专利名称：有丝分裂驱动蛋白抑制剂的制作方法
背景技术：
本发明涉及作为有丝分裂驱动蛋白，特别是有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂，并且可以用于治疗细胞增殖疾病，如癌症、增生、再狭窄、心脏肥厚、免疫病症和炎症的二氢吡唑化合物。
用于治疗癌症的治疗剂包括紫杉烷和长春碱。紫杉烷和长春碱作用于存在于多种细胞结构中的微管。微管是有丝分裂纺锤体的主要结构元件。有丝分裂纺锤体负责将基因组的复制拷贝分布到由细胞分裂得到的两个子细胞中的每一个。推断这些药物导致的有丝分裂纺锤体破坏导致癌细胞分裂的抑制和癌细胞死亡的诱导。但是，微管形成了其它类型的细胞结构，包括用于神经突中细胞内转运的轨道。由于这些药剂不特异性靶定有丝分裂纺锤体，它们具有限制其用途的副作用。
用于治疗癌症的药剂的特异性的改进是特别引人注意的，因为如果与施用这些药剂相关的副作用减轻，则可以实现治疗益处。常规地，癌症治疗中的显著改进与通过新机制起作用的治疗剂的鉴定相关。其实例不仅包括紫杉烷，也包括喜树碱类的拓扑异构酶I抑制剂。从这两方面，有丝分裂都是新的癌症治疗剂的吸引人的靶。
有丝分裂驱动蛋白是有丝分裂纺锤体的组装和功能的必要酶，但通常不是其它微管结构，如神经突的一部分。有丝分裂驱动蛋白在有丝分裂的所有阶段都起关键作用。这些酶是“分子发动机”，它们将ATP水解释放的能量转化为驱动细胞物质沿着微管进行有方向的移动的机械力。足够用于该任务的催化结构域是大约340个氨基酸的紧密结构。在有丝分裂过程中，驱动蛋白将微管组织成双极结构，即，有丝分裂纺锤体。驱动蛋白介导染色体沿着纺锤体微管运动，以及有丝分裂纺锤体中与有丝分裂特定阶段相关的结构改变。有丝分裂驱动蛋白功能的实验干扰导致有丝分裂纺锤体的畸形或功能障碍，通常导致细胞周期停滞和细胞死亡。
在有丝分裂驱动蛋白中，已经鉴定的一种是KSP。KSP属于针对加上末端的微管蛋白驱动器的进化上保守的驱动蛋白亚家族，其组装成由反向平行的同二聚体组成的双极同四聚体。在有丝分裂过程中，KSP与有丝分裂纺锤体的微管缔合。将针对KSP的抗体微量注射到人细胞，防止了前中期的纺锤体极分离，产生单极纺锤体，并且导致有丝分裂停滞和程序化细胞死亡的诱导。KSP和其它非人生物中的相关的驱动蛋白捆绑成反向平行的微管，使它们相对彼此进行滑动，由此驱动两个纺锤体极分开。KSP也可以介导细胞分裂后期B纺锤体延伸和微管在纺锤体极的聚集。
已经描述了人类KSP(也称作HsEg5)[Blangy，et al，Cell，831159-69(1995)；Whitehead，et al.，Arthritis Rheum.，391635-42(1996)；Galgio et al.，J.Cell Biol，135339-414(1996)；Blangy，et al.，J Biol.Chem.，27219418-24(1997)；Blangy，et al.，Cell MotilCytoskeleton，40174-82(1998)；Whitehead and Rattner，J.Cell Sci，1112551-61(1998)；Kaiser，et al.，JBC 27418925-31(1999)；GenBank登录号X85137，NM004523和U37426]，并且已经描述了KSP基因的片段(TRIP5)[Lee，et al.，Mol Endocrinol.，9243-54(1995)；GenBank登录号L40372]。已经报道了爪蟾KSP同源物(Eg5)，并且已经报道了果蝇K-LP61 F/KRP 130。
最近已经描述了某些喹唑啉酮作为KSP的抑制剂(PCT公开WO01/30768，2001年5月3日)。
有丝分裂驱动蛋白是发现和开发新的有丝分裂化疗剂的吸引人的靶。因此，本发明的目的是提供用于抑制KSP，即一种有丝分裂驱动蛋白的化合物、方法和组合物。
发明概述本发明涉及用于治疗细胞增殖疾病，用于治疗与KSP驱动蛋白活性相关的病症，和用于抑制KSP驱动蛋白的二氢吡唑衍生物。本发明的化合物可以用式I表示
发明详述本发明的化合物可以用于抑制有丝分裂驱动蛋白，并且由式I的化合物表示，或是其可药用盐或立体异构体 其中a独立地是0或1；b独立地是0或1；m独立地是0、1或2；n是0-3； 选自每个环都是3-7元环的单环、双环或多环含氮杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环、双环或多环杂环任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R1选自1)C1-C10烷基，2)芳基，3)C3-C8环烷基，
4)杂环基，5)(C＝O)NR7R8，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；或R2和R4独立地选自1)H，2)ObC1-C10烷基，3)C3-C8环烷基，4)卤素，5)CN，和6)OH所述烷基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；R3是卤素；R5独立地是1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C10全氟代烷基，11)Oa(C＝O)bNR7R8，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR7R8，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R7R8，或17)(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R6独立地选自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基，2)Ob(C1-C3)全氟代烷基，3)氧代，4)OH，5)卤素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)aOb(C3-C6)环烷基，10)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基，11)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基，12)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2NR7R8；所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三个选自Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，卤素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代和N(Rb)2的取代基取代；或与相同碳原子连接的两个R6一起形成-(CH2)u-，其中u是3-6，并且一个或两个碳原子任选被选自O，S(O)m，-N(Ra)C(O)-，-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分取代；R7和R8独立地选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，
5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代，或R7和R8可以与其连接的氮一起形成每个环都是5-7元环的单环或双环杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；Ra独立地选自(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，芳基和杂环基；并且Rb独立地选自H，(C1-C6)烷基，芳基，杂环基，(C3-C6)环烷基，(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
本发明的其它实施方案由式II所示化合物或其可药用盐或立体异构体示例 其中a独立地是0或1；b独立地是0或1；m独立地是0、1或2；
n是0-3； 选自每个环都是3-7元环的单环、双环或多环含氮杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环、双环或多环杂环任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R1选自1)C1-C10烷基，2)芳基，3)C3-C8环烷基，4)杂环基，5)(C＝O)NR7R8，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；或R2选自1)ObC1-C10烷基，2)卤素，3)CN，和4)OH，所述烷基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；R3是卤素；R5独立地是1)C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，
9)OH，10)ObC1-C10全氟代烷基，11)Oa(C＝O)bNR7R8，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR7R8，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R7R8，或17)(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R6独立地选自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基，其中r和s独立地是0或1，2)Ob(C1-C3)全氟代烷基，其中r是0或1，3)氧代，4)OH，5)卤素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)aOb(C3-C6)环烷基，10)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基，11)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基，12)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2NR7R8；所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三个选自Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，卤素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代和N(Rb)2的取代基取代；或与相同碳原子连接的两个R6一起形成-(CH2)u-，其中u是3-6，并且一个或两个碳原子任选被选自O，S(O)m，-N(Ra)C(O)-，-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分取代；R7和R8独立地选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代，或R7和R8可以与其连接的氮一起形成每个环都是5-7元环的单环或双环杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；Ra独立地选自(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，芳基和杂环基；并且Rb独立地选自H，(C1-C6)烷基，芳基，杂环基，(C3-C6)环烷基，(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
另一实施方案是上文描述的式II的化合物或其可药用盐或立体异构体，其中
选自 它们任选被一个或多个选自R6的取代基取代；其中a，b，m，n，R1，R2，R3，R5，R6，R7，R8，Ra和Rb如上文的描述。
