专利名称：1.3.4－三氮杂－非那烯和1,3,4,6－四氮杂非那烯衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及抑制表皮生长因子受体(″EGFR′)酪氨酸激酶的新1，3，4-三氮杂-非那烯(phenalene)和1，3，4，6-四氮杂非那烯衍生物。这些化合物及其药物上可接受的盐和酯类具有抗增殖活性且特别用于治疗或控制癌症，特别是实体瘤。本发明还涉及含有这类化合物的药物组合物并涉及治疗或控制癌症的方法，最具体的是治疗或控制乳腺、肺、结肠和前列腺肿瘤的方法。最后，本发明还涉及用于制备本文公开的新非那烯衍生物的新中间体化合物。
受体酪氨酸激酶是参与细胞信号转导的跨膜蛋白。特别地，它们将生长因子信号从细胞表面传递到控制诸如生长、分化和血管发生这类关键功能的某些胞内过程中。A.A.Adjei《未来药物》(Drugs ofthe Future)2001，26(11)1087-1092。
许多癌症与异常信号传导有关。特别地，经由酪氨酸激酶的失调的信号传导在癌的生长与扩散中起关键作用。A.D.Laird和J.M.Cherrington《专业药物研究观点》(Expert Opin.Invetig.Drugs)，2003，12(1)51-64。一族受体酪氨酸激酶为表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶。已经发现这些受体在许多上皮癌中超表达且涉及肿瘤侵害性。
受体酪氨酸激酶(RTKs)且特别是EGFR在癌的生长和扩散中的作用得到充分确立。参见Laird和Cherrington，文献同上；和Adjey，文献同上。由此存在开发RTKs且特别是EGFR的小分子抑制剂的深入研究。
就抑制EGFR的化合物及其治疗应用的综述而言，参见Laird和Cherrington，文献同上；文献同上；《未来药物》(Drugs of the Future)2002，27(4)339-345；M.R.Myers等《生物有机和药物化学特性》(Bioorganic &Medicinal Chemistry Letters)，1997，7(4)421-424；A.J.Bridges等《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)，1996，39267-276；G.W.Rewcastle等《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)1995，383482-3487。
本发明涉及如下通式的新1，3，4-三氮杂-非那烯和1，3，4，6-四氮杂非那烯衍生物或其药物上可接受的盐或酯类 其中Z为C或N；R1和R2独立地选自H、低级烷基、被OR6取代的低级烷基、NR6R7、杂环和杂芳基；R3和R4各自独立地选自H、F、Cl和Br；R5选自H、OH、SH、氧代、硫酮和C1-C3烷基；且R6和R7各自独立地选自H和低级烷基，或另一方面，NR6R7彼此可以形成含有3-7个原子的环，所述的环任选包括至多三个其它杂原子且任选被一个或多个低级烷基取代。
上述通式中的虚线表示在Z与连接R5的碳原子之间或碳原子与R5之间存在双键。虚线的应用是描述互变异构体形式在本领域中众所周知。
这些化合物抑制表皮生长因子受体(″EGFR″)酪氨酸激酶。这些化合物及其药物上可接受的盐和酯类具有抗增殖活性且特别用于治疗或控制癌症，特别是实体瘤。
本发明还涉及包含本发明的一种或多种化合物或其药物上可接受的盐或酯，和药物上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。
本发明进一步涉及治疗或控制癌症，更具体地说是治疗或控制实体瘤，最具体的情况是治疗或控制乳腺、肺和结肠和前列腺肿瘤的方法，通过对需要这类疗法的患者给予治疗有效量的通式I的化合物或其药物上可接受的盐或酯来进行。
最终，本发明还涉及用于制备通式I化合物的新中间体化合物。
本文所用的下列术语应具有如下定义。
″烷基″单独或与另一术语的组合，例如烷基-杂环表示含有1-12个，优选1-10个碳原子的直链或支链饱和脂族烃。优选的烷基为含有1-6个，优选1-4个碳原子的″低级烷基″。典型的低级烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、2-丁基、戊基、己基等。本文所用的C1-C3烷基指的是含有1-3个碳原子的烷基。
芳基单独或与另一术语组合指的是单价单环或双环芳族碳环烃基，优选6-10元芳族环系。优选的芳基包括，但不限于苯基、萘基、甲苯基和二甲苯基。
″有效量″指的是有效预防、缓解或改善疾病症状或延长所治疗受试者存活的用量。
″卤素″指的是氟、氯、溴或碘，优选氟、氯或溴。
″杂原子″指的是选自N、O和S的原子。
″杂芳基″指的是含有至多两个环的芳族杂环系。优选的杂芳基包括，但不限于噻吩基、呋喃基、吲哚基、吡咯基、吡啶基、吡啶、吡嗪基、噁唑基、thiaxolyl、喹啉基、嘧啶基、咪唑和四唑基。
″杂环″或″杂环基″指的是3-8个环原子的饱和或部分不饱和非芳族环基，其中1-4个环原子为选自氮、氧或硫或其组合的杂原子，剩余的环原子为C。优选的杂环的实例为哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、二氢吲哚、四氢吡喃基、硫代吗啉代、五甲撑硫和亚戊基砜。
″IC50″指的是抑制50％测定的特异性活性所需的本发明具体化合物的浓度。可以特别如下文实施例23中所述测定IC50。
″氧代″指的是＝O。
″药物上可接受的酯″指的是带有醇或羧基的通式I的常规酯化的化合物，这些酯类保留了通式I化合物的生物有效性和特性且在体内(生物体内)被裂解成相应的醇或羧酸。在体内被裂解(在被水解的情况中)成相应的羧酸(R40C(＝O)OH)的酯基的实例为可以被NR41R42取代的低级烷基酯类，其中R41和R42为低级烷基或其中NR41R42彼此形成单环脂族杂环，诸如吡咯烷、哌啶、吗啉、N-甲基哌嗪等；和通式R40C(＝O)OCHR43OC(＝O)的碳酸酯类，其中R43为氢或甲基。R40为本发明的化合物。它以其羧酸形式表示(在作为酯对患者给药和被裂解成相应的酸后)。
低级烷基酯类的实例为乙酰基、丙酰基的酯类等。被NR41R42取代的低级烷基酯类的实例为二乙氨基乙酰基、2-(4-吗啉基)乙酰基、2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙酰基的酯类等。碳酸酯类的实例为乙酰氧基-甲氧基-甲酰基和2-(二甲氨基)乙酰氧基-甲氧基-甲酰基的酯类。
有关用于递送药物化合物的酯类的实例和应用的其它信息可以获自《前体药物设计》(Design of Prodrugs.)Bundgaard H ed.(Elsevier，1985)。另外，参见H.Ansel等《药物剂型与递药系统》(Pharmaceutical DosageForms and Drug Delivery Systems)(第6版1995)108-109页；Krogsgaard-Larsen等《药物设计与研发教科书》(Textbook of Drug Designand Development)(第2版1996)152-191页；H.Gao等《合成》(Synthesis)2000，329-351；J.Alexander等《药物化学杂志》(J.Med.Chem.)1988，31，318-322。
″药物上可接受的盐″指的是保留通式I化合物的生物有效性和特性且由合适的非毒性有机酸或无机酸或有机碱或无机碱形成的常用酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐的实例包括那些来源于无机酸和那些来源于有机酸的盐，所述的无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸，所述的有机酸诸如对甲苯磺酸、水杨酸。甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。碱加成盐的实例包括那些来源于铵、钾、钠和季铵氢氧化物的盐，诸如氢氧化四甲基铵。将药物化合物(即药物)转化成盐的化学修饰是制药化学技术人员众所周知获得改善的化合物的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性的技术。例如，参见H.Ansel等《药物剂型与递药系统》(Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems)(第6版1995)196和1456-1457页。
″药物上可接受的″，诸如药物上可接受的载体、赋形剂等指的是药理上可接受的且基本上对给予特定化合物的受试者而言非毒性的。
被取代的烷基中的″取代″指的是除非另有说明，取代可以在一个或多个位置上进行，在每个位置上的取代基独立地选自具体选项。
″治疗有效量″指的是显著抑制人肿瘤细胞、包括人肿瘤细胞系的增殖和/或预防其分化的通式I的至少一种化合物或其药物上可接受的盐或酯的用量。
″硫酮″表示非末端碳原子上的＝S。
本发明在一个实施方案中涉及如下通式的化合物或其药物上可接受的盐或酯类 其中Z和R1-R5如上述所定义。
在通式I化合物的优选实施方案中，Z为N。在另一个优选的实施方案中，Z为C。
在通式I化合物的另一个优选实施方案中，R1和R2独立为低级烷基，优选甲基。在最优选的实施方案中，R1和R2均为甲基。
在通式I化合物的另一个优选实施方案中，R3和R4独立地选自H、Br、Cl和F，最优选H。在最优选的实施方案中，R3和R4均为H。
在通式I化合物的另一个优选实施方案中，R5选自＝O、＝S、H和低级烷基，最优选H和低级烷基。
下列化合物为本发明的优选化合物8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮(实施例1D)；8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮(实施例2)；8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例3)；8，9-二甲氧基-2-甲基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例4)；2-乙基-8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例5)；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例6C)；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮(实施例7)；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例8)；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮(实施例9)；3-(3-溴-苯基)-2-乙基-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例10)；3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮(实施例11C)；3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例12)；3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯(实施例13C)；3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮(实施例14)；7，8-二甲氧基-5-甲基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例15G)；4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例16G)；4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例17G)；4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例18G)；4-(4-溴-2-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例19G)；7，8-二甲氧基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例20B)；4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例21B)；和4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例22B)。
