重组多价疫苗的制作方法

专利名称：：重组多价疫苗的制作方法
技术领域：
：本发明涉及重组水痘带状疱渗病毒、特别是使用BAC(大肠杆菌人工染色体)制备的重组水痘带状疱瘆病毒、以及含有上迷病毒的药物組合物。本发明进一步涉及含有水痘带状疱渗病毒基闺组基因和BAC载体序列的栽体、以及含有上述栽体的细胞。本发明又涉及制备重组水痘带状疱渗病毒的方法。本发明还涉及含有可以与水痘带状疱渗病毒基因組同源重组的片段、和BAC载体序列的核酸盒。
背景技术：
：水痘带状疱渗病毒(Varicella-zostervirus,VZV)是属于人疱瘆病毒科的病毒，是呈现两种不同的临床现象的疾病(水痘和带状疱渗)的病因该病毒的初期感染引发水疽。然后病毒潜伏感染神经节，经过漫长的年月后由于某些诱因而再次激活，引发带状疱渗(形成病毒颗粒，经由神经细胞，到达表皮细胞，在神经细胞分布区域形成水痘的症状)。VZV的基因组是双链DNA，含有约125000个碱基。全部碱基序列已由Davison等人确定，已知在基因组上至少存在72个基因。VZV的疫苗的开发较为困难，VZV疫苗Oka林是由高桥等人(日本特公昭53-41202号)所开发的世界上唯一的用于水痘带状疱渗病毒的疫苗。现行的水痘减毒活疫苗是使用来自减毒水痘病毒Oka抹的病毒为种制备，在世界各国得到广泛应用(RequirementsforVaricellaVaccine(Live)Adopted1984;Revised1993:WHOTechnicalReportSeries,No,848,22~38页，1994)。该Oka林是将由出现典型的水痘的患儿分离的病毒(Oka亲本林)用人胚胎肺细胞在34。C下继代12代、.再用豚鼠胚胎细胞继代11代、然后用人二倍体细胞数代继代之后所得。Oka原株具有强的病原性，而Oka疫苗抹(Oka抹傳种于健康儿童几乎未见任何副作用。因此，Oka林作为几乎没有病原性的疫苗林是有用的。病毒疫苗在其继代培养的同时具有基因型发生变化的可能性。Oka林本身的制备过程中经多代继代培养，因此Oka林本身也可能在遗传上具有多样性。实际上，为了确保疫苗的安全性和有效性，考虑到由于疫苗制备步骤中的继代可能产生的病毒的遗传变异，人们制定了允许制备的水痘种子病毒的继代数目的限制，即，制定了种子批系统，该系统是以认可的种子的继代数为0代，将之后的总继代数10代以内的病毒用作疫苗。另一方面，从水疽疫苗的效果的追踪或上市后药物监测(PMS)、以及免疫学的角度考虑，需要对从自然感染的水痘患者中分离的水痘病毒的新型野生抹和来自上述Oka株的疫苗株之间的病毒学差异进行分析，通过免疫学和基因工程等进行的分析已经进行了各种尝试。例如已经报道了下述分析水痘病毒林间的基因结构或DNA碱基序列的差异(JournalofGeneralViroogy，59,660~668,1986;同前，67，1759-1816,1986)、是否有限制酶PstI位点(JapaneseJournalofExperimentalMedicine,59，233~237，1989)、基于使用PCR(聚合驗反应)的RFLP(限制片段长度多态性)进行的判定(JournalofVirology,66，1016~1020，1992)、将上述Pstl位点的有无与RFLP的组合(JoumalofClinicalMicrobiology,33，658~660,1995)等。但是，这些均是鉴别新型野生林与来自Oka林的疫苗抹的条件，由于Oka林本身的遗传多样性的问题，欠缺可靠性、不确定，因此在疫苗的品质管理方面仍有问题。并且，已知有使用水痘病毒的基因14区域的水痘病毒Oka林的鉴定方法(美国专利第6,093,535号)、或使用基因62区域的水痘减毒活疫苗用的病毒林的鉴定方法(国际公开号WO00/50603)等，但是这些技术可以鉴定水痘病毒Oka株(强毒亲本林)、由此派生的病毒林(减毒Oka株)、以及Oka林以外的水痘病毒林三者之间的差异，但是作为水痘減毒活疫苗的品质管理以及品质保证的制剂基准仍不足够。目前，尚未确立评价和确认疫苗品质的方法，例如尚未通过种子病毒或疫苗病毒的基因组DNA的直接或定量性的基因分析进行品质管理，因此，对于活疫苗用的减毒抹的品质管理和品质保证的精度尚无法计算。因此，提高品质管理和品质保证的精度，这对于确保水痘减毒活疫苗的有效性、安全性、均匀性是极为重要的。但是如上所述,这些方法尚未建立，是要解决的当务课题。为了开发比Oka林更为优异的变异体水痘带状疱渗病毒疫苗，人们需求诱变的重组水痘带状疱疹病毒及其制备方法。并且，在使用BAC载体序列的病毒疫苗的制备方法中，需要对用于导入BAC载体序列的非必需基因进行鉴定。并且，在使用BAC载体制备多价疫苗时，还存在必须将多个抗原插入到病毒基因组上的问题。因此，人们希望开发出用于制备多价疫苗的来自BAC载体的栽体。专利文献1:日本特公昭53"41202号专利文献2:美国专利第6,093,535号专利文献3:国际公开号WO00/50603非专利文献1:RequirementsforVaricellaVaccine(Live)Adopted1984;Revised1993:WHOTechnicalReportSeries,No.848,22~38页，1994非专利文献2:JournalofGeneralVirology,59，660~668，1986非专利文献3:JournalofGeneralVirology,67,1759~1816，1986非专利文献4:JapaneseJournalofExperimentalMedicine,59，233~237，1989非专利文献5:JournalofVirology,66,1016~1020,1992非专利文献6:JournalofClinicalMicrobiology,33，658~660,199
发明内容发明所要解决的课题本发明的课题在于提高水痘带状疱療病毒疫苗的品质管理和品质保证的精度，确保水痘减毒活疫苗的有效性、安全性、均匀性。本发明的课题还在于为了开发比Oka抹更为优异的变异体水痘带状疱瘆病毒疫苗，确立制备诱变的重组水痘带状疱療病毒的方法，并提供上述病毒。本发明的课题进一步在于提供具有上述优点的多价疫苗。在使用BAC载体制备多价疫苗时，必须向病毒基因组序列中插入编码多种抗原的基因。但是已知由于外源基因的插入使得基因组尺寸过大，基罔组DNA无法包装在病毒壳体中，无法制备重组病毒。因此，为了将多个抗原基因插入到Oka疫苗抹中，必须考虑将Oka疫苗抹的非必需基因敲除，减小基因组DNA的尺寸。另一方面，本发明中出人意料地发现在以往被预测为非必需基因的基因中存在敲除会对病毒的增殖产生影响的基因。因此，本发明的课题在于提供不会出现病毒生产量降低等问题的、使用BAC载体的多价疫苗的制备方法。解决i果题的方法
技术领域：
：本发明人等开发了重组水痘带状疱疹病毒的制备方法，从而完成了本发明。所述重组水痘带状疱渗病毒的制备方法是将水痘带状疱瘆病毒基因组的特定基因用作BAC载体序列的插入序列。因此，本发明提供以下内容。1,重组水痘带状疱瘆病毒，该重组水痘带状疱渗病毒是BAC栽体序列的至少一部分插入到水痘带状疱瘆病毒基因组的非必需区域内得到的，这里，该非必需区域选自下迷的区域基固13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域、和与基因58的ORF相邻的区&戈。2.项目1的重组水痘带状疱療病毒，其中该水痘带状疱瘆病毒中选自基因13、基因56、基因57、和基因58的基因至少有2个缺损。3.项目1的重组水痘带状疱疹病毒，其中该水痘带状疱疹病毒中选自基因13、基因56、基因57、和基因58的基因至少有3个缺损。4.项目1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述BAC载体序列包含重組蛋白依赖性重组序列。5.项目1的重组水痘带状疱療病毒，其中上述BAC载体序列包含选自腮腺炎病毒、麻瘆病毒、风瘆病毒、西尼罗病毒、流感病毒、SARS冠状病毒、和日本脑炎病毒的病毒的基因。6.项目1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述BAC载体序列包含选自腮腺炎病毒、麻渗病毒、和风渗病毒的病毒的基因。7.项目6的重组水痘带状疱療病毒，其中上述BAC载体序列包含腮腺炎病毒的基因、麻瘆病毒的基因、和风渗病毒的基因。8.项目6的重組水痘带状疱渗病毒，其中上述腮腺炎病毒的基因选自HN基因、F基因、和N基因。9.项目6的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上迷麻渗病毒的基因选自H基因、F基因、和N基因。10.项目6的重組水痘带状疱渗病毒，其中上述风渗病毒的基因选自C基因、El基因、和E2基因。.11.项目1的重组水痘带状疱療病毒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因組来自野生株。12.项目1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述水痘带状疱瘆病毒基因组来自变异抹。13.项目1的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上迷水疽带状疱渗病毒基因組来自Oka疫苗林。14.项目1的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因组在基因62和基因6上具有变异。15.项目14的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述基因62是在SEQIDNCU的絲序列中至少具有以下(a)(d)的碱基置换(a)2110位碱基置换为G;(b)3100位碱基置换为G;(c)3818位碱基置换为C;和Cd)4006位碱基置换为G,以及上述基因6是在SEQIDN0.4的tt序列中至少具有5745位碱基为G的碱基置换。16.药物组合物，该药物组合物含有项目l的病毒。17，项目16的药物组合物，其中该药物組合物是疫苗形态。18.载体，该栽体从项目1的重组水痘带状疱渗病毒中分离。19.细胞，该细胞含有项目18的载体。20.项目19的细胞，其中该细胞为细菌。21.项目20的细菌，其中该细菌为大肠杆菌。22.项目19的细胞，其中该细胞为哺乳动物细胞。23.项目22的哺乳动物细胞，其中该哺乳动物细胞为来自人的细胞。24，病毒，该病毒由项目22的哺乳动物细胞生产。25.药物组合物，该药物组合物含有项目24的病毒。26.重组水痘带状疱渗病毒的制备方法，该方法包含以下步骤将项目18的载体导入到哺乳动物宿主细胞中的步骤；以及培养该哺乳动物宿主细胞，生产重组水痘带状疱渗病毒的步骤。27.项目26的方法，其中上述哺乳动物宿主细胞是来自人的细胞。28.项目26的方法，该方法进一步包含在上迷2个重组蛋白依赖性重組序列之间发生重組的步骤。29.向项目18的载体导入变异的方法，该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细胞的步骤；将含有由水痘带状疱瘆病毒基因组的一部分形成的片段的质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中，该片段至少具有一个变异；培养该细菌宿主细胞的步骤；以及从该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC栽体序列的栽体的步骤。30.向项目18的载体导入变异的方法，该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细胞的步骤；将含有由水痘带状疱渗病毒基因組的一部分形成的第1片段的第l质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中该第1片段具有至少l个变异；将含有由水痘带状疱渗病毒基因組的一部分形成的第2片段的第2质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中该第2片段具有至少1个变异，该第2片段与该第1片段不同；培养该细菌宿主细胞的步骤；以及从该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC载体序列的载体的步骤。31.核酸盒，该核酸盒含有在细菌细胞内可以与水痘带状疱渗病毒基因組同源重組的第1片段、BAC载体序列、以及在细菌细胞内可以与水痘带状疱渗病毒基因组同源重组的第2片段，其中该BAC序列的两端分别与第1片段和第2片段连接，这里，上迷第1和第2片段各自独立，来自选自水痘带状疱瘆病毒基因組的以下区域的区域基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域、与基因58的ORF相邻的区域、和基因56、57、58的连续的区域。32.项目31的核酸盒,其中上述笫l片段和第2片段至少为lkb。33.项目31的核酸盒，其中上述第1片段和第2片段至少为1.5kb。34.项目31的核酸盒，其中上述第1片段和第2片段至少为2kb。