本发明的化合物的具体实例包括1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-乙酰基哌嗪；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吗啉；(5S)-1-乙酰基-5-(3-氮杂环丁烷-1-基丙基)-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-氟哌啶；7-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1，4-二氧杂-7-氮杂螺[4.5]癸烷；5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二氟吡咯烷；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-(三氟甲基)哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4，4-二氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(甲磺酰基)哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-2-酮；3-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)-4-甲基-1，2，5-二唑；2-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)吡啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-(甲氧基)哌啶；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷；叔丁基5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-5-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷；(3S)-1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-3-醇；(5S)-1-乙酰基-3-(1，5-二氟苯基)-5-{3-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-氟氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；7-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1，4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1-苯基哌嗪-2-酮；5-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)-2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1-甲基哌嗪-2-酮；叔丁基4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-1-羧酸酯；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}硫代吗啉1，1-二氧化物；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-丙基哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-异丁酰哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(2，2二甲基丙酰基)哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(2，2异丙磺酰基)哌嗪；甲基4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-1-羧酸酯；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二甲氧基哌啶；或其可药用盐或立体异构体。
本发明的化合物可能具有不对称中心、手性轴和手性平面(如E.L.Eliel and S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，JohnWiley & Sons，New York，1994，1119-1190页的描述)，并且作为外消旋体、外消旋混合物和各个非对映异构体存在，具有所有可能的异构体及其混合物，包括光学异构体，所有这些立体异构体都包含在本发明中。此外，此处公开的化合物可以作为互变异构体存在，两种互变异构体形式都包括在本发明的范围中，但仅仅描述了一种互变异构体。
当任何变量(如R7、R8、Rb等)在任何成分中出现一次以上时，其对每一次出现的定义不依赖于其它出现。同样，取代基和变量的组合是允许的，前提是所述组合能够得到稳定的化合物。取代基的环体系中的线代表指出的键可以连接于任何可取代的环原子。如果环体系是多环的，键仅仅连接于最接近的环上的合适碳原子。
应该理解，本领域技术人员可以选择本发明化合物上的取代基和取代模式，以提供化学上稳定，并且可以通过本领域公知的技术和下文描述的方法，从容易获得的原料容易地合成的化合物。如果取代基本身被一个以上基团取代，应该理解，这些多个基团可以在相同的碳或不同的碳上，只要得到稳定的结构。短语“任选被一个或多个取代基取代”应该与短语“任选被至少一个取代基取代”相同，在此情况下，另一实施方式将具有0-3个取代基。
本文使用的“烷基”包括支链和直链的饱和脂族烃基，其具有指定数目的碳原子。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10定义为包括具有以线性或分支排列的具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳的基团。例如，“C1-C10烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。术语“环烷基”是指具有指定碳原子数的单环饱和脂族烃基。例如，“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基等。在本发明的一种实施方案中，术语“环烷基”包括上文描述的基团，还包括单环不饱和脂族烃基。例如，本实施方案中定义的“环烷基”包括环丙基、甲基-环丙基、2，2-二甲基-环丁基、2-乙基-环戊基、环己基、环戊烯基、环丁烯基等。
术语“亚烷基”是指具有指定数目的碳原子的烃双基团。例如，“亚烷基”包括-CH2-、-CH2CH2-等。
当用于短语“C1-C6芳烷基”和“C1-C6杂芳烷基”时，术语“C1-C6”是指该部分的烷基部分，并且不描述该部分的芳基和杂芳基部分的原子数目。
“烷氧基”表示通过氧桥连接的指定数目碳原子的环状或非环状烷基。因此，“烷氧基”包含上文烷基和环烷基的定义。
如果没有指出碳原子的数目，术语“烯基”是指非芳族烃基，其是直链、支链或环状，包含2-10个碳原子，和至少一个碳与碳之间的双键。优选存在一个碳与碳之间的双键，可以存在最多4个非芳族碳-碳双键。因此，“C2-C6烯基”表示具有2-6个碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和环己烯基。烯基的直链、支链或环状部分可以包含双键，并且如果指出取代的烯基，它们可以被取代。
术语“炔基”指直链、支链或环状的烃基，包含2-10个碳原子，和至少一个碳与碳之间的三键。可以存在最多3个碳-碳三键。“C2-C6炔基”表示具有2-6个碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直链、支链或环状部分可以包含三键，并且如果指出了取代的炔基，它们可以被取代。
在某些情况下，取代基可以用包括0的一系列碳限定，如(C0-C6)亚烷基-芳基。如果芳基是苯基，该定义将包括苯基本身，以及-CH2Ph-、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
本文使用的“芳基”是指任何稳定的单环或双环，每个环具有最多7个原子，其中至少一个环是芳环。所述芳基的实例包括苯基、萘基、四氢萘基、茚满基和联苯基。当芳基取代基是双环，并且一个环是非芳环时，应该理解，是通过芳环进行连接的。
本文使用的术语杂芳基表示稳定的单环或双环，每个环具有最多7个原子，其中至少一个环是芳环，并且含有1-4个选自O、N和S的杂原子。该定义范围内的杂芳基包括但不限于吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹琳基、异喹琳基、唑基、异唑基、吲哚基、吡嗪基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氢喹琳。对于下文杂环的定义，“杂芳基”也理解为包括任何含氮杂芳基的N-氧化物衍生物。当杂芳基取代基是双环，并且一个环是非芳环或不含杂原子时，应该理解，连接是分别通过芳环或通过含有杂原子的环。
本文使用的术语“杂环”或“杂环基”表示3-10元的芳族或非芳族杂环，其含有1-4个选自O、N和S的杂原子，并且包括双环基团。因此，“杂环基”包括上述杂芳基及其二氢和四氢类似物。“杂环基”的其它实例包括但不限于以下基团氮杂环丁基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、曾啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲哚吖嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘吡啶基(naphthpyridinyl)、二唑基、唑基、唑啉、异唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、四氢异喹琳基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、1，4-二烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、哌啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。杂环取代基的连接是通过碳原子或通过杂原子。
在-种实施方案中，本文使用的术语“杂环”或“杂环基”表示5-10元的芳族或非芳族杂环，其含有1-4个选自O、N和S的杂原子，并且包括双环基团。因此，本实施方案的“杂环基”包括上述杂芳基及其二氢和四氢类似物。“杂环基”的其它实例包括但不限于以下基团苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、曾啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲哚吖嗪基、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、异唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、四氢异喹琳基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁基、1，4-二烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、哌啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。杂环取代基的连接是通过碳原子或通过杂原子。
在另一种实施方案中，杂环选自2-氮杂酮、苯并咪唑基、2-二氮杂酮、咪唑基、2-咪唑烷二酮、吲哚基、异喹琳基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶二酮、2-嘧啶二酮、2-吡咯烷二酮、喹琳基、四氢呋喃基、四氢异喹琳基和噻吩基。
如本领域技术人员可以理解的，本文使用的“卤代”或“卤素”包括氯、氟、溴和碘。
烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基取代基可以被取代或不取代，除非特别指出相反的意思。例如，(C1-C6)烷基可以被一个、两个或三个选自OH、氧代、卤素、烷氧基、二烷基氨基或诸如吗啉基、哌啶基的杂环基等取代。在此情况下，如果一个取代基是氧代，另一个是OH，则定义中包含以下基团-C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)等。
如此处的定义， (也称作“环A”)代表每个环都是3-7元环的单环、双环或多环含氮杂环，其中与本发明化合物的其余部分连接的点是通过环中的氮。该定义中还包括除连接氮之外，还具有一个或两个选自N、O和S的额外杂原子的杂环。环A可以进一步任选被一个或多个选自R6的取代基取代。所述环A杂环的实例包括，但不限于以下基团 以下示出了当位于同一碳原子上的R3和R4组合形成-(CH2)u-时形成的部分
此外，所述环状部分可以任选包含一个或两个杂原子。所述含杂原子的环状部分的实例包括，但不限于 在某些情况下，R7和R8可以与其连接的氮一起形成每个环都是5-7元环的单环或双环杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个额外的选自N、O和S的杂原子，所述杂环任选被一个或多个选自R6的取代基取代。可以由此形成的杂环的实例包括但不限于以下那些，其中杂环任选被一个或多个(在另一种实施方案中是一个、两个或三个)选自R6的取代基取代
在另一种实施方案中，环A选自 它们任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代。
在一种实施方案中，R1选自C1-C10烷基。在该实施方案的另一方面，R1是甲基。
在另一种实施方案中，R2选自C1-C10烷基、卤素和OH。在该实施方案的另一方面，R2是氟。
在一种实施方案中，R3是氟。
在一种实施方案中，R4是氢。
在一种实施方案中，R6选自(C＝O)aOb(C1-C10)烷基、Ob(C1-C3)全氟代烷基、氧代、OH、卤素、(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基、(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基和S(O)mRa；所述烷基、芳基和杂环基任选被一个或两个选自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、卤素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧和N(Rb)2的取代基取代；或与相同碳原子连接的两个R6一起形成-(CH2)u-，其中u是3-6，并且一个或两个碳原子任选被选自O、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分取。
