)，该组合物含有混合(in administrative)或者分开包装的下列成分(a)L-肉碱内盐或其可药用盐；(b)乙酰L-肉碱内盐或其可药用盐；(c)α-硫辛酸；(d)辅酶Q10；(e)维生素E；与(f)硒代蛋氨酸，该组合物完全达到了有效中和氧化应力的满意目标。
L-肉碱和乙酰L-肉碱的可药用盐是指其与酸形成的任何盐类，所述酸不会引起不想要的毒害或者副作用。这些酸对药理学家和制药技术专家来说是众所周知的。
这样的盐类的非限制性例子如下氯化物；溴化物；碘化物；天冬氨酸盐，酸式天冬氨酸盐；柠檬酸盐，酸式柠檬酸盐；酒石酸盐；磷酸盐，酸式磷酸盐；延胡索酸盐，酸式延胡索酸盐；半乳糖二酸盐；甘油磷酸盐；葡萄糖磷酸盐；乳酸盐；马来酸盐，酸性马来酸盐；乳清酸盐；草酸盐；酸式草酸盐；硫酸盐，酸式硫酸盐；三氯乙酸盐；三氟乙酸盐以及甲基磺酸盐。
一份FDA批准的药理学可接受的酸类名单列于Int.J.Pharm.，33，1986，201-217，这份最近的出版物在本说明书中引用以备参考之用。
关于固体给药形式的制备，比如，药片、药丸、胶囊和颗粒，优选使用非吸湿性盐类。
本发明单位剂量形式的组合物(ii)包含(a)20-110毫克L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；
(b)20-110毫克乙酰L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(c)70-130毫克α-硫辛酸；(d)90-110毫克辅酶Q10；(e)5-15毫克维生素E；与(f)40-60微克硒代蛋氨酸。
特别优选的组合物(iii)包含(a)100毫克L-肉碱内盐；(b)100毫克乙酰L-肉碱内盐；(c)100毫克α-硫辛酸；(d)100毫克辅酶Q10；(e)10毫克维生素E；与(f)50微克硒代蛋氨酸。
本发明同时涉及预防/治疗方法，该方法包括给有这种需要的病人服用有效量的前述组合物(i)。正在进行多剂量给药方案的病人优选服用前述单位剂量形式的组合物(ii)，以及更特别地，可以服用单位剂量形式的组合物(iii)。本方法尤其适用于那些正在补充精氨酸的病人，因为前述组合物对预防/对抗由上述补充精氨酸引起的氧化氮诱导的氧化性损伤效果显著。
最近几年里，不仅营养方面的医师而且心脏病专家与内分泌专家也已经越来越多地推荐包含精氨酸的饮食补充。
精氨酸能比其他任何氨基酸更有效地减少胆固醇。6-17克的精氨酸日剂量已经被证明能降低低密度脂蛋白-胆固醇，不会影响高密度脂蛋白-胆固醇，而且不会引起副作用。精氨酸还促进高胆固醇人群健康的冠状微循环，并且抑制血凝块的形成，血凝块是导致心脏病和中风的主要病因。据报道，向心绞痛病人的冠状血管直接灌输精氨酸能显著地恢复他们的循环。
精氨酸是一种一氧化氮前体。一氧化氮(NO)通常由许多类型的细胞产生，并且在从神经传递到血管舒张的领域扮演各种角色。通过松驰动脉，一氧化氮能够改善循环相关疾病，比如心绞痛、间歇性跛行、高血压以及脑循环损伤。
尽管一氧化氮有那么多益处，但它是一种自由基，一种有毒的氧化剂超出50到100ppm的水平能产生肺部毒性。
临床试验下面的临床试验对前面提到的组合物(iii)的抗氧化功效进行了评估。该组合物以小药囊的形式提供。
1.1研究设计本试验是一个16周的随机试验。总共有20个健康的受试者(12男，8女)参加了这次研究。这些受试者必须满足下列包含标准非吸烟者，没有服用维生素/抗氧化剂或者雌激素补剂、甲状腺素或者降脂药物；血糖、肝及肾功能测试正常；参加本研究前至少三个月无急性疾病；参加者被嘱咐在实验期间不得选择特别的生活方式，坚持他们日常的饮食和身体活动，并且不得改变维生素丰富食物的消费；在研究期间，无人接受任何额外的补剂或者药物。参加者给出书面允诺，并且被要求每周进行汇报。
参加者在三个星期的时间内每天服用一小药囊组合物(iii)的形式的抗氧化补剂。该小药囊组合物每天早晨饭后服用。对照组A(5个受试者)只服用乙酰L-肉碱和L-肉碱，并且对照组B(6个受试者)只服用与组合物(iii)等量的硒代蛋氨酸、α-生育酚、α-硫辛酸以及辅酶Q10。
