专利名称：3－苯基－二氢嘧啶并[4,5－d]嘧啶酮的酰胺衍生物，它们的制备和用作药剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及3-苯基-二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮的新的酰胺衍生物，涉及制备它们的方法，包含它们的药物及其制备以及将这些化合物用作药物活性剂的应用。
本领域已知一些取代的二环氮杂环具有蛋白质激酶，以及酪氨酸激酶的抑制活性。WO 01/29042和WO 01/29041公开了具有p38抑制活性的烷氨基取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮衍生物。WO 99/61444描述了用芳基和杂芳基胺，硫化物，亚砜和砜取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮作为细胞周期蛋白依赖性激酶(cdks)和酪氨酸激酶的抑制剂。在WO 00/24744中，还描述了芳基和杂芳基胺取代的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮作为T细胞酪氨酸激酶p561ck的抑制剂。另外，具有酪氨酸激酶抑制活性的二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮描述在WO 04/18472，WO 04/41821，WO 04/41822，WO 04/41823，和WO 04/11465中。
然而，仍然需要具有改善治疗性能的新化合物，所述改善的治疗性能如增加的活性、减少的毒性、更好的溶解性和改善的药物代谢动力学模式，这里仅列举了少数几个例子。
本发明的衍生物是通式I的新化合物 式I，其中R1-O-(CH2)m-N(烷基)2；
m是1，2或3。
R2是氢；氟；氯；或(C1-C3)烷基；所述烷基被卤素任选地取代一次或数次；Q是亚烷基或亚链烯基；n是0或1；R3是环烷基；芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基被苯基；吡啶基；吡咯基或吲哚基任选地取代一次或两次；并且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次；及其所有的药用盐。
按照本发明的化合物显示作为蛋白质激酶抑制剂，特别地src家族酪氨酸激酶抑制剂的活性，并且可以因此用于治疗由所述酪氨酸激酶介导的疾病。酪氨酸激酶的家族通过对肽和蛋白质的酪氨酸残基进行磷酸化在细胞信号传导和细胞增殖的调节中具有重要作用。已知酪氨酸激酶的不恰当的激活涉及多种疾病状态，所述疾病状态包括炎症，免疫疾病，CNS疾病，或肿瘤疾病，或骨病。见，例如Susva，M.，et al.，Trends Pharmacol.Sci.21(2000)489-495；Biscardi，J.S.，et al.，Adv.Cancer Res.76(2000)61-119。
本发明的化合物可以作为活性剂用在预防和治疗，例如移植排斥、炎性肠综合征、类风湿性关节炎、银屑病、再狭窄、过敏性哮喘、阿尔茨海默病、帕金森病、中风、骨质疏松症、良性增生和癌症诸如结肠直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、宫颈癌、肾癌或肾脏肿瘤、白血病或淋巴瘤中，或用在制备相应的药物中。
本发明的目的是式(I)的化合物及药用盐，和它们的对映体形式，上述化合物的制备，含有它们的药物及其制备，以及上述化合物在控制或预防疾病，尤其是如上提及的疾病和病症中的应用或在制备相应的药物中的应用。
用于本文时，术语“烷基”指包含1-6个，优选地1-3个碳原子的饱和的、直链或支链烃，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基。
如果所述烷基任选地由1个或数个卤素原子取代，其优选地由氟或氯，尤其是氟取代。实例是二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、全氟-乙基等。
用于本文时，术语“卤素”指氟、氯和溴，优选地氟或氯，尤其是氯。
用于本文时，术语“环烷基”指具有3-7个，优选地5-7个环原子的单环饱和的烃环。这些环烷基的实例包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基，优选地是环己基或环庚基。
用于本文时，术语“芳基”指具有6-10个环原子的单环或二环芳香烃环，诸如苯基、1-萘基或2-萘基。
用于本文时，术语“杂芳基”指具有5-10个环原子的单环或二环芳香环，其包含多到3，优选地1或2个杂原子，所述杂原子独立地选自N，O或S，并且所余下的环原子是碳原子。这些杂芳基的实例包括吡咯基、噻吩基、呋喃基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡唑基、咪唑基；吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基等，尤其是异噁唑基、吡唑基、吡啶基、吲哚基或苯并噻吩基。
用于本文时，术语“亚烷基”指包含1-5个，优选地1-3个碳原子的饱和的，直链或支链，优选地直链烃，诸如亚甲基、1，2-亚乙基、1，3-亚丙基；四亚甲基、1，5-亚戊基、甲基亚甲基、1-甲基-亚乙基、2-甲基-亚乙基、1-乙基-亚乙基、2-乙基-亚乙基、1-丙基-亚乙基、2-丙基-亚乙基、1-甲基-亚丙基、2-甲基-亚丙基、1-乙基-亚丙基、2-乙基-亚丙基，尤其是亚甲基，亚乙基或1，3-亚丙基。
用于本文时，术语“亚链烯基”指包含2-6个，优选地2-3个碳原子的不饱和的，直链或支链，优选地直链烃。这些“亚链烯基”的实例是1，2-亚乙烯基(亚乙烯基)，亚烯丙基(allylene)，亚异丙烯基，1-亚丙烯基，2-甲基-1-亚丙烯基，1-亚丁烯基，2-亚丁烯基，3-亚丁烯基，2-乙基-1-亚丁烯基，3-甲基-2-亚丁烯基，1-亚戊烯基，2-亚戊烯基，3-亚戊烯基，4-亚戊烯基，4-甲基-3-亚戊烯基，1-亚己烯基，2-亚己烯基，3-亚己烯基，4-亚己烯基和5-亚己烯基，尤其是1，2-亚乙烯基(亚乙烯基)，亚烯丙基(allylene)，亚异丙烯基，1-亚丙烯基，2-甲基-1-亚丙烯基。
优选地在本发明的所有实施方案中，R1是-O-(CH2)2-N(CH2-CH3)2，并且R2是氯。
本发明的一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0。
本发明的另一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是1。
本发明的一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R2是氯。
本发明的另一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R1是-O-(CH2)2-N(CH2-CH3)2。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R3是环烷基。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是环烷基。