35.项目31的核酸盒，其中上迷第1片段和第2片段与水痘带状疱渗病毒基因组的序列至少80%相同。36.项目31的核酸盒，其中上述第1和第2片段来自不同的区域。37.项目31的核酸盒，其中上述BAC载体序列含有重组蛋白依赖性重组序列。38.项目31的核酸盒，其中上述BAC载体序列含有选择标志。39.项目31的核酸盒，其中上述水痘带状疱疹病毒基因组来自野生抹。40.项目31的核酸盒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因组来自变异株。41.项目31的核酸盒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因组来自Oka疫苗林。42.项目31的核酸盒，其中上述BAC载体序列具有SEQIDN0.3的核^列。发明效果本发明提供重组水痘带状疱疹病毒及其制备方法。例如，本发明提供使用BAC(大肠杆菌人工染色体)、将病毒的特定基因作为BAC载体的插入部分、由单一的病毒林制备重組水痘带状疱疹病毒的方法，以及通过该方法制备的重組水痘带状疱渗病毒。本发明还提供含有重组水痘带状疱渗病毒的药物组合物，本发明进一步提供含有水痘带状疱疹病毒基因组基因和BAC载体序列的载体、和含有上述载体的细胞，以及含有可与水痘带状疱渗病毒基因組同源重组的片段和BAC载体序列的核酸盒。附图简述图1是表示CMV启动子/增强子的结构的模式图。图2模式表示通过同源重組向基因13的ORF区域插入腮腺炎病毒抗原的方法。实施发明的最佳方式以下，说明本发明。本说明书全体中，如无特别说明，单数形式的表现应理解为也包含其复数形式的概念。如无特别说明，本说明书中使用的术语应理解为以该领域中通常使用的含义使用。因此，如无其它定义，本说明书中所使用的全部专业术语和科学技术术语具有与本发明所属的领域的技术人员通常理解的相同的含义。如发生矛盾则本说明书(包括定义)优先。(术语的定义)以下例举本说明书中特别使用的术语的定义。..在本说明书中使用时，水痘带状疱渗病毒的"必需基因"是指水痘带状疱渗病毒增殖所必需的基因。另外，水痘带状疱瘆病毒的"非必需基因"是水痘带状疱渗病毒增殖中不是必需的基因，是指例如即使缺损，水痘带状疱渗病毒也可增殖的基因。水痘带状疱渗病毒的非必需基因例如有以下，但并不限于此基因11、基因12、基因13、基因56、和基因58。这些基因中，适合插入到BAC载体中的基因例如有基因13、基因56、和基因58,但并不限于此。病毒基因组中的基因为必需基因时，通过破坏该基因可使病毒无法增殖。因此，通过破坏病毒基因组中的任意基因、检测该病毒的增殖，可以确定该基因是必需基因还是非必需基因。本说明书中，水痘带状疱參病毒的"野生林"是指未经人工变异，从天然中分离的水痘带状疱渗病毒株。野生株的例子有:在Davison,A.J.和Scott,J.E,(J.Gen.Virol.67(Pt9),1759~1816(1986))中鉴定的Dumas抹，但并不限于此。该Dumas株的核酸序列记载于SEQH)N0.4。该Dumas株的ORF编号和位置如下。ORF编号读框的方向基因組上的位置絲酸残基数ORF13，~>5'方向589~915氨基酸l掘ORF25W方向1134~1850氨基酸1-238ORF33'~>5'方向1908~2447氨基酸1-179O鹏3'—5'方向2783-4141氨基酸1-452ORF53'~>5'方向4252~5274氨基酸1-340ORF63'—5'方向5326~8577氨基酸1-1083ORF75，~3，方向8607~9386氨基酸1-259ORF89477~10667氨基酸1—3960RF95'—3'方向11009-'11917氨基酸1-302ORF9A5'－3'方向10642－10902氨基酸1一87ORF105，~>3'方向12160-'13392氨基酸1"410ORF115，~>3，方向13590-'16049氨基酸1-819ORF125，~>3，方向16214'18199氨基酸1~661ORF133－5方向18441'19346氨基酸l一301ORF143'~>5'方向測l-'21113氨基酸1—560ORF153，~>5，方向21258-'22478氨基酸1－406ORF163'~>5'方向22568-'23794氨基酸1~408ORF175'—3，方向24149-'25516氨基酸1~455ORF183'~>5'方向25573-'26493氨基酸1—306ORF193，~5，方向26518-'28845氨基酸l一775ORF203'—5，方向29024-'30475氨基酸1-483ORF215'~3'方向30759-'33875氨基酸l一腦ORF225'—3'方向34083-'42374氨基酸1—2763ORF233'~>5'方向42431--43138氨基酸1-235ORF243'~>5'方向43212-'44021氨基酸1—269ORF253,~>5，方向44148-'44618氨基酸1—156ORF265'—3'方向44506-'46263絲酸l一585ORF275'~>3'方向46127-'47128氨基酸1—333ORF283'—5'方向47052-'50636氨基酸1—1194ORF295'~>3'方向50857-'54471氨基酸1—1204ORF305，~>3'方向54651~'56963氨基酸1-770ORF315'—3，方向57008—'59614氨基酸l－868ORF325，~>3'方向59766-'60197氨基酸1—143ORF333'->5，方向60321-'62138氨基酸1-605ORF33.53，~>5，方向60321-61229氨基酸l-301ORF343'~>5'方向62171-'63910氨基酸1—579ORF353'—5'方向63977-'64753氨基酸1-258ORF365，—3'方向64807-'65832氨基酸1-341ORF375，—3'方向66074-'68599氨基酸1—841ORF383'~5'方向68668-'70293氨基酸1—541ORF395'—3，方向70633-'71355氨基酸1—240ORF4071540-'75730氨基酸1-1396ORF415'~>3'方向75847-'76797氨基酸1-316ORF42+453，卄5，方向76851--78038<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>上述表中，"5，—3'方向"表示ORF与SEQIDN0.4的核酸序列相同方向，"3，—5'方向"表示ORF与SEQIDN0.4的核酸序列相反方向。通过鉴定与上述ORF的核酸序列和/或核酸序列同源的序列，所属
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的技术人员可以容易地鉴定来自Dumas株以外的林的基因组中的ORF。本说明书中，"变异株"是指通过对野生林的病毒林进行诱变、多代继代培养等而诱变的水痘带状疱療病毒抹。对水痘带状疱療病毒林进行诱变时，该诱变可以是随机诱变，也可以是定点特异性诱变。在本说明书中使用时，"减毒病毒"是病毒突变林的一种，是指毒性比野生林减弱的病毒。对于确定病毒突变抹的毒性是否比野生林减弱的方法、即测试水痘带状疱渗病毒的病原性的方法，建立了两种方法，作为使用动物模型的方法，众所周知有制备移植了人的皮肤的重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠，使其感染水痘带状疱渗病毒，对病原性进行评价的方法(J.Virol,1998Feb;72(2):965~74)。与此相对，作为在试管内进行病原性评价的方法，在用孔径3^m的trans-well分隔的双层孔的下侧加入单层培养的人黑素瘤细胞，上侧加入感染了水痘带状疱渗病毒的脐带血单核细胞(CBMC),培养7~8天后观察黑素瘤细胞的CPE(细胞变性效杲)的程度。这也是众所周知的方法(J.Virol.2000Feb;74(4):1864~70)。本发明人等以往的试验结果(J.Virol.2002Nov;76(22):11447~59)表明，病毒的病原性与增殖性密切相关，因此，可以通过感染中心测定来研究细胞到细胞的增殖性，由此间接性地对病原性进行评价，但这不是直接确认病原性的方法。病毒的人工减毒的方法是公知的。例如可以使用具有以下碱基置换的水痘带状疱渗病毒作为減毒病毒在SEQIDNO.l的基因62中至少有以下(a)~(d)的碱基置换(a)2110位碱基置换为G;(b)3100位碱基置换为G;(c)3818位碱基置换为C;和(d)4006位碱基置换为G,以及SEQIDNO.4的基因6中，至少5745位^tt为G的^^置换。也可以使用具有除(a)~(d)的碱基置换外还有以下(e)~(g)的至少1个以上的碱基置换的减毒水痘病毒代替上迷水痘带状疱渗病毒(e)1251位4tt置换为G;(f)2226位碱基置换为G;和(g)3657位碱基置换为G。本发明中，还可以进一步使用除(a)~(g)的至少一个以上碱基置换之外还有以下(h)""(o)的至少一个以上的碱基置换的减毒水痘病毒，以此代替上述水痘带状疱渗病毒(h)162位减基置换为C;(i)225位碱基置换为C;(j)523位威基置换为C;(k)1565位碱基置换为C;(1)1763位碱基置换为C;(m)2652位碱基置换为C;(n)4052位;威基置换为C;和(0)4193位碱基置换为C。或者，"减毒病毒，，例如可以使用在基因62中具有选自以下的至少一个磁基置换的病毒(a)2110位碱基置换为G;(b)3100位碱基置换为G;(c)3818位碱基置换为C;(d)4006位碱基置换为G;(e)1251位戚基置换为G;①2226位-成基置换为G;(g)3657位碱基置换为G。(h)162位碱基置换为C;(1)225位4置换为C;(j)523位4tt置换为C;(k)1565位碱基置换为C;(1)1763位碱基置换为C;(m)2652位碱基置换为C;(n)4052位碱基置换为C;和(o)4193位碱基置换为C。本说明书中使用的术语"蛋白质"、"多肽"、"寡肽"和"肽，，在本说明书中以相同舍义使用，是指任意长度的氨基酸的聚合物。本说明书中使用的术语"多核苷酸"、"寡核苷酸"和"核酸"在本说明书中以相同含义使用，是指任意长度的核苷酸的聚合物。如果未标示其它含义，则特定的核酸序列与所标示的序列同样，包含其保守性变异的变异体(例如筒并密码子置换体)和互补序列。具体来说，简并密码子置换体可通过制成下述序列来实现一个或多个选择的(或者全部)密码子的第3号位置用混合碱基和/或脱氧肌苷残基置换(Batzer等人,NucleicAcidRes,19:5081(1991);Ohtsuka等人，J,Biol.Chera.260:2605~2608(1985);Rossolini等人,Mol.Cell.Probes8:91~98(1994》。本说明书中，"基因，，是指确定遗传性状的因子。通常在染色体上排列成一定的序列。确定蛋白质的一级结构的基因称为结构基因，调节其表达的称为调节基因。本说明书中，"基因"指"多核苷酸"、"寡核苷酸"和"核酸"和/或"蛋白质"、"多肽"、"寡肽"和"肽"。本说明书中，基因的"可读框"或"ORF"是将基因的樣序列按每3个贿进行划分时3个成为一组，具有起始密码子，中途未出现终止密码子，具有一定程度的长度，实质上可编码蛋白质的读框。7jc疽带状疱渗病毒基因组其全部碱基序列都已确定，至少鉴定出71个基因，各基因分别具有可读框"ORF，，这是公知的。本说明书中，水痘带状疱瘆病毒基因組内的基因的"ORF内的区域"是指在水痘带状疱瘆病毒基因組内的基因中，形成ORF的#所存在的区域。本说明书中，水痘带状疱渗病毒基因组内的基因的"与ORF相邻的区域"是指在水痘带状疱渗病毒基因组内的基因中，ORF附近的碱基所存在的区域，是指该基因或其它基因不在ORF内的区域的区域。本说明书中，基因的"同源性"是指2个以上的基因序列相互的同一性的程度，因此，2个基因同源性越高则它们的序列的同一性或类似性越高。两种基因是否具有同源性，这可通过序列的直接比较、或者如果为核酸时，通过严*件下的杂交的方法确认。将2个基因序列直接比较时，该基因序列间的DNA序列代表性的至少为50%同一时、优选至少70%同一时、更优选至少80%、卯％、95%、96%、97%、98%或99°/。同一时，这些基因具有同源性。本说明书中，碱基序列的类似性的比较和同源性的计算可以使用序列分析工具BLAST、使用缺省参数计算。本说明书中，基因、多核苷酸、多肽等的"表达"是指该基因等在体内受到一定的作用，变成另外的形态，优选"表达"表示基因、多核苷酸等被转录和翻译成为多肽的形态，也可以是被转录，制成mRNA，这也是表达的一个方式。更优选上迷多肽的形态是可以在翻译后经过力p工修饰。氨基酸通常是以3个字母或者由IUPAC-IUBBiochemicalNomenclatureCommission(国际生物化学联合会雨国际纯粹与应用化学联合会组成的生物化学命名委员会)推荐的单字母的形式在本说明书中提及。核苷酸也同样，以通常所接受的单字母编码的形式提及。