参加研究小组的受试者与两个对照组中的受试者在开始研究时在年龄、体重指标和脂肪分布(lipid profile)方面是相似的。安全评价包括负作用和生命迹象评价、血液学检验、生化检验、尿液分析以及体格检查。这些评价在治疗开始前在基线完成，然后在治疗期的每周以及完成该研究两个星期后进行评价。
1.2抗氧化酶的分析酶活性在新鲜红细胞中确定。离心1毫升血液后，红细胞用等渗溶液冲洗三次，然后在双蒸水中溶解(终体积为5毫升)。超氧化物岐化酶(SOD)活性根据Flohé和Otting(Flohé，L.，Otting F.，MethodsEnzymol.10593-104，1984)确定。过氧化氢酶(CAT)活性根据Pippenger等[Pippenger，C.E.，Browne，R.W.，Armstrong，D.，Regulatory antioxidant enzymes；Methods in Molecular Biology；Free Radical and Antioxidant Protocols(D.Armstrong，Ed.)vol108，pp299-313，Humana Press，Totowa NJ，1998.]确定。谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性根据Flohé和Gunzler(Flohé，L.，Gunzler，W.A.，Methods Enzymol.105114-121，1984)确定。结果以酶单位/毫克血红蛋白表示。
1.3血浆维生素E，辅酶Q10与QH2的测量维生素E与辅酶Q10的测定依据Lang等人的方法(Lang，J.K.，Gohil，K.，Packer，L.，Anal.Biochem.157106-116，1986)。血浆通过新鲜汲取短暂离心(在4℃800g持续5分钟)后的肝素化静脉血得到。1毫升血浆与含有0.1毫摩尔BHT的1毫升乙醇混合，并且用3毫升正己烷萃取。然后将正己烷相在氮气流下蒸发至干，重新溶于乙醇。取400微升经0.45微米过滤器过滤后，取其中100微升等份用于HPLC分析。HPLC系统由一个配有两个510泵的Waters装置、一个带有100微升环的Rheodyne进样阀、一个配有相同材料基质预柱(guardcolumn)(10毫米)并稳定于27℃的Symmetry 300柱(反相C18，4.6×25厘米，粒径5微米)、一个Waters996二极管阵列检测器和一个Waters474荧光光谱检测器组成。这两个检测器呈直线装配，柱中流体首先经过紫外(UV)检测器。用由A(80/20体积/体积甲醇/水)和B(95/5体积/体积乙醇/异丙醇)组成的混合物作为梯度以1毫升/分钟的流速洗脱。初始状态为39％A和61％B。16分钟后，流动相线性改变两分钟后到100％B；100％B持续10分钟，此后系统反向线性改变两分钟后到初始状态。基于泛醌醇(Rt＝25.1分钟；λmax＝290nm)与泛醌(Rt＝27.1分钟；λmax＝275nm)的保留时间和吸收光谱，以及维生素E(Rt＝18.2分钟；λmax＝292nm；λex＝220nm；λem＝335nm)的保留时间、荧光和吸收光谱来鉴别峰。峰定量通过采用专用软件进行自动峰面积整合来完成。
1.4TRAP分析总自由基俘获抗氧化参数(TRAP)根据Ghiselli等(Ghiselli，A.，Serafini，M.，Maiani G.，Azzini，E.，Ferro-Luzzi，A.，Free Radic.Biol.Med.1829-36，1995)来确定。
1.5血浆氢过氧化物的定量血清氧化能力的估计采用意大利DIACRONs.r.l生产的D-ROMs试剂盒检测方法。该方法基于氢过氧化物存在下过渡金属通过Fenton型反应催化形成羟基自由基(-OH)的能力。产生的羟基自由基的量与存在于血浆中的过氧化物的量直接成比例，该自由基被N，N-二乙基-对-苯二胺分子俘获后，形成λmax为505nm的色原。
