专利名称：偏诺皂苷类化合物注射制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种以偏诺皂苷类化合物为药用活性成分的特殊的制剂形式。
背景技术：
经药代动力学研究表明，偏诺皂苷类化合物生物利用度极低，90％以上以原形从粪便中排出，血液、胆汁及尿样中只检出少量原形药物，未检出代谢产物。注射剂的制剂形式能够提高药用成分的生物利用度，但偏诺皂苷类化合物具有极强的溶血性和机体刺激性，血管内注射会破坏血细胞，引起溶血，肌注则会引起肌肉组织红肿疼痛。所以，在现有技术中，不存在偏诺皂苷类化合物注射制剂。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种能够显著降低溶血和机体刺激性的偏诺皂苷类化合物注射剂。
本发明所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂是由以下重量比的药用成分形成包合物再经常规工艺制成的制剂，偏诺皂苷类化合物∶环糊精为1∶5-30，所述的偏诺皂苷类化合物为以下通式的化合物 通式中R2＝H，CH3，CH2OH，＝CH2
X＝O，N，SC17-OH为R-构型或S-构型R1＝由单糖、双糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖所组成的各种型式的直链糖链或支链糖链，其糖链组成糖的类型包括β-D-葡萄糖(β-D-glucose)、α-D-葡萄糖(α-D-glucose)、α-L-鼠李糖(α-L-rhamnose)、β-D-半乳糖(β-D-galactose)、α-D-半乳糖(α-D-galactose)、β-D-甘露糖(β-D-mannose)、α-D-甘露糖(β-D-mannose)、α-D-阿拉糖(α-D-aradinose)、β-D-阿拉伯糖(α-D-aradinose)、α-D-木糖(α-D-xylose)、β-D-木糖(α-D-xylose)、α-D-核糖(α-D-ribose)、β-D-核糖(β-D-ribose)、α-D-来苏糖(α-D-lyxose)、β-D-来苏糖(β-D-lyxose)、α-L-夫糖(α-L-fucose)；所述的环糊精为六元环或七元环；优选的为2，3-二-羟丙基-β-环糊精、2，3，6丁磺基氢或钠-β-环糊精、2-羟丙基-β-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精、羟乙基-β-环糊精。
优选的重量比范围为偏诺皂苷类化合物∶环糊精为1∶10-20。
上述偏诺皂苷类化合物中，包括4个活性较强的偏诺皂苷类化合物X＝O，R2＝H，[I]R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→4)-α-L-rha·py(1→4)-[α-L-rha-py(1→2)]-β-D-glc·py[II]R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→2)-[α-L-rha·py(1→4)]-β-D-glc·py[III]R1＝-3-O-α-L-ara·fura-(1→4)-[α-L-rha·py(1→2)]-β-D-glc·py[IV]R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→2)-β-D-glc·py。
“fura”表示五元氧环，称“呋喃糖”；”py”表示六元氧环，称“吡喃糖”。理论上所接糖的数量并不限于7糖。
因为偏诺皂苷类化合物的实际每日应用量很小，为0.1-10mg，而且不需要长期用药，所以很适合开发成肌注、血管内注射和皮下注射剂型。本发明的优点在于以优化的低溶血、低刺激性环糊精为包合材料，包合偏诺皂苷类化合物分子，即可制备疗效可靠、起效迅速的注射剂，如肌注、血管内注射和皮下注射。此种注射剂降低了偏诺皂苷类化合物的溶血性和机体刺激性，符合注射剂剂型要求。同时具有最高的生物利用度，即接近100％的进入人体，避免了人体在吸收和代谢过程中的巨大差异导致的疗效不稳定、不确切。环糊精包合与脂质体包合相比，环糊精包合物稳定性极佳，几乎不存在泄露问题，制备过程简单，基本不需有毒的有机溶剂。
