专利名称：一种药物组合物的质量控制方法
技术领域：
本发明是一种药物组合物的质量控制方法，属于中药的技术领域。
背景技术：
心脑血管疾病如冠心病、脑血栓、老年性痴呆等均是当今世界最常见和危害最大的疾病之一，在许多国家已成为人口死亡的主要原因之一；据调查，近年来的发病率有逐年增高趋势，而且中、青年患者不断增加，心脑缺血性疾病已成为危害我国人民健康的常见病、多发病；为了达到防治目的，许多发明人及药品企业对其做了大量的研究工作。药物制剂必须要在保证产品质量稳定可控安全的基础之上，才能不断的更新发展，为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，需要研究、控制该药物组合物质量的方法；目前，在相关药物制剂中，一般仅以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、芍药苷为检测指标，但是它根本不能全面反应产品的质量，仅以此用来控制药物组合物的质量不是十分合理；如果用别的指标进行控制，由于没有现成的检测方案、检测条件等等，所以比较难于实施。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的药物组合物的质量控制方法。这种方法向相关的生产、检测机构提供了检测的指标、检测的手段、技术方法等等，以便更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地。
该药物组合物的药味组成及配比如下(按重量份) 方案一 人参(或红参或党参) 1～99重量份 芍药苷30～0.1重量份 方案二 人参(或红参或党参)提取物0.1～20重量份 芍药苷30～0.1重量份 上述药物组合物的剂型为注射剂或口服制剂；其中注射剂包括直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制备的注射用无菌粉末或无菌块状物；口服制剂包括片剂、分散片剂、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、口服液体制剂、凝胶剂、煎膏剂、浸膏剂和膜剂。临床上用于治疗冠心病、心绞痛、心律失常、脑血栓、老年性痴呆、肝肾综合症、心肺病、糖尿病及其并发症等疾病。
本发明是这样构成的 以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下全部或部分内容 (1)药物组合物的指纹图谱测试，包括以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱中的一种； (2)药物组合物中红参或人参药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、芍药苷中、党参炔苷、苍术内酯III全部或部分成分的鉴别测试方法； (3)药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、芍药苷、总皂苷、党参炔苷、苍术内酯III全部或部分成分的含量测试方法。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法采用液相色谱法测试以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱 a、采用液相色谱法测试红参或人参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备取待测药物组合物适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备取适量红参或人参和麦冬药材中的主要活性成分对照品，包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相A为0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液；B为10％～90％乙腈溶液或10％～90％甲醇溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，所述标准指纹图谱中，共有峰有5～30个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±20％； (5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部 I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00； II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20％； b、采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备取待测药物组合物适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分对照品，包括党参炔苷、苍术内酯III中的一种或两种，用水或甲醇、乙醇溶解稀释至合适浓度，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为5％～99％∶95％～5％乙腈或甲醇-水或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.2％～3％冰醋酸或0.2％～3％甲酸或0.2％～3％磷酸溶液，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-300nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温为20～60℃范围内； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个； (5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部 I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00； II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20％。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法采用液相色谱法测试以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱 a、采用液相色谱法测定以红参或人参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备精密称取待测药物组合物适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，共有峰有5～20个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±10％； (5)以(1)～(3)所述方法作为待药物组合物中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将待测药物组合物指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部； I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00； II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％； b、采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备精密称取待测药物组合物适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分苍术内酯III，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为甲醇-水67∶33，流速为1.0ml/min、蒸发光检测器检测，漂移管温度30℃，载气流量2.2L/min，柱温为30℃； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～20个； (5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部 I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00； II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的鉴别方法包括以下全部或部分内容 a、药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，用正丁醇或乙醇或甲醇或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇-水5～40∶10～100∶5～50∶0.2～30 10℃以下放置的下层溶液或正丁醇-醋酸乙酯或甲酸乙酯-水1～10∶0.2～2∶1～15的上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～50％硫酸乙醇试剂或50％硫酸试剂，80℃～160℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点，阴性无干扰； b、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～40％∶95％～60％甲醇或乙腈-水或0.5％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.5％～5％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