这些化合物是环己烷羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；和环庚烷羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R3是芳基，所述芳基被苯基；吡啶基；吡咯基或吲哚基任选地取代一次或两次；并且所有芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R3是苯基，
所述苯基被苯基；吡啶基；吡咯基或吲哚基任选地取代一次或两次；并且所有芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；并且R3是苯基，所述苯基被苯基；吡啶基；吡咯基或吲哚基取代一次或两次；并且所有芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是苯基，所述苯基被苯基或吡啶基取代一次或两次；并且所有芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
这些化合物是联苯基-4-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；和联苯基-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；和联苯基-3-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；和4′-氰基-联苯基-3-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺.
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是苯基，
所述苯基被吡咯基或吲哚基取代一次或两次；并且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是苯基，所述苯基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R1是-O-(CH2)2-N(CH2-CH3)2；n是0；且R3是苯基，所述苯基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次。
这些化合物是N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-苯甲酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-甲氧基-苯甲酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-氰基-苯甲酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-吗啉-4-基-苯甲酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺.
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是1；且R3是苯基，所述苯基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
这些化合物是N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-苯基-丙酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-(4-羟基-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；和3-(3-氨基-苯基)-N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-密啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；和3-(4-氨基-苯基)-N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-密啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-苯基-丁酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-密啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-苯基-丙烯酰胺-本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是萘基，所述萘基被苯基或吡啶基任选地取代一次，并且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
这些化合物是萘-1-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；和萘-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-密啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物.
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中R3是杂芳基，所述杂芳基被苯基或吡啶基任选地取代一次或两次；且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH--烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是异噁唑；吡唑或吡啶基，所述异噁唑；吡唑或吡啶基被苯基或吡啶基任选地取代一次或两次；且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是0；且R3是吲哚基或苯并噻吩基，所述吲哚基或苯并噻吩基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-3次。
这些化合物是1H-吲哚-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；和苯并噻吩-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺.
本发明的又一个优选实施方案是按照式I的化合物，其中n是1；且R3吡啶基；所述吡啶基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基或卤素任选地取代1-2次。
这些化合物是N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-2-吡啶-3-基-乙酰胺；和
N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-2-吡啶-4-基-乙酰胺；与乙酸形成的复合物；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-吡啶-3-基-丙酰胺；与乙酸形成的复合物.