本文公开和上述通式I包括的化合物可以表现出互变异构或结构异构现象。本发明的目的在于包括这些化合物的任意互变或结构异构形式或这类形式的混合物且不限于上述通式中所述的互变或结构异构形式。
可以通过任意常规方式制备本发明的化合物。实施例中提供了合成这些化合物的合适的方法。一般来说，可以按照下述合成途径制备通式I的化合物。
方案1 方案2 方案3 方案4
方案5 方案6 将立体异构体混合物分离成旋光纯的立体异构体(当通式I的化合物为手性时)。
可以按照已知的方法，诸如拆分或手性高效液相色谱法(也称作手性HPLC)对通式I的异构体结构进行任选分离。拆分法是众所周知的且概括在《异构体、外消旋物和拆分》(″Enantiomers，Racemates，and Resolutions″)(Jacques，J.等，John Wiley&Sons，NY，1981)中。手性HPLC法也是众所周知的且概括在《用液相色谱法分离的对映体》(″Separation of Enantiomersby Liquid Chromatographic Methods″)(Pirkle，W.H.和Finn J.《不对称合成杂志》《Asymmetric Synthesis》，第1卷，Morrison，J.D.，Ed.，Academic Press，Inc.，NY 1983，第87-124页)中。
将带有碱性氮的通式I的化合物转化成药物上可接受的酸加成盐。
可以通过常规方式将带有碱性氮的通式I的化合物任选转化成药物上可接受的酸加成盐。例如，可以用无机酸或用合适的有机酸处理所述化合物，其中所述的无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，所述的合适的有机酸诸如乙酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等。
将带有羧酸基团的通式I的化合物转化成药物上可接受的碱金属盐。
可以通过常规方式将带有羧酸基团的通式I的化合物任选转化成药物上可接受的碱金属盐。例如，可以用无机碱，诸如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等处理所述化合物。
将带有醇或羧酸基团的通式I的化合物转化成药物上可接受的酯。
可以通过常规方式将带有醇或羧酸基团的通式I的化合物任选转化成药物上可接受的酯。形成酯的条件取决于分子上其它官能团对反应条件的稳定性。如果分子上的其它部分对酸性条件稳定，那么可以便利地通过在无机酸(例如硫酸)在醇中的溶液中加热制备酯。另一方面，可以通过使醇与酸酐或酰基卤在本领域中公知的条件下缩合制备酯。如果分子对酸性条件不稳定，那么可能保留的的制备酯的其它方法包括用醇和酸在有偶联试剂存在下和任选有其它可以加速反应的试剂存在下处理所述化合物。许多这类偶联试剂为有机化学领域技术人员所公知。两个实例为二环己基碳二亚胺和三苯膦/偶氮二甲酸二乙酯。就将二环己基碳二亚胺用作偶联试剂的情况而言，便利的是在下列条件下进行反应用醇、二环己基碳二亚胺处理酸，且在任选有催化量(0-10mol％)的N，N-二甲氨基吡啶存在的惰性溶剂中，诸如卤化烃(例如二氯甲烷)，反应温度约为0℃-约室温，优选在约室温下。就将三苯膦/偶氮二甲酸二乙酯用作偶联试剂的情况而言，便利的是在下列条件下进行反应在约0℃-约室温，优选在约0℃下在惰性溶剂，诸如醚(例如四氢呋喃)或芳族烃(例如苯)中用醇、三苯膦和偶氮二甲酸二乙酯处理所述酸。
在可选的实施方案中，本发明包括药物组合物，该组合物包括至少一种通式I的化合物或其盐或酯和药物上可接受的赋形剂和/或载体。
可以通过口服给予这些药物组合物，例如以片剂、包衣片、锭剂、硬或软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂的形式。还可以通过直肠给予它们，例如以栓剂形式，或通过非肠道给予它们，例如以注射液形式。
可以按照本领域中公知的方式，例如通过常规混合、包囊、溶解、制粒、乳化、包埋、制锭或冻干法制备包括通式I化合物和/或其盐或酯类的本发明药物组合物。可以使用治疗惰性无机或有机载体配制这些药物组合物。可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其盐用作片剂、包衣片、锭剂和硬胶囊的这类载体。用于软胶囊的合适的载体包括植物油、蜡和脂肪。随活性物质性质的不同，就软胶囊而言，一般部需要载体。用于制备溶液和糖浆剂的合适的载体为水、多元醇类、蔗糖、转化糖和葡萄糖。合适的注射用载体为水、醇类、多元醇类、甘油、植物油、磷脂类和表面活性剂。用于栓剂的合适的载体为天然或硬化油、蜡、脂肪和半液体多元醇类。
药物制剂还可以含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、增甜剂、着色剂、矫味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。它们还可以含有其它治疗上有价值的物质，包括非通式I化合物的那些活性组分。
剂量如上所述，本发明的化合物，包括通式I的化合物用于治疗或控制细胞增殖性疾病，包括癌症的化学预防。将化学预防定义为通过阻断开始的诱变情况或通过阻断已经发生损伤的癌前期细胞的发展或抑制肿瘤复发来抑制侵害性癌的发展。这些化合物和含有所述化合物的制剂特别用于治疗或控制实体瘤，诸如乳腺、结肠、肺和前列腺的肿瘤。
本发明化合物的治疗有效量指的是有效预防、缓解或改善疾病症状或延长所治疗受试者存活的化合物用量。对治疗有效量的测定属于本领域技术范围内。
本发明化合物的治疗有效量或剂量可以在宽限内改变且可以按照本领域中公知的方式测定。在每种特定情况中，根据个体需要调整这类剂量，包括所给予的具体化合物、所治疗的疾病和所治疗的患者。一般来说，就对体重约70Kg的成年人进行口服或非肠道给药而言，约10mg-约10,000mg，优选约200mg-约1,000mg的每日剂量应是合适的，不过，如果指明，可以超过上限。可以将日剂量作为单剂量或分剂量给药，或对非肠道给药而言，可以作为连续输注给药。
联用可以将本发明的化合物与已知抗癌疗法联用(联合给予或依次给予)，所述的抗癌治疗诸如放射疗法或细胞生长抑制剂或细胞毒性剂，诸如，但不限于DNA相互作用活性剂，诸如顺铂或多柔比星；拓扑异构酶II抑制剂，诸如依托泊苷；拓扑异构酶I抑制剂，诸如CPT-11或托泊替康；微管蛋白相互作用活性剂，诸如紫杉醇、多西他赛或大环内酯类抗肿瘤药；激素药，诸如他莫昔芬；胸苷酸合酶抑制剂(thymidilate synthase inhibitors)，诸如5-氟尿嘧啶；和抗代谢物，诸如甲氨蝶呤。通式I的化合物还可以与p53反式激活调节剂联用。
如果配制成固定剂量，那么上述联用产品包括上述范围剂量内的本发明化合物和其它药物活性剂或经批准剂量范围内的治疗。当同时给药或联用不适宜时，还可以将通式I的化合物与已知的抗癌药或细胞毒性剂依次给药。本发明并不限于给药顺序可以在给予已知抗癌药或细胞毒性剂前或之后给予通式I的化合物。
中间体本发明在另一个实施方案中还涉及用于制备通式I化合物的新中间体。这些新中间体包括下列化合物(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺(实施例15E)；5-碘甲基-7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例15F)；5-烯丙基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(实施例16D)；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺(实施例16E)；4-(4-氯-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例16F)；5-烯丙基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(实施例17D)；
(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺(实施例17E)；4-(3-溴-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例17F)；5-烯丙基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(实施例18D)；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺(实施例18E)；4-(3-氯-4-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例18F)；5-烯丙基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(实施例19D)；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺(实施例19E)；4-(4-溴-2-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(实施例19F)；7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(实施例20A)；7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(实施例21A)；和7，8-二甲氧基-4-(3-溴-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(实施例22A)。
实施例下列实施例解释了用于合成和使用本发明化合物和制剂的优选方法。这些实施例和制剂是解释性的且不起限定作用。应理解存在其它属于如本文后附权利要求所定义的本发明实质和范围的实施方案。
实施例中使用的缩写DMF N，N-二甲基甲酰胺TLC薄层色谱法DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯实施例1
8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮 C17H14N4O3MW 322.33步骤A6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮 C10H19N3O5MW251.20按照Chao，Qi；Deng，Lynn；Shili，Hsiencheng；Leoni，Lorcnzo M.；Genini，Davide；Carson，Dennis A.；Cottam，Howard B.在《药物化学杂志》(J.Med.Chem)1999，42，3860-3873中所述的步骤制备6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮，为淡黄色固体。