c、药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，滤过或离心，取滤液或上清液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板，以三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇或乙醇-甲酸或乙酸1～120∶0.2～15∶0.5～25∶0.01～5或三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇或乙醇-水3～50∶10～120∶5～60∶1～25的下层溶液或三氯甲烷或正丁醇或二氯甲烷或甲苯-甲醇或冰醋酸或甲酸-醋酸乙酯或水1～80∶0.1～50∶0.05～25或氯仿-甲醇1～25∶0.2～15为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以0.2％～10％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后在80℃～160℃烘至斑点显色清晰或热风吹至斑点显色清晰或置紫外光灯365nm或254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点； d、药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加甲醇或乙醇或流动相或水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～95％∶95％～5％甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相，检测波长为200～410nm；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰； e、药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加水溶解，用正丁醇或醋酸乙酯或氯仿萃取，萃取液浓缩至干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，或置C18或C8固相萃取小柱中，依次用5％～50％甲醇、甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取党参对照药材、党参炔苷中的一种或两种制备对照溶液；对照药材溶液的制备取党参对照药材，加水或甲醇提取后滤过，滤液蒸干，残渣用水溶解后用正丁醇或醋酸乙酯或氯仿萃取，萃取液浓缩至干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，或滤液置C18或C8固相萃取小柱中，依次用5％～50％甲醇、甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；对照品溶液的制备取党参炔苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板，正丁醇-冰醋酸或甲酸或乙醇或无水乙醇-水1～35∶0.1～10∶0.05～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％～30％硫酸乙醇溶液，80～150℃加热1～30分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点； f、药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇或乙醇或流动相至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～80％∶95％～20％甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～0.5％磷酸水溶液为流动相，检测波长为200～410nm范围内的一个或几个，柱温20～50℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的鉴别方法包括以下全部或部分内容 a、药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰； b、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
c、药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加甲醇提取，离心，取上清液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸6∶1.5∶1.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后在105℃烘至斑点显色清晰或，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点； d、药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰； e、药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水2ml使溶解，置C18固相萃取小柱(500mg，用甲醇、20％甲醇各10ml预洗)中，依次用20％甲醇、甲醇各5ml洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取党参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取党参炔苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液6μl、对照品溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水7∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； f、药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物含量的测试方法应包括以下全部或部分内容 a、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～40％∶95％～60％甲醇或乙腈-水或0.5％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.5％～5％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项 (1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg； (2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg； (3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg； (4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg； b、药物组合物中总皂苷的含量测定 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加蒸馏水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加1％～50％香草醛-冰醋酸溶液0.1～10ml，高氯酸0.1～15ml，摇匀，30～80℃水浴上加热3～50分钟，取出，立即以冰水浴或流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf计，不得少于3mg； c、药物组合物中芍药苷的含量测定 取待测药物组合物适量，加甲醇或乙醇或流动相或水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～95％∶95％～5％甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相，检测波长为200～410nm；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于10mg； d、药物组合物中党参炔苷的含量测定 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，5％～80％∶95％～20％甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～0.5％磷酸水溶液为流动相，检测波长为200～4l0nm范围内的一个或几个，柱温20～50℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.05mg。
所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物含量的测试方法是以下一种或几种方法 a、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项 (1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg； (2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg； (3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg； (4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg； b、药物组合物中总皂苷的含量测定 取待测药物组合物适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，精密加冰醋酸至25ml，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于6mg； c、药物组合物中芍药苷的含量测定 取待测药物组合物适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm以外标一点法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于20mg； d、药物组合物中党参炔苷的含量测定 取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.1mg。
所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的注射制剂的含量测定结果，其质量标准中可测成分除辅料外，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、芍药苷、总皂苷、党参炔苷、苍术内酯III等中的全部或部分种类的总含量占25％以上。
与现有技术相比，本发明能更加完善的控制以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量。中药成分复杂，如果只用其中一、两种成分来说明其内在质量，具有一定的片面性，更无法判断其药效的指标成分。因此本申请人制定了以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱、鉴别和含量测定来全面控制药物组合物的质量。但是由于药物组合物中的各药材之间所含的化学成分复杂，对指纹图谱的制定、鉴别和含量测定造成干扰，导致鉴别、含量测定和各部分指纹图谱特征不稳定，所以必须控制流动相、展开剂等色谱条件，才能得到良好的薄层色谱、含测条件和指纹图谱。也就是说，由于处方中各成分相互之间的干扰影响，导致药物组合物中人参或红参或党参、芍药苷部分的指纹图谱特征峰发生改变，而只有采用本发明的条件，才能得到理想的薄层色谱、含测条件和指纹图谱。
通过实验证明，本发明质量控制方法对以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物产品的质量控制更为有效，方法精密度、稳定性均较高。