偏诺皂苷类化合物环糊精包合制剂可以用于治疗妇科血症，包括子宫功能性出血和计划生育措施引起的出血，以及妇科炎症，具有止血、造血和抗炎的功能。其药理作用可以参见中国专利200410079565.x，200410079566.4，02133381.5，85108521。
为了更好地理解本发明的实质，下面将从偏诺皂苷类化合物包合物的制备、溶血性和刺激性三方面来说明。
偏诺皂苷类化合物主要有三种来源，己为现有技术所公开。这三种来源是指植物粗提物、植物中提取的总偏诺皂苷类化合物和合成的偏诺皂苷类化合物。在注射剂中我们只用符合中国药典要求的原料，即偏诺皂苷类化合物含量在90％以上，更好的应为98％以上。
偏诺皂苷类化合物环糊精包合可采用已知方法，优选的为“饱和水溶液法”和“研磨法”。
所述的饱和水溶液法是指将偏诺皂苷类化合物溶于少量适当溶媒，如C1至C4的低级醇或其混合物，优选的为乙醇，再加入环糊精饱和溶液，充分搅拌到完全形成包合物。减压干燥后，以少量C1至C4的低级醇或其混合物，优选的为乙醇，冲洗净未包合物，即得制备注射剂的原料。
所述的研磨法是指取环糊精与1-5倍重量的水混合，将偏诺皂苷类化合物用少量适当溶媒溶解，如C1至C4的低级醇或其混合物，优选的为乙醇。环糊精与偏诺皂苷研磨机中充分研磨2-5小时，然后以少量C1至C4的低级醇或其混合物，优选的为乙醇，冲洗净未包合物，让糊状物干燥，即得制备注射剂的原料。
静脉注射剂型最为优选的环糊精为2，3，6丁磺基氢或钠-β-环糊精(SBE-β-CD，R1＝R2＝R3＝H/Na)，商品名为Captisol，常见的有SBE7-β-环糊精和SBE4-β-环糊精，下标4和7表示取代度。肌肉、皮下注射最优化的为2，3-二-羟丙基-β-环糊精(2，3-DHP-β-CD)，其次为2-羟丙基-β-环糊精(2-HP-β-CD)和3-羟丙基-β-环糊精(3-HP-β-CD)，其它适用的还有γ-环糊精、羟乙基-β-环糊精。
偏诺皂苷类化合物环糊精包合物溶血性和刺激性的测定方法是参照中国文献“辽宁中医杂志2005年第32卷第2期复方蒲黄注射液安全性及药效实验的研究”的方法(1)溶血性测定取正常大鼠去纤维血，用生理盐水反复洗涤，然后配制成2％(v/v)红细胞悬液备用。正常对照组采用与偏诺皂苷类化合物注射剂相同的等渗液PBS，阳性对照组采用注射用洋地黄毒苷，试验组用偏诺皂苷类化合物及其不同配方的环糊精包合物。37℃水浴保温，每1小时检测一次溶血情况，共4小时，以2小时内不产生比阳性对照组更严重的溶血反应为合格。检测方法为分光光度计下540nm比色法检测。
(2)肌肉刺激性测定方法20克小鼠大腿肌肉注射含10μg偏诺皂苷类化合物的环糊精包合物，相当于60Kg成人肌注3mg偏诺皂苷类化合物，而实际成人只需注射0.1-1.5mg/天。24小时后处死动物，目测观察注射位点肌肉充血、坏死和毒性情况。
实验结果表1、偏诺皂苷类化合物2，3-二-羟丙基-β-环糊精(2，3-DHP-β-CD)包合物的肌肉刺激性考察(表中偏诺皂苷类化合物均为10μg，用A表示，2，3-二-羟丙基-β-环糊精用B表示)
从表1可以看出，当2，3-DHP-β-CD与偏诺皂苷类化合物的比例达到和超过5∶1时；肌肉刺激性已明显降低，达到和超过10∶1时，肌肉刺激性较小，基本与阳性对照药洋地黄毒苷注射剂相当。
表2、偏诺皂苷类化合物2，3-二-羟丙基-β-环糊精(2，3-DHP-β-CD)包合物的溶血性考察(表中偏诺皂苷类化合物均为10μg，用A表示；2，3-二-羟丙基-β-环糊精用B表示)n＝3