步骤B(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺 C16H14N4O4MW 326.31向6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(1.0g，3.98mmol)(来自实施例1，步骤A，上文)在SOCl2(20mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF。然后在90℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(30mL)，然后加入苯胺(0.36mL，3.98mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。在减压下浓缩该反应混合物并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺，为黄色固体。(产率0.9g，70％)。
步骤C6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺 C16H16N4O2MW 296.33向(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺(1.0g，3.14mmol)(来自实施例1，步骤B，上文)、NH4Cl(1.7g，31.4mmol)在MeOH、H2O和CHCl3(40mL，2∶1∶1)中的溶液中加入Zn粉(2.0g，31.4mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。然后过滤该混合物，浓缩滤液且然后用氯仿(100mL)提取。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2(1∶1)作为洗脱剂，从而得到所需的6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺，为黄色树胶(产率0.5g，54％)。
步骤D8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮 C17H14N4O3MW 322.33向6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺(0.2g，0.68mmol)(来自实施例1，步骤C，上文)在1，2-二氯乙烷(50mL)中的溶液中加入1，1′-羰二咪唑(0.55g，3.4mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮，为黄色固体。(产率0.13g，59％)。
实施例28，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮 C17H14N4O2SMW 338.39向6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺(80mg，0.27mmol)(来自实施例1，步骤C，上文)在1，2-二氯乙烷(30mL)中的溶液中加入1，1′-硫代羰二咪唑(0.58g，3.24mmol)(Fluka)。在搅拌的同时将该反应混合物在80℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮，为灰色固体。(产率50mg(55％)。
实施例38，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C17H14N4O2MW 306.32将6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺(80mg，0.27mmol)(来自实施例1，步骤C，上文)在甲酸(5mL)中的溶液在110℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为白色固体。(产率45mg，54％)。
实施例48，9-二甲氧基-2-甲基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C18H16N4O2MW 320.35将6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺(60mg，0.20mmol)(来自实施例1，步骤C，上文)在乙酐(2mL)中的溶液在150℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的8，9-二甲氧基-2-甲基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为黄色固体。(产率20mg，62％)。
实施例52-乙基-8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C19H18N4O2MW 334.38将6，7-二甲氧基-N4-苯基-喹唑啉-4，5-二胺(130mg，0.44mmol)(来自实施例1，步骤C，上文)在丙酸酐(3mL)(Aldrich)中的溶液在170℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的2-乙基-8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为橙色固体。(产率21mg，14％)。
实施例63-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C17H13BrN4O2MW 385.23步骤A(3-溴-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺 C16H13BrN4O4MW 405.22向6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(1.0g，3.98mmol)(来自实施例1，步骤A，上文)在SOCl2(20mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.05mL)。然后在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热3小时。蒸发溶剂并真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(30mL)，然后加入3-溴苯胺(0.69g，3.98mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。除去溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的(3-溴-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺，为黄色固体。(产率1.2g，74％)。
步骤BN4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺 C16H15BrN4O2MW 375.23向(3-溴-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺(0.2g，0.49mmol)(来自实施例6，步骤A，上文)和NH4Cl(0.26g，4.94mmol)在MeOH、H2O和CHCl3(30mL，6∶1∶1)的混合物中的溶液中加入Zn粉(0.64g，9.87mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。然后过滤该混合物，浓缩滤液且然后用氯仿(100mL)提取。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺，为黄色树胶。(产率0.1g，54％)。
步骤C3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C17H13BrN4O2MW 385.23将N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(100mg，0.27mmol)(来自实施例6，步骤B上文)在甲酸(5mL)中的溶液在110℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(100mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为棕色固体。(产率86mg，83％)。
实施例73-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮 C17H13BrN4O3MW 401.23向N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(0.15g，0.40mmol)(来自实施例6，步骤B，上文)在1，2-二氯乙烷(50mL)中的溶液中加入1，1′-羰二咪唑(0.65g，4.0mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮，为棕色固体。(产率0.12g，75％)。
实施例83-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C18H15BrN4O2MW 399.26将N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(120mg，0.32mmol)(来自实施例6，步骤B，上文)在乙酐(3mL)中的溶液在150℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为棕色固体。(产率60mg，47％)。
实施例93-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮 C17H13BrN4O2SMW 417.29向N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(80mg，0.21mmol)(来自实施例6，步骤B，.上文)在1，2-二氯乙烷(50mL)中的溶液中加入1，1′-硫代羰二咪唑(0.38g，2.13mmol)(Fluka)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶2∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮，为黄色固体。(产率80mg，91％)。
实施例103-(3-溴-苯基)-2-乙基-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C19H17BrN4O2MW 413.28将N4-(3-溴-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(120mg，0.32mmol)(来自实施例6，步骤B，上文)在丙酸酐(3mL)(Aldrich)中的溶液在170℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-溴-苯基)-2-乙基-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为棕色固体。(产率50mg，38％)。