本说明书中，"片段"是指相对于全长多肽或多核苷酸(长度为n),具有1至n-l的序列长度的多肽或多核苷酸。片段的长度根据其目的可以适当变更，例如为多肽时，其长度的下限可以是3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、40、50以及更多的氨基酸，这里，以未具体例举的整数所表示的长度(例如11等)也适合作为下限。为多核苷酸时，有5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、40、50、75、100、200、300、400、500、600、600、700、800、900、1000以及更多的核苷酸，这里，以未具体例举的整数所表示的长度(例如11等)也适合作为下限。BAC载体内的基因所编码的多肽只要具有与天然型的多肽实质上具有相同的作用即可，M酸序列中的1个以上(例如1或多个)的氨基酸可以置换、附加和/或缺失，l个以上的糖链可以置换、附加和/或缺失。在本说明书中使用时，"糖链"是指1个以上单元糖(单糖和/或其衍生物)相连而成的化合物。2个以上羊元糖相连时，各单元糖之间可以通过糖苷键的脱水縮合来连结，上迷糖链例如有在生物体中含有的多糖类(葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、木糖、N-乙酰葡糖胺、N-乙酰半乳糖胺、唾液酸以及它们的复合物和衍生物)，除此之外还有分解的多糖，由糖蛋白、蛋白聚糖、葡糖胺聚糖、糖脂等的复合生物体分子分解或衍生的糖链等广范围的糖类。但并不限于此。因此，本说明书中，"糖链"可以与"多糖"、"糖类"、"碳水化合物"互换使用。如无特别说明，本说明书中，"糖链"包含糖链和舍糖链的物质两者。将某种氨基酸用具有同样的疏水性指数的其它的氨基酸置换，可生成依然具有同样的生物学功能的蛋白质(例如在酶活性中的等效蛋白质)，这是本领域所周知的。上迷氨基酸置换中，优选疏水性指数在±2以内，更优#土1以内，进一步优选在士0.5以内。在本领域中，可以理解基于疏水性的上述氨基酸的置换是高效率的。亲水性指标还可以在突变体的制备中考虑。如美国专利第4,554,101号中所记载，以下的亲水性指数对应各氨基酸残基精氨酸(+3.0);赖氨酸(+3.0);天冬氨酸(+3,0±1);谷氨酸(+3.0±1);丝氨酸(+0.3);天冬酰胺(+0.2);谷氨酰胺(+0.2);甘氨酸(O);苏氨酸(-0,4);脯氨酸(-0.5±1);丙氨酸(-0.5);组氨酸(-0.5);半胱氨酸(-1.0);甲辟4酸(-1.3);缬氨酸(-l,5);亮氨酸(-1.8);异亮氨酸(-1.8);酪氨酸(-2.3);苯丙氨酸(-2.5);以及色氨酸(-3.4)。可以理解氨基酸可以置换成具有同样的亲水性指数、且依然可以获得生物学等价物的其它的氨基酸。上述氨基酸置换中，优选亲水性指数在±2以内，更优i^EJrl以内，进一步优选在士0.5以内。本发明中，"保守性置换"是指在M酸置换中，原有的M酸与被置换的氨基酸的亲水性指数或/和疏水性指数如上所述地类似的置换。保守性置换的例子是本领域所周知的，例如有以下各组内的置换精氨酸和赖氨酸；谷氨酸和天冬氨酸；丝氨酸和苏氨酸；谷氨酰胺和天冬觥胺；以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸等，但并不限于此。本说明书中，"变异体"是指相对于原有的多肽或多核苷酸等物质，有一部分发生变更。上述变异体有置换变异体、附加变异体、缺失变异体、截短的变异体、等位基因变异体等。等位基因是指属于同一基因座、互相区别的遗传性变异体。因此，"等位基因变异体，，是指对于某种基因存在等位基因关系的变异体。"种同源物或同系物"是指在某一种中，与某种基因在氨基酸水平或核苷酸水平上具有同源性(优选60%以上的同源性，更优选80%以上、85%以上、90%以上、95%以上的同源性)。获得上迷种同源物的方法从本说明书的记栽即可明确。"直向同源物"也称为直向同源基因，是指两种基因来自由某一共同祖先种分化而来的基因。例如，以具有多重基因结构的血红蛋白基因家族为例，人与小鼠的a血红蛋白基因是直向同源物，但人的a血红蛋白基因与p血红蛋白基因是种内同源基因(基因重复而产生的基因)。直向同源物可用作分子系统树的推定，.因此本发明的直向同源物在本发明中可以是有用的。"保守性(保守性修饰)变异体"适用于氨基酸序列和核酸序列两者。关于特定的核酸序列，保守性变异的变异体是指编码同一或本质上同一的氨基酸序列的核酸，核酸不编码tt酸序列时，是指本质上同一的序列。由于遗传编码的简并，很多功能性同一的核酸编码任意的规定的蛋白质。例如密码子GCA、GCC、GCG和GCU均编码tt酸的丙氨酸。因此，丙氨酸在由密码子确定的所有的位置上，都可以在不改变该密码子所编码的多肽的情形下变更为上述的对应的任意密码子。上述核酸的变异是保守性修饰变异的一种"沉默变异"。编码多肽的本"E明书中的所有的核酸序列都记载了该核酸的可能的所有的沉默变异，该领域中，可以理解核酸中的各密码子(通常的甲石危氨酸的唯一密码子AUG和通常的色氨酸的唯一密码子TGG除外)可以为产生功能相同的分子而变异。因此，编码多肽的核酸的各沉默变异隐舍在所述的各序列中，优选上述变异可避免对多肽的高级结构产生较大影响的氨基酸半胱氨酸的置换。本说明书中，为了制备含有功能性地编码等效的多肽的基因的BAC载体，除氨基酸的置换之外还可进行氨基酸的附加、缺失或修饰。氨基酸的置换是指将原有的多肽用1个以上、例如i~10个、优选1~5个、更优逸13个氮基酸置换。氨基酸的附加是在原有的肽链上附力口1个以上例如1~10个、优选H个、更优选1~3个氨基酸。氨基酸的缺失是指使1个以上例如1~10个、优选1~5个、更优选1~3个氨基酸从原有的肽上缺失。氨基酸修饰包含酰胺化、羧基化、硫酸化、卣化、烷基化、糖基化、磷酸化、氢氧化、酰化(例如乙酰化)等，但并不限于此。置换或附加的氨基酸可以是天然的氨基酸，也可以是非天然的tt酸或氨基酸类似物。优选天然的氨基酸。本说明书中使用的多肽的核酸形态是指可表达该多肽的蛋白质形态的核酸分子。该核酸分子只要是被表达的多肽与天然型的多肽实质上具有相同活性即可，可以如上所述，该核酸序列的一部分可以缺失或被其它的威基置换，或者插入一部分其它的核酸序列.或者可在5，末端和/或3，末端结合其它核酸。还可以是将编码多肽的基因在严格条件下杂交，编码与该多肽实质上具有相同功能的多肽的核酸分子。上述基因在本领域是公知的，可在本发明中利用。上述核酸可通过周知的PCR法获得，也可以化学合成。这些方法中例如可以将定点特异性诱变法、杂交法等组合。本说明书中，多肽或多核苷酸的"置换、附加或缺失"是指相对原有的多肽或多核苦酸，分别有M酸或其替代物、或者核苷酸或其替代物置换、附加或者除去。上述置换、附加或缺失的技术是该领域所周知的，上述技术的例子有定点特异性诱变技术等。置换、附加或缺失只要是1个以上即可，可以是任意数(大于零)，上述数目只要是在具有该置换、附加或缺失的变异体中可保持目标功能即可，可以增多。例如，上述数目可以是1或多个，优选为全长的20%以内、10%以内，或100个以下、50个以下、25个以下等。高分子结构(例如多肽结构)对于各种水平的构成均有阐述。上迷构成的常规理论例如可参照Akberts等人，MolecularBiologyoftheCell(第3版>1994);以及Cantor和Schimmel，BiophysicalChemistryPaetI:TheConformationofBiologicalMacromolecules(1980)。本发明中可利用的常规的分子生物学方法可参考AusubdF.A.等人编著(1988),CurrentProtocolsinMolecularBiology,Wiley,NewYork,NY;SambrookJ等人,(1987)MolecularCloning:ALaboratoryManual,第2版，ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY等，本领域技术人员均容易实施。本说明书中，提a因时，"载体，，是指可以将目标多核苷,列转入目标细胞中的物质。上迷载体的例子包括可以在原核生物细胞、酵母、动物细胞、植物细胞、昆虫细胞、动物个体和植物个体等的宿主细胞中自主复制，或者可插入染色体中，且在适合本发明的多核苷酸转录的位置上含有启动子的栽体。"BAC栽体，，是指以大肠杆菌的F质粒为基础制备的质粒，是可以将约300kb以上的巨大尺寸的DNA片段在;U^杆菌等细菌内稳定保持并增殖的栽体。BAC载体至少含有BAC载体的复制所必需的区域。该复制所必需的区域例如有:F质粒的复制起始位点oriS或其变异体，但并不限于此。本说明书中，"BAC载体序列"是指含有发挥BAC载体功能所必需的序列的序列。根据需要，BAC载体序列可以进一步含有"重组蛋白依赖性重組序列"和/或"选择标志"。本说明书中，核酸的"重组"可与术语"同源重组"互换使用，是由2种不同的同源核酸分子结合引发，发生交换，产生核酸的新的组合。在本说明书中使用时，同源重组包含"重组蛋白依赖性重组，，和"重组蛋白非依赖性重组"两者。"重组蛋白依赖性重组"是指在重组蛋白存在下发生、但在重组蛋白非存在下不发生的同源重组。"重组蛋白非依赖性重組"是指与重組蛋白的存在无关地发生的同源重组。本说明书中，"重組蛋白依赖性重組序列，，是指发生重组蛋白依赖性重组的序列，"重组蛋白非依赖性重组序列"是指发生重組蛋白非依赖性重组的序列。重组蛋白依赖性重组序列是在重组蛋白存在下发生重组、但在重组蛋白非存在下不发生重組。重组蛋白优选特异性地作用于重组蛋白依赖性重组序列，而不作用于重组蛋白依赖性重组序列以外的序列。代表性的重组蛋白依赖性重組序列与重組蛋白对例如有以下，但并不限于此来自噬菌体P1的loxP(Pl的交换的基因座)序列与Cre(环化重组)蛋白的组合，Fip蛋白与FRT位点的组合，q)C31与attB、attP的组合(Thorpe,HelenaM.;Wilson,StuartE.;Smith，MargaretC,M.;Controlofdirectionalityinthesite-specificrecombinationsystemoftheStreptomycesphage(pC31,;MolecularMicrobiology(2000),38(2),232~241)、解离酶与res位点的組合(SadowskiP,，Site-specificrecombinases:changingpartnersanddoingthetwist,J.Bacteriol"1986年2月；165(2)341-7)(通常参照SauerB.，Site-specificrecombination:developmentsandapplications.,Curr.Opin.Biotechnol.，1994年10月；5(5):521-7)。在本说明书中使用时，"选择标志"是指选择含有BAC载体的宿主细胞，以此为指标发挥功能的基因。选择标志例如有荧光标志、发光标志和药物选择标志，但并不限于此。"荧光标志"有编码绿色荧光蛋白(GFP)等的荧光蛋白的基因，但并不限于此。"发光标志"是指编码萤光素酶等发光蛋白的基因，但并不限于此。"药物选择标志，，是指编码选自以下蛋白的基因，但并不限于此二氫叶酸还原酶基因、谷氨酰胺合成酶基因、天冬氨酸氨基转移酶基因、金属硫蛋白(MT)、腺苷脱氨酶(ADA)、腺苷脱氨酶(AMPD1，2)、黄嗜呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶、UMP合成酶、P-糖蛋白、天冬酰胺合成酶和鸟氨^l^羧酶。这些药物选择标志与所使用的药物的组合例如如下二氢叶酸还原酶基因(DHFR)与氯甲蝶呤(MTX)的组合，谷氨酰胺合成酶(GS)基因与蛋氨酸磺基辨(methioninesdfoximine(Msx))的組合，天冬氨酸氨基转移酶(CAD)基因与N-磷酸乙酰-L-天冬氨酸(PALA)的組合，MT基因和镉(CcP)的组合，腺苷脱氨酶(ADA)基因与腺苷、亚硝基羟基丙氨酸、2，-脱氧助间型霉素的组合，腺苷脱氨酶(AMPD1，2)基因与腺嘌呤、重氮丝氨酸、助间型霉素的组合，黄噪呤-鸟噪呤磷酸核糖转移酶基因与霉酚酸的組合，UMP合成酶基因与6-氮尿苷、pyrazofiiran的组合，P-糖蛋白(P-gp,MDR)基因与多种药物的組合，天冬酰胺合成酶(AS)基因与p-天冬氨酰异羟肟酸或合欢氨酸的组合，乌氨酸脱羧酶(ODC)基因与a-二氟甲基-鸟氨酸(DFMO)的组合。在本说明书中使用时，"表达载体，，是指除结构基因及其调节其表达的启动子之外，各种调节元件以在宿主的细胞中可动作的状态连接而成的核酸序列。调节元件优选终止子、抗药性基因(例如，卡那霉素抗性基因、潮霉素抗性基因等)等的选择标志和增强子。生物(例如，植物)的表达栽体的类型和所使用的调节元件的种类根椐宿主细胞而不同，这是本领域技术人员所周知的事项。为植物时，本发明中使用的植物的表达载体可以进一步具有T-DNA区域。T-DNA区域特别是在使用农杆菌属转化该植物时，可以提高基因的导入效率。