本发明包括游离形式的式I化合物及其可药用盐和立体异构体。此处举例说明的一些特定化合物是胺化合物的质子化盐。术语“游离形式”是指非盐形式的胺化合物。所包括的可药用盐不仅包括对此处描述的具体化合物所列举的盐，也包括游离形式的式I化合物的所有典型可药用盐。可以用本领域公知的技术分离描述的游离形式的特定盐化合物。例如，可以通过用合适碱的稀水溶液，如NaOH、碳酸钾、氨水和碳酸氢钠的稀水溶液处理盐而产生游离形式。游离形式可以在某些物理特性，如在极性溶剂中的溶解度方面与它们各自的盐形式在某种程度上不同，但酸式和碱式盐与用于本发明目的的它们各自的游离形式在其它方面是药学上等同的。
可以通过常规化学方法，从含有酸或碱部分的本发明的化合物合成这些化合物的可药用盐。通常，通过离子交换色谱或通过使游离碱在合适的溶剂或多种溶剂组合中与化学计量的或过量的所需成盐无机或有机酸反应而制备碱性化合物的盐。类似地，通过与合适的无机或有机碱反应而形成酸性化合物的盐。
因此，本发明的可药用盐包括本发明化合物的常规无毒盐，它们是通过将碱性化合物与无机或有机酸反应而形成的。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐，以及从有机酸如醋酸、丙酸、丁二酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸等制备的盐。
当本发明的化合物是酸性时，合适的“可药用盐”是指从包括无机碱和有机碱的可药用无毒碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝、铵、钙、铜、三价铁、二价铁、锂、镁、锰盐、二价锰、钾、钠、锌等。特别优选的是铵、钙、镁、钾和钠盐。得自可药用有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺、和叔胺、取代的胺，包括天然存在的取代的胺、环状胺和碱性离子交换树脂，如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基亚乙基二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、亚乙基二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、组氨酸、hydrabamine、异丙胺、亮氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、tromethamine等的盐。当本发明的化合物是酸性时，术语“游离形式”是指非盐形式的化合物，使得酸官能团仍然是质子化的。
上文描述的可药用盐和其它典型可药用盐的制备更完整地描述于Berg et at.，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.ScL，1977661-19。
也应该注意，本发明的化合物可能是内盐或两性离子，因为在生理条件下，化合物中去质子化的酸部分，如羟基，可以是阴离子，该电荷随后可能在内部被质子化或烷基化的碱部分，如季氮原子的阳离子电荷中和。也可以将具有内部平衡的电荷，因此不与分子间相反离子缔合的分离的化合物考虑为“游离形式”的化合物。
可以采用以下路线所示的反应和本领域公知或在实验程序中举例说明的其它操作制备本发明的化合物。因此，下面列出的示例路线不限于列出的化合物或用于举例说明目的的任何特定取代基。路线中示出的取代基编号不一定与用于权利要求中的编号相关，并且通常为了清楚，示出单取代基与化合物连接，其中在上文式I的定义中允许多个取代基。
路线如路线A所示，合适取代的苯基异羟肟酸酯A-1与合适取代的乙炔A-2的反应提供了苯甲酰炔中间体A-3。铜介导的合适取代的苯基的偶合提供了中间体A-4。中间体A-4然后可以在乙酰氯存在下与肼进行反应，提供N-酰基二氢吡唑A-5。末端羟基的去保护提供了中间体A-6。
路线B显示了用替代的羟基保护基进行的类似反应系列，以制备中间体B-5。该路线也说明了杂环A的掺入，以提供本发明的化合物B-7。
路线A
路线B 用途本发明的化合物可以用于多种应用。本领域技术人员可以理解，有丝分裂可以以多种方式进行改变；即，可以通过增加或减少有丝分裂途径中成分的活性而影响有丝分裂。不同地指出，可以通过干扰平衡影响(如破坏)有丝分裂，所述干扰平衡是通过抑制或活化某些成分。可以用相似方法改变减数分裂。
在一种实施方案中，本发明的化合物被用于调节有丝分裂纺锤体形成，由此导致延长有丝分裂中的细胞周期停滞。“调节”在此处表示改变有丝分裂纺锤体形成，包括增加和减少纺锤体形成。“有丝分裂纺锤体形成”在此表示通过有丝分裂驱动蛋白将微管组织成双极结构。“有丝分裂纺锤体功能障碍”在此表示有丝分裂停滞和单极纺锤体形成。
本发明的化合物用于结合有丝分裂驱动蛋白，和/或调节其活性。在一种实施方案中，有丝分裂驱动蛋白是bimC超家族的有丝分裂驱动蛋白(如美国专利的No.6,284,480第5栏的描述)的成员。在进一步的实施方案中，有丝分裂驱动蛋白是人KSP，但其它生物的有丝分裂驱动蛋白的活性也可以由本发明的化合物调节。在此内容中，调节表示增加或减少纺锤体极分离，导致有丝分裂纺锤体极的畸形，即张开，或导致有丝分裂纺锤体的形态干扰。KSP的变体和/或片段也包括在用于这些目的的KSP定义中。此外，本发明的化合物可以抑制其它有丝分裂驱动蛋白。
本发明的化合物用于治疗细胞增殖疾病。可以由本文提供的方法和组合物治疗的疾病状态包括但不限于癌症(下文进一步讨论)、自身免疫疾病、关节炎、移植物排斥、炎性肠病、包括但不限于手术、血管成形术等的医学程序后诱导的增殖。可以理解，在一些情况下，细胞可能不是过度增殖或增殖不足的状态(异常状态)，但仍然需要治疗。例如，在创伤愈合过程中，细胞可能“正常”增殖，但可能需要增强增殖。类似地，如上文的讨论，在农业领域，细胞可能处于“正常”状态，但可能需要增殖调节，以通过直接增强作物生长或通过抑制不利影响作物的植物或生物来增强作物。因此，在一种实施方案中，本发明在此提供了对受到这些病症或状态的影响，或可能最终变得受到这些病症或状态的影响的细胞或个体的应用。
本文提供的化合物、组合物和方法在治疗包括实体瘤，如皮肤、乳腺、脑、宫颈癌、睾丸癌等的癌症时被认为是特别有用的。具体地，可以用本发明的化合物、组合物和方法治疗的癌症包括但不限于心脏肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺支气管癌(鳞状细胞、未分化的小细胞、未分化的大细胞、腺癌)、肺泡(支气管肺泡)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨错构瘤、间皮瘤；胃肠道食道(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(腺管腺癌、胰岛素瘤、高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌、VIP瘤)、小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌、卡波西肉瘤、平滑肌肉瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)、大肠(腺癌、管腺瘤、绒毛腺瘤、错构瘤、平滑肌肉瘤)；生殖泌尿道肾(腺癌、Wilm肿瘤[成肾细胞瘤]、淋巴瘤、白细胞)、膀胱和输尿管(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、类腺瘤、脂肪瘤)；肝脏肝细胞瘤(肝细胞癌)、胆管癌、成肝细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞腺瘤、血管瘤；骨骨源性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、Ewing肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞肿瘤、脊索瘤、osteochronfroma(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统颅(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、畸形性骨炎)、脑膜(脑膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤)、脑(星形细胞瘤、成髓细胞瘤、胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、多形性成胶质细胞瘤、寡突胶质细胞瘤、施旺细胞瘤、成视网膜细胞瘤、先天肿瘤)、脊髓(神经纤维瘤、脑膜瘤、胶质瘤、肉瘤)；妇产科子宫(内膜癌)、宫颈(宫颈癌、肿瘤前宫颈发育异常)、卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类癌]、颗粒细胞-鞘细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤)、外阴(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)、阴道(透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄样肉瘤(胚胎横纹肌肉癌)、输卵管(癌)；血液系统血液(髓细胞白血病[急性和慢性])、急性成淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖疾病、多发性骨髓瘤、骨髓发育不良综合征)、何杰金病、非何杰金淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮肤恶性骨髓瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、moles dysplastic nevi、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕疙瘩、牛皮癣；和肾上腺成神经细胞瘤。因此，本文提供的术语“癌细胞”包括受到上述任意状况影响的细胞。
本发明的化合物也可以用作抗真菌剂，这是通过其调节如美国专利No.6,284,480所述的bimC驱动蛋白亚组的真菌成员的活性而实现的。
本发明的化合物可以根据标准药学实践，单独或与可药用载体、赋形剂或稀释剂组合，在药物组合物中施用于哺乳动物，优选人。可以口服或肠胃外使用化合物，包括静脉内、肌内、腹膜内、皮下、直肠和表面施用。
含有活性成分的药物组合物可为适合口服用途的剂型，如片剂、锭剂、糖锭，水性或油性悬浮液，可分散性粉剂或者颗粒剂，乳液、硬胶囊或软胶囊，或糖浆剂或者酏剂。预计用于口服用途的组合物可根据药物组合物生产领域公知的任何方法制备并且该种组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂，以提供药学上美观和适口的制剂。片剂含有与适于生产片剂的无毒的可药用赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可为例如惰性的稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或者磷酸钠；造粒剂和崩解剂，如微晶纤维素、Sodium crosscarmellose、玉米淀粉或者海藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或者阿拉伯胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。片剂可无包衣或可通过已知技术进行包衣，从而掩盖药物不佳的味道或延迟在胃肠道内的崩解和吸收，并从而在较长时段内提供持续作用。例如，可以使用水溶性口味掩盖材料，如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或时间延迟材料，如乙基纤维素、乙酸纤维素丁酸酯。
口服用制剂也可作为硬明胶胶囊形式存在，其中的活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或者高岭土混合；或者作为软明胶胶囊形式存在，其中活性成分与水溶性载体如聚乙二醇或者油性介质如花生油、液状石蜡或者橄榄油混合。
水性悬浮液含有与适于生产水性悬浮液的赋形剂混合的活性物质。所述赋形剂为悬浮剂，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可为天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物，如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，如十七亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇的偏酯的缩合产物如聚氧化乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液也可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味料如蔗糖、糖精或者阿斯巴甜。
油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或者椰子油，或悬浮在矿物油如液状石蜡中制备。油性悬浮液可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入如上述的甜味剂和调味剂以提供适口性的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如丁基化的羟基苯甲醚或α-生育酚进行保存。
适于通过加入水制备水性悬浮液的可分散性粉剂和颗粒剂提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂的例子如上所述。也可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸进行保存。
