专利名称：激酶抑制剂的制作方法
背景技术：
p38激酶是促分裂原活化蛋白(MAP)激酶，其属于丝氨酸-苏氨酸激酶总科。这种激酶通过胞外应激反应例如加热、紫外线灯和渗透性的应激反应、以及通过炎症性的刺激例如脂多糖来激活。当激活时，p38激酶将调节前炎症性的细胞素肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的生物合成的胞内蛋白底物磷酸化。这些细胞活素涉及许多下列病症的病理慢性的炎症性病症(Lee等人，Ann.N.Y.Acad.Sci.，696，149-170(1993)；Muller-Ladner，Curr.Opin.Rheumatol.，8，210-220(1996))，心血管和中枢神经系统病症(Salituro等人，Current Medicinal Chemistry，6，807-823(1999))，和自身免疫病症(Pargellis等人，Nature Structural Biology，9(4)，268-272(2002))。
在吡啶基咪唑(WO9621452，WO9725045，US5656644，US5686455，US5717100，WO9712876，WO9821957，WO9847892，WO99903837，WO9901449，WO0061576，WO0172737)和嘧啶基-咪唑(WO9725048，WO9901452，WO9725046，WO9932121，WO9901131，WO9901130，WO9901136，WO9807452，WO9747618，WO9856788，WO9857996)结构平台内的许多化合物，已经确定为p38激酶的抑制剂或细胞素抑制剂。已知p38激酶的选择性抑制剂可以抑制TNF-α和IL-1β的表达(McKenna等人...，J.Med.Chem.，45(11)，2173-2184(2002))。已经报道了嘧啶基咪唑结构平台内的化合物的抗炎活性(Lantos等人，J.Med. Chem.，27，72-75(1984))，并且也在探查许多p38激酶的抑制剂用于治疗各种病症的活性(Boehm和Adams，Exp.Opin.Ther.Patents，10(1)，25-37(2000))。作为细胞素抑制性药物的化合物，即能够抑制p38激酶的化合物，在该领域还有用于治疗的需要。
本发明提供了新的p38激酶抑制剂，其可用于治疗由过量细胞素产生引起的病症。
发明概述本发明提供了式I的化合物
其中 X是N，或C-R1；R是C1-C7烷基，C3-C7环烷基，(C1-C7亚烷基)-(C3-C7环烷基)，-SO2-(C1-C7烷基)，或-SO2-NR5R6；R1是氢，氨基，甲基，或-N＝CH(NMe)2；R2是任选被一或两个独立选自卤素的取代基取代的苯基；R3是氢，C1-C7烷基，C3-C7环烷基，或任选被一或两个独立选自卤素和三氟甲基的取代基取代的苯基；R4是氢或C1-C7烷基；R5和R6独立地选自C1-C7烷基；或其药学可接受的盐。
本发明提供了一种抑制哺乳动物中的p-38激酶的方法，包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供了一种抑制哺乳动物中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生的方法，该方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供了抑制哺乳动物中的白介素-1β(IL-1β)的产生的方法，包含给予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明进一步提供了治疗哺乳动物中由过量细胞素产生引起的病症的方法，包括给予需要这种治疗的哺乳动物细胞素-抑制数量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明也提供了一种治疗哺乳动物中的敏感肿瘤的方法，该方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明也提供了一种抑制哺乳动物中的转移病变的方法，该方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供了一种治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的方法，该方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐。
本发明还提供了一种药物制剂，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂组合。
该发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备抑制p38激酶的药物的用途。另外，该发明提供了用于抑制哺乳动物中p38激酶的式I化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于抑制p38激酶的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或其稀释剂组合。本发明还提供了式I化合物用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗通过抑制p-38激酶能够改善或预防的疾病或病症。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生的药物的用途。另外，本发明提供了用于抑制哺乳动物中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生的式I化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。本发明还提供了式I化合物用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗通过抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)的产生而能够改善或预防的疾病或病症。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备抑制白介素-1β(IL-1β)产生的药物的用途。另外，本发明提供了用于抑制哺乳动物中的白介素β(IL-1β)的产生的式I化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于抑制白介素-1β(IL-1β)的产生的药物组合物，包括式I化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。本发明还提供了式I化合物用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗通过抑制白介素-1β(IL-1β)的产生而能够改善或预防的疾病或病症。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗由过量细胞素产生引起的病症。另外，该发明提供了用于治疗哺乳动物中由过量细胞素产生引起的病症的式I的化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于治疗由过量细胞素产生引起的病症的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。本发明还提供了式I化合物用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗通过抑制过量细胞素产生而能够改善或预防的疾病或病症。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备一种药物的用途，这种药物用于治疗敏感肿瘤。另外，本发明提供了用于治疗哺乳动物中的敏感肿瘤的式I的化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于治疗敏感肿瘤的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备抑制转移病变的药物的用途。另外，本发明提供了用于抑制哺乳动物中的转移病变的式I的化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于抑制转移病变的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。
本发明还提供了式I化合物或其药学可接受的盐用于制备治疗类风湿性关节炎的药物的用途。另外，本发明提供了用于治疗哺乳动物中的类风湿性关节炎的式I的化合物或其药学可接受的盐。此外，本发明提供了一种适合于治疗类风湿性关节炎的药物组合物，包括式I的化合物或其药学可接受的盐与一或多种药学可接受的赋形剂、载体或稀释剂组合。
发明的详细说明上面化学式中所使用的一般化学术语具有它们常用的含义。例如，术语“C1-C7烷基”包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基和庚基部分。术语“C1-C7亚烷基”包括亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚异丙基，亚丁基，亚异丁基，亚仲丁基，亚叔丁基，亚戊基，亚己基和亚庚基部分。术语“C3-C7环烷基”包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基部分。术语“(C1-C7亚烷基)-(C3-C7环烷基)”是指通过C1-C7亚烷基连接基连接的C3-C7环烷基。术语“卤素”包括氟，氯，溴，和碘。
术语“p-38激酶”是指p-38α和/或p38β激酶异构型。
术语“抑制TNF-α(IL-1β，细胞素)的产生”是指将哺乳动物中过量体内水平的TNF-α、IL-1β、或另一种细胞素降低至正常的或亚正常水平。这可以通过下列方式实现抑制所有细胞包括巨噬细胞的TNF-α、IL-1β、或另一种细胞素的体内释放；将哺乳动物中的TNF-α、IL-1β或另一种细胞素的过量体内水平的基因组水平下调至正常的或亚正常水平；抑制作为转译后现象的TNF-α、IL-1β或另一种细胞素的合成；或下调TNF-α、IL-1β或另一种细胞素至翻译水平。
术语“最小有效剂量(MED)”是指可以产生效果的最小剂量，该效果统计上显著地不同于在赋形剂对照组中观察到的效果。
术语“阈有效剂量(TED)”是指要求得到指定活性阈值的剂量。例如，TED50是要求得到50％响应的剂量。
术语“阈最小有效剂量(TMED)”是指保证统计上显著效果的最低剂量，该效果也得到指定活性的阈水平。例如，TMED50是得到50％响应的最低剂量，并且一定是统计上显著地不同于赋形剂对照组。
术语“有效量”是指得到所需要药理学效果的式I化合物的剂量。
熟练技术人员将会理解，某些式I的化合物含有至少一个手性中心。本发明包括所述化合物的所有单一对映体或非对映体、以及对映体和非对映体的混合物，包括消旋体。优选，含有至少一个手性中心的式I化合物以单一对映体或非对映体的形态存在。单一对映体或非对映体可以从手性试剂开始制备，或通过立体选择性的或立体特异性的合成技术制备。或者，单一对映体或非对映体可以通过标准手性色谱或结晶技术从混合物中分离。
技术熟练的技术人员将会理解，当变量“W”是咪唑(i)、R4是氢时，咪唑环存在于下面的两个互变异构形式中
尽管互变异构体I和II在结构上是不同的，熟练的技术人员将会理解，它们处于平衡之中，并且在普通条件下可以容易和快速地互相转换。(参见March，Advanced Organic Chemistry，Third Edition，Wiley Interscience，New York，New York(1985)，第66-70页；和Allinger，Organic Chemistry，Second Edition，Worth Publishers，NewYork，New York，(1976)，第173页)。因此，在互变异构形式中，式I化合物的表述包括咪唑环的两个互变异构形式，其中变量“W”是咪唑(i)，且R4是氢。同样地，其中“W”是咪唑(i)且R4是氢的式I化合物的命名，既可以是1H-咪唑也可以是3H-咪唑，其包括咪唑环的两个互变异构形式。具体地，名称5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺包括1H-咪唑-4-基或3H-咪唑-4-基形式中的分子。类似地，当变量“W”是三唑(iv)时，三唑部分存在三个互变异构形式，并且一个互变异构形式的表述或名称包括三唑环的所有三个互变异构形式。
技术熟练的读者将会了解，本发明的化合物能够形成盐。就一切情况而论，所有化合物的药学可接受的盐包括在它们的名称内。本发明的化合物是胺，并且相应地与大量无机和有机酸的任一项起反应，形成药学可接受的加成盐。优选的药学可接受的盐是那些与马来酸、富马酸、琥珀酸、盐酸和甲磺酸形成的盐。特别优选的是式I化合物的二-甲磺酸盐。
某些类的式I化合物是p-38激酶的优选抑制剂。下面的段落描述这种优选类别
c)X是C-R1；d)X是C-NH2；e)R2是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基；f)R2是苯基；g)R2是4-氟苯基；h)R2是2，4-二氟苯基；i)R4是氢；j)W是 X是C-R1，R2是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基，和R4是氢；k)W是 X是C-NH2，R2是苯基，4-氟苯基或2，4-二氟苯基，和R4是氢；l)W是 X是C-R1，R是C1-C7烷基，R2是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基，R3是C1-C7烷基或任选被一或两个独立选自卤素和三氟甲基的取代基取代的苯基，R4是氢；
m)W是 X是C-NH2，R是C1-C7烷基，R2是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基，R3是C1-C7烷基或任选被一或两个独立选自卤素的取代基取代的苯基，R4是氢；n)式I的化合物是游离碱。
o)式I的化合物是盐。
p)式I的化合物是甲磺酸盐。
q)式I的化合物是二-甲磺酸盐。
本发明的优选实施方案包括段落a)-q)的所有组合。
在式I范围内的化合物的特别优选的亚属是式I’的化合物 其中R′是2，2-二甲基丙基或1，2，2-三甲基丙基；R2′是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基；R3′是叔丁基，2-氯-6-氟苯基，2-氟-6-三氟甲基苯基，2，6-二氯苯基，或2，6-二氟苯基；或其药学可接受的盐。