在本说明书中使用时，"重组载体"是指可将目标多核苷酸序列移入目标细胞中的载体。上迷载体的例子包括可以在原核细胞、酵母、动物细胞、植物细胞、昆虫细胞、动物个体和植物个体等的宿主细胞中自主复制，或者插入染色体中，且在适合本发明的多核苷酸转录的位置上^^有启动子的载体。本说明书中使用的"终止子"位于基因的编码蛋白的区域的下游，是与DNA转录为mRNA时转录的终止、polyA序列的附加有关的序列。已知终止子与mRNA的稳定性有关、对于棊因的表达量有影响。终止子例如有CaMV35S终止子、胭脂氨酸合成酶基因的终止子(Tons)、烟草PRla基因的终止子，但并不限于此。本说明书中使用的"启动子"是指确定基因的转录起始位点、并且直接调节其频率的DNA的ORF内的区域，是RNA聚合酶与之结合、起始转录的碱基序列。启动子的区域通常大多为推定蛋白编码区域的第1外显子上游约2kbp以内的区域，因此，使用DNA分析软件预测基因组磁J^序列中的蛋白编码区域，则可以推定启动子区域。推定启动子区域随每个结构基因而有所变动，通常位于结构基因的上游，但并不限于此，也可能位于结构基因的下游。优选推定启动子区域存在于第1外显子翻译起始位点上游约2kbp以内。本说明书中，本发明的启动子的表达是"构成性的"，这是指在生物的所有的组织中，在该生物的发生的任意阶段都以大致定量进行表达的性质。具体来说，在与本说明书实施例同样的条件下进行RNA印迹分析时，例如在任意时间点(例如两个点以上(例如第5天和第15天))的相同或对应的部位均可见同等程度的表达量，此时，在本发明的定义中，称表达为构成性的。可以认为构成性启动子在通常的生长环境中在维持生物的恒态稳定性方面发挥作用。这些性质可通过由生物的任意部分提取RNA,通过RNA印迹分析来分析表达量；或者通过蛋白质印迹法对表达的蛋白进行定量来确定。"增强子"是用于提高目标基因的表达效率而使用的。在动物细胞中使用时，增强子优选^^有SV40启动子内上游一侧的序列的增强子区域。增强子可使用多个，但也可以使用一个，或不《吏用。在本说明书中使用时，"可动作地连接"是指所需的序列的表达(动作)配置在某种转录翻译调节序列(例如启动子、增强子等)或翻译调节序列的控制下。为了使启动子与基因可动作地连接，通常在该基因的紧靠上游配置启动子，但也未必相邻配置。在本发明中使用时，如无特别说明，术语"转化，'、"转导"和"转染，，可以互换使用，是指向宿主细胞中导入核酸。转化方法只要是可以向宿主细胞内导入DNA的方法均可使用，例如有电穿孔法、使用基因枪的方法、磷酸钧法等各种周知的技术。"转化体"是指通过转化制备的细胞等的生命体的全部或一部分。转化体可例举原核细胞、酵母、动物细胞、植物细胞、昆虫细胞等。转化体与其对象相关，也称作转化细胞、转化組织、转化宿主等，本说明书中包含所有这些形态，是指在特定的语义中指特定的形态。原核细胞有属于埃希氏杆菌属(Es&erjc/K'a)、沙雷氏菌属(<Se;r#a)、芽孢杆菌属(5"<///"》、短杆菌属(5rew'6c7"er/"附)、棒状4干菌属(Cw>>etocfm'Mm)、微杆菌属(M/cro&acfen'MW)、假单孢菌属(户《e说/owo"as)等的原核细胞，例如有大肠杆菌CEscten'c似"co//)XLl-blue、大肠杆菌XL2-blue、大肠杆菌DH1、大肠杆菌MC1000、大肠杆菌KY3276、大肠杆菌W1485、大肠杆菌JM109、大肠杆菌HBIOI、大肠杆菌No.49、大肠杆菌W3110、大肠杆菌NY49、大肠杆菌BL21(DE3)、大肠杆菌BL21(DE3)pLysS、大肠杆菌HMS174(DE3)、大肠杆菌HMS174(DE3)pLysS、无花果沙雷氏菌OSe/raft'fl力cfl^a)、居泉沙雷氏菌(5ferraft'fl々加'co/a)、液化沙雷氏菌(&rraft'a/^^e》de")、粘质沙雷氏菌(Serraft'a附arcesce"s)、枯草芽孢杆菌(5ac飾《s由/嗣、解淀粉芽孢杆菌(5""7/w《fl/wjW^—dmy),产氨短杆菌(firev边ac^en'WKo附附附o附'agewes)、JSreW&acten'ww/wwan'op/w7"wATCC14068、解糖短杆菌(5/^v访"cfen'wmj(3cc/zaro/j^'cw附)ATCC14066、谷氛酸才奉状軒菌(Cto^"e6acten'M附g/wtom'c"附)ATCC13032、谷氨酸棒状杆菌(O0^eftflcfeWw附g/Mto附/cw伤)ATCC14067、谷氨酸棒状杆菌(OvTW功acfen'w附g/wtowicw/n)ATCC13869、嗜乙酰乙酸棒状杆菌(Ovy"e&a;ter/w附orceto"c/fifo//H7w附)ATCC13870、嗜氨微杆菌(M/c/*o6acte"'"wa附mowz'a;A!'/ww)A丁GG15354、假单抱菌属的一种CP《ewcto加owaysp.)D-0110等。动物细胞例如有人MRC-5细胞、人HEL细胞、人WI-38细胞、小鼠骨髓瘤细胞、大鼠骨髓瘤细胞、人骨髓瘤细胞、小鼠杂交瘤细胞、中国仓鼠的细胞-CHO细胞、BHK细胞、非洲绿猴肾细胞、人白血病细胞、HBT5637(日本特开昭63-299)、人直肠癌细胞株等。小鼠骨髓瘤细胞可例举ps20、NSO等，大鼠骨髓瘤细胞可例举YB2/0等，人胚胎肾细胞可例举HEK293(ATCC:CRL-1573)等，人白血病细胞可例举BALL-1等，非洲绿猴肾细胞可例举C0S-1、C0S-7、Vero细胞，人直肠癌细胞林可例举HCT-15等。本说明书中，"动物，，在该领域中以最广义使用，包含脊推动物和无脊推动物。动物例如有哺乳纲、鸟纲、爬虫纲、两栖纲、鱼纲、昆虫纲、蠕虫纲等，但并不限于此。本说明书中，生物的"组织，，是细胞的集团，在该集团中具有一定的同样的作用。因此，组织可以是器官的一部分。器官内，大多具有具相同功能的细胞，但也有具有稍有差异的功能的细胞混杂其中，因此，本说明书中，组织只要是共有一定的特性即可，可以混有各种细胞。本说明书中，"器官，，是指具有一个独立的形态，1种以上的组织组合，形成可发挥特定功能的结构体。植物中，例如有愈伤组织、根、茎、干、叶、花、种子、胚芽、胚、果实等，但并不限于此。动物中，例如有胃、肝脏、肠、胰脏、肺、气管、鼻、心脏、动脉、静脉、淋巴结(淋巴系统)、胸腺、卵巢、眼、耳、舌、皮肤等，但并不限于此。本说明书中，"转基因，，是指将特定的基因插入到某种生物中或者是插入了上述基因的生物(例如包含植物或动物(小鼠等))。本发明的生物为动物时，转基因生物可以使用利用了微注射法、病毒载体法、ES细胞法(胚性干细胞法)、精子栽体法、导入染色片段的方法(transsomicmethod)、游离体法等的转基因动物的制备技术制备。上述转基因动物的制备技术是该领域所周知的。在本说明书中使用时，"筛选"是指通过特定的操作和/或评价方法，从很多候选中选出具有作为目标的特定性质的物质或宿主细胞或者病毒等。本发明中，应理解为通过具有所需活性的篩选而得到的病毒也包含在本发明的范围内。本说明书中，"芯片"或"微芯片，，是指可以互换使用，是指具有多种功能、成为系统的一部分的超小型集成电路。芯片例如有DNA芯片、蛋白质芯片、细胞芯片等，但并不限于此。本"^兑明书中，"阵列"是指舍有1以上(例如1000以上)的靶物质的組合物(例如，DNA、蛋白质、细胞)整齐排列配置的图案，或具有图案的差4良(例如芯片)。阵列中，在小基板(例如10x10mm上等)上图案化的称为微阵列，本说明书中，"微阵列"与"阵列"可互换使用。因此，在比上述基板大的基板上图案化的也可以称作微阵列。例如，阵列由其本身固定在固相表面或膜上的所需的转染混合物组构成，阵列优选至少含有102个、更优逸至少103个、进一步优选至少104个、更进一步优逸至少105个含有相同的或者不同的病毒的细胞。这些细胞优选配置在表面为125x80mm、更优选10x10mm_h。，车歹'j伊J96孑L微量滴定板、384孔微量滴定板、载玻片大小的微量滴定板等，但并不限于此。被固定的组合物可以含有l种或多种耙物质。上述耙物质种类的数目可以是1个至样点数的任意范围。例如可以固定含有约10种、约100种、约500种、约1000种把物质的组合物。如上所述，可在基板等的固相表面或膜上配置任意数目的把物质(例如，细胞等生物体分子)，但通常一个基板上可最多配置108个生物体分子，在其它的实施方案中，最多可配置107个生物体分子、106个生物体分子、105个生物体分子、104个生物体分子、103个生物体分子、102个生物体分子，也可以配置含有超过108个生物体分子的乾物质的组合物，这种情况下，优选基板的大小更小。特别是含有耙物质的组合物(例如，细胞)的点样大小可以是与单一的生物体分子尺寸同样小(这可以是1~2nm级)。在某些情况下，最小限的基仗面积可根椐基板上生物体分子数目确定。阵列上可以配置生物体分子的"样点"。本说明书中，",点"是指含有靶物质的组合物的一定的集合。本说明书中，"点样"是指将含有某种靶物质的组合物的样点制作在基板或板上。点样可以按任何方法进行，例如可通过移液操作等实现，或者通过自动装置进行，上述方法是本领域所周知的。本说明书中使用的术语"地址"是指絲上的独特的位置，可以与其它独特位置辨别。地址与伴随着该地址的样点相关较为适当，所有的各个地址上的存在物可以与其它地址上的存在物识别(例如，光学上)，可以采用任意的形状。规定地址的形状例如可以是圆状、楠圃状、正方形、长方形、或者是不规则形状。罔此，"地址，，表示抽象的概念，"样点"表示具体的概念，无需将两者区别时，本说明书中"地址"和"样点"可互换4吏用。规定了各个地址的尺寸依赖于基板的大小、特定基板上的地址数目、含有靶物质的组合物的量和/或可利用的试剂、微粒的尺寸以及该阵列所采用的任意方法所必须的分辨率程度。大小例如可以是1~2nra至数cm的范围，可以是与其阵列的适用一致的任意大小。规定地址的空间配置和形状可以设计成适合于该微阵列所使用的特定的用途。地址可以紧密配置，常用的较为分歉，或者对于特定类型的分析物进行亚组分组，制成所希望的图案。在本说明书中使用时，"支撑体"是指可以担栽细胞、细菌、病毒、多核苷酸或多肽的物质。支撑体的材料可以是满足下述条件的任意的固体材料，为共价键或者非共价键的任意形式，具有与本发明中所使用的细胞等结合的特性，或者可诱导至具有上述特性。作为支撑体4吏用的材料可以4吏用形成固体表面的任意的物质，例如有玻璃、砝石、硅、陶瓷、二氧化硅、塑料、金属(也包括合金)、天然和合成的聚合物(例如聚苯乙烯、纤维素、壳聚糖、葡聚糖和尼龙)，但并不限于此。优选支撑体舍有进行疏水性结合的部分。支撑体可以由多种不同材料的层形成。例如可使用玻璃、石英玻璃、氧化铝、蓝宝石、硅灰石、碳化硅、氧化珪、氮化硅等无机材料，还可以使用聚乙烯、乙烯、聚丙烯、聚异丁烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、不饱和聚酯、含氟树脂、聚氯乙烯、聚偏氯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯醇、聚乙烯缩醛、丙烯酸类树脂、聚丙烯腈、聚苯乙烯、缩趁树脂、聚碳酸酯、聚酰胺、酚醛树脂、尿素树脂、环氧树脂、三聚氰胺树脂、苯乙烯/丙烯腈共聚物、丙烯腈丁二烯苯乙烯共聚物、有机硅树脂、聚苯醚、聚砜等有机材料。或者，支撑体可以使用硝基纤维素膜、尼龙膜、PVDF膜等在印迹法中使用的膜。本发明的水痘带状疱發病毒可以作为感染症的处置、预防和/或治疗的药物组合物的成分使用。本说明书中，药物的"有效量"是指该药物可以发挥目标药效的量。本说明书中，上述有效量中，将最低浓度称为最低有效量。上迷最低有效量在该领域中是周知的，通常药物的最低有效量由技术人员确定，或者技术人员可适当确定。上述有效量的确定除实际给予之外，还可以采用模型动物等。本发明还可用于确定上迷有效量。本说明书中，"药学上可接受的载体"是指制备医药或动物药等农药时所使用的物质，是指对有效成分没有有害影响的载体。上述药学上可接受的载体例如有以下，但并不限于此抗氧化剂、防腐剂、着色剂、风味剂、以及稀释剂、乳化剂、悬浮剂、溶剂、填料、增量剂、緩冲剂、递送栽体、赋形剂和/或农学上或药学上的佐剂。本发明的处置方法中使用的药物的种类和量可根据由本发明的方法所得的信息(例如，疾病的相关信息)，考虑使用目的、对象疾病(种类、严重程度等)、患者的年龄、体重、性别、既往史、所给予的被检体的部位的形态或种类等，本领域技术人员可容易地确定。对被检体(或患者)实施本发明的监控方法的频率还可考虑使用目的、对象疾病(种类、严重程度等)、患者的年龄、体重、性别、既往史和治疗过程等，本领域技术人员可容易地确定。监测疾病状态的频率例如是每天至数月一次(例如，一周一次至一个月一次)的监测。优逸一周至一个月一次的监测i^f见察过程边实施。本说明书中，"使用说明书"是对医生、患者等进行给予的人记述本发明的治疗方法的文件。该使用说明书可以记栽例如要求在放射线治疗直后或者治疗直前(例如，24小时以内等)给予本发明的药物等的文字。该使用说明书按照实施本发明的国家的监督机构(例如，日本为厚生劳动省，美国为食品药品管理局(FDA)等)所规定的样式制成，并明确标记得到了该监督机构的承认。