本发明的药物组合物也可为水包油乳液形式。油相可为植物油例如橄榄油或者花生油，或为矿物油例如液状石蜡，或者这些物质的混合物。适当的乳化剂可为天然存在的磷脂例如大豆卵磷脂，以及得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或者偏酯，如单油酸脱水山梨醇酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧化乙烯单油酸脱水山梨醇酯。乳液还可含有甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂。
糖浆剂和酏剂可与甜味剂一起进行配制，例如使用甘油、丙二醇、山梨醇或者蔗糖。这种制剂还可含有缓和剂、防腐剂、调味剂以及着色剂和抗氧化剂。
药物组合物可以是无菌注射用水溶液的形式。可以使用的可药用载体和溶剂包括水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。
无菌注射用制剂也可以是无菌注射用水包油微乳液，其中活性成分溶解于油相中。例如，可以首先将活性成分溶解于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液加入水和甘油的混合物，加工形成微乳液。
可以通过局部快速浓注，将注射液或微乳液导入患者血流。或者，有利地是以维持本发明化合物的恒定循环浓度的方式施用溶液或微乳液。为了维持所述恒定浓度，可以利用连续静脉内送递装置。所述装置的实例是Deltec CADD-PLUSTM5400型静脉内泵。
药物组合物可为用于肌内和皮下施用的无菌注射用水性或油性悬浮液形式。悬浮液可根据本领域已知的那样使用那些上述的适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂进行配制。无菌注射用制剂还可为在无毒的非肠道可接受的稀释剂或者溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液形式，如作为1，3-丁二醇中的溶液形式。另外，通常使用无菌的非挥发油类作为溶剂或者悬浮介质。为此可使用任何的刺激性少的非挥发油，包括人造甘油一酯或者甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可用在注射制剂中。
式I的化合物还可以直肠施用的栓剂形式施用。这些组合物可通过将药物与适当的在常温下为固体但是在直肠温度下为液体并从而在直肠中熔化以释放药物的无刺激性的赋形剂混合制备。所述物质包括可可脂、甘油化的明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物，和聚乙二醇的脂肪酸酯。
对于表面应用，可使用含有式I化合物的霜剂、膏剂、胶冻剂、溶液或者悬浮液等。(为了这一应用，表面施用应该包括嗽口水和含漱剂。)可以通过局部使用合适的鼻内载体和送递装置，或采用本领域技术人员公知的经皮贴剂通过经皮途径施用本发明的化合物。为了以经皮送递系统的形式施用，当然，在施用方案中，施用应该是连续而非间断的。本发明的化合物也可以作为使用诸如可可脂、甘油化的明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物，和聚乙二醇的脂肪酸酯的栓剂基的栓剂送递。
当本发明的化合物施用给受试者时，通常将由处方医生确定每日剂量，剂量通常根据个体患者的年龄、体重、性别和反应，以及患者的症状的严重程度而改变。
在一种示例的应用中，给进行癌症治疗的哺乳动物施用适量的化合物。施用量是每日大约0.1mg/kg体重-大约60mg/kg体重，优选每日大约0.5mg/kg体重-大约40mg/kg体重。
本发明的化合物也可以与已知的治疗剂和抗癌剂联合使用。例如，例如，本发明的化合物与已知抗癌剂联合使用。本发明公开的化合物与其它抗癌剂或化疗剂的联合包括在本发明的范围内。所述药剂的实例可以参见Cancer Principles and Practice of Oncology，V.T.Devita and S.Hellman(编者)，第6版(2001年2月15日)，LippincottWilliams & Wilkins出版社。本领域技术人员基于药物和涉及的癌症的特定特征，能够分辨哪些联合将是有用的。所述抗癌剂包括但不限于以下药剂雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒性/细胞抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和其它血管发生抑制剂、细胞增殖和存活信号传递的抑制剂、凋亡诱导剂和细胞周期关卡干扰剂。当与放疗共同施用时，本发明的化合物特别有用。
在一种实施方案中，本发明的化合物也可以与公知的抗癌剂联合，所述抗癌剂包括以下药剂雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、类视黄醇受体调节剂、细胞毒性剂、抗增殖剂、异戊烯基蛋白转移酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂，和其它血管发生抑制剂。
“雌激素受体调节剂”是指干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物，而不论是何机理。雌激素受体调节剂的实例包括但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、涛瑞米芬、fulvestrant、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧基丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并呋喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯、4，4′-二羟基苯酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。
“雄激素受体调节剂”是指干扰或抑制雄激素与受体结合的化合物，而不论是何机理。雄激素受体调节剂的实例包括但不限于非那雄胺和其它5α还原酶抑制剂、尼鲁米特、氟利坦、比卡鲁胺、利阿唑和abiraterone acetate。
“类视黄醇受体调节剂”是指干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物，而不论是何机理。所述类视黄醇受体调节剂的实例包括bexarotene、维A酸、13-顺式视黄酸、9-顺式视黄酸、α-氟甲基鸟氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4′-羟基苯基)视黄酰胺和N-4-羧苯基视黄酰胺。
“细胞毒性剂/细胞抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞的功能或抑制或干扰细胞有丝分裂而导致细胞死亡或抑制细胞增殖的化合物，包括烷化剂、肿瘤坏死因子、嵌入剂、缺氧可活化的化合物、微管抑制剂/微管稳定剂、有丝分裂驱动蛋白抑制剂、参与有丝分裂进程的激酶的抑制剂、抗代谢剂；生物反应调节剂；激素/抗激素治疗剂、造血生长因子、单克隆抗体靶定的治疗剂、拓扑异构酶抑制剂、蛋白酶体抑制剂和遍在蛋白连接酶抑制剂。
细胞毒性剂的实例包括，但不限于sertenef，肿瘤坏死因子，异环磷酰胺，tasonermin，氯尼达明，卡铂，六甲蜜胺，泼尼莫司汀，二溴卫矛醇，雷诺氮芥，福泰氮芥，奈达铂，奥沙利铂，泰莫佐罗，heptaplatin，雌莫司汀，二丙胺磺酯，氯乙环磷酰胺，尼莫司汀，螺溴丙酰胺，嘌米舌泊，乐铂，satraplatin，profiromycin，顺铂，irofulven，dexifosfamide，顺式-胺二氯(2-甲基-吡啶)铂，苄基鸟嘌呤，glufosfamide，GPX100，(反式，反式，反式)-二-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu-[二胺-铂(II)]二[二胺(氯)铂(II)]四氯化物，二氮杂环丁烷基精胺，三氧化砷，1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一氨基)-3，7-二甲基黄嘌呤，佐柔比星，伊达比星，柔红霉素，比桑那，米托蒽醌，吡喃阿霉素，pinafide，戊柔比星，amrubicin，抗酮瘤，3′-脱氨基-3′-吗啉代-13-脱氧-10-羟基洋红霉素，安那霉素，galarubicin，elinafide，MEN10755，和4-脱甲氧基-3-脱氨基-3-氮杂环丙烷基-4-甲基磺酰基-柔红霉素(参见WO 00/50032)。
缺氧可活化的化合物的一个实例是替拉扎明。
蛋白体抑制剂的实例包括但不限于lactacystin和MLN-341(Velcade)。
微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇，硫酸长春地辛，3′，4′-二氢-4′-脱氧-8′-去甲长春花碱，多西紫杉，根霉素，dolastatin，mivobulin羟乙基磺酸盐，auristatin，cemadotin，RPR109881，BMS184476，vinflunine，cryptophycin，2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺，脱水长春碱，N，N-二甲基-L-缬氨酰基-L-缬氨酰基-N-甲基-L-缬氨酰基-L-脯氨酰基-L-脯氨酸-t-丁基酰胺，TDX258，环氧硫酮类(epothilones)(参见例如美国专利6,284,781和6,288,237)和BMS188797。
拓扑异构酶抑制剂的一些实例是拓扑替康，hycaptamine，伊立替康，rubitecan，6-乙氧基丙酰基-3′，4′-O-外型-亚苄基-教酒菌素，9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺，l-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′b，7]吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮，lurtotecan，7-[2-(N-异丙基氨基)乙基]-(20S)喜树碱，BNP1350，BNPI1100，BN80915，BN80942，磷酸依托泊甙，替尼泊甙，sobuzoxane，2′-二甲基氨基-2′-脱氧-依托泊甙，GL331，N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-羧酰胺，asulacrine，(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋(3′，4′6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮，2，3-(亚甲基二氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶，6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮，5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮，N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺，N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-羧酰胺，6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚[2，1-c]喹啉-7-酮，和dimesna。
有丝分裂驱动蛋白，并且特别是人有丝分裂驱动蛋白KSP的抑制剂的实例公开在PCT公开WO 01/30768，WO 01/98278，WO 03/050,064，WO 03/050,122，WO 03/049,527，WO 03/049,679，WO 03/049,678和WO 03/39460和待决PCT申请US 03/06403(2003年3月4日提交)，US03/15861(2003年5月19日提交)，US 03/15810(2003年5月19日提交)，US03/18482(2003年6月12日提交)和US 03/18694(2003年6月12日提交)。在一种实施方式中，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括，但不限于KSP的抑制剂，MKLP1的抑制剂，CENP-E的抑制剂，MCAK的抑制剂，Kifl4的抑制剂，Mphosphl的抑制剂和Rab6-KIFL的抑制剂。
“参与有丝分裂进程的激酶的抑制剂”包括，但不限于，极光型(aurora)激酶的抑制剂，Polo样激酶(PLK)的抑制剂(特别是PLK-1的抑制剂)，bub-1的抑制剂和bub-R1的抑制剂。