最优选的式I’化合物是那些符合下列条件的化合物1.R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2-氟-6-三氟甲基苯基；2.R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2，6-二氯苯基；3.R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是叔丁基；4.R′是2，2-二甲基丙基，R2′是苯基，和R3′是2-氯-6-氟苯基；5.R′是2，2-二甲基丙基，R2′是2，6-二氟苯基，和R3′是叔丁基；
6.R′是1，2，2-三甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是叔丁基；和7.R′是1，2，2-三甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2，6-二氟苯基。
还优选每个这些化合物以甲磺酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸氢盐、二盐酸盐或二甲磺酸盐的形式存在。特别优选每个这些化合物以二甲磺酸盐存在。
式I的化合物是p38激酶抑制剂。由此，本发明还提供了一种抑制哺乳动物中的p38激酶的方法，该方法包括给予需要所述治疗的哺乳动物有效量的式I的化合物。优选通过给予式I的化合物治疗的哺乳动物是人类。
作为p38激酶抑制剂，本发明的化合物可有效用于抑制前炎症性细胞素肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的产生，因此可用于治疗由产生过量细胞素引起的病症。因此可认为式I的化合物可有效用于治疗炎症性病症，包括湿疹、特异性皮炎、类风湿性关节炎、骨关节炎、炎症性肠病和中毒性休克综合症。还认为本发明的化合物可有效用于治疗心血管病症，例如急性心肌梗塞，慢性心力衰竭，动脉粥样硬化，病毒性心肌炎，心脏同种异体移植物的排斥，和与败血症-相关的心脏机能障碍。此外，还认为本发明的化合物可有效用于治疗中枢神经系统病症，例如脑膜炎双球菌性脑膜炎，阿尔茨海墨病，帕金森病，和多发性脑硬化。
大部分实质固态瘤通过恶性细胞和基质细胞包括内皮细胞的增殖而增加质量。为了使肿瘤比2-3毫米直径大，必须形成血管系统，一种被称为血管生成的过程。已经报道了通过血管抑素和血管内皮抑素抑制肿瘤引起的血管生成，可以产生抗癌活性(O’Reilly等人，Cell，88，277-285(1997))。选择性的p38激酶抑制剂SB22025已经显示其可以抑制血管生成(J.R.Jackson等人，J.Pharmacol.Exp.Therapeutics，284，687(1998))。因为血管生成是大部分实质固态瘤的质量扩展的关键部分，用于抑制这种过程的新p38激酶抑制剂的开发代表了抗癌治疗的有希望的方法。这种抗癌治疗的方法可以没有毒性的副作用或常规化疗性能引起的耐药性(Judah Folkman，Endogenous Inhibitors ofAngiogenesis，The Harvey Lectures，Series 92，第65-82页，Wiley-LissInc.，(1998))。
作为p38激酶的抑制剂，本发明的化合物因此还用于抑制敏感肿瘤的增长。Schultz，R.M.Potential of p38 MAP kinase inhibitors in thetreatment of cancer.InE.Jucker(ed.)，Progress in Drug Research，60，59-92，(2003)。将敏感肿瘤定义为其存活、增长或转移病变取决于p38激酶的肿瘤。敏感肿瘤包括脑、泌尿生殖道、淋巴系统、胃、喉和肺肿瘤(U.S.Patent#5,717,100)。优选，本申请中使用的术语“敏感肿瘤”包括人类的癌症，这种癌症包括非小细胞肺恶性肿瘤(A.Greenberg，等人Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.，26，558(2002))，乳房恶性肿瘤(J.Chen，等人J.Biol.Chem.，276，47901(2001)；B.Salh，等人Int.J.Cancer，98，148(2002)；和S.Xiong，等人Cancer Res.，61，1727(2001))，胃恶性肿瘤(Y.D.Jung，等人Proc.Am.Assoc.Cancer Res.，43，9(2002))，结肠癌(S.Xiong，等人Cancer Res.，61，1727(2001))，前列腺恶性肿瘤(J-I Park，等人Oncogene，22，4314-4332(2003)；L.Chen，等人Cancer Lett.，215，239-247(2004)；和A.R.Uzgara，等人Prostate，55，128-139(2003))，恶性黑色素瘤(C.Denkert，等人Clin.Exp.Metastasis，19，79(2002))，和多发性骨髓瘤(Hideshima，等人Oncogeneadvance online publication，1-11，(11 October 2004)；和Hideshima，等人Blood，101(2)，703(2003))。
通过抑制TNF-α来抑制血管生成，也已经报道其可有效用于抑制或预防转移病变(美国专利#6,414,150；U.S.Patent#6,335,336)。此外，抑制TNF-α，显示其可用于治疗和预防大约一半癌症患者所感受的恶病体质、消耗综合征(T.Yoneda，等人，J.Clin.Invest.，87，977(1991))。此外，抑制p38激酶可以有效用于治疗某些病毒病症，例如流行性感冒(K.Kujime，等人J.Immunology.，164，3222-3228(2000))，鼻病毒(S.Griego，等人J.Immunology，165，5211-5220(2000))，和HIV(L.Shapiro，等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA，95，7422-7426，(1998))。
本发明的化合物可以通过各种方法制备，其中一些在下面的反应路线中进行了说明。本领域技术人员将会认识到，在下面反应路线中的独立步骤可以变化，以提供式I的化合物。生产式I的化合物所要求步骤的具体顺序取决于要被合成的具体化合物、原料化合物和取代的部分的相对不稳定性。在下面反应路线中已经排除了一些取代基，这是为了清楚而不是意欲以任何方式限制反应路线的内容。
其中W是咪唑(i)的式I化合物，可以按照下面反应路线中说明的方法制备，其中R、R1、R2和R3如先前所定义。
反应路线I 在合适的溶剂中，优选乙酸，使二酮(a)与乙酸铵和合适的醛反应，形成相应的硝基吡啶基-咪唑(b)。在标准氢化或化学条件下，将硝基部分还原，形成该相应的二胺(c)。然后使该二胺与溴化氰反应，形成3-取代的-5-(咪唑-4-基)-2-氨基吡啶基-咪唑(Ia)，与合适的原甲酸酯反应，形成3-取代的-5-(咪唑-4-基)吡啶基咪唑(Ib)，或与合适的亚硝酸酯反应，形成3-取代的-5-(咪唑-4-基)吡啶基三唑(Ic)。
必要的二酮(a)可以如下面反应路线所述来制备，其中R和R2如先前所定义。
反应路线II
2，6-二氯硝基吡啶(d)与合适的胺或胺衍生物在合适的溶剂中一起加热，形成相应的2-氨基-6-氯-3-硝基吡啶(e)，然后其与适当取代的乙炔偶合，形成相应的1，2-二取代的乙炔(f)。将该乙炔氧化形成靶向二酮(a)。
其中W是吡唑(ii)或(iii)的式I的化合物是按照下面反应路线所述制备的，其中X、R、R1和R2如先前所定义。
反应路线III 在含水硫酸中用氧化汞处理乙炔(f)，形成酮(g)。在合适的溶剂中，典型地是二甲基甲酰胺，用二甲基甲酰胺二甲缩醛或三(二甲基-氨基)甲烷处理该酮，形成烯胺酮(enaminoketone)(h)。然后在合适的溶剂中，典型地是乙醇或甲醇，用肼处理该烯胺酮(enaminoketone)，形成苯基吡唑(j)。如先前所描述来制备咪唑并或三唑并吡啶部分，形成式Id的化合物。
其中W是[1，2，3]三唑(iv)的式I化合物，可以如下面反应路线所述来制备，其中变量Y、R和R2如先前所定义。
反应路线IV
使乙炔(f)与叠氮化物源(典型地是叠氮化钠)在合适的溶剂例如二甲氧基乙烷中反应，形成三唑(k)。如先前所描述来制备咪唑并或三唑并吡啶部分，形成式Ie的化合物。
其中W是噻唑(v)或_唑(vii)的式I的化合物可以如下面反应路线中所述来制备，其中变量X、R、R2和R3如先前所定义，Y是O或S。
反应路线V 在合适的溶剂中，使α-溴酮(l)与合适的酰胺(m，Y＝O)或硫代酰胺(m，Y＝S)反应，形成相应的_唑或噻唑(n)。然后在合适的溶剂中用溴处理_唑(n，Y＝O)，形成相应的溴代杂环(o，Y＝O)。用正丁基锂处理噻唑(n，Y＝S)，并且使得到的阴离子与三丁基氯化锡反应，形成相应的锡衍生物(o，Y＝S)。在先前所述的合适催化剂存在下，使适当取代的杂环(o)与合适的硼酸(p)反应，形成式If的化合物。
必要的α-溴酮可商业购买或可以通过标准条件由相应的羰基化合物制备，例如House(H.O.House，Modern Synthetic Reactions，W.A.Benjamin，Inc.，Menlo Park，California(1972)，第459-478页)和Laroek(R.C.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCHPublishers，Inc.，New York，New York(1989)，第369-471，755页)所述。必要的酰胺和硫代酰胺是可商业购买的，或是可以通过技术人员熟知的标准方法制备的。
其中W是咪唑(i)或异_唑(vi)的其它式I化合物，可以如下面反应路线所述的标准钯偶合条件下制备，其中W’是咪唑(i)或异_唑(vi)，X和R如先前所定义。
反应路线VI 在钯催化剂的存在下，典型地是双(三苯基膦)钯(II)氯化物，在合适的溶剂中，适当取代的卤代杂芳基(q)与适当取代的硼酸(p)偶合，形成所需要的式Ie的化合物。必要的起始原料是可商业购买的，或是可以通过普通技术人员熟知的方法制备的。
本发明的许多化合物不只是用作p38激酶的抑制剂，也用于制备本发明其它化合物的中间体。例如，可以将伯和仲胺酰化、烷基化或在标准肽偶合条件下与羧酸或氨基酸偶合。此外，在标准条件下，可以将酯部分还原成相应的醇或转变为酰胺。利用大量亲核试剂，可以将醇激活和置换，形成本发明的其它化合物。这种离去基团包括但不局限于卤化物，氧_离子，高氯酸烷基酯，铵基烷基磺酸酯，氟磺酸烷基酯，nonaflates，tresylates，三氟甲磺酸酯，和磺酸酯，优选甲磺酸酯或甲苯磺酸酯。引入这些基团的技术对于熟练技术人员也是熟知的，参见例如March，Advanced Organic Chemistry，5thEd.，John Wileyand Sons，New York，pg.445-449(2001)。另外，在标准条件下，苯并咪唑核的2-氨基部分可以被重氮化和置换，形成本发明的其它化合物。
技术熟练的技术人员将会理解，不是所有式I化合物的取代基都能将耐受用于合成这些化合物的某些反应条件。这些部分在合成中根据需要或要求在适宜的位置引入，或可以被保护，而后脱保护。熟练的技术人员将会理解可以在本发明的化合物合成中任何适宜的点除去保护基。引入和除去氮和氧保护基的方法在本领域是熟知的；见，例如，Greene and Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，3rdEd.，JohnWiley and Sons，New York，Chapter 7(1999)。此外，技术熟练的技术人员将会理解，在许多情况下引入部分的顺序不是关键的。生产式I的化合物所要求步骤的具体顺序取决于要被合成的具体化合物、原料化合物和取代的部分的相对不稳定性。
在实施例和试验中所使用的缩写、符号和术语具有下列含义AcOH＝乙酸；DMF＝N，N-二甲基甲酰胺；DMSO＝二甲亚砜；Et2O＝乙醚；EtOAc＝乙酸乙酯；EtOH＝乙醇；h＝小时(s)；MeOH＝甲醇；min＝分钟；MTBE＝甲基叔丁基醚；Pd(OAc)2＝乙酸钯；RT＝室温；THF＝四氢呋喃；VO(acac)2＝乙酰丙酮氧钒(vanadylacetylacetonate)。
制备例1[6-(2-叔丁基-5-苯基-3H-咪唑-4-基)-3-硝基吡啶-2-基]-(2，2-二甲基丙基)胺(6-氯-3-硝基吡啶-2-基)-(2，2-二甲基-丙基)胺在室温，将新戊基胺(18毫升，150mmol)加入到2，6-二氯-3-硝基吡啶(20克，103mmol)和Na2CO3(18.5克，175mmol)的EtOH(1.6毫升/mmol)悬浮液中，并搅拌过夜。浓缩，将得到的浆液用水(100mL)稀释，并慢慢地用浓HCl(大约40mL)中和至pH值＝7。在0℃将悬浮液冷却1小时，并通过真空过滤收集固体。用冰水(4×50mL)洗涤固体，空气干燥过夜。用EtOAc和己烷再结晶物质，得到标题化合物黄色固体(21.23g，84％)。
MS(ES)m/z＝244[M+H](2，2-二甲基丙基-(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)胺在烘干的圆底烧瓶中，该圆底烧瓶用氮气注满并排空三次，将(6-氯-3-硝基吡啶-2-基)-(2，2-二甲基丙基)胺(7.3克，30.0mmol)、苯乙炔(5.0毫升，45mmol)和三苯基膦(1.5mmol，0.39克)溶解在三乙胺(10毫升/克)中。加入Pd(OAc)2(0.10克，0.45mmol)，并重复吹氮/抽真空循环(3x)。在氮气氛围下，伴随着搅拌，在70-80℃加热1-3小时，然后在RT下冷却2小时。浓缩并在水(25mL)和EtOAc(150mL)之间分配。分离有机层，并用水(4×25mL)、饱和NaCl水溶液(25mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将粗品固体通过用EtOAc/己烷重结晶纯化，得到标题产物鲜橙色固体(6.5g，21.2mmol，71％)。
MS(ES)m/z＝310[M+H]；mp90-92℃。