使用说明书是所谓的内附文件(包装说明书)，通常以书面形式提供，但并不限于此，例如也可以以电子形式(例如通过互联网提供的主页、电子邮件)等形式提供。根据需要，在本发明的治疗中可以使用2种以上的药物。使用2种以上药物时，这些药物可以使用具有类似的性质或来源类似的物质，也可以使用具有不同的性质或来源不同的药物。关于给予上述2种以上的药物的方法的疾病水平的信息也可以通过本发明的方法获得。本发明中，关于类似的种类(例如，与人相对应的小鼠等)的生物、培养细胞、組织等，当某种特定的糖链结构分析结果与疾病水平相关时，对应的糖链结构的分析结果可以与疾病水平建立相关关系，这是本领域技术人员容易理解的。上述事项例如在动物细胞培养手册、濑野等人编著、共立出版、1993年等中记栽，本说明书中也引用其全部记栽。(本说明书中使用的常规技术)本说明书中使用的常规技术如果没有具体指示，都是使用在该领域技术范围内的糖链科学、射流技术、微细加工、有机化学、生物化学、基因工程、分子生物学、微生物学、遗传学和相关领域所周知的常用的技术。上述技术例如可在以下例举的文献和本说明书中其它场合所引用的文献中均有充^i兌明。精细加工例如在Campbell,S.A.(1996).TheScienceandEngineeringofMicroelectronicFabrication,OxfordUniversityPress(牛津大学出版社)；Zaut,P.V.(1996).MicromicroarrayFabrication:aPracticalGuidetoSemiconductorProcessing,SemiconductorServices;Madou，M.J.(1997).FundamentalsofMicrofabrication,CRC15Press;Rai-Choudhury,P.(1997).HandbookofMicro她ography,Micromachining,&Microfabrication:Microlithography等中有记载,其中的相关部分也作为参考被引用进本说明书中。本说明书中所采用的分子生物学的方法、生物化学方法、微生物学方法、糖链科学的方法是本领域所周知且常用的，例如在Maniatis，T.，等人.(1989).MolecularCloning(分子克隆)ALaboratoryManual(实验室指南),ColdSpringHarbor及其第3版(2001);Ausubel,F.M.,等人.eds，CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWiley&SonsInc.,NY，10158(2000);Innis，M.A.(19卯).PCRProtocols:AGuidetoMethodsandApplications,AcademicPress(美国学术出版S土)；Innis,M.A,等人.(1995).PCRStrategies,AcademicPress;Sninsky，J丄等人，(1999).PCRApplication:ProtocolsforFunctionalGenomics,AcademicPress;Gait,M丄(1985).OligonucleotideSynthesis:APracticalApproach,IRLPress;Gait,M.J.(1990).OligonucleotideSynthesis:APraticalApproach,IRLPress;Eckstein,F.(1991).OligonucleotideandAnalogues:APracticalApproach,IRLPress;Adams,RX.等人(1992).TheBiochemistryoftheNucleicAcids，Chapman&Hall;Shabarova,Z.等人.(1994).AdvancedOrganicChemistryofNucleicAcids,Weinheim;Blackburm，G.M.等人.(1996).NucleicAcidsinChemistryandBiology,OxfordUniversityPress;Herm肌son，G.T.(1996),BioconjugateTechniques,AcademicPress;MethodinEnzymology230、242、247,AcademicPress,1994;別册实验医学"遺伝子導入&幾現解析実験法(基因导入&表达分析实验法)"羊土社、1997等中有记载，它们的相关部分(也可能是全部)均作为参考引用到本说明书中。(优选实施方案的说明)以下，记载了优选实施方案的说明，但该实施方案只是本发明的例举，应理解本发明的范围只通it^利要求范围的限定并不受上述优选实施方案的限定。本领域技术人员参考本说明书，可以容易地进行本发明的范围内的改变、变更等。本发明的一个方案提供重組水痘带状疱瘆病毒。优选该水痘带状疱渗病毒在其基因组序列中含有BAC载体序列。通,建含有BAC载体序列的水痘带状疱渗病毒基因组，可以以BAC分子的形式在细菌内处理水痘带状疱渗病毒基因组。所使用的BAC载体序列优选含有来自F质粒的复制起点，也可以是来自F质粒的复制起点以外的序列，只要是作为细菌人工染色体可在细菌细胞内保持并增殖300kb以上的序列即可，可以利用任意的复制起点。本发明的BAC载体可在细菌宿主细胞、优选大肠杆菌细胞中保持和/或扩增。优选该BAC载体的一部分插入到水痘带状疱渗病毒基因组的非必需区域内，可以以舍有水痘带状疱渗病毒基因组的BAC的形式操作。含有该水痘带状疱疹病毒基园组的BAC导入到哺乳动物细胞中时，可以生产并增殖重组水痘带状疱渗病毒。重组水痘带状疱療病毒的宿主细胞可以使用野生型水痘带状疱渗病毒林可增殖的任意的哺乳动物细胞。优选该宿主细胞来自人，但并不限于此，例如有人MRC-5细胞、人HEL细胞、人WI-38细胞。(多价疫苗)本发明的BAC可以舍有编码除了由水痘带状疱渗病毒基因组所编码的蛋白质以外的任意的抗原蛋白的基因。对抗原蛋白并没有特别限定，但优选水痘带状疱渗病毒以外的病毒的蛋白质，结果，本发明可以提供多价疫苗。作为抗原蛋白来源的、水痘带状疱疹病毒以外的病毒例如有选自腮腺炎病毒、麻疹病毒、风疹病毒、西尼罗病毒、流感病毒、SARS冠状病毒和日本脑炎病毒的病毒，但并不限于此。在一个方案中，水痘带状疱疹病毒以外的病毒例如有选自腮腺炎病毒、麻渗病毒和风渗病毒的病毒，但并不限于此。在另一方案中，舍有水痘带状疱瘆病毒基因組的单一的BAC载体含有腮腺炎病毒的基因、麻參病毒的基因和风瘆病毒的基因。优选腮腺炎病毒的基因选自HN基因、H基因和N基因。优选麻渗病毒的基因选自H基因、F基因和N基因。优选风渗病毒的基因选自C基因、E1基因和E2基因。优选流感病毒的基因为HA基因。优选SARS冠状病毒的基因为S(突起)基因。优选西尼罗病毒的基因选自Pr基因和E基因。优选日本脑炎病毒的基因选自Pr基因和E基因。这些病毒基因是公知的，因此使用PCR法和杂交法等周知的技术，本领域技术人员可以分离这些病毒的基因。(舍有水痘带状疱渗病毒基因组的BAC载体的制备方法)使用水痘带状疱渗病毒基因组和BAC栽体，制M有水痘带状疱渗病毒基因組的BAC栽体，这可以使用各种周知的方法(采用同源重组的方法等)。采用同源重组的方法例如有使用具有将与水痘带状疱疹病毒基因组同源的序列连接的环状BAC载体序列的核酸的方法。使用具有将与水痘带状疱疹病毒基因组同源的序列连接而成的环状BAC栽体序列的核酸的、制名"^有水痘带状疱疹病毒基因組的BAC载体的方法的代表性例子包含以下步骤(l)将该核酸与水痘带状疱渗病毒基因組一起导入宿主内(例如，人抹化细胞内)；(2)培养宿主细胞，在与环状BAC载体序列连接的同源序列和水痘带状疱疹病毒基因組序列之间发生同源重组；(3)选择通过该同源重组产生的、含有插入了BAC载体序列的水痘带状疱渗病毒基因组序列的宿主细胞；(4)培养该宿主细胞，提取环状病毒DNA。为了使用水痘带状疱渗病毒基因组和BAC序列制备含有水痘带状疱渗病毒基因组的BAC，无需使用同源重组，也可以采用用核酸的限制酶片段等的各种公知的方法，在水痘带状疱渗病毒基因组内，用于导入BAC载体序列的非必需区域可选自以下区域基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因11的ORF相邻的区域、与基因12的ORF相邻的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域和与基因58的ORF相邻的区域、以及基因56、57、58相连续的区域。优选该非必需区域为基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域、与基因58的ORF相邻的区域、以及基因56、57、58相连续的区域。这是由于本发明中明确了，基因13、基因56、基因58、基因56、57、58相连续的区域即使在水痘带状疱療病毒基因组上发生缺损，也不会对病毒的增殖产生影响。或者，BAC载体序列的一部分可以插入到水痘带状疱渗病毒基因组的基因62的ORF内的区域。本发明中使用的BAC载体序列优选含有重组蛋白依赖性重组序列和/或含有选择标志。优选选择标志序列为药物选择标志和/或编码绿色荧光蛋白的基因。这是由于可以简便地确认所需的基因的存在。本发明中，作为起始物质使用的水痘带状疱渗病毒可以来自野生林，也可以来自变异株。优选作为起始物质的水痘带状疱瘆病毒使用减毒的病毒，例如Oka疫苗林或在基因62具有变异的水痘带状疱渗病毒。减毒的水痘带状疱渗病毒例如可以是具有选自以下的基因62的1或多个变异的组合的病毒(a)2110位碱基置换为G;(b)3100位石tt置换为G;(c)3818位碱基置换为C;(d)4006位碱基置换为G;(e)i251偉4tt置换为G;⑦2226位碱基置换为G;(g)3657位碱基置换为G。(h)162位碱基置换为C;(i)225位碱基置换为C;(0523位碱基置换为C;(k)1565位威基置换为C;(1)1763位碱基置换为C;(m)2652位碱基置换为C;(n)4052位碱基置换为C;和(o)4193位碱基置换为C。本发明的另一方案中，还提供用于制备上述病毒的载体、和上述病毒的制备方法。本发明的另一方案中，可提供舍有上述病毒的药物组合物和疫苗形式的药物组合物。本发明的重组水痘带状疱渗病毒可用作疫苗。这是由于它含有很多与野生型病毒具有同样的结构的蛋白质。本发明的另一方案提供向用于生产本发明的疫苗的栽体中导入变异的方法。该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细胞中的步骤；将含有由水痘带状疱瘆病毒基因组的一部分形成的片段的质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，这里,该片段至少具有一个变异；培养该细菌宿主细胞的步骤；由该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC载体序列的载体的步骤。上述方法中，在细菌宿主细胞内，在用于生产本发明疫苗的载体和含有由水痘带状疱渗病毒基因組的一部分形成的片段的质粒载体之间发生同源重组，结果，用于生产本发明的疫苗的载体具有由水痘带状疱瘆病毒基因组的一部分形成的片段上的变异。上述方法中，将载体导入到细菌宿主细胞的步骤可以使用电穿孔等各种周知的方法。同样，可以将含有由水痘带状疱瘆病毒基因组的一部分形成的片段的质粒栽体导入到细菌宿主细胞中。另外，作为向该片l更导入变异的方法，使用PCR的变异导入法是周知的，例如，在四个核苷酸中有一个缺少的奈件下使用不具有校正功能的耐热性聚合酶，由此可以随机诱变。另外，通过使用变异磁基序列的引物进行PCR,可以向所需位置导入所需变异。通过培养该细菌细胞，可以在用于生产本发明的疫苗的载体和含有由水痘带状疱渗病毒基因组的一部分形成的片段的质粒载体之间发生同源重组，结果，用于生产本发明的疫苗的载体具有由水痘带状疱疹病毒基因组的一部分形成的片段上的变异。由细菌宿主细胞制备BAC载体序列时，可以使用碱法等各种周知的方法和市售的试剂盒。本发明的另一方案中，可以进一步提供向用于生产本发明的疫苗的载体中导入变异的方法。该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细胞中的步骤；将含有由水痘带状疱瘆病毒基因組的一部分形成的第1片段的第l质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中，该第1片段至少具有一个变异；将含有由水痘带状疱渗病毒基因组的一部分形成的第2片段的第2质粒栽体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中，该第2片段至少具有一个变异，该笫2片段与该第1片段不同；培养该细菌宿主细胞的步骤；由该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC载体序列的载体的步骤。本发明的一个方案中，可以提供可在制备本发明的疫苗中使用的核酸盒。