实验例1 以红参或人参成分特征为主的指纹图谱的制备 a、实验仪器、试剂及样品 对照品人参皂苷Rg1中国药品生物制品检定所 b、色谱条件与系统适应性实验 1.色谱柱的选择 研究过程中，选用了常规的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱，分别试用了Zorbax、Inertsil ODS-3、Diamonsil ODS(均为C18，4.6mm×200mm，5μm)三种牌号的色谱柱，结果显示三种牌号的色谱柱均可达到较好的分离效果，其中Diamonsil ODS色谱柱分离效果最好，柱效最高，可以达到5400(以参照物人参皂苷Rg1计算)。故最终选用Diamonsil ODS色谱柱(4.6mm×200mm，5μm)为实验研究柱。
2.流动相的选择 研究过程中分别考察了(1)甲醇-水(20∶80)，(2)乙腈-水(15∶85)，(3)乙腈-水(梯度洗脱)(4)A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱体积配比为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％)四种流动相系统。结果显示流动相(1)条件下，峰形较差，1小时内出峰较少，仍有不少组分滞留在后出峰；流动相(2)流动相条件下，峰形较差，分离不好；(3)条件下，峰拖尾严重，出峰不完全；流动相(4)条件下，峰形较好，出峰完全且分布均匀，故而最终被选用。
3.检测波长的确定 研究中在A为50mmol.L-1KH2PO4溶液，B为乙腈-水(80∶20)(梯度洗脱)流动相条件下，分别考察了在不同波段典型波长203、210、230、254下的色谱峰情况，结果显示，在203nm下色谱峰较多，峰形较好，故最终选用203nm作为检测波长。
4.仪器、色谱柱及积分参数 4.1仪器参数选用了液相色谱分析领域主流配置和性能良好的Agilent1100系列高效液相色谱仪，Chemstation色谱工作站。色谱柱为Diamonsil ODS(4.6mm×200mm，5μm)；柱温40℃，流速1.0ml/min。
4.2积分参数Slope Sensitivity1，peak width0.05，最小峰面积为参照物(S)峰峰面积的5％，最小峰高为S峰峰高的5％。如此设定可以避免一些很小面积的色谱峰(单峰面积占总峰面积小于0.5％)的计算，同时保证与参照物的相关性。
5.供试品溶液的制备 精密称取本品适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，即得。
6.参照物溶液的制备 人参皂苷Rg1为红参或人参主要活性成分之一，其积分面积在指纹图谱中所占比例较大且较稳定，同时兼顾中间体和药材的研究，因此选定人参皂苷Rg1作为参照物。
7.指纹图谱及技术参数 根据10批样品制定标准指纹图谱，将供试品指纹图谱与标准指纹图谱比较，相似度均在0.90～1.00之间。
实验例2 药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法 为了突出芍药苷的特征，选择了芍药苷作为其特征斑点，但是由于制剂中存在较多与芍药苷结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件针对芍药苷进行了展开 经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(6-1.5-1.5-0.5)为展开剂，在此条件下，芍药的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例3 药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法 为了突出赤芍或白芍的特征，除了薄层鉴别方法以外，选择了芍药苷作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与芍药苷结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对芍药苷进行了分离 经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-0.1％磷酸水溶液(40∶60)为流动相，在此条件下，芍药苷保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例4 药物组合物人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的薄层色谱鉴别方法 为了突出人参或红参的特征，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf作为其特征斑点，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下薄层板和展开条件对麦冬进行了展开 经过筛选，确定了以硅胶G薄层板为固定相，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf的Rf值适中，和其它斑点分离清晰，阴性无干扰。
实验例5 药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的液相色谱鉴别方法 为了突出人参或红参的特征，选择了人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re作为其特征成分，但是由于药材中存在较多与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1结构相近、极性相似的成分，普通条件难以达到质量控制的要求，因此我们筛选了以下色谱柱和流动相对人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re进行了分离 经过筛选，确定了以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％，在此条件下，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re保留时间适中，峰行尖锐，对称，阴性无干扰。
实验例6 总皂苷含量测定 1 仪器、试药 1.1仪器普析通TU-1810SPC 紫外/可见分光光度仪 SARTORIUS BP211D 电子分析天平 1.2试药香草醛 分析纯 天津市光复精细化工研究所 甲醇 色谱纯 J.T.Baker 冰醋酸 分析纯 上海试剂一厂 高氯酸 分析纯 天津市鑫源化工厂 纯净水 娃哈哈 2 方法与结果 2.1检测波长的选择 精密称取人参皂苷Rg15.14mg，置100ml量瓶中，加适量甲醇超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，在700～400nm波长范围内进行扫描，结果表明，黄芪甲苷在547nm处有最大吸收，空白无干扰，因此选择547nm为分光光度法测定药物组合物中总皂苷的检测波长。
2.2对照品溶液的制备 人参皂苷Rg15mg，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备 取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHZ)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取1.0ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V A)，在547nm的波长处测定吸收度。以外标一点法计算，即得。
3线性关系的考察 精密称取人参皂苷Rg1对照品5.03mg，置100ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHZ)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml，分置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V A)，在547nm的波长处测定吸收度。以吸收度为纵坐标，黄芪甲苷的量(μg)为横坐标，绘制标准曲线。
回归方程Y＝0.0062X+0.0047；r＝0.9999 人参皂苷Rg1在20.12～100.6μg范围线性良好。 人参皂苷Rg1标准曲线测定数据 3精密度试验 精密量取对照品溶液(0.0503mg/ml)1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，按正文测定法项下操作，连续测定5次。
精密度实验 5 稳定性试验 5.1对照品溶液的稳定性试验 精密量取对照品溶液(0.0503mg/ml)1.2ml，置10ml具塞试管中，水浴蒸干溶剂，取出，精密加入5％香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即在冰水浴中冷却2分钟，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，以随行溶剂为空白，按正文测定法项下操作，分别在0、10、20、40、60分钟时测定。对照品溶液稳定性实验 5.2供试品溶液的稳定性实验 取本品装量差异项下本品，取内容物，研细，从中取约50mg，按正文测定法项下进行操作，分别在0、10、20、40、60分钟时测定。 供试品溶液稳定性实验 6重复性试验 取本品装量差异项下本品，取内容物，研细，从中取约50mg(共5份)，按正文测定法项下进行操作。重复性实验 7回收率试验 采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，研细，从中取约25mg(共5份)，精密称定，分置25ml量瓶中；精密量取人参皂苷Rg1对照品溶液(0.634mg/ml)1ml(共5份)，精密称定，分置上述25ml量瓶中，加水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml具塞试管中，按正文测定法项下进行操作，以随行溶剂为空白，依法测定吸收度，按外标一点法计算，即得。
药物组合物中总皂苷的含量25.31mg/g加样回收率实验 平均回收率＝98.13％ RSD＝0.74％ 8三批中试样品含量测定 取本品样品三批，按正文所述方法处理。三批样品含量测定结果 实验例7人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量 1.仪器与试药 (1)仪器Agilent1100高效液相色谱仪，chemstationsys工作站。TU-1800SPC紫外分光光度计。
(2)试药人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中国药品生物制品检定所； 2.检测波长的选择精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re，分置10ml量瓶中，加甲醇稀释制成每1ml含0.5mg的溶液，在200-400nm波长范围扫描。人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re均在203nm处有最大吸收，因此选择203nm作为含量测定的检测波长。