1-[6-(2，2-二甲基丙氨基)-5-硝基吡啶-2-基]-2-苯乙烷-1，2-二酮将(2，2-二甲基丙基)-(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)胺(3.11克，10mmol)、NaHCO3(0.420克，5.0mmol)、MgSO4(2.40克，20mmol)在丙酮(85毫升)和水(25毫升)中的混合物冷却，并冷却至0℃。将KMnO4(3.16克，20.0mmol)加入到该冷却混合物中，并在0℃剧烈搅拌该反应混合物大约1-2小时。用Na2SO3(5.67g，45mmol)猝灭该混合物。除去冰浴并在RT搅拌混合物2小时。通过过滤剂的垫过滤固体。用水(2×50mL)和EtOAc(50mL)洗涤。将各相分离，并用EtOAc(3×50mL)提取水相。用饱和NaCl水溶液(25mL)洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。纯化粗品(硅胶色谱，用1∶1己烷∶CH2Cl2洗脱)，得到标题化合物(1.586克，46％)。
MS(ES)m/z＝342[M+H]；mp88-90℃。-(2，2-二甲基丙基)胺在80℃，加热1-[6-(2，2-二甲基丙氨基)-5-硝基吡啶-2-基]-2-苯乙烷-1，2-二酮(1.0241克，3.0mmol)、三甲基乙醛(0.66毫升，6.0mmol)、乙酸铵(3.47克，45mmol)在乙酸(5毫升/mmol)中的混合物，同时通过液相色谱-质谱监测产物的出现。将反应混合物冷却到0℃，用5.0N NaOH中和至pH值7。用EtOAc(3×20mL)提取中和的水相，用20毫升饱和NaHCO3水溶液部分洗涤合并的有机相，直至没有观察到进一步的中和。用MgSO4干燥有机相，过滤并浓缩。用EtOAc研磨橙色的粗品固体，获得标题化合物(0.7578g，62％)。
MS(ES)m/z＝408[M+H]；mp224-226℃。
基本上如制备例1所述，可以制备制备例2-21的化合物。
制备例226-[2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-1H-咪唑-4-基]-N2-异丁基吡啶-2，3-二胺向{6-[2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-1H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}异丁胺(1.43克，2.96mmol)在50毫升1∶1THF∶水混合物的溶液中加入连二亚硫酸钠(2.58克，14.82mmol)，随后加入32％NH4OH(9毫升)。将混合物在RT下搅拌2小时。用EtOAc稀释。用饱和NaCl水溶液洗涤有机层，用Na2SO4干燥有机相。浓缩，得到标题化合物(1.32克，98％)。
制备例232-异丁氨基-3-硝基-6-[3-(4-氟苯基)-1-吗啉代乙基吡唑-4-基]吡啶2-异丁氨基-3-硝基-6-(4-氟苯基乙酮)吡啶将HgO(0.55克，2.54mmol)在100毫升4％H2SO4中的水悬浮液加入到2-异丁氨基-3-硝基-6-(4-氟苯基)乙炔基吡啶(3.99克，12.7mmol)的100毫升MeOH溶液中。在95℃搅拌17小时，冷却至室温。通过过滤剂过滤混合物，用EtOAc(5×100mL)溶解沉淀。浓缩并用10∶2∶1己烷∶乙醚∶MeOH(130mL)洗涤残余物，形成标题化合物(2.60克，62％)。
MS(ES)m/z＝332[M+H]。
2-异丁氨基-3-硝基-6-[3-(4-氟苯基)吡唑-4-基]吡啶。
将二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(4.50毫升，33.8mmol)加入到2-异丁氨基-3-硝基-6-(4-氟苯基-乙酮)-吡啶(5.63克，16.1mmol)在15毫升干燥DMF的搅拌溶液中。在80℃下加热混合物6小时，冷却至室温，浓缩。将残余物溶解在100mL EtOH中，加入8.30毫升肼(80％，在H2O中)，搅拌2小时，浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用己烷∶EtOAc1∶1洗脱)，得到标题化合物(4.51g，75％)。
MS(ES)m/z＝356[M+H]。
2-异丁氨基-3-硝基-6-[3-(4-氟苯基)-1-吗啉代乙基吡唑-4-基]吡啶在0℃，用95％NaH(0.36克，14.3mmol)处理2-异丁氨基-3-硝基-6-[3-(4-氟苯基)吡唑-4-基]吡啶(1.25克，3.52mmol)的干燥DMF(15毫升)溶液15分钟。加入吗啉代乙基氯盐酸盐(0.983克，5.28mmol)并慢慢地升温至室温。1小时之后，另外加入NaH(0.36克，14.3mmol)，并搅拌反应混合物24小时。用MeOH(1mL)淬灭，并用水(30mL)稀释。用EtOAc(100mL)提取，用MgSO4干燥，浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用己烷∶EtOAc1∶2洗脱)，得到标题化合物(1.35g，81％)。
MS(ES)m/z＝469[M+H]。
制备例24(2，2-二甲基丙基)-[3-硝基-6-(5-苯基-3H-[1，2，3]三唑-4-基)-吡啶-2-基]胺将叠氮化钠(0.065克)加入到2，2-二甲基丙基-(2-硝基-5-苯基乙炔基苯基)胺(0.153克)的DMSO(2.5毫升)溶液中。在80℃加热2小时。冷却到RT。加入10mL的1N HCl，用EtOAc(20mL)提取，用饱和NaCl水溶液(2×10mL)洗涤。用Na2SO4干燥剩下的有机相，浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用EtOAc∶己烷1∶2洗脱)，得到标题化合物黄色固体(0.176g，100％)。
MS(ES)m/z＝353[M+H]。
制备例252-氨基-5-(2-氧代-2-苯乙酰基)咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺N，N-二甲基-N’-(6-氯-3-硝基吡啶-2-基)磺酸将2，6-二氯-3-硝基吡啶(1克，2.60mmol)和N，N-二甲基磺酰胺(0.78克，3.12mmol)在干燥DMF(5毫升)中的混合物搅拌。加入氢化锂(0.11g，6.76mmol)，并在RT下搅拌过夜。加入10mL水和3N HCl，直至pH值＝7。过滤该黄色固体，形成标题化合物(85％)。
MS(ES)m/z＝279[M+H]。
N，N-二甲基-N’-(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)磺酸将氮气鼓泡通过N，N-二甲基-N’-(6-氯-3-硝基吡啶-2-基)磺酸(3.86克，13.7mmol)、苯乙炔(2.3毫升，20.67mmol)、三苯基膦(0.09克，0.68mmol)和碘化铜(I)(0.06克，0.34mmol)在三乙胺(30毫升)和THF(60毫升)中的混合物3分钟。将双(三苯基膦)钯(II)氯化物(0.24克，0.34mmol)加入到该混合物中，并在110℃加热4小时。通过过滤剂垫过滤，浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用己烷∶EtOAc1∶1洗脱)，得到标题化合物(80％)。
MS(ES)m/z＝346[M+H]。
N，N-二甲基-N’-(3-氨基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)磺酸在70℃，将N，N-二甲基-N’-(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)磺酸(0.09克，0.26mmol)和氯化锡二水合物(0.35克，1.56mmol)在EtOAc(5毫升)和EtOH(2.5毫升)中的混合物搅拌2小时。浓缩并纯化残余物(硅胶色谱，用1∶1己烷∶EtOAc洗脱)，得到标题化合物(65％)。
MS(ES)m/z＝317[M+H]。
2-氨基-5-苯基乙炔基咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺在80℃，将N，N-二甲基-N’-(3-氨基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)磺酸(0.20克，0.63mmol)、溴化氰(0.07克，0.69mmol)和甲醇锂(0.04克，0.94mmol)在1，2二氯乙烷(20毫升)中的混合物搅拌过夜。浓缩并纯化残余物(硅胶色谱，用1∶1己烷∶EtOAc洗脱)，得到标题化合物(45％)。
MS(ES)m/z＝342[M+H]。
2-氨基-5-(2-氧代-2-苯乙酰基)咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺在0℃，将2-氨基-5-苯基乙炔基咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺(0.10克，0.31mmol)的丙酮(4毫升)溶液加入到机械搅拌的NaHCO3(0.01克，0.15mmol)和MgSO4(0.07克，0.62mmol)水溶液(4毫升)中。加入KMnO4(0.12克，0.748mmol)，并在0℃搅拌过夜。加入Na2SO3(0.13克)，搅拌1小时。加入EtOAc，用饱和NaCl水溶液洗涤，浓缩，得到标题化合物橙色固体，其不用进一步纯化就可以使用(68％产率)。
MS(ES)m/z＝372[M+H]。
制备例26丙烷-2-磺酸{3-氨基-6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]吡啶-2-基}酰胺丙烷-2-磺酸(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)酰胺将丙烷-2-磺酸(5-氯-2-硝基苯基)酰胺(10克，35.7mmol)、苯乙炔(5.9毫升，53.6mmol)和三苯基膦(0.46克，1.78mmol)加入到三乙胺(25毫升，178.5mmol)的干燥THF(25毫升)溶液中，并用氮气注满系统。将二氯双(三苯基膦)钯(II)(0.625克，0.89mmol)和碘化铜(I)(0.17克，0.89mmol)加入到该搅拌混合物中。加热反应至回流4小时。冷却到RT，浓缩至浆液。通过硅胶填料过滤粗品，使用EtOAc作为冲洗溶剂。浓缩滤液，用EtOAc-己烷结晶标题化合物(7.9g，64％)。
MS(ES)m/z＝346[M+H]。
丙烷-2-磺酸[3-硝基-6-(2-氧代-2-苯乙酰基)吡啶-2-基]酰胺在120℃，在氮气氛围下，将丙烷-2-磺酸(3-硝基-6-苯基乙炔基吡啶-2-基)酰胺(1.8克，5.26mmol)和氯化钯(II)(0.93克，0.53mmol)在干燥DMSO(20毫升)中的混合物加热12小时。冷却至RT，浓缩至浆液，纯化(硅胶色谱，用20∶80EtOAc∶己烷至30∶70EtOAc∶己烷的梯度洗脱)，得到标题化合物(1.07克，54％)。
MS(ES)m/z＝346[M+H]。
丙烷-2-磺酸{6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}酰胺在110℃，将丙烷-2-磺酸[3-硝基-6-(2-氧代-2-苯乙酰基)吡啶-2-基]酰胺(0.25g，0.67mmol)、2，6-二氟苯甲醛(0.146毫升，1.35mmol)和乙酸铵(0.78克，10.05mmol)在乙酸(5毫升)中的混合物加热2小时。冷却到RT并浓缩。用EtOAc(30ml)稀释，用饱和NaHCO3和饱和NaCl水溶液依次提取。用NaSO4干燥有机层，浓缩，纯化(硅胶色谱，用30∶70EtOAc∶己烷洗脱)，得到标题化合物(0.32克，95％)。
MS(ES)m/z＝500[M+H]。
丙烷-2-磺酸{3-氨基-6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-吡啶-2-基}酰胺将10％Pd/C(0.033克)加入到丙烷-2-磺酸{6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}酰胺(0.33g，0.66mmol)的MeOH(10毫升)搅拌溶液中。以几部分加入硼氢化钠(0.124克，3.3mmol)，同时在氮气氛围中搅拌15分钟。过滤催化剂并浓缩。用EtOAc(20ml)稀释，用饱和NaHCO3和饱和NaCl水溶液依次提取。用Na2SO4干燥有机层，浓缩，得到标题化合物(0.3g，98％)。
MS(ES)m/z＝470[M+H]。
制备例27丙烷-2-磺酸{3-氨基-6-[2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-吡啶-2-基}酰胺在100℃，将丙烷-2-磺酸{6-[2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}酰胺(0.262克，0.49mmol)和氯化锡(II)二水合物(0.55克，2.46mmol)在EtOH(10毫升)中的混合物加热1小时。冷却到RT，浓缩至浆液。将反应混合物倒在饱和NaHCO3(20mL)中，并加入过滤剂。过滤并用EtOAc洗涤。分离各层，用饱和NaHCO3和饱和NaCl水溶液依次提取。用Na2SO4干燥有机层，浓缩，得到标题化合物(0.21g，85％)。
MS(ES)m/z＝504[M+H]。
制备例281-苄基-2-甲基-4-溴-5-(2，4-二氟苯基)-1H-咪唑
1-苄基-2-甲基-5-溴-1H-咪唑将N-溴代琥珀酰亚胺(7.85克，44mmol)加入到1-苄基-2-甲基-1H-咪唑(8.0克，46mmol)的氯仿(200毫升)溶液中，并搅拌6小时。用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤，用MgSO4干燥，通过硅胶垫过滤。浓缩滤液，并将残余物悬浮在乙醚(600mL)中，加热到回流，并热过滤。浓缩醚滤液，得到标题化合物褐色固体(9.3g)。
MS(ES)m/z＝252[M+H]。
1-苄基-2-甲基-5-(2，4-二氟苯基)-1H-咪唑将1-苄基-2-甲基-5-溴-1H-咪唑(4.71克，18.7mmol)、2，4-二氟苯基硼酸(6.92克，43.8mmol)、双(乙酰基(acetato))双(三苯基膦)-钯(II)(1.4克，1.875mmol)、2N Na2CO3(19毫升，38mmol)、MeOH(19毫升)和1，2-二甲氧基乙烷(120毫升)的混合物到加热回流18小时。冷却到RT。加入水和EtOAc并分离各层。用MgSO4干燥有机层，过滤并浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用EtOAc∶CH2Cl2混合物洗脱)，得到所要求的化合物(3.59克)。