本发明的另一个实施方案是制备按照本发明的化合物的方法。所述化合物可以通过以下步骤进行(a)使通式II的化合物 中的氨基基团与通式III的羧酸 反应以得到通式IV
的酰胺衍生物，在所述通式II中，R2具有上文的含义，在所述通式III中，R3具有上文给出的含义(b)甲基磺酰基基团被式V的各种苯胺所取代， 以得到通式I的化合物 其中在所述式V中，R1具有上文给出的含义，(c)如果需要，将所述通式I的化合物转化为药用盐。
(d)药用盐。
作为本发明主题的式I的化合物，或其药用盐可以通过已知适应于制备在化学上相关的化合物的任何方法来进行制备。当用于制备式I的3-苯基二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶酮或其药用盐时，这些方法通过下面的代表性路线和实施例来进行举例说明，其中除非另外指出，R1，R2，和R3具有上文指定的意义。可以通过有机化学的标准方法来获得必需的原材料。将这些原材料的制备描述在后附的实施例中。备选地，必需的原材料可以通过与有机化学领域的普通技术人员所举例说明的那些类似的方法获得。
式I的化合物可以按照路线1，2和3，制备自已知来自WO 04/41823的4-氯-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-羧酸乙酯，其中R1，R2，和R3具有上文指定的意义。
路线1步骤14-甲基氨基-2-甲基硫烷基嘧啶-5-羧酸乙酯在介于5℃和室温(RT)之间的温度，在以三乙胺的碱性条件下，在四氢呋喃(THF)中制备自4-氯-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-羧酸乙酯和甲胺。
步骤2(4-甲基氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基)甲醇在介于5℃和室温(RT)之间的温度，在四氢呋喃(THF)中，通过用氢化铝锂还原4-甲基氨基-2-甲基硫烷基嘧啶-5-羧酸乙酯进行制备。
步骤3于室温，在1，1，1-三氯乙烷中，用亚硫酰二氯来将(4-甲基氨基-2-甲基硫烷基-嘧啶-5-基)-甲醇转化为(5-氯甲基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-甲基-胺。
路线2步骤4在介于-20℃和180℃之间的温度范围，在乙腈或类似极性的溶剂中，通过添加碘化钠和N-乙基二异丙胺使(5-氯甲基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-甲基-胺与式VI的化合物反应以得到式VII的化合物。
步骤5在乙腈或在类似极性的溶剂诸如二甲基甲酰胺或四氢呋喃中，在0℃到180℃的温度范围，通过用1，1′-羰基二咪唑和碳酸钾(K2CO3)处理，自式VII的化合物制备式VIII的化合物。备选地，例如可以使用在二甲基甲酰胺/四氢呋喃中的氢化钠。
步骤6
可以通过氧化为亚砜，来将甲硫基转化为适合的离去基团。在0℃到150℃的温度范围，在惰性溶剂诸如二氯甲烷(CH2Cl2)，THF或NMP中，用3-氯过苯甲酸(mCPBA)作为氧化剂，来将式VIII的化合物转化为式IX的化合物从而得到式IX的化合物。
步骤7使用去活化的Pd(CaCO3)/C或其它的Pd催化剂，通过氢化作用将式IX的化合物还原为式II的化合物。还原在惰性溶剂诸如THF，CH2Cl2，或NMP中，在介于0℃和150℃的温度范围上发生。
路线3步骤8将式II的化合物偶联于式III的羧酸来得到式IV的酰胺。在惰性溶剂诸如THF，CH2Cl2，或NMP或在极性溶剂诸如甲醇(MeOH)或甚至水中，使用活化羧酸的常用的试剂诸如例如，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)，N，N′-二环己基碳二亚胺(DCC)，1-羟基苯并三唑(HOBT)，N，N′-羰基二咪唑(CDI)，和4-(4，6-二甲氧基-[1，3，5]三嗪-2基)-4-甲基-吗啉-4-鎓氯化物(DMTMM)。有时，将二甲基氨基吡啶(DMAP)加入作为催化剂。活化的另一种方法是在碱性条件，例如三乙胺、N，N-二异丙基乙胺(Hünig碱)下制备相应的酰基氯。用标准的保护基诸如叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧基羰基来保护具有在反应条件下不稳定的官能团的一些酸。
步骤9在0℃到180℃的温度范围，在将HCl添加到在极性、惰性溶剂诸如NMP或DMF中的二乙醚或二噁烷中，以亲核取代反应，将式IV的化合物偶联于式(V)的化合物以得到最终的式I的产物。
在反应顺序中，R3中的某些侧链可能需要保护。本文可以应用在本领域众所周知的标准保护和去保护方法。例如，可以将伯胺和仲胺应用在叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧基羰基保护形式中，并且所述保护基可以通过用类似HCl或TFA的酸来处理，作为最终的反应步骤进行去除。