该核酸盒优选含有在细菌细胞内可以与水痘带状疱渗病毒基因组同源重组的第1片段、BAC载体序列、在细菌细胞内可与人水痘带状疱渗基因组同源重组的第2片段，其中，该BAC序列的两端分别与第1片段和第2片段连接。这里，第1片段和第2片段优选至少为1kb、至少1.5kb、至少2kb。该第1片段和第2片段相对于水痘带状疱渗病毒基因组的序列优选至少为80%同一、至少85%同一、至少90%同一、至少95°/。同一。优逸上述第l和第2片段各自独立，来自选自水痘带状疱渗病毒基罔组的下述区域的区域，或者与选自下述区域的区域至少为80%、85%、90%、95%同一基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因11的ORF相邻的区域、与基因12的ORF相邻的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域和与基因58的ORF相邻的区域。优选该第l和第2片段来自水痘带状疱疹病毒基因组的不同的区域。该第l和第2片段各自独立，可以来自基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因11的ORF相邻的区域、与基因12的ORF相邻的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域和与基因58的ORF相邻的区域。为了控制同源重组、简便地检测所需的基因，优选BAC载体序列含有重組蛋白依赖性重组序列和/或选择标志。该逸择标志可以是药物选择标志，也可以是编码像缘色荧光蛋白那样的荧光蛋白的基因。该BAC栽体序列的代表性的是具有SEQIDN0.3所示的核酸序列。(变异型重组水痘带状疱渗病毒的制备)使用本发明的方法，可以筒便地制备具有诱变的水痘带状疱渗病毒基因组的变异型水痘带状疱渗病毒。上述诱变例如可采用以下方法进行向大肠杆菌内导入(a)VZV-BAC-DNA质粒、以及(b)作为变异核酸，具有任意变异、具有水痘带状疱渗病毒基因组的部分序列的穿梭栽体或PCR产物。VZV-BAC-DNA质粒与其变异核酸之间发生重組，由此可以向VZV-BAC-DNA质粒中导入变异。另外通过使用转座子，也可以随机诱变。导入了变异的VZV-BAC-DNA质粒可在大肠杆菌内容易地进行选择和扩增。由具有变异的VZV-BAC-DNA生产病毒，由此可以获得重組水痘带状疱渗病毒(MarkusWagner，TRENDSinMierobilogy,10巻,No.7,2002年7月)。其具体例子如下。(1)使用含有变异水痘带状疱發病毒基因作为变异核酸的温度感受性穿梭栽体时首先，将穿梭栽体和VZV-BAC-DNA质粒经由第1同源区域重组，生产穿梭载体与VZV-BAC-DNA质粒连接而成的共插入体。接着，由于穿梭载体的复制起点具有温度感受性，由此除去穿梭质粒。在第2重组的情形中，除去共插入的部分。第2重組的情形经由笫1同源区域发生时，生成与重組中所使用的VZV-BAC-DNA具有同一序列的质粒。与此相对，第2重组的情形经由与第1同源区域不同的第2同源区域发生时，可得到具有穿梭载体上的变异的变异型VZV-BAC-DNA质粒。第1同源区域和第2同源区域为大致相同长度时，第2重组的情形在笫2同源区域发生的概率与第2重组的情形在第1同源区域发生的概率大致相同。因此，所得的VZV-BAC-DNA质粒的约二分之一是具有与在重组中使用的序列为同一序列的质粒，是约二分之一具有导入到穿梭载体中的变异的质粒。(2)使用线性DNA片段时该方法中，例如采用来自原噬菌体Rac的recET的重组功能，或者利用来自噬菌体X的redap重组功能，使用线性DNA片段，向环状VZV-BAC-DNA分子中导入变异。具体来说，将与粑序列相邻的选择标志和含有同源序列的线性DNA片段与VZV-BAC-DNA—起导入到可以发生同源重组的大肠杆菌中。为了避免线性DNA在大肠杆菌内的分解，优选使用外切核酸^损的大肠杆菌，或者是使来自嗛菌体的外切核酸酶抑制剂redy(gam)表达。线性DNA是在其两端具有与VZV-BAC-DNA质粒同源的区域。经由该同源区域发生同源重组，由此可以将线性DNA片段内的所需序列导入到VZV-BAC-DNA内。recET和redctp经由具有25~50个核苷酸左右长度的同源序列显示同源重組，因此，可以比recA中介的同源重组更简便地使用。(3)使用转座子时采用转座子元件向大肠杆菌内的核酸中随机插入的功能。例如，将具有所需外源基因的转座子元件和VZV-BAC-DNA导入大肠杆菌内，以便向VZV-BAC-DNA内随机插入转座子元件，由此获得具有插入了外源基因的VZV-BAC-DNA。并且，例如将具有向VZV-BAC-DNA的重组水痘带状疱瘆病毒的宿主细胞本身用"^秀变剂(例如，亚硝基胍)处置，由此可以向重組水痘带状疱瘆病毒基因組内导入随机的变异。(处方)本发明还提供通过对受试体给予有效量的治疗药、预防药来进行疾病或障碍(例如，感染症)的处置和/或预防的方法。治疗药、预防药是指与药学上可接受的载体型(例如，无菌载体)组合而成的本发明的组合物。治疗药、预防药可以考虑每位患者的临床状态(特别是用治疗药、预防药单独处置的副作用)、传递部位、给予方法、给予计划和本领域所公知的其它因素来给予，以遵守医疗实施基准(GMP-良好医疗规范)的方式进行处方和给药。因此，本说明书中，作为目标的"有效量，，是依据上述考虑而确定。作为通常的提案，每日的用量、非口服给予的治疗药、预防药的合计药学上的有效量是患者体重的约1ug/kg/天10mg/kg/天的范围，如上所述，这根据治疗上的裁量。进一步优选相对于本发明的细胞生理活性物质，该用量至少为0.01mg/kg/天，最优选每人为约0.01mg/kg/天和约1mg/kg/天之间。连续给予时，代表性的方式是以约1^tg/kg/小时~约50ug/kg/小时的给药速度、以每天1~4次注射或者是连续皮下注射(例如，使用微量泵)的任意方式给予治疗药、预防药。也可以使用静脉内用的袋溶液(intravenousbagsolution)。为了观察变化，必要的处置期间以及产生应答的处置后的间隔才艮据所需效果来变化。可以将治疗药、预防药以口另艮、直肠内、非口J3艮、脑池内(intracistemally)、阴道内、腹腔内、局部(粉剂、软膏、、输液剂或透皮贴剂等)、口内或经口或鼻腔的喷雾的形式给予。"药学上可接受的载体，，是指非毒性的固体、半固体或液体的填充剂、稀释剂、包覆材料或任意形式的处方助剂。本说明书中使用的术语"非口服"是指包含静脉内、肌内、腹腔内、胸骨内、皮下和关节内注射和注入的给药方式。本发明的治疗药、预防药可以通iM释系统适当给药。緩释性治疗药、预防药的适当例子可以以口服、直肠内、非口服、脑池(intracistemally)、阴道内、腹腔内、局部(粉剂、软膏、凝胶、输液剂或透皮贴剂等)、口内或经口或者鼻腔的喷雾的形式给予。"药学上可接受的载体，，是指非毒性的固体、半固体或液体的填充剂、稀释剂、包覆材料或任意形式的处方助剂。本说明书中使用的术语"非口服"是指包含静脉内、肌内、腹腔内、胸骨内、皮下和关节内注射和注入的给药方式。。由于是非口服给予，在一个实施方案中的处方通常是治疗药、预防药以所需程度的纯度，以单位给药量可注射的形式(溶液、混悬液或乳浊液)与药学上可接受的载体，即，在所使用的给药量和浓度下对受体没有毒性且与处方物的其它成分能够配合的栽体混合。例如该处方物优逸不含有氧化和已知对治疗药、预防药有害的其它化合物。通常，将治疗药、预防药与液体载体或微细分割的固体载体或其两者均匀紧密接触，制备处方物。接着，如果需要，可以将生成物成型为所需的处方物。优选栽体为非口服的栽体，更优选与受体的血液等渗的溶液。上述栽体的例子有水、生理盐水、林格氏溶液和右旋糖溶液。不挥发性油和油酸乙酯等非7]c性载体与脂质体同样，也可用于本说明书。载体可以适当含有可提高等渗性和化学稳定性的物质等的微量添加剂。上迷物质在所使用的给药量和浓度下对受体没有毒性，上述物质例如有磷酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、乙酸及其它有机酸或其它盐类等緩冲剂；抗坏血酸等抗氧化剂；低分子量(约比10个残基少)的多肽(例如，聚精氨酸或三肽)；血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白等蛋白质；聚乙烯吡咯烷酮等亲水性聚合物；甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或精氨酸等氨基酸；含有纤维素或其衍生物、葡萄糖、甘露糖或糊精的单糖类、二糖类及其它碳水化合物；EDTA等螯合剂；甘露醇或山梨醇等糖醇；钠的抗衡离子；和/或聚山梨醇酯、泊洛沙姆或PEG等非离子性表面活性剂。在治疗性给予中使用的任何药物，可以是不含有作为有效成分的病毒以外的生物、病毒的状态，即为无菌状态。可通过无菌滤膜(例如0.2pm的膜)过滤来容易地实现无菌状态。通常，治疗药、预防药是装在具有无菌进入孔的容器、例如可用皮下注射针穿刺的带塞的静脉内用的溶液袋或管形瓶中。治疗药、预防药通常是在单位用量或多个用量容器、例如密封安瓿瓶或管形瓶中，以水溶液或用于重构的冻干处方物的形式储存。冻干处方物的例子有在10mL的管形瓶中填充5mL无菌过滤的1%(w/v)治疗药、预防药水溶液，然后将所得混合物冻干。冻干的治疗药、预防药用注射用无菌水重构，制备注入溶液。本发明还提供药品包装或试剂盒，该药品包装或试剂盒具备装满了本发明的治疗药，预防药的一种以上成分的一个以上的容器。政府机构规定的药物或生物学制品的制备、使用或销售的认证许可可附着于上述容器上，该认证许可表示给予人的制造、使用或销售得到有关的政府机构的承认。并且可以将治疗药、预防药与其它治疗用化合物组合使用。本发明的治疗药、预防药可以单独或者与其它治疗药、预防药组合给予。可与本发明的治疗药、预防药組合给予的治疗药、预防药例如有化学疗法制剂、抗生素、类固醇和非类固醇的抗炎症剂、以往的免疫治疗药、预防药、其它细胞因子和/或生长因子，但并不限于此。組合例如可以是以混合物的形式同时；同时或者并行《旦分别；或者是不同时间分别给予。这包含组合的药物以治疗用混合物的形式一起给予，以及组合的药物分别但同时给予、例如对同一个体通过不同的静脉导管给予的顺序。"组合"的给予进一步包含给予第1、接着第2的化合物或药物中的一种的分别给予。在特定的实施方案中，本发明的治疗药、预防药可以与抗反转录病毒药物、核苷反转录酶抑制剂、非核苷反转录酶抑制剂、和/或蛋白酶抑制剂等組合给予。在又一实施方案中，本发明的治疗药、预防药可以与抗生素组合给予。可以使用的抗生素例如有tt糖苷系抗生素、多烯系抗生素、青霉素系抗生素、头孢烯系抗生素、肽系抗生素、大环内酯类抗生素、四环素系抗生素，但并不限于此。在另一个实施方案中，本发明的治疗药、预防药可以单独或者与抗炎症药组合给予。可与本发明的治疗药、预防药一起给予的抗炎症药例如有糖皮质激素和非类固醇抗炎症药、氨基芳基羧酸衍生物、芳基乙酸衍生物、芳基丁酸衍生物、芳基羧酸、芳基丙酸衍生物、吡唑、吡唑酮、水杨酸衍生物、瘗溱甲酰胺、e-乙酰胺己酸、S-腺芬甲硫氨酸、3-氨基-4-羟基丁酸、阿米西群、节达酸、千达明、布可隆、联笨他胺、地他唑、依莫法宗、愈创蓝油烃、萘丁美酮、尼美舒利、奥古蛋白、奥沙西罗、瑞尼托林、哌立索唑、哌福肟、普罗喹宗、普罗沙唑、替尼达普等，但并不限于此。在又一实施方案中，本发明的治疗药、预防药可以与其它治疗方案/预防方案(例如放射线治疗)组合给予。以下，通过实施例等进一步详细说明本发明，但本发明并不受限于这些实施例。(实施例l:插入BAC载体的区域(基因)的选择)利用BAC栽体制备插入了外源抗原基因的重组病毒时，由于插入多数外源基因而使因组尺寸增大。已知基因组尺寸过大，则基因組DNA无法包装到病毒壳体中，结果无法制备重组病毒。因此，为了将多数抗原基因插入到Oka疫苗抹中，必须考虑将Oka疫苗林的非必需基因敲除，减小基因组DNA的尺寸。另外，即使敲除病毒也可以增殖的非必需基因是适合作为将BAC载体序列或編码来自其它病毒的抗原蛋白的基因等的外源序列插入的部位。因此，使用将水痘病毒Oka原林基因组插入到BAC载体中得到的重组DNA(P-Oka林VZV-BAC-DNA)，研究基因7的ORF(HSVUL51同系物)、基因13的ORF(胸腺嘧咬核苷合成酶)、基因21的ORF(核壳)、基因48的ORP(蛋白激酶)、基因46的ORF(HSVUL16同系物)、基因56的ORF(HSVUL4同系物)、基因58的ORF(HSV-1UL3同系物)、基因66的ORF(蛋白激酶)基因分别是非必需基因还是必需基因。(方法)在卡那霉素基因的两端连接作为敲除目标的基因序列，使其与作为目标基因的基因组内的取向为同一方向，制备敲除载体。将该敲除载体导入到保持有P-Oka株VZV-BAC-DNA的大肠杆菌中，在敲除载体和P-Oka林VZV-BAC-DNA之间发生同源重组，敲除目标基因。(结果)将^&因13的ORF、基因56的ORF、基因58的ORF和基因560RF-基因570RF-基因580RF的连续区域缺损的P-Oka抹VZV-BAC-DNA转染MRC-5细胞，产生重組病毒。由此表明这些基因是非必需基因。