1.6淋巴细胞的分离PBMCs从肝素化外周血中通过Lymphoprep梯度离心(Nycomed，Oslo，Norway)分离，用磷酸缓冲盐(PBS)冲洗两次，再重悬于补加了10％热灭活胎牛血清(FCS；Life Technologics)、10IU/毫升盘尼西林/链霉素(Life Technologics)、10mM HEPES(Sigma ChemicalCompany，St.Louis，MO，USA)和1mM L-谷氨酰胺(Life Technologics)的RPMI1640(Life Technologics，Inc.，Paisley，UK)培养基(完全培养基)中。在程序性细胞死亡分析中，PBMCs(5×105/毫升)在37℃、5％CO2增湿空气下于完全培养基上培养12个小时。另外，为了对线粒体的功能进行分析，分离细胞等分试样并保持在4℃完全培养基上直到标记。
1.7细胞表面和细胞内抗原的表达带有CD4或者CD8表型的细胞绝对数通过流式细胞术确定。PBMCs用如下抗体染色藻红蛋白(PE)-标记的抗-hCD4或者抗-hCD8(BectonDickinson，Immunocytometry Systems，BDIS，San Josè，CA，USA)。为了对表面抗原进行染色，将5×105PBMCs用含有1％BSA(Sigma)与0.1％叠氮化钠的PBS(PBS-BSA-NaN3)冲洗，然后在4℃用前面所述的单克隆抗体温育20分钟。为了确定背景染色，将细胞用20微升小鼠IgG1PE(Becton Dickinson)温育。然后，用含有2％FCS的PBS-BSA-NaN3冲洗两次，用FACScan流式细胞计量仪(Becton Dickinson)采用流式细胞术对标记过的细胞进行分析。每个样品根据大小(前向角散射，FSC)和粒度(侧向角散射，SSC)参数选通10,000个活淋巴细胞。
1.8用碘化丙锭对程序死亡细胞核染色淋巴细胞程序死亡采用Nicoletti等(Nicoletti，I.；Migliorati，G.；Pagliacci，C.；Grignani，F.；Riccardi，C.，J.Immunol.Method 139271-279，1968)的方法以含有亚二倍DNA细胞的百分数来定量。简而言之，在经过短时间培养后，细胞悬浮液在200g下离心10分钟。为了对表面抗原染色，1×106个细胞的等分试样用前面所述的结合有异硫氰酸荧光素(FITC)的抗-hCD4或者抗-hCD8(Becton Dickinson)mAbs进行培养，并且冲洗后，轻轻地重悬于1毫升低渗荧光染料溶液(0.1％柠檬酸钠加0.1％Triton X-100TM，含50微克/毫升的PI，0.05毫克/毫升的RNaseA；Sigma)。细胞在4℃保存过夜，然后在置于FACScan流式细胞计量仪(Becton Dickinson)上的染色溶液中进行分析，该流式细胞计量仪装有一个15毫瓦空气冷却的488nm氩离子激光器。程序死亡细胞核在红色荧光信道下显示一个宽的亚二倍体DNA峰，它与含有正常(二倍体)DNA的细胞核显示的窄峰很容易区分。橙色PI荧光在一束585/42nm波段光通过滤光器后被收集到，并且以四个对数值(four decade log)的规模显示。流式血细胞计数器上的检测以低样品流速(12μl/min)来实现，目的是为了提高DNA直方图的变动系数。以它们的FSC和SSC参数为基础选通(gated)淋巴细胞(包括活的、早期程序死亡和后期程序死亡细胞)，在FSC对PI荧光双参数轮廓图上选通荧光数据，以排除单核细胞、细胞残骸以及细菌凝块。这种选通方法能很容易地区分细胞残骸(很低的FSC和降低的PI荧光)与死亡细胞(低FSC和高PI荧光)。每份样品至少收集到了10,000个事件(events)。
1.9程序死亡T细胞的表型分析短期培养淋巴细胞中的程序死亡细胞的定量与表型分析采用Schmid等(Schmid，I.，Uittenbogaart，C.H.，Keld，B.，Giorgi，J.V.，J.Immunol.