MS(ES)m/z＝285[M+H]。
溴化在室温，将1-苄基-2-甲基-5-(2，4-二氟苯基)-1H-咪唑(3.58克，12.6mmol)和N-溴代琥珀酰亚胺(2.24克，12.6mmol)在氯仿(100毫升)中的混合物搅拌18小时。将反应混合物直接加入到硅胶上，并用CH2Cl2∶EtOAc混合物洗脱，得到标题化合物(3.41g)。
MS(ES)m/z＝364[M+H]。
制备例292-叔丁基-4-(4-氟苯基)_唑将可商业购买的2-溴-4’-氟苯乙酮(100.00克，460mmol)、2，2-二甲基-丙酰胺(93.06克，20mmol)的1，4-二_烷(600毫升)溶液回流2天。过滤沉淀，浓缩滤液，纯化(硅胶色谱，用己烷∶EtOAc 60∶1洗脱)，得到标题化合物(55克，55％)。
MS(ES)m/z＝220[M+H]。
基本上如制备例29所述，可以制备制备例30-31的化合物。
制备例322-叔丁基-4-(4-氟苯基)-5-三甲基锡烷基_唑在-78℃，将2-叔丁基-4-(4-氟苯基)_唑(0.61克，2.77mmol)溶解在THF(15毫升)中，并加入叔丁基锂(3.3毫升，1.7M)。将混合物搅拌45分钟。加入三甲基锡烷基氯(0.58克，2.90mmol)并使温度达到RT。搅拌2小时，加入氯化铵溶液(200μL，用氨调节pH值＝8)，浓缩。
1H NMR(CDCl3)δ7.46(m.2H)，6.95(m，2H)，1.32(s，9H)，0.24(s，9H)。
制备例334-(4-氟苯基)-2-甲基噻唑将2-溴-4’-氟苯乙酮(10克，46mmol)和硫代乙酰胺(6.9克，92mmol)的1，4-二_烷(60毫升)溶液回流3小时。过滤沉淀，用EtOAc洗涤，得到标题化合物(6.5g，73％)。
MS(ES)m/z＝194[M+H]。
基本上如制备例33所述，可以制备制备例34的化合物。
制备例352-氨基-5-溴咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺2，6-二溴-3-硝基吡啶在50℃，加热2，6-二氯-3-硝基吡啶(9克)和氢溴酸(90毫升)在乙酸(30％)中的混合物过夜。冷却到RT，投入水(600mL)中。过滤固体，形成标题化合物(87％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.93(d，J＝8.14Hz，1H)，7.55(d，J＝8.14Hz，1H)。
N，N-二甲基-N’-(6-溴-3-硝基吡啶-2-基)磺酸将2，6-二溴-3-硝基吡啶(11.3g，39.25mmol)和N，N-二甲基磺酰胺(0.006克，47.10mmol)在DMF(40毫升)中的混合物搅拌。加入氢化锂(0.81g，102.05mmol)，并在RT下搅拌过夜。加入100mL水和3N HCl，直至pH值＝7。过滤黄色固体，形成标题化合物(93％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ10.25(br s，1H)，8.41(d，J＝8.59Hz，1H)，7.50(d，J＝8.59Hz，1H)，2.95(2，6H)。
N，N-二甲基-N’-(3-氨基-6-溴-吡啶-2-基)-磺酸加热N，N-二甲基-N’-(6-溴-3-硝基吡啶-2-基)磺酸(11.6克，35.69mmol)和氯化锡(40克，178mmol)在EtOAC∶EtOH 500∶250毫升中的混合物4小时。浓缩并纯化残余物(硅胶色谱，用1∶1己烷∶EtOAc洗脱)。用水研磨，形成标题化合物(85％)。
MS(ES)m/z＝297[M+H]。
2-氨基-5-溴咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺搅拌N，N-二甲基-N’-(3-氨基-6-溴代吡定-2-基)磺酸(0.40克，1.35mmol)、溴化氰(0.08克，1.48mmol)和甲醇锂(0.08克，2.02mmol)在1，2-二氯乙烷(400毫升)中的混合物。在80℃搅拌2小时。浓缩并纯化残余物(硅胶色谱，用1∶1己烷∶EtOAc洗脱)，得到标题化合物(82％)。
MS(ES)m/z＝322[M+H]。
制备例361-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(2，4-二氟-苯基)-乙烷-1，2-二酮5-(2，4-二氟-苯基乙炔基)-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺将5-溴-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(30.00克，105.94mmol)、Et3N(60毫升)和Pd(OAc)2[P(Ph)3]2(3.97克，5.30mmol)在甲苯(150毫升)中混合，并将得到的混合物在氮气氛围中加热到～65℃。将1-乙炔基-2，4-二氟代苯(21.95克，158.92mmol)的甲苯(30毫升)溶液逐滴加入到上述混合物中，而后将得到的反应混合物在80℃加热3小时。冷却反应至25℃，并用饱和NH4Cl水溶液(300mL)淬灭。在室温下将得到的反应混合物搅拌20分钟，然后过滤，用H2O洗涤固体，在真空过滤下干燥30分钟。使固体在MTBE(200mL)中形成浆液，然后过滤并用MTBE(50mL)冲洗。在真空过滤下干燥所回收的固体，形成14.47克标题化合物淡黄色固体。
MS(ES+)m/z＝341(M+1)氧化用MgSO4(10.23克，85.00mmol)和NaHCO3(1.79克，21.30mmol)水溶液(200毫升)处理5-(2，4-二氟-苯基乙炔基)-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(14.47克，42.51mmol)的丙酮(350毫升)溶液。将得到的反应混合物放置在水浴中。加入硅藻土(28.50克)，随后经10分钟加入KMnO4(14.11克，89.28mmol)，反应放热至～30℃。在室温下搅拌3小时，然后用10wt％Na2SO3水溶液(150mL)淬灭。搅拌30分钟，然后用硅藻土垫过滤，用10％MeOH/EtOAc(2×700mL，每次)洗涤。分离滤液的各层，用EtOAc(2×500mL，每次)提取水溶液。用水(500mL)和饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤合并的有机物，然后用Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到固体。用10％MeOH/EtOAc洗涤硅藻土的滤垫，减压浓缩滤液，获得额外的固体。将固体合并，用柱色谱纯化，用2％的2N NH4/MeOH-EtOAc洗脱，然后用5％的2N NH4/MeOH-EtOAc洗脱，得到13.08g(82％产率)的标题化合物橙棕色固体。
MS(ES+)m/z＝373(M+1)制备例37{6-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-胺1-[6-(1(R)，2，2-三甲基丙氨基)-5-硝基吡啶-2-基]-2-((4-氟苯基)乙烷-1，2-二酮将[6-(4-氟-苯基乙炔基)-3-硝基-吡啶-2-基]-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-胺(2.73g，8.00mmol)溶解在丙酮(60毫升)中。加入水(20毫升)，然后加入NaHCO3(336毫克，4mmol，0.5当量)和MgSO4(1.9g，16mmol，2.0当量)，并将该反应冷却至大约3℃。伴随着强烈搅拌，分批加入KMnO4(2.5g，16mmol，2.0当量)，同时保持温度低于3℃。1-2小时之后，通过加入水(20mL)和Na2SO3(4.5g，36mmol)猝灭反应，在室温搅拌该混合物1小时。借助于600mL乙酸乙酯和大约300mL水，用Celite_过滤悬浮液。分离各层，用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机层四次，用饱和NaCl水溶液洗涤两次。用Na2SO4干燥有机层，滤出固体，减压浓缩上清液。将残余物进行中压的硅胶色谱纯化，用CH2Cl2/己烷的50-70％梯度洗脱，得到所需要的化合物橙色油(1.82g，61％产率)。
MS(ESI)m/z＝374.1(M+H)+。
成环将1-[6-(1(R)，2，2-三甲基丙氨基)-5-硝基吡啶-2-基]-2-((4-氟苯基)乙烷-1，2-二酮(747mg，2.0mmol)溶解在冰醋酸(10毫升)中，加入乙酸铵(2.3g，30mmol，15当量)，而后加入三甲基乙醛(344毫克，4.0mmol，2当量)。加热该反应混合物至100℃，保持1小时，减压浓缩。将得到的固体在乙酸乙酯和水之间分配。用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机层5次，用饱和NaCl水溶液洗涤两次。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。将残余物进行中压的硅胶色谱纯化，用等浓度的10％乙酸乙酯/己烷系统洗脱，得到标题化合物橙色固体(589毫克，67％产率)。
MS(ESI)m/z＝440.2(M+H)+
基本上如制备例37所述，可以制备制备例38-40的化合物。
制备例41{6-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(2，2-二甲基-丙基)-胺将1-(4-氟-苯基)-2-[5-硝基-6-(2，2-二甲基丙氨基)-吡啶-2-基]-乙烷-1，2-二酮(1.08g，3.0mmol)溶解在冰醋酸中，加入乙酸铵(3.47g，45mmol，15当量)，而后加入三甲基乙醛(517毫克，6.0mmol，2当量)。加热该反应混合物至100℃，保持1小时，减压浓缩。将得到的固体在乙酸乙酯和水之间分配。加入NaHCO3，直至气体逸出结束。用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机层5次，用饱和NaCl水溶液洗涤一次。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩，得到标题化合物黄橙色的固体(1.25g，97％产率)。
Exact MS计算值m/z＝426.230(M+H)+；实测值m/z＝426.2313(M+H)+。
实施例15-(2-叔丁基-5-苯基-3H-咪唑-4-基)-3-(2，2-二甲基丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐在氢气球条件下，搅拌6-(2-叔丁基-5-苯基-3H-咪唑-4-基)-3-硝基吡啶-2-基]-(2，2-二甲基丙基)胺(0.20克，0.5mmol)和10％钯/碳(0.025克)在EtOH(10毫升)中的悬浮液过夜。将悬浮液通过过滤剂过滤，并用EtOH(2×5mL)洗涤。浓缩滤液至大约5毫升，在RT用溴化氰(1.3mmol)处理。用饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)淬灭，搅拌15-60分钟。将混合物用水(50毫升)稀释，并用CH2Cl2(2×10mL)提取。用饱和NaCl水溶液(5mL)洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，浓缩，并纯化(硅胶色谱，用从100％CH2Cl2开始、至5∶95氨化的MeOH∶CH2Cl2的分级梯度洗脱)，得到所需要的化合物。将游离碱分离，而后通过用甲磺酸处理MeOH-水溶液转变为甲磺酸盐，随后冷冻干燥，得到标题化合物。
MS(ES)m/z＝402[M+H]。
基本上如实施例1所述，可以制备实施例2-14的化合物。
实施例153-环丙基甲基-5-[2-(2，6-二氯苯基)-5-(4-氟苯基)-3H-咪唑-4-基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐在氮气氛围中，用氯化亚锡二水合物(0.5641克，2.5mmol)处理(环丙基甲基{6-[2-(2，6-二氯苯基)-5-(4-氟苯基)-3H-咪唑-4-基[-3-硝基吡啶-2-基}胺(0.250克，0.5mmol)在EtOH(10毫升)中的悬浮液，并回流加热2.5小时。冷却至RT，慢慢地用饱和NaHCO3水溶液(5mL)和EtOAc(5mL)猝灭。将过滤剂加入到得到的悬浮液中，并进一步用各自5mL的NaHCO3水溶液和EtOAc稀释混合物。通过过滤剂的垫过滤混合物。用各自10mL的NaHCO3水溶液和EtOAc洗涤固体。将有机层分离，并用EtOAc(10mL)提取水相。用饱和NaCl水溶液(5mL)洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将粗品苯二胺溶解在EtOH(5mL)中，并用溴化氰(1.0mmol)处理。用饱和NaHCO3水溶液(2mL)淬灭，搅拌15-60分钟。将混合物用水(5毫升)稀释，并用CH2Cl2(2×10mL)提取。用饱和NaCl水溶液(5mL)洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥，过滤，浓缩，并纯化(硅胶色谱，用从100％CH2Cl2开始、至5∶95的5％氨/MeOH∶CH2Cl2的分级梯度洗脱)，得到所需要的化合物。将游离碱分离，而后通过用甲磺酸处理MeOH-水溶液转变为甲磺酸盐，随后冷冻干燥。
MS(ES)m/z＝495.1[M+H]。
基本上如实施例15所述，可以制备实施例16-35的化合物。
实施例365-[2-叔丁基-5-(4-氟苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基丙基)-2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶甲磺酸盐按照实施例1，还原并分离{6-[2-叔丁基-5-(4-氟苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}-(2，2-二甲基丙基)胺(0.43克；1.0mmol)。使粗品二胺与纯的原乙酸三乙酯在120℃反应过夜。浓缩并用15mL 1N HCl稀释。用饱和NaHCO3中和，并用CH2Cl2提取。用饱和NaCl洗涤有机层，用Na2SO4干燥，浓缩，纯化(硅胶色谱，用EtOAc∶CH2Cl250∶50洗脱)，得到标题化合物褐色固体(0.11克；53％产率)。基本上如实施例1所述，将游离碱产物转变为甲磺酸盐。
MS(ES)m/z＝420[M+H].