3.色谱条件Dikma ODS(4.6mm×250mm，5um)；流动相乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；检测波长为203nm；流速1.0ml/min。
4.对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re适量，精密称定，加甲醇制成1ml含人参皂苷Rg10.20mg，人参皂苷Rb10.20mg，人参皂苷Re 0.1mg的混合溶液。
5.供试品溶液的制备取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
在此条件下，阴性样品不干扰样品中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的测定，且分离度好。
6.人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的线性关系 精密称取人参皂苷Rg110.24mg、人参皂苷Rb110.09mg、人参皂苷Re7.54mg，共置10ml量瓶中，加流动相定至刻度，摇匀，作为对照品溶液(每1ml中含人参皂苷Rg11.024mg，人参皂苷Rb11.009mg，含人参皂苷Re0.754mg)，精密量取2.5ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照品稀释溶液。(每1ml中含人参皂苷Rg10.256mg，含人参皂苷Rb10.25225mg，含人参皂苷Re0.1885mg)精密吸取对照品溶液3μl、6μl、10μl；对照品稀释溶液2μl、5μl、10μl；注入液相色谱仪，以峰面积为纵坐标，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的量为横坐标做图，绘制标准曲线。
人参皂苷Rg1线性关系 回归方程Y＝345.01X+1.20； 决定系数γ＝0.9996； 人参皂苷Rg1在0.512～10.240μg范围内线性关系良好。
人参皂苷Rb1线性关系 回归方程Y＝282.95X-0.44； 决定系数γ＝0.9999； 人参皂苷Rb1在0.5045～10.090μg范围内线性关系良好。人参皂苷Re线性关系 回归方程Y＝490.12X+1.11； 决定系数γ＝0.9999； 人参皂苷Re在0.3770～7.5400μg范围内线性关系良好。
7.对照品精密度试验 精密吸取标准曲线项下人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品稀释溶液(每1ml中含人参皂苷Rg10.256mg，参皂苷Rb10.25225mg，含人参皂苷Re0.1885mg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，连续进样测定5次，考察对照品溶液的精密度。对照品溶液精密度试验 结果表明，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re对照品溶液精密度良好。
8.稳定性试验 8.1对照品稳定性试验 精密吸取标准曲线项下人参皂苷Rg1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品稀释溶液(每1ml中含人参皂苷Rg10.256mg，参皂苷Rb10.25225mg，含人参皂苷Re0.1885mg)10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，在0、6、12、24、48小时进样测定。对照品溶液稳定性试验结果 结果表明，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re对照品溶液稳定性良好。
8.2供试品溶液稳定性试验 取重量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，分别在0、6、12、24、48小时进样测定。
供试品溶液稳定性试验结果 结果表明，供试品溶液稳定性良好。
9.重复性试验 取本品装量差异项下粉针5瓶，取内容物，研细，从中取约0.5g，精密称定，置5ml量瓶中，加流动相使溶解并定至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
重复性试验 10.加样回收率试验 采用加样回收法，取重量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约0.25g(共5份)，精密称定，分置5ml量瓶中；精密称取人参皂苷Rg113.71mg，人参皂苷Rb113.96mg，人参皂苷Re6.73mg，共置25ml量瓶中，加流动相适量超声处理使溶解，取出，放至室温，加流动相至刻度，摇匀，精密量取1ml(共5份)，分置上述5ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
药物组合物中人参皂苷Rg1含量2.021mg/g； 药物组合物中人参皂苷Rb1含量2.182mg/g； 药物组合物中人参皂苷Re含量1.010mg/g；人参皂苷Rg1加样回收率试验 人参皂苷Rg1平均回收率＝98.61％；RSD＝0.62％ 人参皂苷Rb1加样回收率试验 人参皂苷Rb1平均回收率＝98.13％；RSD＝0.83％ 人参皂苷Re加样回收率试验 人参皂苷Re平均回收率＝98.17％；RSD＝0.60％ 11.三批中试样品含量测定 取本品样品三批，按正文所述方法处理。 三批样品含量测定结果 实验例8 芍药苷含量测定 1 仪器、试药 仪器JASC0 1580型高效液相色谱仪 钻石C18色谱柱 250×4.6mm 5um迪马公司 SARTARIUS BP211D 电子分析天平 试剂乙腈色谱纯Fisher公司 甲醇 分析纯北京化工厂 磷酸二氢钠分析纯北京化学试剂公司 2 方法与结果 2.1 色谱分析条件 固定相十八烷基硅烷键合硅胶 250×4.6mm 5um 流动相甲醇-1％甲酸溶液(40∶60) 流速1ml/min 柱温室温 进样量10ul 检测波长230nm 2.2 系统适用性试验 根据上述色谱条件得到芍药苷对照品、样品色谱图，理论板数n均大于3000。
2.3 测定波长的选择 经紫外扫描，芍药苷在230nm波长处有最大吸收，故选定230nm为测定波长。
2.4 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥器干燥36小时的芍药苷对照品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芍药苷0.1mg)。
2.5 供试品溶液的制备 取装量差异项下本品，取内容物，混匀，取约0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。
2.6 阴性对照试验 为考察其它辅料是否干扰芍药苷的测定，除赤芍或白芍外，按处方比例称取其它辅料与供试品溶液同法制成阴性对照溶液并测定。结果表明，阴性样品对芍药苷的含量测定无干扰。
3 线性关系的考察 精密称取经五氧化二磷减压干燥器干燥36小时的芍药苷对照品11.48mg，置10ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml，分别置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别从中精密吸取10ul注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定。以峰面积为纵坐标，芍药苷量(ug)为横坐标作图，绘制标准曲线。
回归方程为Y＝1270296.82X+2219.70 线性系数为γ＝0.9999 芍药苷在0.4592～2.2960ug范围内线性良好。 标准曲线测定数据 4 稳定性试验 取本品装量差异项下的内容物105.19mg，按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，每隔1小时重复测定1次，结果表明在4小时之内，供试品溶液稳定。
5 精密度试验 精密称取经五氧化二磷干燥器干燥36小时的芍药苷对照品11.56mg，按正文对照品溶液的制备和测定法项下操作，重复测5次，结果如下 6 重复性试验 取本品5份，精密称定，按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，结果如下 7 回收率试验 采用加样回收法，取装量差异项下本品，取内容物，混匀，从中取约50mg(共5份)，精密称定，分置100ml量瓶中；精密量取芍药苷对照品溶液(1.6644mg/ml)3ml(共5份)，分置上述100ml量瓶中，加甲醇适量超声处理使溶解，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，精密吸取续滤液10μl注入液相色谱仪，测定，即得。
药物组合物中芍药苷含量为93.86mg/g 平均回收率＝97.05％，RSD＝1.21％。
8 样品的测定 按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，测定三批样品，结果如下
具体实施例方式 实施例1采用液相色谱法测定以红参或人参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备精密称取本发明组方粉针制剂适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，共有峰有5～20个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±10％； (5)以(1)～(3)所述方法作为待药物组合物中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将本发明组方粉针制剂指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部； I.计算本发明组方粉针制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00； II.本发明组方粉针制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间的相对偏差不得超过±10％。