Methods170145-157；1994)报道的方法用7-氨基-放线菌素D(7-AAD；Sigma)染色程序死亡细胞而进行。这种方法证明能根据它们增加的细胞膜通透性区分早期和晚期程序死亡细胞。经过培养的淋巴细胞首先用上述表面抗原的FITC缀合单克隆抗体培育，并且冲洗过的细胞接着用20微克/毫升的7-AAD在4℃避光培育20分钟。在20微克/毫升非荧光放线菌素D(Sigma)存在下，染色过的细胞进一步用含有1％多聚甲醛的PBS固定，以防止程序死亡细胞中的7-AAD染色和避免活细胞非特异性标记。最后，双重染色的细胞在4℃黑暗中培育过夜，然后在其染色溶液中用FACScan流式细胞计数器(BectonDickinson)分析。绿色荧光经530/30BPnm滤光器后收集，来自7-AAD的红色荧光经650长穿透(long pass)滤光器滤过。将FSC与7-AAD荧光结合生成散点图，并且在具有负(活细胞)、淡(早期程序死亡细胞)和亮(后期程序死亡细胞)荧光的清晰群体周围画出区域。每个样品至少收集到10,000个事件。
1.10线粒体功能分析为了同时对表面标记和ROS(比如超氧化物阴离子和羟基过氧化物)的形成进行估计，首先将细胞用PE标记的抗-hCD4或者抗-hCD8抗体染色，然后在37℃下2毫摩尔/升的hydroethidine(HE；MolecularProbes)和37℃下5mm2’，-7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)(Molecular Probes)中分别暴露15分钟和1小时。在对照实验中，细胞在与解偶联试剂羰基氰化物间氯苯腙(mClCCP；50毫摩尔/升，37℃，30分钟；Sigma)或者ROS-生成试剂2-甲萘醌(1毫摩尔/升，37℃，1小时，Sigma)预先培育后进行标记。对于DCFH-DA，采取了阳性对照(细胞在15mM H2O2中保存2分钟并冲洗三次)。Monobromobimane(MBB)(Molecular Probes)染色谷胱甘肽(GSH)。在谷胱甘肽-S-转移酶存在下，MBB在低浓度下与GSH非酶促结合，产生GSH特异性荧光。简而言之，将T细胞成团化，并在1毫升含有40μMMBB的培养基中室温黑暗重悬10分钟。在FACScan细胞荧光计(BectonDickinson)上进行分析操作之前将细胞置于冰上。对正常大小淋巴细胞的主要群体选通FSC与SSC参数。适当补偿后，在不同波长下记录荧光在525nm为FITC，DCFH-DA和MBB(FL-1)，在575nm为PE(FL-2)以及600nm下为HE(FL-3)。
2 统计分析所有结果以平均值±标准差表示。采用Student t检验进行组之间的统计对比。P值＜0.05认为是显著的。
结果血浆抗氧化状态与过氧化物水平补充前述组合物(iii)21天导致总抗氧化状态的显著增高(表1)。从血浆TRAP值和脂质过氧化产物的测定中得到了支持这种增强的抗氧化状态的证据。在两个对照组中也发现了相当的TRAP值的上升，这两个小组只使用组合物成分中的一部分，即对照组A使用肉碱，对照组B使用硒代蛋氨酸、α-生育酚、α-硫辛酸以及辅酶Q10。相反地，发现处理末期组合物组中血浆过氧化物水平与基线相比显著下降，而两个对照组的下降程度则较低。
维生素E、辅酶Q10和QH2的基线血浆水平分别为26、0.50、0.66纳摩尔/毫升，与文献报道的数据相当。补充组合物3星期导致α-生育酚、辅酶Q10、QH2的平均血浆水平以及QH2/(Q10+QH2)比率(表1)的增加。有趣的是，补充该组合物导致血浆辅酶(主要为它的还原态)浓度增加1.5倍。