基本上如实施例36所述，可以制备实施例37-38的化合物。
实施例395-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基丙基)-2-甲基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶甲磺酸盐基本上如实施例16所述，将{6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}-(2，2-二甲基丙基)胺还原，而后如所实施例36述，使二胺在原乙酸三甲酯反应，得到游离碱褐色固体(0.11克；49％产率)。基本上如实施例1所述，将游离碱产物形成为甲磺酸盐。
MS(ES)m/z＝458[M+H]。
基本上如实施例39所述，可以制备实施例40-45的化合物。
实施例465-[2-(2-氯-6-氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶甲磺酸盐基本上如实施例15所述，将{6-[2-(2-氯-6-氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基吡啶-2-基}-(2，2-二甲基丙基)胺还原。使二胺与纯的原甲酸三乙酯回流24小时，并在RT另外回流24小时。基本上如实施例36所述，纯化并分离游离碱(0.11克，49％产率)。基本上如实施例1所述，转变成甲磺酸盐。
MS(ES)m/z＝460[M+H]。
基本上如实施例46所述，可以制备实施例47-48的化合物。
实施例495-[3-(4-氟苯基)-1-异丙基吡唑-4-基]-3H-3-异丁基咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二-甲磺酸盐在NH4OH(8.70毫升，32％，在水中)的存在下，将次硫酸钠(2.55克，14.6mmol)加入到2-异丁胺基-3-硝基-6-[3-(4-氟苯基)-1-异丙基吡唑-4-基]吡啶(0.50克，1.27mmol)的25毫升1∶1 THF∶H2O溶液中。2小时之后，用水稀释(25毫升)。用EtOAc(100mL)提取，用MgSO4干燥，浓缩。将残余物溶解在1∶1 CH2Cl2∶EtOH(25毫升)中，加入溴化氰(0.16克，1.51mmol)，并搅拌大约48小时。浓缩并纯化残余物(硅胶色谱，用EtOAc∶MeOH 16∶1洗脱)。用乙醚己烷再结晶，形成游离碱(0.44克，88％)。基本上如实施例1所述，转变成甲磺酸盐(58％产率)。
MS(ES)m/z＝393[M+H]。
基本上如实施例49所述，可以制备实施例50-62的化合物。
实施例63N’-{5-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基}-N，N-二甲基甲脒将基本上如实施例1所述制备的N’-{5-[2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(0.10克，0.225mmol)、N，N-二甲基甲酰胺二甲基乙缩醛(0.05毫升，0.4mmol)在甲苯(1.5毫升)中回流2小时。冷却到RT并浓缩。纯化(硅胶色谱，用1∶1CH2Cl2∶乙腈洗脱)，得到标题化合物(0.11g)。
MS(ES)m/z＝500[M+H]。
基本上如实施例63所述，可以制备实施例64的化合物。
实施例65N’-{5-[2-(2，6-二氯苯基)-3-甲基-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基}-N，N-二甲基甲脒在室温，将基本上如实施例63所述制备的N’-{5-[2-(2，6-二氯苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基}-N，N-二甲基甲脒(0.10克，0.188mmol)、碘代甲烷(0.040克，0.282mmol)和Cs2CO3(0.09克，0.28mmol)在DMF(1.5毫升)中搅拌大约24小时。用EtOAc提取，用水(3x)、饱和NaCl水溶液洗涤，然后用Na2SO4干燥。过滤并浓缩，得到甲基异构体的混合物。纯化(硅胶色谱)，用1∶1∶0.4CH2Cl2∶乙腈∶己烷洗脱，得到标题化合物(0.02克)。
MS(ES)m/z＝548[M+H]。
实施例665-[2-(2，6-二氟苯基)-3-甲基-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺在100℃，在1∶1冰醋酸∶浓HCl(0.6毫升)中加热N’-{5-[2-(2，6-二氟苯基)-3-甲基-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基}-N，N-二甲基甲脒(0.02克，0.04摩尔)30分钟。冷却到RT。加入CH2Cl2和水，用5N NaOH中和到大约pH值＝7，同时快速搅拌。用CH2Cl2提取水相三次，合并有机层，用饱和NaCl水溶液洗涤，用Na2SO4干燥。过滤并浓缩，得到标题化合物(0.02克)。
MS(ES)m/z＝459[M+H]
基本上如实施例66所述，可以制备实施例67的化合物。
实施例683-(2，2-二甲基丙基)-5-(5-苯基-3H-[1，2，3]三唑-4-基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将(2，2-二甲基-丙基)-[3-硝基-6-(5-苯基-3H-[1，2，3]三唑-4-基)吡啶-2-基]胺(0.180克，0.51mmol)和10％Pd/C(0.025克)悬浮在EtOH(10毫升)中，并在RT、在含有氢气的气球条件下搅拌5小时。使用过滤剂过滤反应混合物，浓缩到大约反应体积的一半。不用进一步分离或纯化就可以立刻使用该二胺(MS(ES)m/z323[M+H]，并在EtOH(5mL)中用溴化氰(0.09g)处理。在氮气条件下搅拌3.5小时，用饱和NaHCO3水溶液(2.0mL)淬灭，搅拌，用CH2Cl2(5mL)和H2O(5mL)稀释，分离各相。用CH2Cl2(2×5mL)提取水相，用各自5毫升的H2O和饱和NaCl水溶液洗涤合并的有机相，用MgSO4干燥。过滤并浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用4∶96的2.0N氨/MeOH∶CH2Cl2洗脱)，得到游离碱。通过用甲磺酸处理MeOH-水溶液转变为甲磺酸盐，随后冷冻干燥，得到标题化合物(0.07g，39％)。
MS(ES)m/z＝348[M+H]。
基本上如实施例68所述，可以制备实施例69-71的化合物。
实施例725-[2-(2-氯-6-氟苯基)-5-苯基-1H-咪唑-4-基]-3-异丁基-3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶甲磺酸盐将6-[2-(2-氯-6-氟苯基)-5-苯基-1H-咪唑-4-基]-N2-异丁基吡啶-2，3-二胺(1.1克，2.52mmol)的CH2Cl2(9毫升)溶液和50％乙酸水溶液(9毫升)逐滴加入到亚硝酸钠水溶液(0.1毫升)(0.184克，2.66mmol)中。搅拌该反应混合物15分钟，加入另外的CH2Cl2，并用饱和NaCl水溶液、NaHCO3水溶液(5％)洗涤有机层，用MgSO4干燥，浓缩。纯化残余物(硅胶色谱，用4∶1至1∶2的己烷∶EtOAc洗脱)，得到游离碱(70％)。MS(ES)m/z＝447[M+H]。将0.34毫升的1M甲磺酸的9∶1CH2Cl2∶MeOH溶液加入到该游离碱(0.15克，0.336mmol)的10毫升9∶1CH2Cl2∶MeOH溶液中。搅拌该溶液5分钟，浓缩，并在乙醚中研磨该白色固体。过滤固体，形成标题化合物(71％)。
MS(ES)m/z＝447[M+H]。
基本上如实施例72所述，可以制备实施例73-75的化合物。
实施例762-氨基-5-(2-叔丁基-5-苯基-3H-咪唑-4-基)咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺甲磺酸盐在90℃，将2-氨基-5-(2-氧代-2-苯乙酰基)咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺(0.07克，0.20mmol)、三甲基乙醛(65微升，0.6mmol)和乙酸铵(0.23克，3mmol)在乙酸(5毫升)中的混合物加热4小时。冷却到RT。用饱和NaHCO3水溶液稀释，用EtOAc提取。浓缩有机相并纯化(硅胶色谱，用15∶1 CH2Cl2∶MeOH洗脱)，得到游离碱(35％)。MS(ES)m/z＝438[M+H]。将5.4毫升1M甲磺酸的95∶5CH2Cl2∶MeOH溶液加入到该游离碱(0.02克，0.054mmol)的5毫升95∶5CH2Cl2∶MeOH溶液中。搅拌该溶液5分钟，浓缩，并在乙醚中研磨该白色固体。过滤固体，得到标题化合物(71％)。
MS(ES)m/z＝440[M+H]。
基本上如实施例76所述，可以制备实施例77-79的化合物。
实施例805-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(丙烷-2-磺酰基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐在室温，搅拌丙烷-2-磺酸{3-氨基-6-[2-(2，6-二氟苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-吡啶-2-基}酰胺(0.37克，0.79mmol)、溴化氰(0.104克，0.99mmol)和甲醇锂(0.033克，0.87mmol)在二氯甲烷(10毫升)中的混合物12小时。加入饱和NaHCO3(10mL)，搅拌1小时。分离各层，用饱和NaCl水溶液提取。用NaSO4干燥有机层，浓缩，纯化(硅胶色谱，用40∶60EtOAC∶己烷至80∶20EtOAc∶己烷的梯度洗脱)，得到游离碱(0.21g，54％)。MS(ES)m/z＝495[M+H]。将甲磺酸加入到该游离碱在1毫升5∶1甲醇∶二氯甲烷的混合物的溶液中。浓缩该溶液，加入乙醚。过滤固体，干燥，得到标题化合物。
MS(ES)m/z＝495[M+H]。
基本上如实施例80所述，可以制备实施例81-91的化合物。
实施例925-[2-叔丁基-4-(4-氟苯基)_唑-5-基]-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺将氮气鼓入2-叔丁基-4-(4-氟苯基)_唑(0.145克，0.66mmol)、5-溴-3-异丁基-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(0.355克，1.32mmol)、碳酸铯(6.06克，18.6mmol)、乙酸钯(II)(0.201克，10％)和三苯基膦(0.14克，0.07mmol)在DMF(1.5毫升)的悬浮液中。在100℃加热反应过夜，冷却到RT，并在EtOAc和饱和NaCl水溶液之间分配。用饱和NaCl水溶液洗涤有机层/用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，纯化(硅胶色谱，用2％的2M氨/MeOH-CH2Cl2洗脱)，得到标题化合物(0.07g，34％)。
MS(ES)m/z＝408[M+H]。
基本上如实施例92所述，可以制备实施例93-96的化合物，同时基本上如实施例1所述，将游离碱转变为甲磺酸盐。
实施例972-氨基-5-(2-叔丁基-5-(4-氟苯基)_唑-5-基)咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺在密封管中，将2-氨基-5-溴咪唑并[4，5-b]吡啶-3-磺酸二甲基酰胺(0.05克，0,156mmol)溶解在甲苯(3毫升)中。加入2-叔丁基-4-(4-氟苯基)-5-三甲基锡烷基_唑(0.07克，0.17mmol)和四(三苯基膦)钯(O)(0.02克，0.015mmol)。将混合物在110℃下加热4小时。浓缩并纯化(硅胶色谱，用20∶1 CH2Cl2∶MeOH洗脱)，得到标题化合物(14％)。
MS(ES)m/z＝459[M+H]。
基本上如实施例97所述，可以制备实施例98的化合物，同时基本上如实施例1所述，将游离碱转变为甲磺酸盐。
实施例995-[2-(2，6-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将1-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(4-氟-苯基)-乙烷-1，2-二酮(19.58克，55.24mmol)、2，6-二氯-苯甲醛(15.47克，88.39mmol)和NH4OAc(42.58克，552.41mmol)在冰醋酸(200毫升)中混合，并在85℃、在氮气氛围中搅拌5小时。将得到的反应混合物减压浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(2,000毫升)中，并该得到的溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(2×1,000毫升，每次)、水(1,000毫升)和饱和氯化钠水溶液(1,000毫升)洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤，而后减压浓缩。用柱色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(1∶1)、然后乙酸乙酯-己烷(2∶1)、然后纯的乙酸乙酯、然后5％的2N NH3/MeOH-乙酸乙酯洗脱，得到11.70克(41.5％产率)的5-[2-(2，6-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺类白色固体。MS(ES+)m/z＝509(M+1)。
将5-[2-(2，6-二氯-苯基)-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(11.20克，21.99mmol)在甲醇(150毫升)中混合，而后逐滴加入甲磺酸(2.11克，21.96mmol)的甲醇(10毫升)溶液。在室温下搅拌20分钟，而后减压浓缩。加入乙酸乙酯(150毫升)，将得到的浆液过滤，用乙醚(200毫升)洗涤滤饼。将得到的固体在干燥箱中、在80℃、在真空条件下干燥2小时，得到12.765g(95％产率)的标题化合物浅紫色固体。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.78-7.50(m，7H)，7.24-7.20(m，2H)，3.86(s，2H)，2.70(s，3H)，0.85(s，9H)TOF-MS[ES+，M+H]观测值m/z 509.1412，计算值m/z509.1423。
实施例1003-(2，2-二甲基-丙基)-5-[5-(4-氟-苯基)-2-(2-氟-6-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将1-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(4-氟-苯基)-乙烷-1，2-二酮(18.32克，51.69mmol)和2-氟-6-三氟甲基-苯甲醛(15.00克，78.08mmol)和NH4OAc(39.84克，516.90mmol)在冰醋酸(200毫升)中混合，并在85℃、在氮气氛围中搅拌4小时。将得到的反应混合物减压浓缩。将残余物溶解在乙酸乙酯(2,000毫升)中，并该得到的溶液用饱和NaHCO3水溶液(2×1,000毫升，每次)、水(1,000毫升)和饱和氯化钠水溶液(1,000毫升)洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤，而后减压浓缩。用柱色谱纯化，用纯的乙酸乙酯、然后2％的2N氨/MeOH-乙酸乙酯、然后5％的2N氨/MeOH-乙酸乙酯洗脱，得到7.38克3-(2，2-二甲基-丙基)-5-[5-(4-氟-苯基)-2-(2-氟-6-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺类白色固体。用柱色谱纯化不纯的馏份，用纯的乙酸乙酯、然后1％的2N氨/MeOH-乙酸乙酯、然后2％的2N氨/MeOH-乙酸乙酯、然后3％的2N氨/MeOH-乙酸乙酯洗脱，得到额外的4.68克所需要的化合物。
MS(ES+)m/z＝527(M+1)将3-(2，2-二甲基-丙基)-5-[5-(4-氟-苯基)-2-(2-氟-6-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(11.56克，21.95mmol)在甲醇(150毫升)中混合，而后逐滴加入甲磺酸(2.11克，21.96mmol)的MeOH(10毫升)溶液。将得到的反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后减压浓缩。使残余物在乙醚中形成浆液，过滤，并用新鲜乙醚洗涤。将得到的固体在干燥箱中、在室温下、在真空条件下干燥48小时，得到12.015g(87.9％产率)的标题化合物浅紫色固体。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.84-7.60(m，7H)，7.24-7.20(m，2H)，3.86(s，2H)，2.70(s，3H)，0.85(s，9H)TOF-MS[ES+，M+H]观测值m/z527.1979，计算值m/z527.1982。
实施例1015-[2-叔丁基-5-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将1-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(2，4-二氟-苯基)-乙烷-1，2-二酮(17.36克，46.62mmol)和三甲基乙醛(6.42克，74.53mmol)和NH4OAc(35.93克，466.20mmol)在冰醋酸(200毫升)中混合，并在85℃、在氮气氛围中搅拌4.5小时。冷却到室温过夜。在85℃加热反应5小时，然后在100℃加热3小时，然后冷却到室温过夜。将得到的反应混合物减压浓缩。将残余物溶解在EtOAc(2L)中，并将得到的溶液用饱和NaHCO3(2×1L)、H2O(1L)和饱和氯化钠水溶液(1L)洗涤。用Na2SO4干燥有机物，过滤，而后减压浓缩。用柱色谱纯化，用纯的EtOAc、然后1％的2N氨/MeOH-EtOAc、然后2％的2N氨/MeOH-EtOAc、然后3％的2N氨/MeOH-EtOAc洗脱，得到10.28克的5-[2-叔丁基-5-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺类白色固体。
MS(ES+)m/z＝439(M+1)将5-[2-叔丁基-5-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(11.55克，26.33mmol)在MeOH(150毫升)中混合，而后逐滴加入甲磺酸(2.53克，26.33mmol)的MeOH(10毫升溶液)。在室温下将得到的反应混合物搅拌20分钟，然后减压浓缩。使残余物在Et2O中形成浆液，然后过滤，并用新鲜Et2O洗涤。将得到的固体在干燥箱中、在室温下、在真空条件下干燥过夜，然后在80℃干燥1.5小时。在MeOH中将该盐溶解，而后用NaHCO3处理，直至碱性。用EtOAc提取得到的溶液，用Na2SO4干燥合并的有机物，过滤，然后减压浓缩。用柱色谱纯化，用纯的EtOAc、然后1％的2N氨/MeOH-EtOAc、然后2％的2N氨/MeOH-EtOAc洗脱，得到9.38克的5-[2-叔丁基-5-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺。将5-[2-叔丁基-5-(2，4-二氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(9.38克，21.39mmol)在无水MeOH(150毫升)中混合，而后)逐滴加入甲磺酸(2.06克，21.43mmol)的MeOH(10毫升)溶液。将得到的反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后减压浓缩。使残余物在Et2O中形成浆液，然后过滤，并用新鲜Et2O洗涤。将得到的固体在干燥箱中、在室温下、在真空条件下干燥48小时，得到10.695g(76％产率)的标题化合物褐色固体。