实施例2采用液相色谱法测试红参或人参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备取本发明组方水针制剂适量，加甲醇制成每1ml含80mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相A为0.5％冰醋酸溶液；B为50％甲醇溶液，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至10分钟，流动相B的比例为20％，从10分钟至40分钟，流动相B的比例由20％升至65％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为65％，从50分钟至70分钟，流动相B的比例由65％升至80％，从70分钟至80分钟，流动相B的比例由80％降至20％；流速为0.6ml/min、检测波长201nm，柱温50℃； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，所述标准指纹图谱中，共有峰有5～30个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±20％； (5)以上述方法作为本发明组方水针制剂中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将本发明组方水针制剂的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，符合下列要求 I.计算本发明组方水针制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00； II.本发明组方水针制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间的相对偏差不得超过±20％。
实施例3药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方粉针制剂适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。
实施例4药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别 取本发明组方粉针制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0m1/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
实施例5药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方粉针制剂适量，加甲醇提取，离心，取上清液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸6∶1.5∶1.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后在105℃烘至斑点显色清晰或，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例6药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法 取本发明组方粉针制剂适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例7药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方分散片适量，用醋酸乙酯提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各15μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以正丁醇-甲酸乙酯-水6∶1∶7的上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以50％硫酸试剂，150℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点，阴性无干扰。
实施例8药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别 取本发明组方滴丸适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，30％∶70％甲醇-1.5％冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1.5ml/min，检测波长为201nm，柱温50℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
实施例9药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方微丸适量，加醋酸乙酯提取，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各20μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水15∶5∶3为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后热风吹至斑点显色清晰或置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
实施例10药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法 取本发明组方水针适量，加水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，70％∶30％乙腈-水为流动相，检测波长为235nm；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例11药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定 取本发明组方粉针制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标法或标准曲线法进行计算，本发明组方粉针制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项 (1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg； (2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg； (3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg； (4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg。
实施例12药物组合物中总皂苷的含量测定 取本发明组方粉针制剂适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，精密加冰醋酸至25ml，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，本发明组方粉针制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于6mg。
实施例13药物组合物中芍药苷的含量测定 取本发明组方粉针制剂适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm；以外标一点法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于20mg。
实施例14药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定 取本发明组方分散片制剂适量，置量瓶中，加水至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，25％∶75％甲醇-2.5％冰醋酸水溶液为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至30分钟，乙腈的比例为25％，从30分钟至50分钟，乙腈的比例由25％上升至30％，从50分钟至70分钟，乙腈的比例为30％，从70分钟至90分钟，乙腈的比例由30％升至50％；流速为1.8ml/min，检测波长为200nm，柱温50℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，分散片制剂以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项 (5)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg； (6)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg； (7)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg； (8)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg。
实施例15药物组合物中总皂苷的含量测定 取本发明组方水针制剂适量，置量瓶中，加蒸馏水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加18％香草醛-冰醋酸溶液2ml，高氯酸0.2ml，摇匀，80℃水浴上加热5分钟，取出，立即以流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，水针制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf计，不得少于3mg。
实施例16药物组合物中芍药苷的含量测定 取本发明组方分散片制剂适量，加水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，70％∶30％乙腈-水为流动相，检测波长为235nm；以外标一点法或标准曲线法进行计算，分散片制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于10mg。
实施例17采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备精密称取本发明组方粉针制剂适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分苍术内酯III，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为甲醇-水67∶33，流速为1.0ml/min、蒸发光检测器检测，漂移管温度30℃，载气流量2.2L/min，柱温为30℃； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～20个； (5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱； (6)将本发明组方粉针的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部 I.计算本发明组方粉针制剂的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00； II.本发明组方粉针制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％。