通式I的化合物可以包含一个或几个手性中心，并且可以接着以外消旋或光学活性形式存在。所述外消旋物可以按照已知方法分离为对映体。例如，通过与光学活性酸诸如例如D-或L-酒石酸，扁桃酸，苹果酸，乳酸或樟脑磺酸反应，从外消旋混合物形成可以通过结晶分离的非对映的盐。备选地，对映体的分离还可以通过使用在商购的手性HPLC-相上进行的色谱法来实现。
按照本发明的化合物可以以它们的药用盐的形式存在。术语“药用盐”指保持式I的化合物的生物有效性和性质的常用酸式加成盐或碱式加成盐并且形成自适合的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱。酸式加成盐包括例如来自无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些，和来自有机酸诸如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等的那些。碱式加成盐包括来自铵、钾、钠的那些和氢氧化季铵，诸如例如氢氧化四甲铵。将药物化合物化学改性为盐是药剂师众所周知的技术以获得化合物的改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。其例如描述在Stahl，P.H.，和Wermuth，G.，(编者)，Handbook of Pharmaceutical Salts，Verlag Helvetica Chimica Acta(VHCA)，Zürich，(2002)或Bastin，R.J.，et al.，Organic Proc.Res.Dev.4(2000)427-435。
按照本发明的化合物和它们的药用盐可以用作，例如以药物制剂形式存在的药物。所述药物制剂可以通过口服，例如以片剂、包衣片剂、糖锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬液形式进行施用。然而，施用还可以通过直肠，例如以栓剂形式起作用，或通过肠胃外，例如以注射剂溶液的形式起作用。
通过用药学上惰性的无机或有机载体加工按照本发明的化合物可以获得上述药物制剂。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐等可以用作，例如，如片剂、包衣片剂、糖锭剂和硬明胶胶囊的载体。适用于软明胶胶囊的载体是，例如，植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇等。但是，取决于活性物质的性质，软明胶胶囊通常不需要载体。生产溶液和糖浆的合适载体是，例如，水、多元醇、甘油、植物油等。适用于栓剂的载体是，例如，天然或硬化油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇等。
此外，所述药物制剂可以含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、调味剂、用于改变渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧化剂。它们还可以包含其它有治疗价值的物质。
通过使用下列方法来获得药物制剂1.在常规制作的试管GL 25，4cm中称重4.0g的玻璃珠(珠子填满试管的一半)2.加入50mg的化合物，用刮刀(spatulum)和涡旋来分散。
3.加入2ml的明胶溶液(珠子的重量∶明胶溶液2∶1)并进行涡旋。
4.用铝箔封顶并包裹以避光。
5.准备平衡以进行研磨6.在Retsch磨机上，以20/s研磨4小时(对于某些物质，以30/s多到24小时)7.通过在400g离心2分钟，用与接收瓶连接的滤器固定器上的滤器的两层(100μm)从珠子提取混悬液。
8.将提取物移到量筒中。
9.用小体积(本文1ml幅度)来重复洗涤，直到达到最终体积或提取物是澄清的。
10.用明胶填充到最终体积并进行搅匀。
上述制备方法产生颗粒大小在1和10μm之间的式I的化合物的微-混悬液。所述混悬液适合于口服应用并且可以体内用在药物代谢动力学测试中。
药学活性通过使用下列测定法来显示作为src-家族酪氨酸激酶的抑制剂的按照本发明的化合物的活性。
SRC-抑制剂-测定法参数反应混合物ATP5μM肽(Ro+Ja133-Ro) 10μMJa133-Ro 196nMRo 9.8uMPT66 230ng/ml测定缓冲液4mM MgCl22mM TCEP50mM HEPES0,1％吐温20pH7.3酶2.5U/ml抑制剂最多.25μM最少.0.42nM材料Eu-标记的磷酸酪氨酸抗体-对于Lck Cisbio Mah PT66-K，-对于Src EG&G Wallac PT66 Eu-W1024(所有的都可商购).