1H-NMR(400MHz；CD3OD)δ7.74-7.66(m，2H)，7.60-7.54(m，1H)，7.15-7.08(m，2H)，3.70(s，2H)，2.70(s，3H)，1.51(s，9H)，0.81(s，9H)TOF-MS[ES+，M+H]观测值m/z＝439.2398；计算值m/z＝439.2422实施例1025-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐在氢气球条件下，将{6-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(2，2-二甲基丙基)-胺(426毫克，1.0mmol)和10％钯/碳(85毫克)在100％乙醇中的悬浮液搅拌过夜。通过0.2μm针筒式滤器过滤该悬浮液，减压浓缩。将残余物溶解在10％乙醇水溶液中，并在室温下用溴化氰(80毫克，0.75mmol，1.5当量)处理。当反应完成时，用饱和NaHCO3水溶液猝灭反应。加入乙酸乙酯和水，以溶解所有的固体。用饱和NaHCO3水溶液洗涤有机层一次，用饱和NaCl水溶液洗涤一次，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物进行中压硅胶色谱纯化，用50％乙酸乙酯/CH2Cl2、然后用1.5-3.5％(2M氨/MeOH)/CH2Cl2洗脱，形成5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺褐色泡沫体(156毫克，74％产率)。
用甲磺酸处理5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺的甲醇-水溶液，随后冷冻干燥，形成标题化合物。
精确MS计算值m/z＝421.2516(M+H)+；实测值m/z＝421.2523(M+H)+。
1H-NMR(DMSO-d6)δ7.85(d，1H，J＝7.9Hz)，7.85(d，1H，J＝7.9Hz)，7.72(d，1H，J＝8.4Hz)，7.62(dd，2H，J＝8.8，4.8Hz)，7.27(t，2H，J＝8.8Hz)，3.90(s，2H)，2.70(s，3H)，1.62(s，9H)，0.89(s，9H)实施例1035-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺富马酸盐将126毫克(0.3mmol)5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺溶解在1.0毫升88％丙酮*中。伴随着摇动，逐渐地加入70mg富马酸的温热88％丙酮溶液。加入晶种，过滤得到的沉淀。空气干燥，形成145mg(74％)的轻微紫色毛发似的晶体。
*(剩余部分是水，按体积)实施例104晶体5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐将126毫克(0.3mmol)5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺溶解在2.0毫升丙酮中。逐渐加入58mg甲磺酸。加入晶种，过滤得到的沉淀。空气干燥，形成114mg(62％)的类白色不规则晶体。
m.p.＞250℃实施例105非晶形5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐将5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐(300毫克)溶解在5毫升去离子水中。通过0.45μm滤过器将溶液过滤到预先冷却的500mL容量瓶中。在烧瓶的底部和侧面快速地冷冻溶液。冻干24小时，形成非晶形5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐。
实施例1065-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺琥珀酸盐将126毫克(0.3mmol)5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺溶解在2.0毫升88％丙酮*中。逐渐地加入71mg琥珀酸/1mL温热88％丙酮溶液。加入晶种，过滤得到的沉淀。空气干燥，形成123mg(63％)的非常浅的紫色晶体。
*(剩余部分是水，按体积)实施例1075-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺马来酸氢盐将126毫克(0.3mmol)5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺溶解在1.0毫升异丙醇中。逐渐地加入69.6mg马来酸/1mL温热异丙醇溶液。加入晶种，过滤得到的沉淀。空气干燥，形成120mg(63％)的非常浅的紫色晶体。
实施例1085-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二盐酸盐将126毫克(0.3mmol)5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺溶解在2.0毫升丙酮中。逐渐地加入120μL的5N盐酸。将得到的沉淀过滤。空气干燥，形成140mg(93％)的非常浅的粉红色晶体。
实施例1095-[2-(2-氯-6-氟-苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将{6-[2-(2-氯-6-氟-苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(2，2-二甲基丙基)-胺(240mg，0.50mmol)溶解在100％乙醇(10毫升)中，并加入二氯化锡(II)二水合物(564mg，2.50mmol，5.0当量)。加热反应混合物，直至原料耗尽。将反应溶液冷却到室温，慢慢地用饱和NaHCO3水溶液猝灭。将Celite_加入到猝灭反应中，并在Celite_垫上过滤该悬浮液，用水和乙酸乙酯洗涤。分离各层，将有机层用饱和NaCl水溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。将10％乙醇水溶液和溴化氰(106毫克，1.00mmol，2.0当量)加入到得到的固体中，搅拌过夜。用饱和NaHCO3水溶液(20毫升)猝灭反应。加入乙酸乙酯和水，以溶解所有的固体。用饱和NaCl水溶液洗涤有机层三次，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物进行中压硅胶色谱纯化，用1.5-3％(2M氨/MeOH)/CH2Cl2的梯度洗脱，形成5-[2-(2-氯-6-氟-苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺黄绿色固体(196毫克，60％产率)。
用甲磺酸处理5-[2-(2-氯-6-氟-苯基)-5-苯基-3H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺的甲醇-水溶液，随后冷冻干燥，形成标题化合物。
MS(ESI)m/z＝475.2(M+H)+。
实施例1105-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将{6-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-胺(558mg，1.27mmol)在溶解100％乙醇(15毫升)中，并加入二氯化锡(II)二水合物(1.4g，6.3mmol，5当量)。加热反应混合物，直至原料耗尽。将反应溶液冷却到室温，慢慢地用饱和NaHCO3水溶液猝灭。加入Celite_，并在Celite_垫上过滤该悬浮液，用水和乙酸乙酯洗涤。分离各层，将有机层用饱和NaCl水溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。将10％乙醇水溶液(13毫升)和溴化氰(202毫克，1.99mmol，1.5当量)加入到残余物中，搅拌过夜。再加入1.5当量的溴化氰，搅拌3小时，用饱和NaHCO3水溶液(20毫升)淬灭。加入乙酸乙酯和水，以溶解所有的固体。用饱和NaCl水溶液洗涤有机层三次，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物进行中压硅胶色谱纯化，用1.5-4％(2M氨/MeOH)/CH2Cl2的梯度洗脱，形成5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-
3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺褐色玻璃体(158毫克，29％产率)。
用甲磺酸处理5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺的甲醇-水溶液，随后冷冻干燥，形成标题化合物。
MS(ESI)m/z＝435.2(M+H)+实施例1115-[2-(2，6-二氟-苯基)-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺甲磺酸盐将{6-[2-(2，6-二氟-苯基)-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-硝基-吡啶-2-基}-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-胺(673mg，1.4mmol)溶解在100％乙醇(15毫升)中，并加入二氯化锡(II)二水合物(1.5g，6.8mmol，5当量)。加热反应混合物，直至原料耗尽。将反应溶液冷却到室温，慢慢地用饱和NaHCO3水溶液猝灭。将Celite_加入到猝灭的反应中，并在Celite_垫上过滤该悬浮液，用水和乙酸乙酯洗涤。分离各层，将有机层用饱和NaCl水溶液洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤并减压浓缩。将10％乙醇水溶液(14毫升)和溴化氰(216毫克，2.04mmol，1.5当量)加入到残余物中，搅拌过夜。用饱和NaHCO3水溶液(20毫升)猝灭。加入乙酸乙酯和水，以溶解所有的固体。用饱和NaCl水溶液洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物进行中压硅胶色谱纯化，用1.5-3％(2M氨/MeOH)/CH2Cl2的梯度洗脱，形成5-[2-(2，6-二氟-苯基)-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺褐色玻璃体(289毫克，43％产率)。
用甲磺酸处理5-[2-(2，6-二氟-苯基)-5-(4-氟-苯基)-3H-咪唑-4-基]-3-(1(R)，2，2-三甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺的甲醇-水溶液，随后冷冻干燥，形成标题化合物。
MS(ESI)m/z＝491.2(M+H)+实施例1125-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐5-溴-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基-铵溴化物在H2O(20mL，0.4体积)中搅拌50wt％次磷酸水溶液(0.555g)和5％Pt/C(2.5g)的混合物10分钟。加入固体VO(acac)2(0.420克，1.20mmol)，并额外搅拌该黑色浆液5分钟。在一升高压釜中，在室温，将该浆液加入到2-(2，2-二甲基丙氨基)-3-硝基-6-溴吡啶(50.00克，173.61mmol)在甲苯(500.00毫升)的混合物中。在35psi(2.38大气压)H2的存在下，将高压釜加热到75℃，同时以100rpm搅拌。3小时之后，用HyfloSuper Cel_垫过滤该反应混合物，并将滤液减压浓缩至溶液全部质量(273.0g)的一半。搅拌该溶液，加入溴化氰(18.4克，173.70mmol)，随后加入MeOH(250毫升)。18小时之后，加热至40℃，减压浓缩，直至通过短路径蒸馏收集350mL溶剂。用MTBE(350mL，7.0体积)稀释所得到的浆液，冷却至0℃，搅拌1小时。滤出固体，用MTBE(75mL，1.5体积)洗涤，在40℃减压干燥24小时，形成48.06克(76％)所需要的化合物白色固体。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.96(9H，s)，3.91(2H，s)，7.45(1H，d，J＝8.1 Hz)，7.64(1H，d，J＝8.1Hz)，8.73(2H，bs)。
MS(ES-)m/z＝282.0；(M-1)-3-(2，2-二甲基-丙基)-5-(4-氟-苯基乙炔基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2- 基胺将三乙胺(27.10克，267.80mmol)加入到5-溴-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基-铵溴化物(25.00克，68.67mmol)在乙醇(25毫升)和甲苯(75毫升)的混合物中。加热到70-75℃，而后加入Pd(OAc)2(0.15克，0.69mmol)、三苯基膦(0.72克，2.75mmol)和碘化铜(I)(0.13克，0.69mmol)。用15分钟加入2/3的4-氟苯基乙炔(12.37克，103.00mmol)的甲苯(50毫升，2.0体积)溶液。1小时之后，加入剩下的4-氟乙炔溶液。3小时之后，加入额外的4-氟苯基乙炔(1.5g，12.86mmol)。额外的一小时之后，蒸馏除去EtOH。冷却反应混合物至＜40℃，加入水(25mL)。冷却到室温。过滤悬浮液，用水(25mL)和2×25mL甲苯洗涤。在45-50℃减压干燥，形成19.3g(87％)的所需要的化合物。
纯化步骤将甲醇(1,200毫升)加入到合并的全部3-(2，2-二甲基-丙基)-5-(4-氟-苯基乙炔基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(37.30克)中，并加热至回流。加入活性炭(3.73克，10wt％)，并回流1小时。过滤，同时浆液是热的，然后在室温下将水(375mL)加入到滤液中，同时搅拌。滤出固体，用2×100毫升水洗涤，在45-50℃下减压干燥，形成30.0g(80％)所需要的化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ0.99(9H，s)，3.91(2H，s)，6.98(2H，s)，7.25-7.32(3H，m)，7.40(1H，d，J＝7.8Hz)，7.62-7.67(2H，m)。
1-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(4-氟 -苯基)-乙烷-1，2-二酮用5分钟将MgSO4(82.7克，687.05mmol)和NaHCO3(14.4克，171.41mmol)的去离子水(1524毫升)溶液加入到3-(2，2-二甲基-丙基)-5-(4-氟-苯基乙炔基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(110.76g，343.57mmol)的丙酮(3665毫升)搅拌溶液中。加入Hyflo Super Cel_(171.1g)，随后加入KMnO4(108.6克，687.21mmol)。在40-45℃加热3小时，而后冷却到室温。加入饱和Na2SO3水溶液(1,800毫升)，随后加入EtOAc(3,500毫升)和水(3,500毫升)。通过Hyflo Super Cel_床过滤，用9％MeOH/EtOAc(2,860mL)的混合物洗涤。分离滤液层，用2×2,750mL EtOAc反萃取水层。合并有机提取物，用2×2,380mL饱和氯化钠水溶液(4760mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤，然后减压浓缩，形成暗红色-褐色固体(185克)。加入丙酮(650毫升)，过滤悬浮液，将收集的固体用3×167毫升MTBE(501毫升)洗涤，在45℃减压干燥，形成106.79克(88％)所需要的化合物浅黄色固体。
1H-NMR(500MHz，DMSO-d6)δ0.72(9H，s)，3.71(2H，s)，7.47(2H，dd，J1＝7.5Hz，J2＝8.5Hz)，7.56(2H，bs)，7.65(1H，d，8.0Hz)，7.97-7.99(2H，m)，8.02(1H，d，J＝8.0Hz)。
MS(ES+)m/z＝355.4；(M+1)+5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H- 咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺在氮气氛围中，将1-[2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-5-基]-2-(4-氟-苯基)-乙烷-1，2-二酮(25.33克，71.48mmol)、NH4OAc(82.3克，1.04摩尔)和三甲基乙醛(13.0毫升，116mmol)在MeOH(650毫升)中的混合物加热至回流，保持20小时。减压浓缩。将残余物溶解在EtOAc(2,000mL)、去离子水(500mL)和饱和NaHCO3水溶液(1000mL)中。分离各层，用1L饱和NaHCO3水溶液(1000mL)、去离子水(500mL)和饱和氯化钠水溶液(500mL)洗涤有机层，然后用Na2SO4干燥。过滤并减压浓缩，形成20.08克黑色固体/泡沫。加入MTBE(60mL)，并加热至回流。用5分钟加入己烷(290毫升)，然后将浆液冷却至室温。搅拌1.25小时，过滤，用己烷(80mL)洗涤所收集的固体，在45℃减压干燥过夜，形成17.31g(58％)所需要的化合物淡褐色固体。
纯化步骤将合并的全部5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(55.9克)在MTBE(165毫升)中的混合物加热至回流。加入己烷(800毫升)，并冷却浆液至室温。过滤固体，用己烷(200毫升)洗涤，在45℃减压干燥，形成54.35克(97％)所需要的化合物淡褐色固体。
1H-NMR(300MHz，CD3OD)δ0.87(9H，s)，1.45(9H，s)，3.79(2H，s)，7.05(2H，dd，J1＝8.7Hz，J2＝9.0Hz)，7.30(1H，bs)，7.40-7.50(3H，m)。
MS(ES+)m/z＝421.4(M+1)+5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H- 咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐将5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(10.0853克，23.98mmol)的MeOH(24毫升)溶液加热至40℃。除去热源，并用3.5分钟逐滴加入甲磺酸(3.14毫升，47.91mmol)/EtOAc(10毫升)。搅拌1小时，同时冷却至室温。加入EtOAc(20毫升)，并搅拌5分钟。过滤，用2×50mL EtOAc洗涤固体，在45-50℃减压干燥2.5小时，形成12.62克(86％)标题化合物白色粉末固体。
1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ0.94(9H，s)，1.65(9H，s)，2.73(6H，s)，3.91(2H，s)，7.31-7.35(2H，m)，7.63-7.67(2H，m)，7.69(1H，d，J＝8.5Hz)，7.87(1H，d，J＝8.5Hz).MS(ES+)m/z＝421.5(M+1)+实施例1135-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-5-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-乙酰基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-_甲磺酸盐在温和的回流(105-107℃)下，用蒸馏装置加热3-(2，2-二甲基-丙基)-5-(4-氟-苯基乙炔基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺(184.7克，0.573摩尔)、甲酸(923.0毫升)、甲磺酸(110.0克，1.14摩尔)、DMSO(224.0克，2.87摩尔)和48％HBr(9.7克，0.057摩尔)的混合物过夜。减压蒸馏出挥发物(550毫升)。冷却至大约65℃，逐滴加入含有Na2S2O3(18.0克，0.114摩尔)的水(1.2L)，同时剧烈搅拌，保持温度在大约65℃。冷却反应混合物至环境温度(大约3小时)，然后放在冰浴中(大约30分钟)。过滤固体，用水(200mL)冲洗，在真空烘箱中、在大约50℃干燥，形成217.0g(84％)所需要的化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.08(s，2H)；8.18(d，J＝6.0Hz，2H)；7.92-7.98(m，3H)；7.40(t，J＝8.0Hz，2H)；3.67(s，2H)；2.40(s，2H)；0.66(s，9H)。
MS(ES+)m/z＝355.4(M+1)+.