实施例18采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱 (1)供试品溶液的制备取本发明组方水针适量，加水溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液； (2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分对照品，包括党参炔苷、苍术内酯III中的一种或两种，用水溶解稀释至合适浓度，作为参照物溶液； (3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为5％～99％∶95％～5％乙腈或甲醇-水或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.2％～3％冰醋酸或0.2％～3％甲酸或0.2％～3％磷酸溶液，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-300nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温为20～60℃范围内； (4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个； (5)以(1)～(3)所述方法作为本发明组方水针制剂中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备水针的指纹图谱； (6)将水针的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部 I.计算水针的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00； II.水针制剂指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％； III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20％。
实施例19药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方粉针制剂适量，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水2ml使溶解，置C18固相萃取小柱(500mg，用甲醇、20％甲醇各10ml预洗)中，依次用20％甲醇、甲醇各5ml洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取党参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取党参炔苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液6μl、对照品溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水7∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
实施例20药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法 取本发明组方粉针制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例21药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法 取本发明组方滴丸适量，加水溶解，用醋酸乙酯萃取，萃取液浓缩至干，残渣用乙醇溶解，作为供试品溶液，另取党参对照药材、党参炔苷中的一种或两种制备对照溶液；对照药材溶液的制备取党参对照药材，加水提取后滤过，滤液蒸干，残渣用水溶解后用醋酸乙酯萃取，萃取液浓缩至干，残渣用乙醇溶解，作为供试品溶液，对照品溶液的制备取党参炔苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各25μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，正丁醇-甲酸-水20∶5∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃加热25分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 实施例22药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法 取本发明组方分散片适量，置量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.25％磷酸水溶液，检测波长265nm，柱温45℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
实施例23药物组合物中党参炔苷的含量测定 取本发明组方粉针制剂适量，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，粉针制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.1mg。
实施例24药物组合物中党参炔苷的含量测定 取本发明组方水针制剂适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.08％磷酸水溶液60％∶40％为流动相，检测波长为263nm，柱温40℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，水针制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.05mg。
权利要求
1、一种以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下全部或部分内容
(1)药物组合物的指纹图谱测试，包括以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱中的一种；
(2)药物组合物中红参或人参药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、芍药苷中、党参炔苷、苍术内酯III全部或部分成分的鉴别测试方法；
(3)药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、芍药苷、总皂苷、党参炔苷、苍术内酯III全部或部分成分的含量测试方法。
2、按照权利要求1所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法采用液相色谱法测试以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱
a、采用液相色谱法测试红参或人参成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备取待测药物组合物适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备取适量红参或人参和麦冬药材中的主要活性成分对照品，包括人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合适浓度，作为参照物溶液；
(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相A为0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液；B为10％～90％乙腈溶液或10％～90％甲醇溶液，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；
(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，所述标准指纹图谱中，共有峰有5～30个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±20％；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部
I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；
II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；
III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20％；
b、采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备取待测药物组合物适量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀释，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分对照品，包括党参炔苷、苍术内酯III中的一种或两种，用水或甲醇、乙醇溶解稀释至合适浓度，作为参照物溶液；
(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为5％～99％∶95％～5％乙腈或甲醇-水或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.2％～3％冰醋酸或0.2％～3％甲酸或0.2％～3％磷酸溶液，流速为0.5～2.0ml/min、检测波长为190-300nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温为20～60℃范围内；
(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段；依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～30个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部
I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.80～1.00；
II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的10％；
III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±20％。
3、按照权利要求2所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于该方法采用液相色谱法测试以红参或人参成分特征为主的指纹图谱、以党参成分特征为主的指纹图谱