表2提示，当2，3-DHP-β-环糊精与偏诺皂苷类化合物的比例达到和超过5∶1时，溶血性已明显降低；达到和超过10∶1时，偏诺皂苷类化合物的溶血性下降到一个较低的值，只比对照药物洋地黄毒苷注射剂略高；当2，3-DHP-β-环糊精与偏诺皂苷的比例达到15∶1时，偏诺皂苷类化合物的溶血性与对照药物洋地黄毒苷注射剂接近。
表3、偏诺皂苷类化合物SBE7-β-环糊精包合物的溶血性考察(表中偏诺皂苷类化合物均为10μg，用A表示；SBE7-β-环糊精用B表示)n＝3
表3显示当SBE7-β-环糊精与偏诺皂苷类化合物的比例达到和超过5∶1时，溶血性已明显降低；达到和超过10∶1时，偏诺皂苷类化合物的溶血性下降到一个较低的值，只比对照药物洋地黄毒苷注射剂略高一点；当SBE7-β-环糊精与偏诺皂苷类化合物的比例达到15∶1时，偏诺皂苷类化合物的溶血性与对照药物洋地黄毒苷注射剂相当。
表4、偏诺皂苷类化合物SBE7-β-环糊精包合物的肌肉刺激性考察(表中偏诺皂苷类化合物均为10μg，用A表示；SBE7-β-环糊精用B表示)n＝3
表4显示当SBE7-β-环糊精与偏诺皂苷类化合物的比例达到和超过5∶1时，肌肉刺激性已明显降低；达到和超过10∶1时，偏诺皂苷类化合物的肌肉刺激性下降到可以接受的程度，即与阳性药相当。
具体实施例方式
凡注射剂、肌肉注射剂和皮下注射剂均选用注射级药用材料。本发明并不限于以下实施例。
实施例1肌肉和皮下注射剂按饱和水溶液法将偏诺皂苷类化合物溶于少量乙醇，再加入2，3-DHP-β-环糊精饱和溶液，按重量计算，偏诺皂苷类化合物2，3-DHP-β-环糊精＝1∶12，充分搅拌到完全形成包合物。减压干燥后，以少量乙醇冲洗净未包合物，即得制备注射剂的原料。该原料溶于5％葡萄糖生理盐水中，调节PH为7.4及调节等渗，灌封，不同规格安瓿含偏诺皂苷0.1-0.5mg，100℃流通蒸汽灭菌30分钟。视病情轻重缓急于月经来之前3天注射偏诺皂苷类化合物0.1-1.5mg，每日1次，最多7天。用于治疗妇科血症和炎症，血症包括子宫功能性出血和计划生育措施引起的出血。
实施例2肌肉和皮下注射剂将实施例1中2，3-DHP-β-环糊精更换成2-HP-β-环糊精或3-HP-β-环糊精，按重量计算，偏诺皂苷类化合物2，3-DHP-β-环糊精＝1∶11，具有同等效果。
实施例3肌肉、皮下和静脉注射剂将实施例1中2，3-DHP-β-环糊精更换成SBE7-β-环糊精具有最小的刺激性，按重量计算，偏诺皂苷类化合物SBE7-β-环糊精＝1∶10，不但能用于肌肉和皮下注射，而且能用于静脉注射。
实施例4肌肉、皮下和静脉注射剂按研磨法取γ-环糊精与5倍重量的20％乙醇水混合，将偏诺皂苷类化合物用少量DMSO∶乙醇＝1∶9的混合溶剂溶解。γ-环糊精与偏诺皂苷(15∶1)置球磨机中充分研磨3小时，然后以少量乙醇冲洗净未包合物，让糊状物包合物干燥，即得制备注射剂的原料。该原料溶于5％葡萄糖生理盐水中，以含磷酸的PBS缓冲液调节PH为7.4及调节等渗，灌封，不同规格安瓿含偏诺皂苷类化合物0.05-0.5mg，100℃流通蒸汽灭菌30分钟。视病情轻重缓急于月经来之前3天注射偏诺皂苷类化合物0.1-1.5mg，每日1次，最多7天。用于治疗妇科血症和炎症，血症包括子宫功能性出血和计划生育措施引起的出血。
实施例5实施例4中γ-环糊精可更换成SBE7-β-环糊精、SBE4-β-环糊精、2，3-二-羟丙基-β-环糊精、2-羟丙基-β-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精，具有更好的实施效果，即溶血性和刺激性均满足注射剂要求。
权利要求