红细胞中抗氧化酶的活性在治疗小组中，服用组合物导致治疗末期抗氧化酶GSHPX(p＜0.01)的特异活性比基线值显著增加(表2)。对照组B中也发现了GSHPX活性有相似的增加(p＜0.01)。补充组合物或者组合物的一些组分后，发现SOD活性没有显著变化。服用组合物的小组在研究末期的CAT活性与基线相比显著下降(p＜0.05)；两个对照组中也观察到了CAT活性下降的趋势，不过在服用组合物的一些成分前测得的值的差异没有达到统计显著性。
淋巴细胞程序死亡组合物的补充与淋巴细胞对程序死亡敏感性的降低相联系。实际上，与基线相比，受治疗病人经3星期补充后遭受程序死亡的淋巴细胞数量减少了。这通过PI染色程序死亡细胞核建立(参考Nicoletti等，同上)，也就是探测诸如染色质浓缩与DNA等程序细胞死亡后期事件(Wyllie，A.N.，Morris，R.G.；Smith，A.L.；Dunlop，D.，J.Pathol.14267-77；1991)。在完全培养基中培育12小时后，接受3星期处理后的CD4与CD8淋巴细胞与治疗前水平相比细胞自发性程序死亡率显著下降(CD4与CD8的基线分别为6.1±0.59和6.8±3.03，处理期末分别为2.8±1.52和3.9±2.09；两参数p＜0.01)(表3)。只补充肉碱对程序细胞死亡的CD4和CD8淋巴细胞的频率有相当甚至更大的影响(CD4与CD8淋巴细胞的基线分别为7.2+1.19和12.2+3.24，处理期末分别为3.9+1.19和5.4+1.94；CD4与CD8细胞皆为P＜0.01)。甚至服用硒代蛋氨酸、α-生育酚、α-硫辛酸、辅酶Q10的受试者与治疗前水平相比程序死亡淋巴细胞的频率也有了很大下降(CD4与CD8细胞的基线分别为6.7+1.58和8.6+1.91，处理期末分别为3.7+1.59和5.9+1.12，两参数P＜0.01)。
用7-AAD测量程序细胞死亡也进一步证实了这些结果，7-AAD是一种DNA插入荧光试剂，它只穿透正遭受程序细胞死亡而因此表现出收缩表型(缩减的FSC)的细胞膜(两参数p＜0.001)(表3)。
反应性氧物质的生成如表4所示，来自参加本研究健康自愿者的循环淋巴细胞含有一部分能氧化非荧光亲脂性(比如膜通透)染料HE成为亲水性荧光产物Eth的细胞。由于HE对超氧化物阴离子特别敏感，这种变化可能反映了超氧化物阴离子的生成(Rothe，G.；Valet，G.，J.Leukoc.Biol.47440-446，1990)。此外，淋巴细胞用一种检测氢过氧化物生成的荧光染料DCFH-DA标记(Rothe等，同上，和Hockenbery，D.M.，Oltvai，Z.N.，Yin，X.M.，Milliman，C.L.，Korsmeyer，S.J.，Cell 75241-251，1993)。
我们发现，补充组合物与这种细胞百分数跟治疗前水平相比剧烈下降有关，其中所述细胞具有Eth高与DCFH-DA阳性表型(表4)。对于用HE或者DCFH-DA染色过的CD4和CD8细胞，统计分析显示治疗前后水平之间有非常显著的差异(两参数p＜0.001)。
在对照组A和B中，同样发现了Eth高与DCFH-DA阳性的CD4与CD8亚类的发生次数也有显著的下降，即使所述对照组中的补充对那些参数影响(虽然统计上很显著)小于用组合物治疗的(表4)。
用本组合物治疗也跟具有谷胱甘肽染色阳性的CD4或者CD8表型的循环淋巴细胞发生次数的增加有关(在T0和T1分别为，CD455.1±7.71和59.2±4.58；CD869.4±4.98和74.9±6.29；p分别为p＜0.05与p＜0.01)。我们发现只服用乙酰L-肉碱和L-肉碱(在T0和T1分别为，CD456.9±4.58和61.1±3.49；CD864.9±7.22和76.3±6.77，p分别为p＜0.18与p＜0.05)，或者组合物成分，即硒代蛋氨酸、α-硫辛酸、α-生育酚以及辅酶Q10(在T0和T1分别为，CD451.6±3.72和60.3±1.91；CD863.7±5.87和72.5±4.30；p分别为p＜0.01与p＜0.05)的受试者中甚至也有类似的趋势。