实施例113-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮 C17H13ClN4O3MW 356.77步骤A(3-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺 C16H13ClN4O4MW 360.76将6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(0.5g，1.99mmol)(来自实施例1，步骤A，上文)在SOCl2(20mL)(Aldrich)和几滴DMF(0.05mL)中的溶液在90℃下搅拌的同时加热3小时。然后蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(30mL)，然后加入3-氯苯胺(0.25g，1.99mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。在减压下浓缩该反应混合物并通过色谱法纯化残余物使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶2∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的(3-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺，为黄色固体。(产率0.4g，56％)。
步骤BN4-(3-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺 C16H15ClN4O2MW 330.78向(3-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺(0.2g，0.55mmol)(来自实施例11，步骤A，上文)和NH4Cl(0.24g，4.43mmol)在MeOH、H2O和CHCl3(50mL，2∶1∶12)的混合物中的溶液中加入Zn粉(0.72g，11mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。然后过滤该混合物。浓缩滤液且然后用氯仿(100mL)提取。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的N4-(3-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺，为橙色树胶。(产率0.1g，55％)。
步骤C3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮 C12H13ClN4O3MW 356.77向N4-(3-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(80mg，0.24mmol)(来自实施例11，步骤B，上文)在1，2-二氯乙烷(30mL)中的溶液中加入1，1′-羰二咪唑(0.2g，1.21mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮，为棕色固体。(产率50mg，58％)。
实施例123-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C18H15ClN4O2MW 354.80将N4-(3-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(0.2g，0.60mmol)(来自实施例11，步骤B上文)在乙酐(3mL)中的溶液在150℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(50mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为黄色固体。(产率90mg，42％)。
实施例133-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C17H13ClN4O2MW 340.77步骤A(4-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺
C16H13ClN4O4MW 360.76向6，7-二甲氧基-5-硝基-3H-喹唑啉-4-酮(0.5g，1.99mmol)(来自实施例1，步骤A，上文)在SOCl2(20mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.05mL)。然后在90℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(30mL)，然后加入4-氯苯胺(0.25g，1.99mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。除去溶剂并通过色谱法纯化残余物使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶2∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的(4-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺，为黄色固体。(产率0.5g，70％)。
步骤BN4-(4-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺 C16H15ClH4O2MW 330.78向(4-氯-苯基)-(6，7-二甲氧基-5-硝基-喹唑啉-4-基)-胺(0.2g，0.55mmol)(来自实施例13，步骤A，上文)和NH4Cl(0.24g，4.43mmol)在MeOH、H2O和CHCl3(50mL，2∶1∶12)的混合物中的溶液中加入Zn粉(0.72g，11mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。然后过滤该混合物，浓缩滤液且然后用氯仿(500mL)提取。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的N4-(4-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺，为黄色树胶。(产率0.16g，88％)。
步骤C3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯 C17H13ClN4O2MW 340.77将N4-(4-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(160mg，0.48mmol)(来自实施例13，步骤B，上文)在甲酸(2mL)中的溶液在110℃下加热2小时。然后将NaOH水溶液加入到该反应混合物中至pH 10-12。用氯仿(100mL)稀释该溶液。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯，为灰白色固体。(产率96mg，59％)。
实施例143-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮 C17H13ClN4O2SMW 372.84向N4-(4-氯-苯基)-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4，5-二胺(120mg，0.36mmol)(来自实施例13，步骤B，上文)在1，2-二氯乙烷(30mL)中的溶液中加入1，1′-硫代羰二咪唑(0.65g，3.63mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶3∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮，为黄色固体。(产率110mg，82％)。
实施例157，8-二甲氧基-5-甲基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H17N3O2MW 319.37步骤A6-乙酰氧基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉 C17H15N3O3MW 309.33按照Gibson，K.H.等在《生物有机与药物化学通讯》(Bioorganic &Medicinal Chemistry Letters)，1997，7(21)，2723-2728中所述的步骤合成6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮。向6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮(1.2g，5.13mmol)在SOCl2(30mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.1mL)。然后在100℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(30mL)，然后加入苯胺(0.47mL，5.13mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时，然后冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到6-乙酰氧基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉，为白色固体。(产率1.0g，63％)。
步骤B7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇
C15H13N3O2MW 267.29向6-乙酰氧基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉(1.01g，3.27mmol)(来自实施例15，步骤A，上文)在MeOH(30mL)中的溶液中加入NH4OH水溶液(29％，2.0g，31.4mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌18小时且然后在100℃下加热1.5小时。然后将该混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇，为白色固体。(产率0.6g，69％)。
步骤C(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺 C18H17N3O2MW 307.36向7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇(0.56g，2.1mmol)(来自实施例15，步骤B，上文)在丙酮(50mL)中的溶液中加入K2CO3(1.45g，10mmol)和烯丙基溴(0.2mL，2.3mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶4∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺，为黄色固体。(产率0.6g，93％)。
步骤D5-烯丙基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇
C18H17N3O2MW 307.36将(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺(0.30g，0.98mmol)(来自实施例15，步骤C，上文)在邻-二甲苯(50mL)中的溶液在150℃下加热7小时。在该期限结束时，TLC分析显示原料几乎完全消耗且形成作为主要斑点的所需产物。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.04)作为洗脱剂，从而提供所需的5-烯丙基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇，为灰白色固体。(产率0.26g，87％)。
步骤E(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺 C19H19N3O2MW 321.38向5-烯丙基-7-甲氧基-4-苯基氨基-喹唑啉-6-醇(0.16g，0.524mmol)(来自实施例15，步骤D，上文)在丙酮(30mL)中的溶液中加入K2CO3(0.36g，2.62mmol)和甲基碘(0.15g，1.05mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶5∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺，为淡黄色固体。(产率0.13g，77％)。
步骤F5-碘甲基-7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H18IN3O2MW 447.27向(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺(0.12g，0.37mmol)(来自实施例15，步骤E，上文)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入I2(0.24g，1.87mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。用氯仿(100mL)稀释该混合物并用饱和Na2SO3水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶2∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的5-碘甲基-7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为淡黄色固体。(产率0.11g，66％)。
步骤G7，8-二甲氧基-5-甲基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H17N3O2MW 319.37向5-碘甲基-7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(0.1g，0.22mmol)(来自实施例15，步骤F，上文)在甲苯(20mL)中的溶液中加入DBU(73μl，0.49mmol)(Fluka)。将该反应混合物在120℃下加热1小时。然后用氯仿(100mL)稀释该混合物并用H2O洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的7，8-二甲氧基-5-甲基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为淡黄色固体。(产率50mg，71％)。
实施例16
4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H16ClN3O2MW 353.81步骤A6-乙酰氧基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉 C17H14ClN3O3MW 343.76向6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮(1.0g，4.26mmol)(来自实施例15，步骤A，上文)在SOCl2(12.5mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF。然后在100℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(20mL)，然后加入4-氯苯胺(0.6g，4.69mmol)(Fluka)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。将该反应混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的6-乙酰氧基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉，为灰色固体。(产率1.45g，99％)。
步骤B4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C15H12ClN3O2MW 301.73向6-乙酰氧基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉(1.4g，4.07mmol)(来自实施例16，步骤A，上文)在MeOH(35mL)中的溶液中加入NH4OH水溶液(29％，0.82ml，12.2mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在100℃下加热1.5小时。随后将该混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰色固体。(产率0.67g，55％)。
步骤C(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺 C18H16ClN3O2MW 341.79向4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.61g，2.02mmol)(来自实施例16，步骤B，上文)在丙酮(50mL)中的溶液中加入K2CO3(0.84g，6.06mmol)和烯丙基溴(0.52mI，6.06mmol)(Aldrich)。然后在90℃下搅拌的同时将该反应混合物加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤并浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺，为白色固体。(产率0.5g，72％)。
步骤D5-烯丙基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C18H16ClN3O2MW 341.79将(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺(0.50g，1.46mmol)(来自实施例16，步骤C，上文)在邻-二甲苯(50mL)中的溶液在150℃下加热7小时。在该期限结束时，TLC分析显示原料几乎完全消耗且形成作为主要斑点的所需产物。蒸发溶剂并通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/Et3N(1∶0.04)作为洗脱剂，从而得到所需的5-烯丙基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰白色固体。(产率0.4g，80％)。
步骤E(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺 C19H18ClN3O2MW 355.82向5-烯丙基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.45g，1.32mmol)(来自实施例16，步骤D，上文)在丙酮(30mL)中的溶液中加入K2CO3(0.36g，2.6mmol)和甲基碘(0.75g，5.3mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶2∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺，为淡黄色固体。(产率0.3g，84％)。
步骤F4-(4-氯-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H17ClIN3O2MW 481.71向(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺(0.3g，0.85mmol)(来自实施例16，步骤E，上文)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入I2(0.53g，4.2mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。用氯仿(100mL)稀释该混合物并用饱和Na2SO3水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(2∶1∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(4-氯-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为白色固体。(产率0.15g，37％)。
步骤G4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H16ClN3O2MW 353.81向4-(4-氯-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(0.15g，0.31mmol)(来自实施例16，步骤F，上文)在甲苯(50mL)中的溶液中加入DBU(0.46mL，3.1mmol)(Fluka)。将该反应混合物在120℃下加热1小时。然后用氯仿(100mL)稀释该混合物并用H2O洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为淡黄色固体。(产率0.1g，91％)。
实施例174-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H16BrN3O2MW 398.25
步骤A6-乙酰氧基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉 C17H14BrN3O3MW 388.22向6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮(1.0g，4.26mmol)(来自实施例15，步骤A，上文)在SOCl2(12.5mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.1mL)。然后在100℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(20mL)，然后加入3-溴苯胺(0.806g，4.69mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时，然后冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到6-乙酰氧基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉，为灰色固体。(产率1.65g，100％)。