成环在大约70℃，加热2-氨基-3-(2，2-二甲基-丙基)-5-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-乙酰基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-_甲磺酸盐(0.62摩尔)、乙醇(2.5L)、乙酸铵(500.0克，6.2摩尔)和三甲基乙醛(84.0克，0.93摩尔)的混合物过夜。蒸发挥发物。在室温下，加入乙酸乙酯(4.0L)和水(3.0L)，随后加入1.0N NaOH(1.2L)，并搅拌20-30分钟。分离各相，并用乙酸乙酯(2.0L)提取水相。合并乙酸乙酯相，用10体积的饱和氯化钠水溶液洗涤两次，用Darco(30.0克，10％重量)处理。用硅藻土垫过滤，并浓缩滤液至大约1.0L。加入乙醇(2.50L)，并加热至大约65℃，快速地滴加入甲磺酸(150.0g，1.55mol)/乙酸乙酯(500mL)，保持温度在大约65℃，保持3小时。将反应混合物冷却至室温，搅拌2小时以上。过滤悬浮液，用乙酸乙酯(500mL)冲洗固体，在真空烘箱中、在大约45℃干燥，形成226.0克标题化合物。
1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.99(s，2H)，7.90(d，1H，J＝9.0Hz)；7.86(d，1H，J＝9.0Hz)；7.60(dd，2H，J＝9.0Hz)，7.34(dd，2H，J＝9.0Hz)；3.68(s，2H)；2.35(s，6H)；1.51(s，9H)；0.71(s，9H).
MS(ES+)m/z＝421.5(M+1)+.
实施例114制备晶种的一般方法将250μL在甲醇(0.1M)中的目标化合物游离碱加入到设置为96孔格式的所有孔中，以此制备主平板。以一和两个摩尔当量将一系列酸分配至每个孔中。使用Genevac Series II蒸发器，由所有96孔中蒸发出溶剂，在靠模板中保留固体残余物。通过一个盖垫将一系列溶剂分配到每个孔中，而后加热到55℃，同时搅拌，在大约55℃平衡60-90分钟。然后热过滤每个样品，并转入蒸发平皿、沉淀平皿和冷却平皿的相应孔中。使用55℃加热的注射器，通过从主平板中转移200μL滤液至开放孔滴定度平皿中来制备蒸发平皿，然后在室温和环境湿度下蒸干过夜。使用55℃加热的注射器，通过将100μL主平板中的滤液加入至封盖的96孔滴定度平皿中来制备沉淀平皿，其中每个孔中含有200μL庚烷或异丙醇的反溶剂。在室温下平衡九个小时之后，使用预先切片的Whatman滤纸来通过毛细作用除去过量溶液。使用55℃加热的注射器，通过从主平板中转移200μl滤液至封盖的滴定度平皿中、并在8小时期间内按指数律地从55℃冷却至10℃，以此来制备冷却平皿。使用具有2.5X物镜的Zeiss Axiovert 200M反向入射-光学显微镜，在96孔平皿的每个孔的底部收集显微照相。如果物质是晶体，它显示出双折射，即针对黑暗背景显示为白色。无定形固体以黑色或不透明的微滴或圆环呈现。
(在公开时缺页)
p38激酶的抑制标准溶液制备通过将2.5mL 1M Tris-HCl(pH值7.5)、0.1mL 1M二硫苏糖醇、1.0mL 1氯化镁和300μL 1％Triton X-100混合、并用水稀释至100mL来制备激酶缓冲溶液。将84毫升的这种激酶缓冲溶液与16毫升DMSO结合，制备16％DMSO溶液。
通过在5毫升激酶缓冲溶液中加入102.6μL 10mM含水ATP、25μL33P-ATP和163.5μL的4mM含水表皮生长因子肽661-681(Biomol，Catalog #P-121)来制备200μM ATP溶液。
通过在1536μL激酶缓冲溶液中溶解9.5μL浓缩酶溶液(250ng p38酶/μL激酶缓冲溶液)来制备p38激酶溶液。
样品制备在Costar 96孔微量滴定板中，将2μL在二甲亚砜中的10mM相应化合物的储备溶液溶解在248μL的16％DMSO溶液中，以此制备每个试验化合物和对照化合物的80μM溶液。将平皿放置到Tecan Genesis自动液体处理器上，进行1∶3的系列稀释。
试验用Beckman Multimek 96孔自动液体处理器将10μL连续稀释的化合物放置到试验平皿中。用Titertek Multidrop 8-通道液体处理器加入20μL的200μM ATP溶液。使用Multimek将10μL的p38激酶溶液转入试验平皿中。使混合物在30℃反应40分钟，然后通过用Multidrop加入60μL新制备的5％冰AcOH来中止反应。使用Multimek将80μL的此溶液转入“MAPH”平皿中。将平皿在室温放置30分钟，然后在Titertek MAP提取器上用新制备的0.5％冰AcOH(1×300μL，2×200μL)洗涤/吸出。将孔吸干，并用Multidrop加入100μL MicroScint-20闪烁液体(Packard Bioscience)。使平皿搁置30分钟，并在PE/WallacMicrobeta Trilux闪烁计数器统计33P-同位素。
所有例示的化合物以10个浓度(20μM-1nM，使用1∶3系列稀释)开始试验。对于IC50值小于25nM的化合物，以2μM至0.1nM(1∶3系列稀释)的起始浓度重新试验。使用非线性回归计算(IDBSActivityBase软件)每种化合物的IC50值。基本上如上所述试验所有的例示化合物，并且发现，抑制p38激酶具有IC50值＜5μM。具体地，基本上如上所述试验下列化合物，并且发现可以抑制p38激酶，如下面列表。
TNF-α的体外抑制小鼠腹膜巨噬细胞将1毫升硫羟乙酸盐液体培养基(5.0克酵母抽提物，15.0克酪胨或胰酶解酪蛋白，5.0克葡萄糖，2.5克氯化钠，0.75克L-胱氨酸，0.5克硫基乙醇酸钠，1.0毫克刃天青，和0.75克琼脂，在1.0L蒸馏水中)注入到Balb/C雌性小鼠的腹膜腔中。注射后的4或5天，将小鼠杀死，然后腹膜内注入4mL RPMI-1640介质(BioWhittaker)，并且用注射器抽出腹膜的巨噬细胞。
细胞素产物用血球计统计小鼠腹膜的小噬细胞，并且在96孔平皿中、在含有10％胎儿牛血清的RPMI-1640介质中调节至5×105个细胞/孔。将200μL/孔涂覆在96孔平皿中，并且使细胞沉降并附着在孔的底部至少3小时。在37℃，使用一系列8个浓度预先处理试验化合物或标准p38激酶抑制剂1小时(20μL/孔)。在37℃，用50ng/mL脂多糖(LPS)和10U/mL干扰素-γ的混合物处理细胞18小时(20μL/孔)。采集条件培养基，并使用Luminex方法试验TNF-α产物。
TNF-α/Luminex检测试验(Bio-Rad Bio-Plex试剂盒-目录#171- G12221)将冻干的预混合TNF-α标准物(1标准管/两个96孔平皿)与50μL无菌水(500,000pg/mL)重组。在使用以前，将样品涡旋5秒钟、在冰上培养30分钟、并且涡旋5秒钟。用#1-#12标记一组十二个1.5mL管，然后将如下所示的细胞介质的量加入到合适的管中(标准浓度如下50,000；25,000；12,500；6,250；3,125；1,562.5；781.3；390.6；195.3；97.7；48.8；和24.4pg/mL)。将预混合的抗细胞素共轭的小球大力涡旋(25X)30秒钟。使用1X Bio-Plex试验缓冲液将抗细胞素共轭小球稀释至1X浓度。对于每个平皿，将240μL预先混合的小球加入到5760μL的Bio-Plex试验缓冲液中。将微孔96孔滤板用100μL/孔的封闭缓冲液进行封闭。使用微孔过滤系统过滤封闭缓冲液，然后用毛巾擦干。在滤板上用100μl/孔的Bio-Plex试验缓冲液进行2次洗涤，并用毛巾擦干。将1X抗细胞素共轭小球涡旋15秒钟，并每个孔中加入50μL。将其滤过，并用毛巾擦干。在平皿上用100μl/孔的Bio-Plex洗涤缓冲液进行2次洗涤。再次将其滤过，并用毛巾擦干。将50μL的样品或标准物加入到每个样品孔中。将其在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养30分钟，然后放入冰箱中过夜。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。滤过，并用毛巾擦干。对于每个平皿，制备细胞素检测抗体(在使用之前～10分钟)，并且将60μL预混合的细胞素检测抗体储备加入到5940μL的Bio-Plex检测抗体稀释剂中。加入50的细胞素检测抗体，并在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养30分钟。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。将其滤过，并用毛巾擦干。对于每个平皿，制备Strept-PE(在使用之前～10分钟)，并将60μL加入到5940μL的Bio-Plex试验缓冲液中。将50μL Streptavidin-PE加入到每个孔中，并在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养10分钟。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。将其滤过。将小球重新悬浮在100μL/孔的Bio-Plex试验缓冲液中。在Luminex机器上读出标准和样品。然后基于12点标准曲线(使用四参数逻辑回归法(Bio-Plex Manager 2.0，Bio-Rad)产生双份)，将这些强度读数转变为微微克/毫升单位，并计算IC50值。
基本上如上所述试验例示化合物的代表性成员，并且具有体外抑制TNF-α的IC50值＜100nM。具体地，基本上如上所述试验下列化合物，并且发现可以体外抑制TNF-α，如下面列表。
TNF-α的体内抑制将化合物口服给予(100，30，10和3毫克/千克)雌性Balb/c小鼠(5个小鼠/剂量)。2小时之后，在每个小鼠的尾部静脉，i.v.给予脂多糖(LPS，E.coli serotype 0111B4，5mg/kg)。一个小时之后，将给予LPS的小鼠通过吸入CO2进行窒息，并通过心脏穿刺使血出。
TNF-α/Luminex检测试验(Bio-Rad Bio-Plex试剂盒-目录#171- G12221)将冻干的预混合TNF-α标准物(1标准管/两个96孔平皿)与50(L无菌水(500,000pg/mL)重组。在使用以前，轻轻地涡旋5秒钟、在冰上培养30分钟、并且涡旋5秒钟。用#1-#12标记一组十二个1.5mL管，然后将如下所示的细胞介质的量加入到合适的管中(标准浓度如下50,000；25,000；12,500；6,250；3,125；1,562.5；781.3；390.6；195.3；97.7；48.8；和24.4pg/mL)。将预混合的抗细胞素共轭小球大力涡旋(25X)30秒钟。使用1X Bio-Plex试验缓冲液将抗细胞素共轭小球稀释至1X浓度。对于每个平皿，将240μL预先混合的小球加入到5760μL的Bio-Plex试验缓冲液中。将微孔96孔滤板用100μL/孔的封闭缓冲液进行封闭。使用微孔过滤系统过滤封闭缓冲液。用毛巾擦干。在滤板上用100μl/孔的Bio-Plex试验缓冲液进行2次洗涤，并用毛巾擦干。将1X抗细胞素共轭小球涡旋15秒钟，并每个孔中加入50μL。滤过，并用毛巾擦干。在平皿上用100μl/孔的Bio-Plex洗涤缓冲液进行2次洗涤。滤过，并用毛巾擦干。将25μL的血清样品和25μL的稀释剂(Bio-Rad)或50μL标准物加入到每个样品孔中。将其在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养30分钟，然后放入冰箱中过夜。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。滤过，并用毛巾擦干。对于每个平皿，制备细胞素检测抗体(在使用之前～10分钟)，并且将60μL预混合的细胞素检测抗体储备加入到5940μL的Bio-Plex检测抗体稀释剂中。加入50μL的细胞素检测抗体，并在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养30分钟。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。滤过，并用毛巾擦干。对于每个平皿，制备Strept-PE(在使用之前～10分钟)，并将60μL加入到5940μL的Bio-Plex试验缓冲液中。每个孔加入50μL的抗生蛋白链菌素-PE，并在RT、在设置为6的避光保存的振荡器上培养60秒钟，然后在设置为3的位置培养10分钟。用Bio-Plex洗涤缓冲液进行3次洗涤。滤过。将小球重新悬浮在100μL/孔的Bio-Plex试验缓冲液中。在Luminex机器上读出标准和样品。然后基于12点标准曲线(使用四参数逻辑回归法(Bio-Plex Manager 2.0，Bio-Rad)产生双份)，将这些强度读数转变为微微克/毫升单位，并计算IC50值。