安全特性本组合物治疗耐受性好，并且参与的受试者无人有副作用经历。经血液学与生物化学试验没有发现异常。
表1血浆抗氧化状态
*p＜0.05**p＜0.01***p＜0.001表2抗氧化酶活性
*p＜0.05**p＜0.01***p＜0.001
表3对程序性死亡的淋巴细胞染色
*p＜0.05**p＜0.01***p＜0.001表4在线粒体水平对反应性氧物质染色
*p＜0.05**p＜0.01***p＜0.001
缩写词7-AAD7-氨基-放线菌素DABAP 2，2’-偶氮二(2-脒基丙烷)CAT 过氧化氢酶DCFH-DA 2’，7’-二氯荧光黄双乙酸盐DPPH 1，1-联苯-2-苦基-偕腙肼(hydrazil)FITC 异硫氰酸荧光素FSC 前向角散射GSH 谷胱甘肽GSHPX谷胱甘肽过氧化物酶HE hydroethidineMBB monobromobimanemC1CCP 羰基氰化物间氯苯腙.OH 羟基自由基PBMCs外周血单核细胞PBS 磷酸盐缓冲溶液PI 碘化丙锭Q10 辅酶Q10的氧化态泛醌QH2 辅酶Q10的还原态泛醇R-PE R-藻红蛋白ROS 反应性氧物质SOD 超氧化物岐化酶SSC 侧向角散射TBARS硫代巴比妥酸反应物质TRAP 总自由基俘获抗氧化参数LOOH 脂质过氧化物
权利要求
1.一种组合物，包含(a)L-肉碱内盐或其可药用盐；(b)乙酰L-肉碱内盐或其可药用盐；(c)α-硫辛酸；(d)辅酶Q10；(e)维生素E；与(f)硒代蛋氨酸。
2.以单位剂量形式存在的权利要求1的组合物，包含(a)20-110毫克L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(b)20-110毫克乙酰L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(c)70-130毫克α-硫辛酸；(d)90-110毫克辅酶Q10；(e)5-15毫克维生素E；与(f)40-60微克硒代蛋氨酸。
3.权利要求2的组合物，包含(a)100毫克L-肉碱内盐；(b)100毫克乙酰L-肉碱内盐；(c)100毫克α-硫辛酸；(d)100毫克辅酶Q10；(e)10毫克维生素E；与(f)50微克硒代蛋氨酸。
4.权利要求1-3的组合物，其中所述可药用盐选自下列氯化物；溴化物；碘化物；天冬氨酸盐，酸式天冬氨酸盐；柠檬酸盐，酸式柠檬酸盐；酒石酸盐；磷酸盐，酸式磷酸盐；延胡索酸盐，酸式延胡索酸盐；半乳糖二酸盐；甘油磷酸盐；葡萄糖磷酸盐；乳酸盐；马来酸盐，酸式马来酸盐；乳清酸盐；草酸盐，酸式草酸盐；硫酸盐，酸式硫酸盐；三氯乙酸盐；三氟乙酸盐以及甲磺酸盐。
5.一种组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防、抵消和/或治疗由氧化应力、伴随氧化应力而来的过早生理性细胞程序死亡现象和/或环境因素诱导的细胞程序死亡引起的病症和/或疾病，并且所述组合物包含(a)L-肉碱内盐或其可药用盐；(b)乙酰L-肉碱内盐或其可药用盐；(c)α-硫辛酸；(d)辅酶Q10；(e)维生素E；与(f)硒代蛋氨酸。
6.权利要求5的用途，其中所述单位剂量形式的组合物包含(a)20-110毫克L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(b)20-110毫克乙酰L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(c)70-130毫克α-硫辛酸；(d)90-110毫克辅酶Q10；(e)5-15毫克维生素E；与(f)40-60微克硒代蛋氨酸。