1.一种偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于是由以下重量比的药用成分形成包合物再经常规工艺制成的制剂，偏诺皂苷类化合物环糊精为1∶5-30，所述的偏诺皂苷类化合物为以下通式的化合物 通式中R2＝H，CH3，CH2OH，＝CH2X＝O，N，SC17-OH为R-构型或S-构型R1＝由单糖、双糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖所组成的各种型式的直链糖链或支链糖链，其糖链组成糖的类型包括β-D-葡萄糖(β-D-glucose)、α-D-葡萄糖(α-D-glucose)、α-L-鼠李糖(α-L-rhamnose)、β-D-半乳糖(β-D-galactose)、α-D-半乳糖(α-D-galactose)、β-D-甘露糖(β-D-mannose)、α-D-甘露糖(β-D-mannose)、α-D-阿拉伯糖(α-D-aradinose)、β-D-阿拉伯糖(α-D-aradinose)、α-D-木糖(α-D-xylose)、β-D-木糖(α-D-xylose)、α-D-核糖(α-D-ribose)、β-D-核糖(β-D-ribose)、α-D-来苏糖(α-D-lyxose)、β-D-来苏糖(β-D-lyxose)、α-L-夫糖(α-L-fucose)。
2.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的环糊精为六元环或七元环。
3.如权利要求1和2所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的环糊精为2，3-二-羟丙基-β-环糊精、2，3，6丁磺基氢或钠-β-环糊精、2-羟丙基-β-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精、γ-环糊精、羟乙基-β-环糊精。
4.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的偏诺皂苷类化合物环糊精为1∶10-20。
5.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的偏诺皂苷类化合物为通式中X＝O，R2＝H，R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→4)-α-L-rha·py(1→4)-[α-L-rha-py(1→2)]-β-D-glc·py。
6.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的偏诺皂苷类化合物为通式中X＝O，R2＝H，R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→2)-[α-L-rha·py(1→4)]-β-D-glc·py。
7.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的偏诺皂苷类化合物为通式中X＝O，R2＝H，R1＝-3-O-α-L-ara·fura-(1→4)-[α-L-rha·py(1→2)]-β-D-glc·py。
8.如权利要求1所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂，其特征在于所述的偏诺皂苷类化合物为通式中X＝O，R2＝H，R1＝-3-O-α-L-rha·py(1→2)-β-D-glc·py。
全文摘要
本发明涉及一种以偏诺皂苷类化合物为药用活性成分的特殊的制剂形式。本发明所述的偏诺皂苷类化合物注射制剂是由以下重量比的药用成分形成包合物再经常规工艺制成的制剂，偏诺皂苷类化合物环糊精为1∶5－30，所述的环糊精为六元环或七元环。本发明的优点在于以优化的低溶血、低刺激性环糊精为包合材料，包合偏诺皂苷类化合物分子，制备注射剂。本注射剂不仅降低了偏诺皂苷类化合物的溶血性和机体刺激性，符合注射剂剂型要求。同时具有最高的生物利用度，即接近100％的进入人体，避免了人体在吸收和代谢过程中的巨大差异导致的疗效不稳定、不确切。
文档编号A61K31/706GK1891226SQ20051001090
公开日2007年1月10日 申请日期2005年7月8日 优先权日2005年7月8日
发明者唐书明, 高崇昆, 冯有 申请人:云南白药集团股份有限公司