步骤B4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C15H12BrN3O2MW 346.18向6-乙酰氧基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉(1.59g，4.11mmol)(来自实施例17，步骤A，上文)在MeOH(30mL)中的溶液中加入NH4OH水溶液(29％，0.83mL，12.3mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在100℃下加热1.5小时。随后将该混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰色固体。(产率1.25g，88％)。
步骤C(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺
C18H16BrN3O2MW 386.24向4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(1.24g，3.58mmol)(来自实施例17，步骤B，上文)在丙酮(250mL)中的溶液中加入K2CO3(0.99g，7.16mmol)和烯丙基溴(1.55mL，17.9mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(2∶3∶0.02)作为洗脱剂，从而得到所需的(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺，为黄色油状物。(产率0.55g，40％)。
步骤D5-烯丙基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C18H16BrN3O2MW 388.24将(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺(0.54g，1.39mmol)(来自实施例17，步骤C，上文)在邻-二甲苯(75mL)中的溶液在150℃下加热4.5小时。在该期限结束时，TLC分析显示原料几乎完全消耗且形成作为主要斑点的所需产物。浓缩滤液并过滤。收集固体并在真空中干燥而得到所需的5-烯丙基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰白色固体。(产率0.33g，61％)。
步骤E(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺
C19H18BrN3O2MW 400.27向5-烯丙基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.27g，0.7mmol)(来自实施例17，步骤D，上文)在丙酮(30mL)中的溶液中加入K2CO3(0.48g，3.5mmol)和甲基碘(0.4g，2.8mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶3∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺，为黄色固体。(产率0.14g，50％)。
步骤F4-(3-溴-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H17BrIN3O2MW 526.17向(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺(0.14g，0.35mmol)(来自实施例17，步骤E，上文)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入I2(0.23g，1.75mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌3小时。用氯仿(100mL)稀释该混合物并用饱和Na2SO3水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶2∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(3-溴-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为淡黄色泡沫。(产率0.12g，66％)。
步骤G4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H16BrN3O2MW 398.25向4-(3-溴-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(0.12g，0.23mmol)(来自实施例17，步骤F，上文)在甲苯(20mL)中的溶液中加入DBU(0.075mL，0.5mmol)(Fluka)。将该反应混合物在120℃下加热1小时。然后用氯仿(100mL)稀释该混合物并用H2O洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶2∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为淡黄色固体。(产率0.09g，100％)。
实施例184-(3-氯-4-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H15ClFN3O2MW 371.80步骤A6-乙酰氧基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉 C17H13ClFN3O3MW 361.76
向6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮(1.0g，4.26mmol)(来自实施例15，步骤A，上文)在SOCl2(12.5mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.1mL)。然后在100℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(20mL)，随后加入4-氯-3-氟苯胺(0.682g，4.69mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。将该反应混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到6-乙酰氧基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉，为灰色固体。(产率1.54g，100％)。
步骤B4-(4-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C15H11ClFN3O2MW 319.72向6-乙酰氧基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉(1.54g，4.26mmol)(来自实施例18，步骤A，上文)在MeOH(30mL)中的溶液中加入NH4OH水溶液(29％，0.86mL，12.7mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在100℃下加热1.5小时。随后将该混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰色固体。(产率1.21g，89％)。
步骤C(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺 C18H15ClFN3O2MW 359.78
向4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.70g，2.18mmol)(来自实施例18，步骤B，上文)在丙酮(140mL)中的溶液中加入K2CO3(0.61g，10.9mmol)和烯丙基溴(0.94mL，10.9mmol)(Aldrich)。然后在90℃下搅拌的同时将该反应混合物加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤并浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.02)作为洗脱剂，从而得到所需的(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺，为灰白色固体。(产率0.64g，82％)。
步骤D5-烯丙基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C18H15ClFN3O2MW 359.78将(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-氨基(0.92g，2.55mmol)(来自实施例18，步骤C，上文)在邻-二甲苯(150mL)中的溶液在150℃下加热7小时。在该期限结束时，TLC分析显示原料几乎完全消耗且形成作为主要斑点的所需产物。浓缩滤液并过滤。收集固体并在真空中干燥而得到所需的5-烯丙基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰白色固体。(产率0.65g，71％)。
步骤E(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺 C19H17ClFN3O2MW 373.81向5-烯丙基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.59g，1.63mmol)(来自实施例18，步骤D，上文)在丙酮(175mL)中的溶液中加入K2CO3(0.68g，4.91mmol)和甲基碘(2.32g，16.4mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶3∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺，为灰白色固体。(产率0.29g，48％)。
步骤F4-(3-氯-4-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-13，4-三氮杂-非那烯 C19H16ClFIN3O2MW 499.70向(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺(0.102g，0.27mmol)(来自实施例18，步骤E，上文)在二氯甲烷(20mL)中的溶液中加入I2(0.69g，2.7mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌2小时。用氯仿(100mL)稀释该混合物并用饱和Na2SO3水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩而得到所需的4-(3-氯-4-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为黄色泡沫。(产率0.134g，99％)。
步骤G4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H15ClFN3O2MW 371.79
向4-(3-氯-4-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(0.125g，0.25mmol)(来自实施例18，步骤F，上文)在甲苯(25mL)中的溶液中加入DBU(0.37mL，2.5mmol)(Fluka)。将该反应混合物在120℃下加热1小时。然后用氯仿(100mL)稀释该混合物并用H2O洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(3∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(3-氯-4-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为白色固体。(产率0.093g，100％)。