a、采用液相色谱法测定以红参或人参成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备精密称取待测药物组合物适量，加水制成每1ml含50mg的溶液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1适量，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相A为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为乙腈-水80∶20，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至5分钟，流动相B的比例为25％，从5分钟至40分钟，流动相B的比例由25％升至64％，从40分钟至50分钟，流动相B的比例为64％，从50分钟至65分钟，流动相B的比例由64％升至80％，从65分钟至75分钟，流动相B的比例由80％降至25％；流速为1.0ml/min，检测波长为203±2nm，柱温为40℃；
(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以红参或人参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，共有峰有5～20个，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，其相对标准偏差不得超过±10％；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待药物组合物中红参或人参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测药物组合物指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部；
I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；
III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％；
b、采用液相色谱法测试党参成分特征为主的指纹图谱
(1)供试品溶液的制备精密称取待测药物组合物适量，加甲醇制成每1ml含50mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
(2)参照物溶液的制备取适量党参药材中的主要活性成分苍术内酯III，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为参照物溶液；
(3)色谱条件色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料流动相为甲醇-水67∶33，流速为1.0ml/min、蒸发光检测器检测，漂移管温度30℃，载气流量2.2L/min，柱温为30℃；
(4)标准指纹图谱的制定以上述方法作为制定以党参成分特征为主的标准指纹图谱的测试手段；分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，依据10批或10批以上供试品所测得的图谱，制定标准指纹图谱，以确定的参照物色谱峰的保留时间为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间，所述标准指纹图谱中，共有峰有3～20个；
(5)以(1)～(3)所述方法作为待测药物组合物中以党参成分特征为主的指纹图谱的测试手段，制备待测样品的指纹图谱；
(6)将待测药物组合物的指纹图谱与上述标准指纹图谱对比，应符合下列要求中的部分或全部
I.计算待测药物组合物的指纹图谱与标准指纹图谱的相似度，应为0.90～1.00；
II.待测药物组合物指纹图谱中，非共有峰面积不得超过总峰面积的5％；
III.除参照物色谱峰之外的其他共有色谱峰与参照物色谱峰的相对保留时间与标准指纹图谱相比，相对偏差不得超过±10％。
4、按照权利要求1所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的鉴别方法包括以下全部或部分内容
a、药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，用正丁醇或乙醇或甲醇或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇或醋酸乙酯提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇-水5～40∶10～100∶5～50∶0.2～3010℃以下放置的下层溶液或正丁醇-醋酸乙酯或甲酸乙酯-水1～10∶0.2～2∶1～15的上层为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5～50％硫酸乙醇试剂或50％硫酸试剂，80℃～160℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点，阴性无干扰；
b、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂甲醇或乙腈-水或0.5％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.5％～5％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
c、药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加醋酸乙酯或乙醇或甲醇或正丁醇提取，滤过或离心，取滤液或上清液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板，以三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇或乙醇-甲酸或乙酸1～120∶0.2～15∶0.5～25∶0.01～5或三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯-甲醇或乙醇-水3～50∶10～120∶5～60∶1～25的下层溶液或三氯甲烷或正丁醇或二氯甲烷或甲苯-甲醇或冰醋酸或甲酸-醋酸乙酯或水1～80∶0.1～50∶0.05～25或氯仿-甲醇1～25∶0.2～15为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以0.2％～10％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后在80℃～160℃烘至斑点显色清晰或热风吹至斑点显色清晰或置紫外光灯365nm或254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色斑点；
d、药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加甲醇或乙醇或流动相或水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为200～410nm；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
e、药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加水溶解，用正丁醇或醋酸乙酯或氯仿萃取，萃取液浓缩至干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，或置C18或C8固相萃取小柱中，依次用5％～50％甲醇、甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取党参对照药材、党参炔苷中的一种或两种制备对照溶液；对照药材溶液的制备取党参对照药材，加水或甲醇提取后滤过，滤液蒸干，残渣用水溶解后用正丁醇或醋酸乙酯或氯仿萃取，萃取液浓缩至干，残渣用甲醇或乙醇溶解，作为供试品溶液，或滤液置C18或C8固相萃取小柱中，依次用5％～50％甲醇、甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；对照品溶液的制备取党参炔苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板，正丁醇-冰醋酸或甲酸或乙醇或无水乙醇-水1～35∶0.1～10∶0.05～5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3％～30％硫酸乙醇溶液，80～150℃加热1～30分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应显相同颜色的荧光斑点；
f、药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇或乙醇或流动相至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～0.5％磷酸水溶液5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为200～410nm范围内的一个或几个，柱温20～50℃范围内；供试品色谱中，应具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
5、按照权利要求4所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的鉴别方法包括以下全部或部分内容
a、药物组合物中红参或人参、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中一种或几种的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，用正丁醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；另取红参或人参对照药材、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种，制备对照药材溶液；红参或人参对照药材溶液的制备取红参或人参对照药材适量，加三氯甲烷回流提取，弃去三氯甲烷液，残渣加水饱和正丁醇提取，提取液加氨试液，分取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解，作为对照药材溶液；对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf中的一种或几种对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇试剂，105℃烘至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰；
b、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的液相色谱鉴别