7.权利要求5或者6的用途，用于制备预防/抵消接受精氨酸补充的病人中一氧化氮诱导的氧化性损伤的药物。
8.权利要求5-7的用途，其中所述疾病由淋巴细胞程序死亡和/或伴随过早生理性细胞程序死亡现象的线粒体变化而引起。
9.权利要求5-8的用途，其中所述疾病包括动脉粥样硬化、缺血再灌注性损伤、类风湿性关节炎、癌症、中风、白内障和其他眼科疾病、甲状腺疾病、肝病、性功能障碍、帕金森氏症、阿尔茨海默氏病以及受病毒感染病人的变性病症。
10.一种预防和/或治疗由氧化应力、伴随氧化应力而来的过早生理性细胞程序死亡现象和/或环境因素诱导的细胞程序死亡引起的病症或者疾病的治疗方法，该方法包括给有这种需要的病人服用有效量的组合物，该组合物含有(a)L-肉碱内盐或其可药用盐；(b)乙酰L-肉碱内盐或其可药用盐；(c)α-硫辛酸；(d)辅酶Q10；(e)维生素E；与(f)硒代蛋氨酸。
11.权利要求10的治疗方法，包括以多剂量给药方案给所述病人服用单位剂量形式的组合物，该单位剂量形式的组合物含有(a)20-110毫克L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐；(b)20-110毫克乙酰L-肉碱内盐或者等摩尔量的其可药用盐类；(c)70-130毫克α-硫辛酸；(d)90-110毫克辅酶Q10；(e)5-15毫克维生素E；与(f)40-60微克硒代蛋氨酸。
12.权利要求11的治疗方法，包括给接受精氨酸补充的病人服用一定量的所述组合物，该一定量的所述组合物对预防/抵消由所述精氨酸补充引起的一氧化氮诱导的氧化损伤是有效的。
13.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗动脉粥样硬化。
14.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗缺血再灌注性损伤。
15.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗类风湿性关节炎。
16.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗癌症。
17.权利要求11的治疗方法，用于预防或治疗中风。
18.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗白内障以及其他眼科疾病。
19.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗甲状腺疾病。
20.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗肝病。
21.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗性功能障碍。
22.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗帕金森氏症。
23.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗阿尔茨海默氏病。
24.权利要求11的治疗方法，用于预防或者治疗受病毒感染病人的变性病症。
全文摘要
公开了一种口服或者肠胃外给药的组合物，其含有下列成分(a)L－肉碱内盐或其可药用盐；(b)乙酰L－肉碱内盐或其可药用盐；(c)α－硫辛酸；(d)辅酶Q
文档编号A61K31/355GK1809344SQ02818722
公开日2006年7月26日 申请日期2002年9月26日 优先权日2001年10月3日
发明者C·德西蒙 申请人:艾蒂尔药物有限公司