实施例194-(4-溴-2-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H15BrFN3O2MW 416.24步骤A6-乙酰氧基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉 C17H13ClFN3O3MW 361.76向6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-酮(来自实施例15，步骤A，上文)在SOCl2(12.5mL)(Aldrich)中的溶液中加入几滴DMF(0.1mL)。然后在100℃下搅拌的同时将该反应混合物加热3小时。蒸发溶剂并在真空中干燥残余物。将残余物溶于2-丙醇(20mL)，然后加入4-溴-2-氟苯胺(0.891g，4.69mmol)(Aldrich)。将该反应混合物在110℃下加热3小时。将该反应混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到6-乙酰氧基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉，为灰色固体。(产率1.42g，82％)。
步骤B4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C15H11BrFN3O2MW 364.17向6-乙酰氧基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉(1.36g，3.34mmol)(来自实施例19，步骤A，上文)在MeOH(30mL)中的溶液中加入NH4OH水溶液(29％，0.68mL，10mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌18小时，然后在100℃下加热1.5小时。随后将该混合物冷却至室温并过滤。收集沉淀并在真空中干燥而得到所需的4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰色固体。(产率0.93g，77％)。
步骤C(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺 C18H15BrFN3O2MW 404.23向4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.50g，1.37mmol)(来自实施例19，步骤B，上文)在丙酮(100mL)中的溶液中加入K2CO3(0.38g，2.74mmol)和烯丙基溴(0.59mL，6.86mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热2小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.02)作为洗脱剂，从而得到所需的(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基-(4-溴-2-氟-苯基)-胺，为淡黄色固体。(产率0.52g，95％)。
步骤D5-烯丙基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇 C18H15BrFN3O2MW 404.23将(6-烯丙氧基-7-甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺(0.46g，1.13mmol)(来自实施例19，步骤C，上文)在邻-二甲苯(75mL)中的溶液在150℃下加热4小时。在该期限结束时，TLC分析显示原料几乎完全消耗且形成作为主要斑点的所需产物。将滤液浓缩至小体积并过滤而得到所需的5-烯丙基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇，为灰白色固体。(产率0.35g，76％)。
步骤E(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺 C19H17BrFN3O2MW 418.26向5-烯丙基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇(0.34g，0.84mmol)(来自实施例19，步骤D，上文)在丙酮(100mL)中的溶液中加入K2CO3(0.35g，2.52mmol)和甲基碘(1.19g，8.41mmol)(Aldrich)。在搅拌的同时将该反应混合物在90℃下加热4.5小时。将该混合物冷却至室温，过滤且然后浓缩滤液。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶4∶0.01)作为洗脱剂，从而得到所需的(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺，为黄色固体。(产率0.33g，94％)。
步骤F4-(4-溴-2-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H16BrFIN3O2MW 544.16向(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺(0.236g，0.564mmol)(来自实施例19，步骤E，上文)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入I2(1.43g，5.64mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌4小时。用氯仿(100mL)稀释该混合物并用饱和Na2SO3水溶液洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩而得到所需的4-(4-溴-2-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为灰白色油状物。(产率0.034g，11％)。
步骤G4-(4-溴-2-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C19H15BrFN3O2MW 416.24向4-(4-溴-2-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯(33mg，0.06mmol)(来自实施例19，步骤F，上文)在甲苯(7mL)中的溶液中加入DBU(0.09ml，0.6mmol)(Fluka)。将该反应混合物在120℃下加热1小时。然后用氯仿(100mL)稀释该混合物并用H2O洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/Et3N(1∶1∶0.05)作为洗脱剂，从而得到所需的4-(4-溴-2-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为白色固体。(产率0.027g，100％)。
实施例207，8-二甲氧基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H15N3O2MW 305.33步骤A7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇 C18H17N3O3MW 323.35使在-78℃下(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺(0.35g，1.09mmol)(来自实施例15，步骤E，上文)在甲醇(50mL)中的溶液中通过连续的O3气流，直到溶液颜色变蓝。然后用氩气净化反应溶液并加入甲基硫(5mL)(Aldrich)。将该反应混合物缓慢温至室温并搅拌过夜。浓缩该溶液，在真空中干燥残余物而得到所需的7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇，为黄色固体粗品。(产率0.17g，48％)。
步骤B7，8-二甲氧基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H15N3O2MW 305.33
向在0℃下7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(91mg，0.28mmol)(来自实施例20，步骤A，上文)和三乙胺(0.23mL，1.69mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(0.087mI，1.12mmol)(Aldrich)。将该反应溶液在室温下搅拌2小时。然后浓缩该溶液，通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶4∶0.05)作为洗脱剂而得到所需的7，8-二甲氧基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为白色固体。(产率47mg，55％)。
实施例214-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H14ClN3O2MW 339.78步骤A7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇 C18H16ClN3O3MW 360使在-78℃下(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺(0.14g，0.39mmol)(来自实施例16，步骤E，上文)在甲醇(50mL)中的溶液中通过连续的O3气流，直到溶液颜色变蓝。然后用氩气净化反应溶液并加入甲基硫(5mL)(Aldrich)。将该反应混合物缓慢温至室温并搅拌过夜。浓缩该溶液，在真空中干燥残余物而得到所需的7，8-二甲氧基-4-(4-氯-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇，为黄色固体粗品。(产率0.14g，100％)。
步骤B4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H14ClN3O2MW 339.78向在0℃下7，8-二甲氧基-4-(4-氯-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(140mg，0.39mmol)(来自实施例21，步骤A，上文)和三乙胺(0.32mL，2.33mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(0.12mL，1.55mmol)(Aldrich)。将该反应溶液在室温下搅拌2小时。然后浓缩该溶液，通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.01)作为洗脱剂而得到所需的4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为黄色固体。(产率47mg，55％)。
实施例224-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H14BrN3O2MW 384.23步骤A7，8-二甲氧基-4-(3-溴-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇