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温在30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰，阴性无干扰。
c、药物组合物中芍药苷的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加甲醇提取，离心，取上清液作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，分别加甲醇制成每1ml含2mg的溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸6∶1.5∶1.5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，先喷以5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；再喷以香草醛硫酸溶液后在105℃烘至斑点显色清晰或，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
d、药物组合物中芍药苷的液相色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰；
e、药物组合物中党参炔苷的薄层色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水2ml使溶解，置C18固相萃取小柱(500mg，用甲醇、20％甲醇各10ml预洗)中，依次用20％甲醇、甲醇各5ml洗脱，收集甲醇洗脱液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取党参对照药材，同法制成对照药材溶液；再取党参炔苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液；采用中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液6μl、对照品溶液2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水7∶1∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5分钟，置紫外光灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
f、药物组合物中党参炔苷的液相色谱鉴别方法
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；供试品色谱中，具与对照品色谱有保留时间一致的色谱峰。
6、按照权利要求1所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物含量的测试方法应包括以下全部或部分内容
a、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加水或甲醇或流动相或乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.5％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～5％磷酸水溶液或0.5％～5％甲酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为190～410nm范围内的一个或几个或蒸发光检测器检测，柱温在20～60℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于0.8mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.4mg；
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于0.5mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于1.7mg；
b、药物组合物中总皂苷的含量测定
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加蒸馏水适量使溶解并定至刻度，摇匀，精密量取适量，置量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加1％～50％香草醛-冰醋酸溶液0.1～10ml，高氯酸0.1～15ml，摇匀，30～80℃水浴上加热3～50分钟，取出，立即以冰水浴或流水冷却，精密加冰醋酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液，以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547±10nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1或人参皂苷Rb1或人参皂苷Re或人参皂苷Rf计，不得少于3mg；
c、药物组合物中芍药苷的含量测定
取待测药物组合物适量，加甲醇或乙醇或流动相或水溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇或乙醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.05％～10％冰醋酸水溶液或0.05％～10％甲酸水溶液或0.01％～5％磷酸水溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钠溶液或0.005mol/L～2mol/L磷酸二氢钾溶液5％～95％∶95％～5％为流动相，检测波长为200～410nm；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于10mg；
d、药物组合物中党参炔苷的含量测定
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇或乙腈-水或0.05％～5％冰醋酸水溶液或0.02％～0.5％磷酸水溶液5％～80％∶95％～20％为流动相，检测波长为200～410nm范围内的一个或几个，柱温20～50℃范围内；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.05mg。
7、按照权利要求6所述的以人参或红参或党参、芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物含量的测试方法是以下一种或几种方法
a、药物组合物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中一种或几种的含量测定
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re中的一种或几种对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，梯度洗脱，溶剂比例为从0分钟至35分钟，乙腈的比例为19％，从35分钟至55分钟，乙腈的比例由19％上升至29％，从55分钟至70分钟，乙腈的比例为29％，从70分钟至100分钟，乙腈的比例由29％升至40％；流速为1.0ml/min，检测波长203nm，柱温为30℃；以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，含量限度应为以下一项或几项
(1)每单位量含人参皂苷Rg1的限度不得少于1.6mg；
(2)每单位量含人参皂苷Re的限度不得少于0.8mg；
(3)每单位量含人参皂苷Rb1的限度不得少于1.0mg；
(4)每单位量含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总和的限度不得少于3.4mg；
b、药物组合物中总皂苷的含量测定
取待测药物组合物适量，置10ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取0.6ml，至25ml量瓶中，水浴蒸干，立即取出，精密加5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸2.0ml，摇匀，60℃水浴上加热15分钟，取出，立即以冰水浴冷却2分钟，精密加冰醋酸至25ml，摇匀，作为供试品溶液；以人参皂苷Rg1为对照品，同法制得对照品溶液。以随行溶剂为空白，采用中国药典附录公开的分光光度法，在547nm的波长处测定吸收度，以外标法或标准曲线法进行计算，待测药物组合物以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含总皂苷以人参皂苷Rg1计，不得少于6mg；
c、药物组合物中芍药苷的含量测定
取待测药物组合物适量，加甲醇溶解或稀释至合适浓度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；以芍药苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，40％∶60％甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相，检测波长为230nm；以外标一点法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含芍药苷的限度不得少于20mg；
d、药物组合物中党参炔苷的含量测定
取待测药物组合物适量，置量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；以党参炔苷对照品的甲醇溶液为对照，采用液相色谱法，色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水22∶78为流动相，检测波长为267nm，柱温30℃；以外标一点法或标准曲线法进行计算，各制剂以相当于每日用成品量为单位量，每单位量含党参炔苷的限度不得少于0.1mg。
8、按照权利要求6或7所述的药物组合物的质量控制方法，其特征在于所述药物组合物的含量测定结果，其质量标准中可测成分除辅料外，人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、芍药苷、总皂苷、党参炔苷、苍术内酯III等中的全部或部分种类的总含量占25％以上。
全文摘要
本发明涉及一种由人参(或红参或党参)或其提取物与芍药苷制成的药物组合物的质量控制方法，该质量控制方法包括该组方制剂中人参(或红参或党参)、芍药苷的指纹图谱测试方法和/或鉴别测试方法和/或含量测定方法，本发明为该组方制剂的质量控制提供了一种可靠、稳定、全新的方法，使该制剂的工艺控制更加严格合理，质量更加稳定，同时为大生产提供了可靠稳定的检测方法，为确保患者用药的有效性、安全性提供了数字化的说明。
文档编号A61P25/00GK1939434SQ20051010782
公开日2007年4月4日 申请日期2005年9月30日 优先权日2005年9月30日
发明者于文风 申请人:北京奇源益德药物研究所