肽RoNH2-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，和Ja133-RoJa133-G-氨基辛酸-A-E-E-E-I-Y-G-E-F-E-A-K-K-K-K-CONH2，其中Ja133是LightCycler-Red 640-N-羟基琥珀酰亚胺酯；其中两条肽在Zinsser SMP350肽合成仪上，通过优化的固相肽合成方法(Merrifield，Fed.Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.21(1962)412)进行合成。简言之，所述肽在160mg(22.8μmol规模)的Rink-Linker修饰的聚苯乙烯固相上通过重复与20倍过量的氨基酸缀合来进行装配，根据侧链功能，所述氨基酸每个都被暂时性的哌啶不稳定的Fmoc-和永久性的酸不稳定的tert-Bu-，BOC-和O-tert-Bu-基团保护。底物序列AEEEIYGEFEAKKKK在N端另外与间隔臂氨基酸氨基辛酸和对羟苯基甘氨酸连接。在裂解N-端暂时性保护基后，仍旧连接的和保护的肽用1.5倍量的LightCycler-Red640-N-羟基琥珀酰亚胺酯(购自Roche Diagnostics GmbH)和三乙胺进行标记。3小时后，用二甲基甲酰胺和异丙醇来洗涤树脂直到蓝色树脂的洗脱物变为无色。通过用80％三氟乙酸，10％的乙二硫醇，5％苯硫基甲烷和5％的水的混合物来处理，将充分保护的和标记的肽从固相上移去并从永久性保护基进行释放。通过制备性反相HPLC纯化来最终分离底物。所述纯化产生12.2mg RP-HPLC的单峰蓝色物质(冻干产物)。通过MALDI质谱分析来进行鉴定[2720.0]。
酶；Upstate Src(p60c-src，部分纯化)购自UBI，Upstate Biotech，Inc.。时间分辨荧光测定法阅读器Perkin Elmer，Wallac Viktor 1420-040多标记计数器；液体处理系统Beckman Coulter，Biomek 2000。
ATP，吐温TM 20，4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)购自RocheMolecular Biochemicals，MgCl2和MnCl2购自Merck Eurolab，三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)购自Pierce，384孔低体积荧光板购自Falcon。
测定描述首先将酶在15℃在水溶液中，与相应量的按照本发明的抑制剂一起预温育15分钟。接着，通过加入包含ATP，肽和PT66的反应混合物来起动磷酸化反应，并随后摇动。立即以适合的孔板阅读器，使用时间分辨荧光光谱分析来监测该反应的进行。
使用非线性曲线拟合(Xlfit软件(ID Business Solution Ltd.，Guilford，Surrey，UK))，可以从反应速率获得IC50-值。
含有本发明化合物或其药用盐以及治疗惰性载体的药物也是本发明的目的，所述药物的制备方法也是本发明的目的，其包括将一种或多种本发明化合物和/或其药用盐，和如果需要，一种或多种其它有治疗价值的物质连同一种或多种治疗惰性载体配制成盖仑(galenical)给药形式。
根据本发明，本发明化合物及其药用盐用于控制或预防疾病。基于它们的酪氨酸激酶抑制及其抗增殖活性，所述化合物用于治疗人或动物疾病，诸如癌症，并用于制备相应的药物。其剂量取决于各种因素而定，诸如，给药方式，种类，年龄和/或个体健康状况。
提供下述实施例和参考文献有助于理解本发明，本发明的真正范围由后附权利要求阐明。应当理解的是，在不偏离本发明实质的情况下，可以对提出的方法进行改进。
实施例A原材料实施例a{5-[(2-氯-5-硝基-苯氨基)-甲基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基}-甲基-胺将15.85g的(5-氯甲基-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基)-甲基-胺盐酸盐，1.979g碘化钠，和34.49mL的N-N-二异丙基乙胺溶解在150ml乙腈中并冷却到0℃。将溶解在150ml乙腈中的17.085g的2-氯-5-硝基-苯基胺在搅拌下缓慢加入。将反应混合物于室温搅拌48小时，接着将所述溶剂蒸发。将残余物溶解在水/乙酸乙醚(1∶1)的混合物中，搅拌，并将结晶产物吸去，将其在真空下于40℃干燥48小时。分离母液中的两相，并用二氯甲烷提取水相。合并有机相，并通过硫酸钠进行干燥，将所述溶剂蒸发，并用二乙醚来研磨所述残余物。合并两种残余物，并给出97％产率的标题产物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝7.9540(1H)；7.6400-7.5991(2H)；7.4579-7.4359(1H)；4.4058-4.3940(1H)；4.1932-4.1806(2H)；3.0746-3.0416(3H)；2.5723-2.5279(3H)实施例b3-(2-氯-5-硝基-苯基)-1-甲基-7-甲基硫烷基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮将20.796g的{5-[(2-氯-5-硝基-苯氨基)-甲基]-2-甲基硫烷基-嘧啶-4-基}-甲基-胺溶解在500ml的乙腈中，加入25.375g的碳酸钾和19.847g的N，N-羰基二咪唑(CDI)，并将所述溶液在50℃加热24小时。将所述溶剂通过硫酸钠进行干燥，蒸发，并将所述残余物用二乙醚进行提取以得到96％产率的标题产物。