基本上如上所述试验例示化合物的代表性成员，并且具有体内抑制TNF-α的IC50值＜100mg/kg。基本上如上所述试验实施例104的化合物，并且显示出IC50值＜1mg/kg。
对关节内的LPS引起的TNF-α的影响将LPS关节内注射到大鼠踝中，引起TNF-α的合成，其可以按滑液洗出液体计量。高水平的TNF-α可在2小时之内检测。由于关节是关节炎形成的位点，这种模型可以快速地确定，不论口服给予化合物是否对滑膜中的炎症性响应起作用。
将六个雌性Lewis大鼠(150-200克)置于每个试验组中。口服给予动物赋形剂(1％羧甲基纤维素钠-0.25％Tween80)或试验化合物(1mg/kg，3mg/kg，10mg/kg，和30mg/kg)。一个小时后，将10μl LPS(10μg)关节内给予到每个大鼠的右踝中，同时剩下的踝接受10μL生理盐水。两个小时之后，用100μL生理盐水灌洗每个踝。收集灌洗液，并在-80℃存储。
#1组赋形剂(1％NaCMC-0.25％Tween80，1mL，PO)#2组试验化合物(1mg/kg，1mL，PO)#3组试验化合物(3mg/kg，1mL，PO)#4组试验化合物(10mg/kg，1mL，PO)#5组试验化合物(30mg/kg，1mL，PO)用可商业购买的ELISA试剂盒(R&D，RTA00)测定TNF-α。用实施例104的化合物处理，产生TNF-α合成的剂量依赖性抑制，具有0.54mg/kg的TMED50。
B16F10黑素瘤靶向(MAPKAP-K2磷酸化)B16F10黑素瘤细胞系是从American Type Culture Collection，Rockville，MD处获得的。将细胞在补充有10％胎牛血清的RPMI-1640介质中培养。在其指数生长期，将体外培育的细胞通过温和的胰酶消化进行采集，在介质中洗涤两次，并且再悬浮在无血清的RPMI-1640介质中。使用血球计测定活细胞的数目，并调节至1×107个/mL。将肿瘤细胞皮下注入在正常的C57Bl6小鼠中。按小鼠的接种体积是0.2mL(2,000,000个细胞)。当肿瘤达到300-500毫克时，既可以在p.o.化合物处理之后的固定时间(2.5小时)将小鼠用于靶向抑制研究，也可以在p.o.化合物处理之后用于药效研究(其中在许多时间点(例如3，6，9，12，15和18小时)收集肿瘤)。
蛋白质萃取和免疫印记分析将如上所述收集的肿瘤立刻急速在液氮中冷冻，并存储在-80℃下。使用Daunce均化器、在冰上、在提取缓冲液中将肿瘤组织均匀化(25mM Tris，pH值7.5，含有下列蛋白酶抑制剂10μg/mL亮肽素，10μg/mL大豆tryp-胰凝乳蛋白酶抑制剂，10μg/mL N-甲苯磺酰基-L-苯丙氨酸氯甲基酮，10μg/mL抑肽酶，Nα-对甲苯磺酰基-L-精氨酸甲酯，7mM苯甲脒，0.3mM苯甲基磺酰氟和两个片剂的Roche完全蛋白酶抑制剂混合物；接着是磷酸酶抑制剂60mM beta-甘油磷酸盐，1mM钒酸钠，10mM氟化钠，20mM对硝基苯磷酸，1μM冈田酸，1μM微囊藻素，2.5mM焦膦酸钠；和1mM二硫苏糖醇，15mM EDTA，5mMEGTA，1％Triton X100和150mM NaCl)。通过在冷冻微量离心机中、在14,000rpm和在1℃条件下，将组织溶解产物澄清20分钟。将上清液转入在冰上预先冷却的新微量离心管中，并在液氮或干冰中再次急速冷冻。在温水中迅速解冻至大约80％之后，将样品放置在冰上至完全解冻。在14,000rpm和在1℃下，将样品再次离心15分钟。将上清液转入预先冷却的新微量离心管中，并且使用Bio-Rad蛋白试验试剂、使用牛血清白蛋白作为蛋白标准物来测定蛋白浓度。
用提取缓冲液平衡蛋白提取物。将等体积的2X SDS样品缓冲液加入到蛋白提取物中，并在水浴锅中沸腾5分钟。以4-20％梯度SDS-PAGE凝胶，将每种试样的100mg蛋白质提取物用于电泳，并转移到硝化纤维(NC)膜上。将NC膜在5％BSA/TBST(20mM Tris，pH值＝7.5，500mM NaCl，0.05％Tween20和0.02％叠氮化钠)中封闭最少1小时。然后在4℃、在80rpm的振荡器上，将该膜在1∶1,000的初级抗体与5％BSA/TBST中培养过夜。将膜用TBST洗涤4X，每次10分钟。然后用以1∶10,000稀释在3％无脂奶/TBST中的二级抗体HRP(辣根过氧化物酶)共轭物将膜培养40分钟，并再次用TBST洗涤4次，每次10分钟。然后按照制造商的说明书、通过增强化学发光(ECL，Amersham)来显现免疫印记。所有的初级抗体是从Cell Signaling购买的，二级抗体HRP共轭物是从Amersham处获得的。用于电泳和蛋白质印迹法的凝胶剂、膜和装置购买于Invitrogen。使用Kodak ImageStation 1000，从胶片来定量使人感兴趣的蛋白频带。
基本上如上所述试验实施例104的化合物，并且显示出TMED50＝3.59mg/kg。
大鼠胶原引起的关节炎功效模型将雌性Lewis大鼠((190g，Charles River Labs )用牛类型II胶原(2mg/mL)进行免疫，该胶原用等体积的助剂(氢氧化铝)乳化。在接近尾根的背部，将大鼠用大约0.3mg的乳状液进行皮内免疫。按照相同方案，7天后将所有的动物重新免疫。从第一次免疫之后的12至14天，大鼠开始形成关节炎(以肿胀和一或两个踝充血为特征)。从出现关节炎的第一个标志开始，将大鼠等量分布到5个试验组中，并对于每个大鼠开始剂量治疗，bid 14天。
治疗组1组 赋形剂(1％羧甲基纤维素钠+0.25％Tween 80)1mL，PO，Bid×14天2组 试验化合物，5mg/kg，1mL，PO，Bid×143组 试验化合物，15mg/kg，1mL，PO，Bid×144组 试验化合物，30mg/kg，1mL，PO，Bid×145组 氢化泼尼松10mg/kg，1mL，PO，qd×14一周5天用卡钳测定踝直径，并记录。用曲线(AUC)下的面积来表示数据，该曲线是由复合炎症记录和进行的统计分析产生的。基本上如上所述试验实施例104的化合物，并且显示出TMED50＝1.5mg/kg(b.i.d.)。
口服本发明的化合物是优选的。然而，口服不是唯一的途径，或甚至不是唯一优选的途径。例如，透皮给予对于易忘或暴躁的患者比口服医药理想，为方便起见或避免与口服有关的潜在的并发症，可以优选静脉内途径。在具体情况下，式I的化合物可以通过透皮肤、肌肉内、鼻内或直肠内途径给予。给药途径可以以任何方式变化，这由药物的物理性质、患者和护理者的便利性、及其它相关的情况来限制(Remington′s Pharmaceutical Sciences，18th Edition，Mack PublishingCo.(1990))。
药物组合物可以按照药学领域众所周知的方式来制备。载体或赋形剂可以是固体、半固体或可以充当活性组分的赋形剂或介质的液体物质。合适的载体或赋形剂在本领域为大家所熟知。药物组合物可以适合于口服、吸入、肠胃外、或局部使用，并且可以以片剂、胶囊、气雾剂、吸入剂、栓剂、溶液、悬浮液等等的形式给予患者。
本发明的化合物可以口服给予，例如，利用惰性稀释剂或胶囊，或压缩成片剂。为了口服治疗学给予的目的，该化合物可以与赋形剂混合，并且可以以片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、薄片、咀嚼胶等等的形式使用。这些制剂应该含有至少4％的本发明化合物(活性组分)，但可以变化，这取决于具体形式，并且可以方便地在4％至大约70％的重量单位之间。存在于组合物中的化合物的量是所获得的合适剂量。本发明的优选组合物和制剂可以通过技术熟练的技术人员熟知的方法来确定。
片剂、丸剂、胶囊、锭剂等等也可以含有一或多种下列助剂粘合剂例如聚乙烯基吡咯烷酮，羟丙基纤维素，微晶纤维素，或明胶；赋形剂或稀释剂例如淀粉，乳糖，微晶纤维素或磷酸二钙，崩解剂例如交联羧甲基纤维素，聚乙烯聚吡咯烷酮，淀粉羟基乙酸钠，玉米淀粉等等；润滑剂例如硬脂酸镁，硬脂酸，滑石或氢化植物油；助流剂例如胶体二氧化硅；润湿剂例如十二烷基硫酸钠和聚山梨酸酯80；和甜味剂例如蔗糖，阿斯巴甜或邻磺酰苯甲酰亚胺，可以加入增香剂例如胡椒薄荷，水杨酸甲酯或柑桔调味剂。当剂量单位形式是胶囊时，除了以上类型的物质之外，它还可以含有液体载体例如聚乙二醇或脂肪油。其它剂量单位形式可以含有其它各种的物质，这些物质可以改进剂量单位的外形，例如包衣。由此，片剂或丸剂可以涂有糖、羟丙基甲基纤维素、聚甲基丙烯酸酯或其它包覆剂。除了本化合物之外，糖浆还可以含有蔗糖作为甜味剂、和某些防腐剂、染料和颜料和香料。用于制备这些不同组合物的物质应该是药学纯的，并且在使用数量中是无毒的。
式I的化合物通常在很广的剂量范围内有效。例如，每日剂量正常地在大约0.0001至大约30mg/kg体重的范围。在有些情况下，低于上述范围的下限的剂量水平可以更合适，而在其它情况下，甚至可以更大剂量使用而不会导致任何有害的副作用，因此，以上剂量范围无论如何不是限制本发明的范围。应该理解，实际给予的化合物量将按照相关情况由医师来确定，包括所治疗病症，选择的给药途径，所给予的实际的一或多种化合物，个体患者的年龄、重量和应答，和患者症状的严重度。
权利要求
1.式I的化合物或其药学可接受的盐 其中 或 X是N，或C-R1；R是C1-C7烷基，C3-C7环烷基，(C1-C7亚烷基)-(C3-C7环烷基)，-SO2-(C1-C7烷基)，或-SO2-NR5R6；R1是氢，氨基，甲基，或-N＝CH(NMe)2；R2是任选被一或两个独立选自卤素的取代基取代的苯基；R3是氢，C1-C7烷基，C3-C7环烷基，或任选被一或两个独立选自卤素和三氟甲基的取代基取代的苯基；R4是氢或C1-C7烷基；R5和R6独立地选自C1-C7烷基。
2.式I’的化合物或其药学可接受的盐 其中R′是2，2-二甲基丙基或1，2，2-三甲基丙基；R2′是苯基，4-氟苯基，或2，4-二氟苯基；R3′是叔丁基，2-氯-6-氟苯基，2-氟-6-三氟甲基苯基，2，6-二氯苯基，或2，6-二氟苯基。
3.式I’的化合物或其药学可接受的盐 其中a)R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2-氟-6-三氟甲基苯基；b)R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2，6-二氯苯基；c)R′是2，2-二甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是叔丁基；d)R′是2，2-二甲基丙基，R2′是苯基，和R3′是2-氯-6-氟苯基；e)R′是2，2-二甲基丙基，R2′是2，6-二氟苯基，和R3′是叔丁基；f)R′是1，2，2-三甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是叔丁基；或g)R′是1，2，2-三甲基丙基，R2′是4-氟苯基，和R3′是2，6-二氟苯基。
4.化合物5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺，或其药学可接受的盐。
5.化合物5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1 H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺，或其富马酸盐、二甲磺酸盐、琥珀酸盐、马来酸氢盐或二盐酸盐。
6.化合物5-[2-叔丁基-5-(4-氟-苯基)-1H-咪唑-4-基]-3-(2，2-二甲基-丙基)-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-基胺二甲磺酸盐。
7.一种药物制剂，包括按照权利要求1至6的任一项的化合物与药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂的组合。
8.权利要求1-6的任一项化合物用于制备治疗能够通过抑制p-38激酶而改善或预防的疾病或病症的药物中的用途。
9.权利要求1-6的任一项的化合物用于制备治疗敏感肿瘤的药物的用途。
10.权利要求9的用途，其中敏感肿瘤是多发性骨髓瘤。
全文摘要
本发明提供了式I的激酶抑制剂。
文档编号A61P29/00GK1938302SQ200580010142
公开日2007年3月28日 申请日期2005年1月25日 优先权日2004年1月30日
发明者R·邦朱克里安, C·H·哈道奇, C·史, A·德迪奥斯, M·F·德普拉多, C·贾拉米洛阿古多, P·科蒂延, M·M·马德, S·P·塞加斯, C·桑彻滋-马蒂内滋 申请人:伊莱利利公司