C18H16BrN3O3MW 402.24使在-78℃下(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺(0.17g，0.42mmol)(来自实施例17，步骤E，上文)在甲醇(50mL)中的溶液中通过连续的O3气流，直到溶液颜色变蓝。然后用氩气净化反应溶液并加入甲基硫(5mL)(Aldrich)。将该反应混合物缓慢温至室温并搅拌过夜。浓缩该溶液，在真空中干燥残余物而得到所需的7，8-二甲氧基-4-(3-溴-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇，为棕色油状物粗品。(产率0.16g，100％)。
步骤B4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯 C18H14BrN3O2MW 384.23向在0℃下7，8-二甲氧基-4-(3-溴-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇(0.17g，0.42mmol)(来自实施例22步骤A，上文)和三乙胺(0.35mL，2.53mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液中加入甲磺酰氯(0.13mL，1.68mmol)(Aldrich)。将该反应溶液在室温下搅拌2小时。然后浓缩该溶液，通过色谱法纯化残余物，使用EtOAc/CH2Cl2/NEt3(1∶1∶0.01)作为洗脱剂而得到所需的4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯，为灰白色固体。(产率81mg，50％)。
可以通过许多药理学试验证实本发明化合物的药理活性。使用本发明的化合物及其盐进行如下的典型药理学试验。
实施例23激酶抑制试验为了测定本发明测试化合物抑制EGFR活性的能力，使用HTRF(均匀时间分辨荧光，Hormogeneous Time Resolved Fluorescence)试验进行激酶试验。该试验描述在A.J.Kolb等的《今日药物研发》(Drug Discovery Today)，1998，3(7)，第333页中。
在96孔聚丙烯平板(Falcon)中使用90μL总体积在各孔中进行激酶活性试验。各孔中含有1μM EGFR底物(生物素-EEEEYFELV)、1.5nM EGFR和100μM-128pM(1∶5连续稀释)范围内的8种试验浓度之一的测试化合物。在有100mM HEPES，pH 7.4、1mM DTT、5mM MgCl2、2mM MnCl2、1％DMSO、0.5μM ATP(EGFR的Km)、0.1mM Na2VO4和0.02％BSA存在下进行激酶活性试验。将该反应体系在37℃下保温30分钟。为了终止EGFR反应，将72μL反应混合物转入含有18μL展示缓冲液(20mMEDTA、50mM HEPES，pH 7.4、0.02％BSA、10nM Eu-标记的抗-pY抗体(终浓度2nM)和100nM链霉抗生物素(终浓度20nM))的STOP平板中。在混合后，将35μL溶液转入384-孔黑平板(Costar)的一式两份的孔中并在Wallac Victor 5读出器上的615/665nm处读取。
根据一式两份数据组测定测试化合物的IC50值并通过使用Excel和与方程式Y＝[(a-b)/{1+(X/c)d}+b拟合数据计算，其中a和b分别为在无测试化合物存在和极大量测试化合物存在下酶的活性，c为IC50，且d为化合物反应的希尔常数。IC50值为测试在所述试验条件下将酶活性降低50％的测试化合物浓度。
本发明的化合物在上述试验中测试时具有低于1μM的IC50值。这些化合物由此表现出EGFR激酶抑制活性。
EGFR IC50(微摩尔)实施例1 0.04788实施例2 0.06069实施例4 0.04006实施例9 0.00468实施例100.00994实施例11C 0.00268实施例19G 0.02600
权利要求
1.如下通式的化合物或其药物上可接受的盐或酯类 其中Z为C或N；R1和R2独立地选自H、低级烷基、被OR6取代的低级烷基、NR6R7、杂环和杂芳基；R3和R4各自独立地选自H、F、Cl和Br；R5选自H、OH、SH、氧代、硫酮和C1-C3烷基；且R6和R7各自独立地选自H和低级烷基，或另一方面，NR6R7彼此可以形成含有3-7个原子的环，所述的环任选包括至多三个其它杂原子且任选被一个或多个低级烷基取代。
2.权利要求1所述的化合物，其中Z为C。
3.权利要求1所述的化合物，其中Z为N。
4.权利要求1的通式I的化合物，其中R1和R2独立地选自低级烷基。
5.权利要求4所述的化合物，其中R1或R2为甲基。
6.权利要求4所述的化合物，其中R1和R2均为甲基。
7.权利要求1的通式I的化合物，其中R3和R4独立地选自H、Br、Cl和F。
8.权利要求7所述的化合物，其中R3或R4为H。
9.权利要求7所述的化合物，其中R3和R4均为H。
10.权利要求1的通式I的化合物，其中R5选自＝O、＝S、H和低级烷基。
11.权利要求10所述的化合物，其中R5选自H和低级烷基。
12.权利要求1的通式I的化合物，其中Z为N，R1和R2为甲基且R3和R4为H。
13.权利要求1的通式I的化合物，其中Z为N，R1和R2为甲基，R3和R4之一为H，而另一个为Cl或Br。
14.权利要求1的通式I的化合物，其中Z为C，R1和R2为甲基，R3和R4之一为H，而另一个为Cl或Br。
15.权利要求1的通式I的化合物，其中Z为C，R1和R2为甲基，R3和R4之一为F，而另一个为Cl或Br。
16.选自下组的化合物8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮；8，9-二甲氧基-3-苯基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮；8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；8，9-二甲氧基-2-甲基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；和2-乙基-8，9-二甲氧基-3-苯基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯。
17.选自下组的化合物3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；3-(3-溴-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮；3-(3-溴-苯基)-2-乙基-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；和3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-酮。
18.选自下组的化合物3-(3-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-2-甲基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯；3-(4-氯-苯基)-8，9-二甲氧基-1H，3H-1，3，4，6-四氮杂-非那烯-2-硫酮；7，8-二甲氧基-5-甲基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；和4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯。
19.选自下组的化合物4-(4-溴-2-氟-苯基)-7，8-二甲氧基-5-甲基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；7，8-二甲氧基-4-苯基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；4-(4-氯-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；和4-(3-溴-苯基)-7，8-二甲氧基-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯。
20.选自下组的化合物(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-苯基-胺；5-碘甲基-7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；5-烯丙基-4-(4-氯-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-氯-苯基)-胺；4-(4-氯-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；5-烯丙基-4-(3-溴-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-溴-苯基)-胺；和4-(3-溴-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯。
21.选自下组的化合物5-烯丙基-4-(3-氯-4-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇；(5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(3-氯-4-氟-苯基)-胺；4-(3-氯-4-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；5-烯丙基-4-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-甲氧基-喹唑啉-6-醇；5-烯丙基-6，7-二甲氧基-喹唑啉-4-基)-(4-溴-2-氟-苯基)-胺；4-(4-溴-2-氟-苯基)-5-碘甲基-7，8-二甲氧基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯；7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇；7，8-二甲氧基-4-苯基-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇；和7，8-二甲氧基-4-(3-溴-苯基)-5，6-二氢-4H-1，3，4-三氮杂-非那烯-5-醇。
22.药物组合物，包含有效量的权利要求1-21中任意一项的化合物作为活性组分和药物上可接受的载体或赋形剂。
23.权利要求22所述的药物组合物，其适合于非肠道给药。
24.权利要求1-23中任意一项的化合物，作为药物。
25.权利要求1-23中任意一项的化合物在制备用于治疗实体瘤的药物中的应用。
26.权利要求25的应用，其中所述的实体瘤为乳腺、结肠、前列腺或肺肿瘤。
27.如上所述的本发明。
全文摘要
本发明公开了通式(I)的新1，3，4－三氮杂－非那烯和1，3，4，6－四氮杂非那烯衍生物。这些化合物抑制表皮生长因子受体(“EGFW”)酪氨酸激酶。这些化合物及其药物上可接受的盐和酯类具有抗增殖活性且特别用于治疗或控制癌症，特别是实体瘤。本发明还涉及含有这类化合物的药物组合物并涉及治疗或控制癌症的方法，最具体的是治疗或控制乳腺、肺、结肠和前列腺肿瘤的方法。
文档编号A61K35/00GK1805964SQ200480016245
公开日2006年7月19日 申请日期2004年4月26日 优先权日2003年6月10日
发明者K-C·卢克, 张筑明 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司