实施例c3-(2-氯-5-硝基-苯基)-7-甲磺酰基-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮将1.4g的3-(2-氯-5-硝基-苯基)-1-甲基-7-甲基硫烷基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮溶解在75ml的二氯甲烷中，冷却到0℃，并加入3.305g的间位-氯过苯甲酸(mCPBA)。将所述混合物在室温搅拌24小时。接着，通过用150mL的碳酸钾水溶液提取淬灭所述反应混合物进行。分离所述有机相，通过硫酸钠进行干燥，并蒸发溶剂。将所述残余物用二乙醚进行提取，并获得70％产率的标题产物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.4417-7.7268(4H)；4.8703-4.8451(2H)；3.5581(3H)；3.3765(3H)实施例d3-(5-氨基-2-氯-苯基)-7-甲磺酰基-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮将5.94g的3-(2-氯-5-硝基-苯基)-7-甲磺酰基-1-甲基-3，4-二氢-1H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮溶解在200 mL的四氢呋喃中。将Pd(CaCO3)/C加入溶液中，将其接着用氢(1atm)处理18小时。接着，过滤所述溶液，并将溶剂进行蒸发。用二乙醚来提取所述残余物，并获得98％产率的标题产物。
实施例e联苯基-4-羧酸[4-氯-3-(7-甲磺酰基-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基)-苯基]-酰胺将0.2g的3-(5-氨基-2-氯-苯基)-7-甲磺酰基-1-甲基-3，4-二氢-1H-密啶并[4，5-d]嘧啶-2-酮溶解在50mL的二氯甲烷中。加入0.137g的联苯基-4-羧酸和0.042g的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)。将所述溶液冷却到0℃并将溶解在20mL的二氯甲烷中的0.128g N-(3-二甲基氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)缓慢加入。在氮气下，将反应混合物搅拌24小时。通过用100mL的碳酸钾水溶液提取来淬灭反应。分离各相，并用二氯甲烷来提取水相，将合并的有机相通过硫酸钠进行干燥并蒸发。通过在硅胶(正庚烷/乙酸乙酯(EtOAc))上进行的快速色谱法(flash chromatography)来纯化所述粗制产物以得到28％产率的标题产物。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ＝8.3772-7.3794(14H)；4.9021-4.7663(2H)；3.5745-3.5592(3H)；3.3662(3H)B最终产物实施例1联苯基-4-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺将0.1g的4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯基胺溶解在1mL的N-甲基吡咯烷酮(NMP)中，并冷却到0℃。将在二乙醚中的300μl的HCl水溶液加入并搅拌45分钟。将联苯基-4-羧酸[4-氯-3-(7-甲磺酰基-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-密啶并[4，5-d]嘧啶-3-基)-苯基]-酰胺溶解在2mL NMP中并加入前述溶液中，将所述反应混合物在120℃加热24小时。通过加入5mL的碳酸钠饱和溶液来淬灭反应，并用二氯甲烷来提取水相。通过硫酸钠来干燥有机相并蒸发溶剂。通过在硅胶(二氯甲烷/甲醇)上进行的快速色谱法来纯化所述粗制产物以得到35％产率的标题产物。
1H-NMR(400MHz，[D6]-DMSO)δ＝10.5435(1H)；9.3936(1H)；8.1320-7.4312(15H)；6.8899-6.8675(2H)；4.7106-4.5572(2H)；3.9919-3.9610(2H)；2.7685-2.7376(2H)；2.5724-2.4969(4H)；1.8853(3H)；0.9921-0.9565(6H)实施例2按照实施例1中所述的合成方法，并使用相应的原材料，获得下列化合物
参考文献Bastin，R.J.，et al.，Organic Proc.Res.Dev.4(2000)427-435Biscardi，J.S.，et al.，Adv.Cancer Res.76(2000)61-119Merrifield，Fed.Proc.Fed.Amer.Soc.Exp.Biol.21(1962)412Stahl，P.H.，and Wermuth，G.，(editors)，Handbook of Pharmaceutical Salts，Verlag Helvetica Chimica Acta(VHCA)，Zürich(2002)Susva，M.，et al.，Trends Pharmacol.Sci.21(2000)489-495WO 00/24744WO 01/29041WO 01/29042WO 04/11465WO 04/18472WO 04/41821WO 04/41822WO 04/41823WO 99/6144权利要求