“抗增殖剂”包括反义RNA和DNA寡核苷酸，例如G3139，ODN698，RVASKRAS，GEM231和INX3001，和抗代谢药，例如依诺他滨，卡莫氟，替加氟，喷托他丁，多西氟尿啶，曲麦克特，氟达拉宾，卡培他滨，galocitabine，阿糖胞苷酯，fosteabine钠水合物，raltitrexed，paltitrexid，emitefur，噻唑呋林，脱氧氮杂胞苷，nolatrexed，pemetrexed，nelzarabine，2′-脱氧-2′-亚甲基胞苷，2′-氟亚甲基-2′-脱氧胞苷，N-[5-(2，3-二氢-苯并呋喃基)磺酰基]-N′-(3，4-二氯苯基)脲，N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯酰基]甘氨酰基氨基]-L-甘油-B-L-甘露-吡喃庚糖基]腺嘌呤，aplidine，ecteinascidin，troxacitabine，4-[2-氨基4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩基-L-谷氨酸，氨基蝶呤，5-flurouracil，丙氨菌素，11-乙酰基-8-(氨基甲酰氧基甲基)-4-甲酰基-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环并(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯，swainsonine，洛美曲索，右丙亚胺，methioninase，2′-氰基-2′-脱氧-N4-棕榈酰基-1-B-D-呋喃阿拉伯糖基胞嘧啶，和3-氨基吡啶-2-羧醛缩氨基硫脲。
单克隆抗体靶定的治疗剂的实例包括那些含有与癌细胞特异性或靶细胞特异性单克隆抗体相连的细胞毒性剂或放射性同位素的治疗剂。实例包括Bexxar。
“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二醛-CoA还原酶的抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR，参见美国专利4,231,938、4,294,926和4,319,039)；辛伐他汀(ZOCOR，参见美国专利4,444,784、4,820,850和4,916,239)；普伐他汀(PRAVACHOL，参见美国专利4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)；氟伐他汀(LESCOL，参见美国专利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)和阿伐他汀(LIPITOR，参见美国专利5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。本发明方法中可以使用的这些和其他HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式公开在M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry & Industry，pp.85-89(1996年2月5日)的第87页和美国专利4,782,084和4,885,314中。本文使用的术语HMG-CoA还原酶抑制剂包括具有HMG-CoA还原酶抑制活性的化合物的所有药学可接受内酯和开环酸形式(即，其中内酯环打开形成游离酸)以及盐和酯形式，因此这些盐、酯、开环酸和内酯形式的应用属于本发明的范围内。
异戊烯基蛋白转移酶抑制剂是指抑制异戊烯基蛋白转移酶的一种或任意组合的化合物，包括法呢基-蛋白质转移酶(FPTase)，I型香叶基香叶基-蛋白质转移酶(GGPTase-I)和II型香叶基香叶基-蛋白质转移酶(GGPTase-II，也称作RabGGPTase)。
异戊烯基蛋白转移酶抑制剂的其他实例可以参见下列文献和专利WO 96/30343，WO 97/18813，WO 97/21701，WO 97/23478，WO97/38665，WO 98/28980，WO 98/29119，WO 95/32987，美国专利号5,420,245，美国专利号5,523,430，美国专利号5,532,359，美国专利号5,510,510，美国专利号5,589,485，美国专利号5,602,098，欧洲专利公开0 618 221，欧洲专利公开0 675 112，欧洲专利公开0 604181，欧洲专利公开0 696 593，WO 94/19357，WO 95/08542，WO 95/11917，WO95/12612；WO 95/12572，WO 95/10514，美国专利号5,661,152，WO95/10515，WO 95/10516，WO 95/24612，WO 95/34535，WO 95/25086，WO 96/05529，WO 96/06138，WO 96/06193，WO 96/16443，WO96/21701，WO 96/21456，WO 96/22278，WO 96/24611，WO 96/24612，WO 96/05168，WO 96/05169，WO 96/00736，美国专利号5,571,792，WO 96/17861，WO 96/33159，WO 96/34850，WO 96/34851，WO96/30017，WO 96/30018，WO 96/30362，WO 96/30363，WO 96/31111，WO 96/31477，WO 96/31478，WO 96/31501，WO 97/00252，WO97/03047，WO 97/03050，WO 97/04785，WO 97/02920，WO 97/17070，WO 97/23478，WO 97/26246，WO 97/30053，WO 97/44350，WO98/02436，和美国专利号5,532,359。异戊烯基蛋白转移酶抑制剂作用于血管发生的实例参见European J.of Cancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。
“血管发生抑制剂”是指无论机理如何的能够抑制新血管形成的化合物。血管发生抑制剂的化合物包括，但不限于，酪氨酸激酶抑制剂，例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR20)的抑制剂，表皮衍生的、成纤维细胞衍生的或血小板衍生的生长因子的抑制剂，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，包括非甾类抗炎药物(NSAIDs)如阿司匹林和布洛芬以及选择性环加氧酶-2抑制剂如塞来昔布和洛芬昔布(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))，甾族抗炎药(例如皮质类固醇，盐皮质类固醇，地塞米松，强的松，强的松龙，甲强龙，倍他米松)，羧酰氨基三唑，combretastatin A-4，角鲨胺，6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1，血管紧张素II拮抗剂(参见Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))，和VEGF的抗体(参见，Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(October 1999)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777；和WO00/61186)。
其他调节或抑制血管发生并且也可以与本发明的化合物联合的治疗剂包括调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解系统的药物(参见Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000)的综述)。此类调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解途径的药物的实例包括，但不限于，肝素(参见Thromb.Haemost.8010-23(1998))，低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(也称作活性凝血酶可活化纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa]的抑制剂)(参见Thrombosis Res.101329-354(2001))。TAFIa抑制剂已经公开在PCT公报WO 03/013,526和美国专利系列号60/349,925(2002年1月18日提交)中。
“细胞周期关卡干扰剂”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶致使癌细胞对DNA破坏剂敏感的化合物。此类药物包括ATR、ATM的抑制剂，Chk1和Chk2激酶和cdk和cdc激酶的抑制剂并且特别例如是7-羟基staurosporin，flavopiridol，CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。
“细胞增殖和存活信号传递途径的抑制剂”是指抑制细胞表面受体和那些表面受体的信号转导级联下游的药物。此类药物包括EGFR的抑制剂的抑制剂(例如gefitinib和erlotinib)，ERB-2的抑制剂(例如司徒曼布)，IGFR的抑制剂，细胞因子受体的抑制剂，MET的抑制剂，PI3K的抑制剂(例如LY294002)，丝氨酸/苏氨酸激酶(包括但不限于Akt的抑制剂，例如WO 02/083064，WO 02/083139，WO 02/083140和WO 02/083138中所述的)，Raf激酶的抑制剂(例如BAY-43-9006)，MEK的抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制剂(例如Wyeth CCI-779)。此类药物包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。
“细胞凋亡诱导剂”包括TNF受体家族成员(包括TRAIL受体)的激活剂。
本发明还包括与是选择性COX-2抑制剂的NSAID的联合。出于本说明书的目的，作为COX-2的选择性抑制剂的NSAID被定义为具有对COX-2的抑制作用高于对COX-1至少100倍的特异性化合物，这是通过细胞或微粒体试验中所评估的对COX-2的IC50与对COX-1的IC50的比率测定的。此类化合物包括，但不限于下列公开的那些美国专利5,474,995，美国专利5,861,419，美国专利6,001,843，美国专利6,020,343，美国专利5,409,944，美国专利5,436,265，美国专利5,536,752，美国专利5,550,142，美国专利5,604,260，美国专利5,698,584，美国专利5,710,140，WO 94/15932，美国专利5,344,991，美国专利5,134,142，美国专利5,380,738，美国专利5,393,790，美国专利5,466,823，美国专利5,633,272，和美国专利5,932,598，上述文献均在此引入作为参考。
特别适用于本发明的治疗方法中的COX-2的抑制剂是3-苯基-4-(4-(甲基磺酰基)苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲基磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶或其可药用盐。
已经被认为是COX-2的特异性抑制剂并因此适用于本发明的化合物包括，但不限于parecoxb、CELEBREX和BEXTRA或其可药用盐。
血管发生抑制剂的其他实例包括，但不限于，endostatin，ukrain，ranpirnase，IM862，5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙烷基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基(氯乙酰基)氨基甲酸酯，乙酰基dinanaline，5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰基)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺，CM101，角鲨胺，combretastatin，RPI4610，NX31838，硫酸化甘露戊糖磷酸盐，7，7-(羰基-二[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯并羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亚氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)，和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-二氢吲哚酮(SU5416)。
如上所述，“整联蛋白阻断剂”是指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与αvβ3整联蛋白结合的化合物，是指选择性拮抗、抑制或阻碍生理配体与αvβ5整联蛋白结合的化合物，是指拮抗、抑制或阻碍生理配体与αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白两者结合的化合物，并且是指拮抗、抑制或阻碍表达在毛细管内皮细胞上的特定整联蛋白的活性的化合物。该术语还是指αvβ6，αvβ8，α1β1，α2β1，α5β1，α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该术语还是指αvβ3，αvβ5，αvβ6，αvβ8，α1β1，α2β1，α5β1，α6β1和α6β4整联蛋白的任意组合的拮抗剂。
酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异唑-4-甲酰胺，3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮，17-(烯丙基氨基)-17-脱甲氧基格尔德霉素，4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉，N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺，BIBX1382，2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟基甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3′，2′，1′-k1]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮杂环辛间四烯-1-酮，SH268，染料木素，STI571，CEP2563，4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯，4-(3-溴-4-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，4-(4′-羟基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，SU6668，STI571A，N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺，和EMD121974。
与除抗癌化合物之外的化合物的联合药物形式也属于本发明的方法内。例如，本发明所述的化合物与PPAR-γ(即PPAR-gamma)激动剂和PPAR-δ(即PPAR-delta)激动剂的联合适用于治疗某些恶性疾病。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧物酶体增殖物活化受体γ和δ。PPAR-γ在内皮细胞上的表达及其在血管发生中的参与作用已有文献报导(参见J.Cardiovasc.Phannacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.2000；412309-2317)。最近，PPAR-γ激动剂已经被证实在体外抑制对VEGF的血管发生反应；曲格列酮(troglitazone)和罗格列酮(rosiglitazone)马来酸盐抑制小鼠中视黄醛新血管形成的恶化(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激动剂和PPAR-γ/α激动剂的实例包括，但不限于，噻唑烷二酮类(例如DRF2725，CS-011，曲格列酮，罗格列酮，和吡格列酮)，非诺贝特，吉非贝齐，氯贝特，GW2570，SB219994，AR-H039242，JTT-501，MCC-555，GW2331，GW409544，NN2344，KRP297，NP0110，DRF4158，NN622，GI262570，PNU182716，DRF552926，2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并异唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(公开在USSN09/782,856)，和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色满-2-羧酸(公开在USSN60/235,708和60/244,697中)。
本发明的另一实施方式是此处所公开的化合物与基因疗法联合在治疗癌症中的应用。有关治疗癌症的基因策略的综述参见Hall等(Am JHum Genet 61785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，5th Ed，pp 876-889，BC Decker，Hamilton 2000)。基因疗法可以用于施加任何肿瘤抑制基因。此类基因的实例包括，但不限于，p53，它可以经重组病毒介导的基因传递来输送(参见例如美国专利号6,069,134)，uPA/uPAR拮抗剂(“Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPARAntagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth andDissemination in Mice，”Gene Therapy，August 1998；5(8)1105-13)，和干扰素γ(J Immunol 2000；164217-222)。
本发明的化合物还可以与固有多药耐药性(MDR)，特别是与转运蛋白的高水平表达有关的NDR的抑制剂联合使用。此类MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979，XR9576，OC144-093，R101922，VX853和PSC833(valspodar)。
本发明的化合物可以与止吐剂联合使用来治疗恶心或呕吐，包括急性，延迟型，晚期和早发性呕吐，这些呕吐可能是由本发明化合物单用或与放疗合用所导致的。为了预防或治疗呕吐，本发明的化合物可以与其他止吐剂合用，尤其是神经激肽-1受体拮抗剂，5HT3受体拮抗剂，例如奥丹西隆，格雷西隆，托吡西隆，和zatisetron，GABAB受体激动剂，例如巴氯芬，皮质类固醇例如甲氟烯索(地塞米松)，曲安奈德，去炎舒松，氟尼缩松，布地奈德，Benecorten或其他药物，例如公开在美国专利号2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的，抗多巴胺能药物，例如吩噻嗪类(例如普鲁氯嗪，氟非那嗪，硫利哒嗪和美索哒嗪)，甲氧氯普胺或屈大麻酚。为了治疗或预防施用本发明化合物可能导致的呕吐，优选采用与选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗剂和皮质类固醇的止吐剂的联合疗法。
和本发明化合物联合施用的神经激肽-1受体拮抗剂全面公开在，例如美国专利号5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；欧洲专利公开号EP 0 360 390、0 394 989、0428 434、0 429 366、0 430 771、0 436 334、0 443 132、0 482 539、0 498 069、0 499 313、0 512 901、0 512 902、0 514273、0 514 274、0 514 275、0 514 276、0 515 681、0 517 589、0 520 555、0 522 808、0 528 495、0 532 456、0 533 280、0 536 817、0 545 478、0 558156、0577 394、0 585 913、0 590 152，0 599 538、0 610 793、0 634 402、0 686 629、0 693 489、0 694 535、0 699 655、0 699 674、0 707 006、0 708101、0 709 375、0 709 376、0 714891、0 723 959、0 733 632和0 776 893；PCT国际专利公开号WO 90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099，93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170，94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042，95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；英国专利公报号2 266 529、2 268 931、2 269 170、2 269 590、2 271 774、2 292 144、2 293168、2293 169和2 302 689。这些化合物的制备全面公开在上述专利和公开中，其内容在此引入作为参考。
在一实施方式中，与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂选自2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或其药学可接受盐，其公开在美国专利号5,719,147中。
本发明的化合物也可以与双膦酸盐(理解为包括双膦酸盐、二膦酸盐、双膦酸和二膦酸)联合用于治疗或预防癌症，包括骨癌。双膦酸盐的实例包括但不限于依替膦酸钠(Didronel)、氨羟二膦酸二钠(Aredia)、阿伦膦酸钠(Fosamax)、利塞膦酸钠(Actonel)、zoledronate(Zometa)、伊本膦酸钠(Boniva)、incadronate或cimadronate、氯屈膦酸二钠、EB-1053、minodronate、neridronate、piridronate和tiludronate，包括其所有可药用盐、衍生物、水合物和混合物。
本发明的化合物还可以与治疗贫血的药物联合施用。此类贫血治疗药例如是连续红细胞生成受体激活剂(例如红细胞生成素α)。
本发明的化合物还可以与治疗嗜中性粒细胞减少症的药物联合施用。此类嗜中性粒细胞治疗剂例如是调节嗜中性粒细胞的生成和功能的造血生长因子，例如人粒细胞集落刺激因子，(G-CSF)。G-CSF的实例包括非格司亭。
本发明的化合物还可以与免疫增强药联合施用，例如左旋咪唑，异丙肌苷和胸腺肽。
所以，本发明的范围内包括本发明所述化合物与选自下列的第二化合物的联合应用雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞抑制剂，抗增殖剂，异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，HIV蛋白酶抑制剂，逆转录酶抑制剂，血管发生抑制剂，PPAR-γ激动剂，PPAR-δ激动剂，遗传性多药物抗性的抑制剂，止吐剂，双膦酸盐，贫血治疗剂，嗜中性粒细胞减少症治疗剂，免疫增强药，18)细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，细胞周期关卡干扰剂，和细胞凋亡诱导剂。
在本发明化合物的引用中术语“施用”和其变化形式(例如“施用”化合物)是指将所述化合物或该化合物的前药引入到需要治疗的动物系统中。当本发明的化合物或其前药与一种或多种其他活性剂(例如，细胞毒性剂等)联合提供时，“施用”及其变化形式各自理解为包括将所述化合物或其前药和其他药物并行和顺序引入。
在此使用的术语“组合物”包括含有特定量的特定组分的产品，以及任何直接或间接由特定量的特定组分的组合获得的产品。
在此使用的术语“治疗有效量”是指由研究人员、兽医、临床医生和其他临床工作者寻找到的活性化合物或药剂在组织、系统、动物或人体中产生生物或医学反应的量。
术语“治疗癌症”或“癌症的治疗”是指向患有癌性病症的哺乳动物施用并且通过杀死癌细胞来减轻癌性病症，而且产生抑制癌症生长和/或迁移的结果。
在一实施方式中，用作第二化合物的血管发生抑制剂选自酪氨酸激酶抑制剂，表皮衍生生长因子的抑制剂，成纤维细胞衍生生长因子的抑制剂，血小板衍生生长因子的抑制剂，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，羧酰胺基三唑，combretastatin A-4，角鲨胺(squalamine)，6-O-氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1，或VEGF的抗体。在一实施方式中，该雌激素受体调制剂为他莫昔芬或雷洛昔芬。
权利要求书的范围内还包括一种治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与放疗和/或与选自下列的化合物联合施用雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞抑制剂，抗增殖剂，异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，HIV蛋白酶抑制剂，逆转录酶抑制剂，血管发生抑制剂，PPAR-γ激动剂，PPAR-δ激动剂，遗传性多药物抗性的抑制剂，止吐剂，双膦酸盐，贫血治疗剂，嗜中性粒细胞减少症治疗剂，免疫增强药，细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，细胞周期关卡干扰剂，和细胞凋亡诱导剂。
本发明的另一实施方式涉及一种治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与紫杉醇或司徒曼布联合施用。
本发明进一步包括一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的式I的化合物与COX-2抑制剂联合施用。
本发明还包括一种用于治疗或预防癌症的药物组合物，其中含有治疗有效量的式I的化合物和选自下列的化合物雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞抑制剂，抗增殖剂，异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，HIV蛋白酶抑制剂，逆转录酶抑制剂，血管发生抑制剂，PPAR-γ激动剂，PPAR-δ激动剂，遗传性多药物抗性的抑制剂，止吐剂，双膦酸盐，贫血治疗剂，嗜中性粒细胞减少症治疗剂，免疫增强药，细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，细胞周期关卡干扰剂，和细胞凋亡诱导剂。
本发明的这些和其他方面将从本文的教导中更加清楚。
试验实施例中描述的本发明化合物通过下述试验测试并且发现具有驱动蛋白抑制活性。其他试验从文献中获知并很容易为本领域技术人员实施(参见，例如，PCT公开WO 01/30768，2001年5月3日，第18-22页)。