1.一种式I的化合物 其中R1-O-(CH2)m-N(烷基)2；m是1，2或3。R2是氢；氟；氯；或(C1-C3)烷基，所述烷基被卤素任选地取代一次或数次；Q是亚烷基或亚链烯基；n是0或1；R3是环烷基，芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基被苯基，吡啶基；吡咯基或吲哚基任选地取代一次或两次；并且所有的芳香基被-CN；-CHO；-OH；-O-烷基；-NH2；-NH-烷基；-烷基-NH2；烷基；卤素；哌啶基；哌嗪基；N-甲基-哌嗪基或吗啉基任选地取代1-3次；及其所有的药用盐。
2.按照权利要求1的化合物，其中R2是氯。
3.按照权利要求1的化合物，其中R2是氯；并且R1是-O-(CH2)2-N(CH2-CH3)2。
4.按照权利要求3的化合物环己烷羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；环庚烷羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；联苯基-4-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；联苯基-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；联苯基-3-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；4′-氰基-联苯基-3-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-苯甲酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-甲氧基-苯甲酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-氰基-苯甲酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-吗啉-4-基-苯甲酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-苯基-丙酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-(4-羟基-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；3-(3-氨基-苯基)-N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；3-(4-氨基-苯基)-N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-丙酰胺；与乙酸形成的复合物；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-4-苯基-丁酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-苯基-丙烯酰胺；萘-1-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；萘-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；与乙酸形成的复合物；1H-吲哚-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；苯并噻吩-2-羧酸(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-酰胺；N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-2-吡啶-3-基-乙酰胺；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-2-吡啶-4-基-乙酰胺；与乙酸形成的复合物；和N-(4-氯-3-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙氧基)-苯氨基]-1-甲基-2-氧代-1，4-二氢-2H-嘧啶并[4，5-d]嘧啶-3-基}-苯基)-3-吡啶-3-基-丙酰胺；与乙酸形成的复合物。
5.一种制备按照权利要求1的式I的化合物的方法，所述方法通过以下步骤进行(a)使通式II的化合物 中的氨基基团与通式III的羧酸 反应以得到通式IV 的酰胺衍生物，在所述通式II中，R2具有前面权利要求1所给出的含义，在所述通式III中，R3具有前面权利要求1所给出的含义，(b)甲基磺酰基基团被式V的各种苯胺所取代， 以得到通式I的化合物 其中在所述式V中，R1具有前面权利要求1所给出的含义，(c)如果需要，将所述通式I的化合物转化为药用盐。
6.一种药物，其包含作为活性成分的按照权利要求1-4中任一项的一种或多种化合物以及药用佐剂。
7.按照权利要求6的药物，其用于治疗癌症。
8.按照权利要求1-4中任一项的一种或多种化合物用于制备治疗癌症的药物的应用。
9.按照权利要求1-4中任一项的式I的一种或多种化合物用于治疗癌症的应用。
全文摘要
本发明涉及3－苯基二氢嘧啶并[4，5－d]嘧啶酮的新的酰胺衍生物，和它们的制备方法，包含它们的药物及其制备，以及这些化合物用作药物活性剂的应用。本发明的衍生物是通式I的新的化合物。
文档编号A61P35/00GK1980933SQ200580022238
公开日2007年6月13日 申请日期2005年8月30日 优先权日2004年8月31日
发明者R·恩格, H·赫腾备格尔, K·霍诺尔德, B·马斯宙斯特, P·吕格尔, W·舍费尔, S·沙伊布勒赫, M·施魏格尔 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司