I.驱动蛋白ATPase体外试验人聚组氨酸标记的KSP运动结构域(KSP(367H))的克隆和表达表达人体KSP运动结构域构建体的质粒通过PCR用pBluescript全长人KSP构建体(Blangy等，Cell，vol.83，pp1159-1169，1995)作为模板进行克隆。用N-末端引物5′-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.1)和C-末端引物5′-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.2)来用于扩增该运动结构域和颈连接区。PCR产物用AseI和XhoI消化，连接到pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化产物且转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。
细胞在37℃下生长至OD600为0.5。将培养物冷却至室温后，KSP的表达用100μM IPTG诱导且持续培养过夜。细胞通过离心沉淀且用冰冷的PBS洗涤1次。将沉淀速冻且储存在-80℃。
蛋白纯化在冰上融化细胞沉淀团冰并再次悬浮在溶胞缓冲液(50mM K-HEPES，pH8.0，250mM KCl，0.1％吐温，10mM咪唑，0.5mMMg-ATP，1mM PMSF，2mM benzimidine，1x完全蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Roche))中。细胞混悬液与1mg/ml溶菌酶和5mM β-巯基乙醇在冰上温育10分钟，随后超声处理(3×30秒)。所有后续处理在4℃下进行。溶胞产物在40,000xg下离心40分钟。用缓冲液A(50mM K-HEPES，pH6.8，1mM MgCl2，1mM EGTA，10μM Mg-ATP，1mMDTT)稀释上清液且加载在SP琼脂糖柱(Pharmacia，5ml药筒)上，并用缓冲液A中的0-750mM KCl梯度洗脱。合并含有KSP的馏分且与Ni-NTA树脂(Qiagen)温育1小时。树脂用缓冲液B(溶胞缓冲液减少PMSF和蛋白酶抑制剂鸡尾酒)洗涤3次，随后培养15分钟3次并用缓冲液B洗涤。最后，将该树脂培养且用缓冲液C(除pH6.0之外与缓冲液B相同)洗涤15分钟共3次并倾入柱内。KSP用洗脱缓冲液(除150mM KCl和250mM咪唑之外与缓冲液B相同)洗脱。合并含KSP的馏分，在蔗糖中达到10％，并储存在-80℃。
从由牛脑分离的微管蛋白制备微管。1mg/ml的纯化微管蛋白(＞97％无MAP)在37℃下在10μM紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP的存在下于BRB80缓冲液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mMMgCl2，pH6.8)中聚合。通过超速离心将所得微管与未聚合微管蛋白分离并且除去上清液。将含有微管的沉淀团轻轻再悬浮于BRB80中的10μM紫杉醇，1mM DTT，50μg/ml氨苄西林和5ug/ml氯霉素酯内。
将该驱动蛋白运动结构域与微管、1mM ATP(1∶1MgCl2∶Na-ATP)和化合物在23℃下于含有80mM K-HEPES(pH7.0)、1mMEGTA、1mM DTT、1mM MgCl2和50mM KCl的缓冲液中温育。用80mM HEPES和50mM EDTA的最终缓冲组合物稀释2-10倍来终止该反应(或者，通过与反应体积1∶1的添加终止缓冲液(1.8M KCl和50mMEDTA)来终止该反应)。利用喹哪啶红/钼酸铵试验、通过加入1.5倍体积的猝灭剂C测定ATP水解反应得到的游离磷酸盐(例如，40μl反应体积+40μl终止缓冲液的混和物加入120μl猝灭剂C)。猝灭剂A含有0.1mg/ml喹哪啶红和0.14％聚乙烯醇；猝灭剂B在1.15M硫酸中含有12.3mM钼酸铵四水合物。猝灭剂C是2∶1比例的猝灭剂A∶猝灭剂B。该反应在23℃下保温5-10分钟，在540nm下测定磷-钼酸盐复合物的吸光度。
实施例中的化合物1-5和1-6通过上述试验测定且发现IC50≤50μM。
II.细胞增殖试验将细胞铺板在96孔组织培养皿中，使其密度能够在24、48和72小时期间呈对数生长且允许过夜附着。次日，化合物以10个点的半对数滴定度加入到所有平板内。各滴定系列按照一式三份进行，并且在整个试验过程中维持0.1％的恒定DMSO浓度。也包括0.1％DMSO单用的对照。各化合物稀释系列是在无血清培养基中进行。试验中在200μl体积的培养基中血清的终浓度是5％。在24、48和72小时时向滴定平板上的各样本和对照孔内加入20微升的Alamar蓝染色剂，随后加入药物并再次在37℃培养。在CytoFluorII平板读取器上用530-560纳米波长激发、590纳米发射在6-12小时后分析Alamar蓝色荧光度。
通过绘制X轴向上的化合物浓度和Y轴上的各滴定点时细胞生长的平均百分抑制率来获得细胞毒性EC50。单独用载体处理的对照孔内的细胞生长被定义为该试验的100％生长率，而将用化合物处理的细胞的生长与该值对比。采用内部专有软件计算百分细胞毒性值并且用对数4参数曲线拟合计算拐点。细胞毒性百分率被定义为％细胞毒性率(荧光对照)-(荧光样本)×100×(荧光对照)-1。
拐点报告为细胞毒性EC50。
III.FACS的有丝分裂停止和细胞凋亡的评估FACS分析通过测定经处理的细胞群的DNA含量用于评估一种化合物抑制细胞有丝分裂并引起细胞凋亡的性能。将细胞以1.4×106个细胞/6cm2组织养皿的密度接种并令其粘附过夜。随后细胞用载体(0.1％DMSO)或滴定系列的化合物处理8-16小时。处理后，通过胰蛋白酶在指定时间内作用并离心沉淀而收获细胞。细胞沉淀团在PBS中漂洗并固定在70％乙醇中，储存在4℃下过夜或更长时间。
对于FACS分析，沉淀至少500,000个固定细胞并通过抽吸除去70％乙醇。随后该细胞在4℃下与RNase A(50Kunitz单位/ml)和碘化丙锭(50pg/ml)温育30分钟，并且用Becton Dickinson FACSCaliber分析。用Modfit细胞周期分析模型软件(Verity Inc.)分析数据(得自10,000个细胞)。
通过绘制X轴上的化合物浓度和Y轴上的各滴定点的细胞周期的G2/M相中的细胞百分率(通过碘化丙锭荧光测定)来获得有丝分裂停止的EC50。利用SigmaPlot程序分析数据，用对数4参数曲线拟合计算拐点。拐点报告为有丝分裂停止的EC50。采用类似方法测定化合物细胞凋亡的EC50。此处，各滴定点处凋亡细胞的百分率(由碘化丙锭荧光测定)绘制在Y轴上，并且按照上述方法进行类似的分析。
IV.检测单极纺锤体的免疫荧光显微镜检查法用于DNA、微管蛋白和粒周蛋白(pericentrin)的免疫荧光染色的方法基本上如同Kapoor等(2000)J.Cell Biol.150975-988所述。为了细胞培养的研究，将细胞铺板在组织培养物处理的玻璃隔室玻片上且令其粘附过夜。随后细胞与感兴趣的化合物一起培养4-16小时。培养完毕后，抽吸培养基和药物并且从玻片除去隔室和垫圈。随后按照参考方案使细胞渗透，固定，洗涤和封阻用于非特异性抗体结合。用二甲苯将石蜡镶嵌的肿瘤切片脱蜡并且在封阻之前用乙醇系列液再水化。玻片在初级抗体(小鼠单克隆抗-α-微管蛋白抗体，得自Sigma的1∶500稀释的克隆DM1A；得自Covance的兔多克隆抗粒周蛋白抗体，1∶2000稀释)中4℃下温育过夜。洗涤后，室温下该玻片用稀释至15μg/ml的偶联二级抗体(微管蛋白的FITC偶联驴抗小鼠IgG；用于粒周蛋白的Texas红偶联驴抗兔IgG)培养1小时。随后洗涤玻片且用Hoechst 33342复染色以显示DNA。免疫染色样本用100x油浸渍物镜在Nikon落射荧光显微镜上用Metamorph去卷曲和成像软件进行成像。
实施例提供实施例的目的在于帮助进一步理解本发明。所用的特定材料、物质和条件是举例说明本发明而不限定其合理范围。
路线1 步骤11-1的合成0℃下向1.5L CH2Cl2中的24.9g(255mmol)盐酸N，O-二甲基羟胺悬浮液中加入71.1mL(510mmol)三乙胺，然后逐滴加入溶于100mLCH2Cl2中的25.0g(141.6mmol)2，5-二氟苯甲酰氯。搅拌1小时后，用水洗涤反应物，用1M盐酸，盐水洗涤3次，在Na2SO4上干燥，浓缩以提供无色油状的1-1。1-1的数据1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.2-7.0(m，3H)，3.6(bs，3H)，3.4(s，3H)ppm。
步骤21-3的合成-78℃下向750mL THF中的15.0g(89.2mmol)THP-炔1-2(按照Tetrahedron，2001，57，2597-2608中的描述制备)的溶液加入35.7mL(89.2mmol)2.5M nBuLi的己烷溶液。室温下搅拌1小时后，通过注射器加入17.9g(89.2mmol)1-1在35mL THF中的溶液。将溶液搅拌过夜，同时逐渐温热到室温。用饱和NH4Cl水溶液猝灭反应，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机萃取物，在Na2SO4上干燥，通过旋转蒸发浓缩，然后通过采用EtOAc/己烷的柱色谱纯化，以提供无色油状1-3。1-3的数据1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.7(m，1H)，7.3(m，1H)，7.15(m，1H)，4.6(m，1H)，3.9(m，2H)，3.55(m，2H)，2.65(m，2H)，1.95(m，2H)，1.85(m，1H)，1.75(m，1H)，1.6-1.5(m，4H)ppm。
步骤31-4的合成-78℃下向75mL THF中的20.2g(98.1mmol)溴化铜(I)二甲基硫化物复合物的悬浮液中加入98.1mL(196mmol)2M PhLi的二丁醚溶液。搅拌1.5小时后，通过套管加入25.2g(81.7mmol)炔1-3在200mLTHF中的溶液，-78℃下将反应搅拌3小时。用饱和NH4Cl水溶液猝灭反应，用EtOAc萃取两次。用盐水洗涤有机萃取物，在Na2SO4上干燥，通过旋转蒸发浓缩，然后通过采用EtOAc/己烷的柱色谱纯化，提供黄色油状的1-4，即(E)和(Z)异构体的混合物。1-4的数据HRMS(ES)计算值M+Na，对于C23H24F2O3409.1586。实测值409.1586。
步骤43-[1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇(1-5)的合成向16.0g(41.4mmol)1-4在150mL吡啶中的溶液加入3.0mL(62.1mmol)肼水合物，将得到的混合物在90℃下加热45分钟。冷却到室温后，将反应置于冰浴中，逐滴加入14.7mL(207mmol)乙酰氯。移去冰浴，在室温下搅拌过夜，然后倒入含有EtOAc和盐水的分液漏斗。分离各层，用1M HCl洗涤有机相两次，用盐水洗涤一次，在Na2SO4上干燥，通过旋转蒸发浓缩。将残留物重悬于甲苯中两次，浓缩到共沸掉任何剩余的吡啶。将残留物溶解于200mL MeOH，加入8.0g(42mmol)对甲苯磺酸一水合物。室温下搅拌2小时，通过旋转蒸发除去大多数溶剂，残留物分配在饱和的NaHCO3水溶液和EtOAc之间。分离各层后，再次用碳酸氢盐洗涤有机相，然后用盐水洗涤，在Na2SO4上干燥，通过旋转蒸发浓缩。用Et2O滴定残留物，通过过滤收集固体物质，得到白色固体的外消旋体1-5。外消旋体1-5的数据1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.7(m，1H)，7.4-7.0(m，7H)，3.8-3.65(m，2H)，3.6(m，1H)，3.5(m，1H)，2.9(m，1H)，2.4(s，3H)，2.3(m，1H)，1.7-1.5(m，2H)ppm。
步骤53-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇1-5的手性拆分通过装有10cm Chiralpak AD柱的制备HPLC拆分对映异构体，其中使用的洗脱液是92％己烷(含有0.1％二乙胺)，4％MeOH和4％EtOH，以150mL/分的流速洗脱。洗脱的第一个峰是无活性的(R)异构体，洗脱的第二个峰是活性(S)异构体。
步骤61-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-乙酰基哌嗪1-6的合成室温下用Dess-Martin periodinane(1.30g，3.07mmol)处理醇1-5(1.00g，2.79mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液。搅拌20分钟后，用饱和的硫代硫酸钠/NaHCO3(30mL/30mL)水溶液处理云雾状溶液。再搅拌20分钟后，用EtOAc洗脱混合物，用NaHCO3和盐水洗涤。在Na2SO4上干燥有机层，过滤，并且浓缩产生未纯化的醛(0.994g)。获得的物质不进行进一步纯化。将醛(0.994g，2.79mmol)和N-乙酰基哌嗪(0.393g，3.07mmol)的溶液搅拌40分钟，然后用Na(OAc)3BH(0.65g，3.07mmol)处理。搅拌45分钟后，用EtOAc稀释混合物，用H2O、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。在Na2SO4上干燥有机层，过滤并浓缩。通过二氧化硅色谱纯化粗物质(85∶15 EtOAc[10∶1∶1EtOH∶H2O∶NH4OH])，得到1-6。
通过上述程序的简单修改制备以下化合物。除非特别指明，表中的化合物是以游离碱形式分离的。
序列表<110>Merck & Co.，Inc.
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Fraley，Mark E.
Hartman，George D.
Schreier，John<120>有丝分裂驱动蛋白抑制剂<130>21746<150>60/584,518<151>2004-07-01<160>2<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>42<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>完全合成的核苷酸序列<400>1gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag42<210>2<211>60<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>完全合成的核苷酸序列<400>2gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60
权利要求
1.式I的化合物或其可药用或立体异构体， 其中a独立地是0或1；b独立地是0或1；m独立地是0、1或2；n是0-3； 选自每个环都是3-7元环的单环、双环或多环含氮杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环、双环或多环杂环任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R1选自1)C1-C10烷基，2)芳基，3)C3-C8环烷基，4)杂环基，5)(C＝O)NR7R8，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；或R2和R4独立地选自1)H，2)ObC1-C10烷基，3)C3-C8环烷基，4)卤素，5)CN，和6)OH所述烷基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；R3是卤素；R5独立地是1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C10全氟代烷基，11)Oa(C＝O)bNR7R8，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR7R8，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R7R8，或17)(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R6独立地选自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基，2)Ob(C1-C3)全氟代烷基，3)氧代，4)OH，5)卤素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)aOb(C3-C6)环烷基，10)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基，11)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基，12)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2NR7R8；所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三个选自Rb，OH， (C1-C6)烷氧基， 卤素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代和N(Rb)2的取代基取代；或与相同碳原子连接的两个R6一起形成-(CH2)u-，其中u是3-6，并且一个或两个碳原子任选被选自O，S(O)m，-N(Ra)C(O)-，-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分取代；R7和R8独立地选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代，或R7和R8可以与其连接的氮一起形成每个环都是5-7元环的单环或双环杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；Ra独立地选自(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，芳基和杂环基；并且Rb独立地选自H，(C1-C6)烷基，芳基，杂环基，(C3-C6)环烷基，(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
2.权利要求1的化合物，其是式II的化合物或其可药用盐或立体异构体 其中a独立地是0或1；b独立地是0或1；m独立地是0、1或2；n是0-3； 选自每个环都是3-7元环的单环、双环或多环含氮杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环、双环或多环杂环任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R1选自1)C1-C10烷基，2)芳基，3)C3-C8环烷基，4)杂环基，5)(C＝O)NR7R8，所述烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基和杂环基任选被一个或多个选自R5的取代基取代；或R2选自1)ObC1-C10烷基，2)卤素，3)CN，和4)OH，所述烷基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；R3是卤素；R5独立地是1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb杂环基，6)CO2H，7)卤素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C10全氟代烷基，11)Oa(C＝O)bNR7R8，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR7R8，14)氧代，15)CHO，16)(N＝O)R7R8，或17)(C＝O)aObC3-C8环烷基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、杂环基和环烷基任选被一个或多个选自R6的取代基取代；R6独立地选自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基，其中r和s独立地是0或1，2)Ob(C1-C3)全氟代烷基，其中r是0或1，3)氧代，4)OH，5)卤素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)aOb(C3-C6)环烷基，10)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-芳基，11)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-杂环基，12)(C＝O)aOb(C0-C6)亚烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亚烷基-CO2Ra，15)C(O)H，16)(C0-C6)亚烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，和19)S(O)2NR7R8；所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基和杂环基任选被最多三个选自Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，卤素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代和N(Rb)2的取代基取代；或与相同碳原子连接的两个R6一起形成-(CH2)u-，其中u是3-6，并且一个或两个碳原子任选被选自O，S(O)m，-N(Ra)C(O)-，-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分取代；R7和R8独立地选自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8环烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob杂环基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)杂环基，11)C3-C8环烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、环烷基、芳基、杂环基、烯基和炔基任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代，或R7和R8可以与其连接的氮一起形成每个环都是5-7元环的单环或双环杂环，并且除氮之外，其任选还包含一个或两个选自N、O和S的额外的杂原子，所述单环或双环杂环任选被一个、两个或三个选自R6的取代基取代；Ra独立地选自(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，芳基和杂环基；并且Rb独立地选自H，(C1-C6)烷基，芳基，杂环基，(C3-C6)环烷基，(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
3.权利要求2的式II的化合物，其中 选自 它们任选被一个或多个选自R6的取代基取代；其中所有其余取代基如权利要求3的描述。
4.选自下组的化合物1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-乙酰基哌嗪；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吗啉；(5S)-1-乙酰基-5-(3-氮杂环丁烷-1-基丙基)-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-氟哌啶；7-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1，4-二氧杂-7-氮杂螺[4.5]癸烷；5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二氟吡咯烷；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-(三氟甲基)哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4，4-二氟哌啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(甲磺酰基)哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-2-酮；3-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)-4-甲基-1，2，5-二唑；2-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)吡啶；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3-(甲氧基)哌啶；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氮杂二环[2.2.1]庚烷；叔丁基5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷-2-羧酸酯；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷；2-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-5-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2.1]庚烷；(3S)-1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-3-醇；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(3R)-3-氟吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-氟氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；7-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1，4-二氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1-苯基哌嗪-2-酮；5-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)-2，4--二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-{3-[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]丙基}-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(2，5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-[3-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)丙基]-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑；5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-1-甲基哌嗪-2-酮；叔丁基4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-1-羧酸酯；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪；4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}硫代吗啉1，1-二氧化物；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-丙基哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-异丁酰哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(2，2二甲基丙酰基)哌嗪；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-(2，2异丙磺酰基)哌嗪；甲基4-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}哌嗪-1-羧酸酯；1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-3，3-二甲氧基哌啶；或其可药用盐或多晶型物。
5.一种化合物，其是 1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-4-乙酰基哌嗪；或其可药用盐或多晶型物。
6.一种化合物，其是 5-(1-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}吡咯烷-2-基)-2，4-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮；或其可药用盐或多晶型物。
7.一种化合物，其是 5-{3-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑-5-基]丙基}-2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚烷；或其可药用盐或多晶型物。
8.一种药物组合物，包含权利要求1的化合物和可药用载体。
9.一种药物组合物，包含权利要求5的化合物和可药用载体。
10.用权利要求1的化合物制备治疗或预防需要所述治疗的哺乳动物的癌症的方法。
11.用权利要求5的化合物制备治疗或预防需要所述治疗的哺乳动物的癌症的药物的方法。
12.用权利要求1的化合物制备治疗或预防需要所述治疗的哺乳动物的癌症的药物的方法，其中癌症选自组织细胞淋巴瘤，肺腺癌，小细胞肺癌，胰腺癌，gioblastomas和乳腺癌。
13.用权利要求1的化合物制备调节需要所述治疗的哺乳动物的有丝分裂纺锤体形成的药物的方法。
14.治疗或预防需要所述治疗的哺乳动物的癌症的方法，包括给所述哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
15.权利要求14的治疗或预防癌症的方法，其中癌症选自脑、胃肠道、淋巴系统、胃、咽喉和肺的癌症。
16.权利要求14的治疗或预防癌症的方法，其中癌症选自组织细胞淋巴瘤，肺腺癌，小细胞肺癌，胰腺癌，gioblastomas和乳腺癌。
17.制备药物组合物的方法，包括将权利要求1的化合物与可药用载体混合。
18.权利要求13的组合物，进一步包括选自下组的第二种化合物1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂，10)血管发生抑制剂，和11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂；13)双膦酸盐；14)细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，和15)细胞周期关卡干扰剂。
19.权利要求18的组合物，其中该第二化合物是血管发生抑制剂，其选自酪氨酸激酶抑制剂，表皮衍生的生长因子的抑制剂，成纤维细胞衍生的生长因子的抑制剂，血小板衍生的生长因子的抑制剂，MMP抑制剂，整联蛋白阻断剂，干扰素-α，白介素-12，戊聚糖多硫酸酯，环加氧酶抑制剂，羧酰胺基三唑，combretastatin A-4，角鲨胺，6-O-(氯乙酰基-羰基)-烟曲霉醇，沙利度胺，制管张素，肌钙蛋白-1和VEGF的抗体。
20.权利要求13的组合物，进一步包含蛋白酶体抑制剂。
21.权利要求13的组合物，进一步含有极光型激酶抑制剂。
22.权利要求13的组合物，进一步含有Raf激酶抑制剂。
23.权利要求13的组合物，进一步含有丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。
24.权利要求13的组合物，进一步含有另一种非KSP的有丝分裂驱动蛋白的抑制剂。
25.权利要求19的组合物，其中该第二化合物是选自他莫昔芬和雷洛昔芬的雌激素受体调节剂。
26.一种治疗癌症的方法，该方法包括施用与放疗联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
27.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与选自下组的化合物联合的治疗有效量的权利要求1的化合物1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂，10)血管发生抑制剂，11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂13)遗传性多药物抗性的抑制剂，14)止吐剂，15)贫血治疗剂，16)嗜中性粒细胞减少症治疗剂，17)免疫增强药，18)双膦酸盐，19)细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，和20)细胞周期关卡干扰剂。
28.一种治疗癌症的方法，该方法包括施用与放疗和选自下组的化合物联合的治疗有效量的权利要求1的化合物1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视黄醇受体调节剂，4)细胞毒性/细胞抑制剂，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂，10)血管发生抑制剂，和11)PPAR-γ激动剂，12)PPAR-δ激动剂；13)遗传性多药物抗性的抑制剂，14)止吐剂，15)贫血治疗剂，16)嗜中性粒细胞减少症治疗剂，17)免疫增强药，18)双膦酸盐，19)细胞增殖和存活信号传递的抑制剂，和20)细胞周期关卡干扰剂。
29.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用治疗有效量的权利要求1的化合物和紫杉醇或司徒曼布。
30.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用治疗有效量的权利要求1的化合物和GPIIb/IIIa拮抗剂。
31.权利要求30的方法，其中该GPIIb/IIIa拮抗剂是替罗非班。
32.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与COX-2抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
33.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与蛋白体抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
34.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与极光型激酶抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
35.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与Raf激酶抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
36.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
37.一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括施用与非KSP的有丝分裂驱动蛋白的抑制剂联合的治疗有效量的权利要求1的化合物。
38.一种调节有丝分裂纺锤体形成的方法，该方法包括施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
39.一种抑制有丝分裂驱动蛋白KSP的方法，该方法包括施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明涉及用于治疗细胞增殖疾病，用于治疗与KSP驱动蛋白活性相关的病症，和用于抑制KSP驱动蛋白的二氢吡唑化合物。本发明也涉及包含这些化合物的组合物，和用它们治疗哺乳动物癌症的方法。
文档编号A61K31/5377GK1980662SQ200580022194
公开日2007年6月13日 申请日期2005年6月27日 优先权日2004年7月1日
发明者P·J·科尔曼, C·D·科克斯, M·E·弗拉利, G·D·哈特曼, J·施赖尔 申请人:默克公司