关于基因13和57的ORF，认为其是非必需基因，这在本次试验中得到确认。将以往被认为是必需基因的基因21敲除，无法获得重组病毒。与此相对，使以往被认为是非必需基因的基因7、基因46、基因48和基因66缺损，无法得到重组病毒。在通过本次试验证实为非必需基因的基因中，将基因56缺损P-Oka的噬斑尺寸与P-Oka比银，<錄因56缺损P-Oka感染MRC-5细胞时的噬斑尺寸比其它非必需基因缺损时稍小，但没有显著差异。由以上结果表明，单由结构是难以判断水痘带状疱瘆病毒基因是否为病毒增殖所必需的。由本次结果表明，除以往被认为是非必需基因的基因13、基因57之外，基因56和基因58也是非必需基因，即使敲除对于病毒的增殖也不会有影响。特别是基因58即使缺损，对病毒增殖没有任何影响。因此，表明除基因13和57之外，基因56和基因58、特别是从基因56至基因58的连续区域是敲除以乂作为外源序列(例如，BAC载体序列和编码其它抗原的基因序列)的插入位点的适合基因。(实施例2:通过向基因13的ORF中插入腮腺炎病毒HN基因来制备多价疫苗)实施例1中表明，基因13是敲除和/或插入外源序列的适合基因，因此，通过向该基因13的ORF中插入腮腺炎病毒HN基因来制备多价疫苗。使用PCR由野外流行株一岩崎林扩增腮腺炎病毒的HN基因和F基因。对克隆的岩崎株的F基因和HN基因的g^列进行分析，F基因与野外林或疫苗林相比，显示较高的同源性(>98.5),而HN基因与90年代后期以后的野外株的同源性高，与卯年代前期以前的野外林或疫苗林的同源性低(约96°/0)。接着，在克隆的基因的上游可动作地连接人巨细胞病毒(CMV)的启动子/增强子序列。将使用了HN基因和F基因的质粒分别命名为pDEST26/MeV-HN和pDEST26/MeV-F。人巨细胞病毒的启动子/增强子序列具有NF-kB结合位点、AP-1结合位点和TATA盒(图1)。将pDEST26/MeV-F和pDEST26/MeV-HN转染293细胞，通过荧光抗体法与多种抗MeV抗体反应。结果，转染pDEST26/MeV-F的293细胞不与任何抗体反应，但转染pDEST26/MeV-HN的细胞与一些抗MeV抗体(也包括具有中和活性的抗体)反应。在结合有该腮腺炎病毒HN基因和CMV启动子/增强子的核,列的两端连接基因13的上游和下游，制备载体(碱基编号为P-0ka的碱基编号，为SEQIDN0.4所示的Dumas抹时，分别对应17037~18440和19347~20350)。将该载体导入到保有P-Oka抹的VZV-BAC-DNA的大肠杆菌内，在载体和P-Oka株VZV-BAC-DNA之间发生同源重组，基因13的ORF、与腮腺炎病毒NH基因与CMV启动子/增强子的连接序列发生同源重組(图2)。通过PCR和限制酶消化来确认发生了同源重组。接着，将通过同源重组制备的BAC载体通过电穿孔转染MRC-5细胞。转染的细胞的噬斑尺寸与使用未破坏基因13的病毒时同样。为了检测腮腺炎病毒的HN基因产物，分别使用FITC标记的抗腮腺炎病毒HN蛋白抗体(小鼠免疫球蛋白/FITC山羊F(ab，)2,DakoCytomationDenmarkA/S，Produktionsvej42，DK-2600Glostrup，Denmark)和Alexa594标记的抗腮腺炎病毒HN蛋白抗体(AlexaHour(注册商标)594、山羊的抗小鼠IgG(H+L)的F(ab，)2片段，MolecularProbesinvitrogendetectiontechnologiesEugene,Oregon,U,S.A)，确认了HN基因在转染的细胞中的表达。结果，使用任何标记抗体都可以确认HN蛋白的表达。通过本实施例，在不抑制病毒的增殖的情况下，可以简便地制备针对水痘带状疱渗病毒和腮腺炎病毒两者的多价疫苗。(实施例3)(病原性弱的变异型重组水痘带状疱渗病毒林的制备)根据本发明，通过采用以下的方法可以制备变异型重组水痘带状疱渗病毒，可以从变异病毒中获得病原性弱的变异水痘带状疱渗病毒抹。(1:变异型重组水痘带状疱渗病毒的制备)变异型重组水痘带状疱疹病毒的制备方法例如有通过在含有变异基因的核酸和VZV-BAC-DNA质粒之间发生同源重组来制备变异型重组水痘带状疱瘆病毒。与VZV-BAC-DNA质粒发生同源重組中所使用的变异基因可以具有随机的变异，也可以具有定向位点变异。使用上述任一种方法，可以获得具有随机变异的变异型重组水痘带状疱疹病毒集闳、和具有定向位点变异的变异型重组水痘带状疱渗病毒。以下，对各情况进行更详细地说明。(1.1:具有随机变异的变异型重組水痘带状疱渗病毒的制备)几种在水痘带状疱渗病毒基因组的基因62上具有变异的病毒是减毒病毒，这是公知的。因此，本实施例中，使用PCR制备随机诱变的基因62。使用PCR的诱变的方法是周知的，例如在4个核苷酸中缺少一个的条件下使用不具有校正功能的耐热性聚合酶，由此可以随机诱变。还可根据需要，在变异型62基因上连接抗药性基因等标志基因。通过电穿孔法，将上述制备的变异型基因62与VZV-BAC-DNA质粒一起导入到大肠杆菌中，使变异型基固62与VZV-BAC-DNA之间发生同源重组。然后，分离发生了同源重组的水疽带状疱疹病毒的DNA，导入到大肠杆菌中，得到含有发生了同源重组的VZV-BAC-DNA的大肠杆菌。所得的多数;U^杆菌具有VZV-BAC-DNA,该VZV-BAC-DNA含有具各种不同的变异的基因62。因此，采用下述(2:水痘带状疱疹病毒的病原性试验方法)，对由于各大肠杆菌中所含的变异型VZV-BAC-DNA所产生的水痘带状疱瘆病毒的病原性程度进行筛选。(i.2:具有定向位点变异的变异型重组水痘带状疱渗病毒的制备)导入所需的定向位点变异的方法也是本领域所周知的。例如，使用具有所需变异的引物进行PCR，制备具有该所需变异的基因片段，然后使用该变异基因片段进一步进行PCR,或者是进行限制酶等的酶处理，制备具有所需变异的全长基因。对于上述制备的变异基因，采用上述(l丄)的顺序，制备具有定向位点变异的变异型重组水痘带状疱渗病毒。(2:水痘带状疱渗病毒的病原性的试验方法)关于对水痘带状疱渗病毒的病原性进行试验的方法，确立了两种方法。使用动物模型的方法是制备移植了人皮肤的联合免疫缺陷(SCID)小鼠，通过对其感染水痘带状疱渗病毒来评价病原性，该方法为众所周知(J.Virol.1998Feb,72(2):965~74)。与此相对，在试管内进行病原性的评价的方法是在用孔径3^im的trans-well分隔的双层孔的下侧加入单层培养的人黑素瘤细胞，上侧加入感染了水疸带状疱渗病毒的脐带血单核细胞(CBMC),培养7~8天后观察黑素瘤细胞的CPE(细胞变性效果)的程度。这也是众所周知的方法(J.Virol.2000Feb;74(4):1864~70)。本发明人等以往的试验结果(J.Virol.2002Nov;76(22):11447~59)表明，病毒的病原性与增殖性密切相关，因此，可以通过感染中心测定来研究细胞到细胞的增殖性，由此间接性地对病原性进行评价，但这不是直接确认病原性的方法。(实施例4)(疫苗的制备)在培养面积210cm2的20个Roux扁瓶中培养MRC-5细胞，接种实施例2所得的重组水痘带状疱渗病毒，然后培养。培养结束后舍去培养液，将备Roux扁瓶内的感染细胞用200mL的PBS(-)洗涤2次。接着将20mL的0.03%(w/v)EDTA-3Na铺在各Roux扁瓶的感染细胞上，使细胞由Roux扁瓶内壁面剥离并浮游，合并各Roux扁瓶内的感染细胞浮游液，以2,000rpm、在4。C下离心10分钟，收集感染细胞的沉淀。将其重新悬浮于100mL的PBS(-)中，进行1次冷冻溶化。接着，在水水浴中进行超声波处理(20KHz、150mA、0.3秒/mL),然后以3,000rpm、在4。C下离心20分钟，收集舍有细胞游离病毒的上清，将其作为活疫苗原液。从该原液中取样30mL作为检测用，向70mL残余的原液中添加并混合溶解于PBS(-)的蔗糖和明胶水解物，作为疫苗稳定剂，终浓度为5%(w/v)和2.5%(w/v)，结果，制备140mL活疫苗最终批。从该最终批中取样30mL作为检测用，然后将其余的批以0.5ml分別分注到3mL容量的管形瓶中，冻干后填充氮气，用橡皮盖密封，使管形瓶内部密闭。该活疫苗在4"C下保存，在即将使用之前添加0.5mL注射用蒸馏7jc,将干燥内容物完全溶解使用。另一方面，对取样的上述疫苗原液、最终批、以及20瓶分注品进行检测试验。该检测试验是为了确认安全性、有效性和均匀性，为了确定活疫苗的适合性，可按照日本厚生省告示第195号规定的生物学制剂基准(1989年)"千燥减毒活水痘疫苗"，且考虑该规定的基准"重组沉淀B型肝炎疫苗(来自酵母)"实施。该检测试验的结果表明上述分注品的病毒含量为2xl04PFU(噬斑形成单位)/0.5mL,且在按照上述基准进行各种规定的试验合格时，可以作为具备适合性的活疫苗用于之后的应用中。(实施例5)(重组水痘带状疱渗病毒疫苗的免疫原性的判定)使用豚鼠对实施例4制备的重組水痘带状疱渗病毒疫苗林的免疫原性进行测定。作为比较对照，使用Oka林活疫苗。将这些疫苗分别皮下接种于三只3周龄的平均体重250g的豚鼠。疫苗接种中的接种量是在重组抹和Oka株活疫苗中，用PBS(-)稀释调节各疫苗，使其浓度为3，000PFU或2,000PFU/豚鼠。疫苗接种后第4、6和8周，从各被接种豚鼠的股静脉部分采血，测定血液抗体效价。抗体敢价的测定采用中和试验法(JoumaiofGeneralVirology,61，255~269，1982)。确认上迷重組水痘带状疱渗病毒疫苗与Oka林同等程度地诱导抗VZV抗体。由上述结果可以选择免疫原性良好的重组水痘带状疱渗病毒。如上所述，采用本发明的优选实施方案例举了本发明,但应理解本发明只通过权利要求范围来解释其范围并不受上述优选实施方案的限定。本领域技术人员参考本说明书，可以容易地进行本发明的范围内的各种变更、相应改进等。应理解本说明书中所引用的专利、专利申请和文献，其内容本身与本说明书中具体记栽的同样，其内容是作为本说明书的参考引用。产业实用性本发明提供例如使用BAC(大肠杆菌人工染色体)制备舍有重組水痘带状疱渗病毒抗原以及其它病毒抗原的疫苗的方法，以及由该方法制备重组水痘带状疱渗病毒。本发明还提供含有重組水疸带状疱疹病毒等的抗原的多价疫苗。本发明进一步提供舍有水痘带状疱渗病毒基因组基因和BAC载体序列的载体、含有该载体的细胞、以及含有可以与水痘带状疱瘆病毒基因组同源重组的片段和BAC载体序列的核酸盒。序列表的描述SEQIDNO.l:基因62的核酸序列SEQIDN0.2:基因62的氨基酸序列SEQIDN0.3:质粒PHA-2的序列SEQIDN0.4:水痘带状疱渗病毒Dumas抹SEQIDN0.5:在SEQIDN0.4的1134位~1850位沿5，—3'方向编码的氛基,列(基因2)SEQIDN0.6:在SEQIDN0.4的8607位~9386位沿5，—3'方向编码的tt^^列(基因7)SEQIDN0.7:在SEQIDNO.4的10642位~10卯2位沿5，—3'方向编码的tt酸序列(基因9A)SEQIDN0.8:在SEQIDN0.4的11009位~11917位沿5，—3，方向编码的M酸序列(基因9)SEQIDN0.9:在SEQIDN0.4的12160位~13392位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因10)SEQIDNO.10:在SEQIDN0.4的135卯位~16049位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因11)SEQIDNO.l1:在SEQIDN0.4的16214位~18199位沿5，—3，方向编码的tt酸序列(基因12)SEQIDNO.12:在SEQIDN0.4的18441位~19346位沿5，—3，方向编码的tt酸序列(基因13)SEQIDN0.13:在SEQIDNO.4的24149位~25516位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因17)SEQIDN0.14:在SEQIDN0.4的30759位~33875位沿5，—3'方向编码的tt酸序列(基因21)SEQIDNO.15:在SEQIDN0.4的34083位~42374位沿5，—3，方向编码的M酸序列(基因22)SEQIDN0.16:在SEQIDN0.4的44506位~46263位沿5，—3，方向编码的H&酸序列(基因26)SEQIDN0.17:在SEQIDN0.4的50857位~54471位沿5，—3'方向编码的M酸序列(基因29)SEQIDN0.18:在SEQIDN0.4的54651位~56963位沿5，—3'方向编码的氛基酸序列(基因30)SEQIDN0.19:在SEQIDNO,4的57008位~59614位沿5，—3'方向编码的M酸序列(基因31)SEQIDNO.20:在SEQIDN0.4的59766位~60197位沿5，—3，方向编码的M酸序列(基因32)SEQIDN0.21:在SEQIDN0.4的64807位~65832位沿5，—3，方向编码的tt酸序列(基因36)SEQIDN0.22:在SEQIDNO,4的66074位~68599位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因37)SEQIDN0.23:在SEQIDN0.4的70633位~71355位沿5，—3'方向编码的氨基酸序列(基因39)SEQIDN0.24:在SEQIDN0.4的71540位~75730位沿5，—3'方向编码的氨基酸序列(基因40)SEQIDN0.25:在SEQIDN0.4的75847位~76797位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因41)SEQIDN0.26:在SEQIDN0.4的78170位~80200位沿5，—3'方向编码的氨基酸序列(基因43)SEQIDN0.27:在SEQIDN0.4的80360位~81451位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因44)SEQIDN0.28:在SEQIDN0.4的82719位~83318位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因46)SEQIDN0.29:在SEQIDNO,4的84667位~86322位沿5，—3'方向编码的氨基酸序列(基因48)SEQIDNO.30:在SEQIDN0.4的87881位~卯388位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因51)SEQIDNO.31:在SEQIDN0.4的卯493位~92808位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因52)SEQIDN0.32:在SEQIDN0.4的95996位~98641位沿5，—3'方向编码的氨基酸序列(基因55)SEQIDN0.33:在SEQIDN0.4的110581位~U1417位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因63)SEQIDN0.34:在SEQIDN0.4的111565位~112107位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因64)SEQIDN0.35:在SEQIDNO,4的113037位~114218位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因66)SEQIDN0.36:在SEQIDN0.4的114496位~115560位沿5，—3，方向编码的氨基酸序列(基因67)犯QIDN0.37:在SEQIDN0.4的115808位~117679位沿5，—3，方向编码的tt酸序列(基因68)SEQIDN0.38:在SEQIDN0.4的120764位~124696位沿5，—3，方向编码的tt^列(基因71)SEQIDN0.39:SEQIDN0.4的部分序列(基因27)SEQIDNO.40:在SEQIDN0.39的1位~999位沿5，—3'方向编码的tt酸序列(基因27)SEQIDN0.41:SEQIDN0.4的部分序列(基罔47)SEQIDN0.42:在SEQIDN0.41的1位~1530位沿5，—3'方向编码的氨基^列(基因47)SEQIDN0.43:SEQIDN0.4的部分序列SEQIDN0.44:在SEQIDN0.43的1位~243位沿5，屮3，方向编码的tt,列(基因49)SEQIDNO.45:SEQIDN0.4的部分序列SEQIDN0.46:在SEQIDN0.45的1位~732位沿5，—3，方向编码的tt^列(基因56)SEQIDN0.47:SEQIDN0.4的序列的互补序列SEQIDN0.48:在SEQIDN0.4的118480位~119316位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的5569位~6405位对应)(基因70)SEQIDNO.49:在SEQIDNO.4的1177卯位~118332位沿3，—5，方向编码的氨基^列(与SEQIDN0.47的6553位~7095位对应)(基因69)SEQIDNO.50:在SEQIDN0,4的112332位~112640位沿3，—5，方向编码的M酸序列(与SEQIDN0.47的12245位~12553位对应)SEQIDN0.51:在SEQIDNO.4的105201位~109B3位沿3，—5，方向编码的^J^酸序列(与SEQIDN0.47的15752位~19684位对应)(基因62)SEQIDN0.52:在SEQIDN0.4的103082位~104485位沿3，—5，方向编码的tt酸序列(与SEQIDN0.47的20400位~21803位对应)(基因61)SEQIDN0.53:在SEQIDNO,4的100302位~101219位沿3，—5，方向编码的氨基,列(与SEQIDN0.47的23666位~24583位对应)(基因59)SEQIDN0.54:在SEQIDN0.4的99411位~99626位沿3，—5，方向编码的M酸序列(与SEQIDN0.47的25259位~25474位对应)(基因57)SEQIDN0.55:在SEQIDNO,4的92855位~93850位沿3，—5'方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的31035位~32030位对应)(基因53)SEQIDN0.56:在SEQIDNO.4的68668位~702930位沿3，—5'方向编码的tt酸序列(与SEQIDN0.47的54592位~56217位对应)(基因38)SEQIDN0.57:在SEQIDNO.4的63977位~64753位沿3，—5，方向编码的絲酸序列(与SEQIDN0.47的60132位~60908位对应)(基因35)SEQIDN0.58:在SEQIDNO.4的62171位~63910位沿3，—5，方向编码的tt酸序列(与SEQIDN0.47的60975位~62714位对应)(基因34)SEQIDN0.59:在SEQIDNO.4的60321位~62138位沿3，—5，方向编码的絲醋列(与SEQIDN0.47的62747位~64564位对应)(基因33)SEQIDNO.60:在SEQIDNO.4的47052位~50636位沿3，—5'方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的74249位~77833位对应)(基因28)SEQIDN0.61:在SEQIDN0.4的44148位~44618位沿3，—5'方向编码的tt酸序列(与SEQIDNO.47的80267位~80737位对应)(基因25)SEQIDN0.62:在SEQIDN0.4的43212位~44021位沿3，—5，方向编码的tt齡列(与SEQIDN0.47的80864位~81673位对应)(基因24)SEQIDN0.63:在SEQIDN0.4的42431位~43138位沿3，—5'方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的81747位~82454位对应)(基因23)SEQIDN0.64:在SEQIDN0.4的2卯24位~30475位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的94410位~95861位对应)(基因20)SEQIDN0.65:在SEQIDN0.4的26518位~28845位沿3，—5，方向编码的絲酸序列(与SEQIDNO.47的96040位~98367位对应)(基因19)SEQIDN0.66:在SEQIDN0.4的25573位~26493位沿3，—5，方向编码的tt酸序列(与SEQIDNO.47的98392位~99312位对应)(基因18)SEQIDN0.67:在SEQIDN0.4的22568位~23794位沿3，—5，方向编码的AJ-酸序列(与SEQIDNO.47的101091位~102317位对应)(基因16)SEQIDN0.68:在SEQIDN0.4的21258位~22478位沿3，—5，方向编码的tt酸序列(与SEQIDNO.47的102407位~103627位对应)(基因15)SEQIDN0.69:在SEQIDN0.4的19431位~21113位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDNO.47的103772位~105454位对应)(基因14)SEQIDNO.70:在SEQIDN0.4的9477位~10667位沿3，—5，方向编码的氨基齡歹ij(与SEQIDN0.47的114218位~U5408位对应)(基因8)SEQIDN0.71:在SEQIDNO.4的5326位~8577位沿3，—5'方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的116308位~119559位对应)(基因6)SEQIDN0.72:在SEQIDNO.4的4252位~5274位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的119611位~120633位对应)(基因5)SEQIDN0.73:在SEQIDNO.4的2783位~4141位沿3，—5，方向编码的M酸序列(与SEQIDN0.47的120744位~122102位对应)(基因4)SEQIDN0.74:在SEQIDNO.4的1908位~2447位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的122438位~122977位对应)(基因3)SEQIDN0.75:在SEQIDNO.4的589位~915位沿3，—5，方向编码的氨基贿列(与SEQIDN0.47的123970位~124296位对应)(基因1)SEQIDN0.76:SEQIDN0.47的部分序列SEQIDNO,77:在SEQIDN0.76的1位~1056位和4556位~5740位沿3，—5'方向编码的M酸序列(与SEQIDN0.47的46847位~48034位和42292位~43347位对应)(基因42和基因45)SEQIDN0.78:SEQIDN0.47的部分序列SEQIDN0.79:在SEQIDN0.78的1位~1305位沿3，—5，方向编码的氨基絲歹'K与SEQIDN0.47的123580位~124884位对应)(基因50)SEQIDNO.80:SEQIDN0.47的部分序列SEQIDN0.81:在SEQIDNO.80的1位~2307位沿3，—5'方向编码的氨基酸序列(与SEQIDNO.47的122578位~124884位对应)(基因54)SEQIDN0.82:SEQIDN0.47的部分序列SEQIDNO.83:在SEQIDN0.82的1位~663位沿3，—5'方向编码的M酸序列(与SEQIDN0.47的124222位~124884位对应)(基因58)SEQIDN0.84:SEQIDN0.47的部分序列SEQIDN0.85:在SEQIDN0.84的1位~427位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的124458位~124884位对应)(基因60)SEQIDN0.86:SEQIDNO,47的部分序列SEQIDN0.87:在SEQIDN0.86的1位~卯3位沿3，—5，方向编码的氨基酸序列(与SEQIDN0.47的60321位~61229位对应)(基因33,5)权利要求1.重组水痘带状疱疹病毒，该重组水痘带状疱疹病毒是BAC载体序列的至少一部分插入到水痘带状疱疹病毒基因组的非必需区域内得到的，其中该非必需区域选自下述的区域基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域、和与基因58的ORF相邻的区域。2.权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒，其中该水疽带状疱疹病毒中选自基因13、基因56、基因57、和基因58的基园至少有2个缺损。3.权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒，其中该7JC痘带状疱疹病毒中选自基因13、基因56、基因57、和基因58的基因至少有3个缺损。4.权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述BAC栽体序列舍有重组蛋白依赖性重组序列。5.权利要求1的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上述BAC载体序列含有选自腮腺炎病毒、麻渗病毒、风渗病毒、西尼罗病毒、流感病毒、SARS冠状病毒、和日本脑炎病毒的病毒的基因。6.权利要求1的重組水痘带状疱疹病毒，其中上述BAC载体序列含有选自腮腺炎病毒、麻渗病毒、和风疹病毒的病毒的基因。7.权利要求6的重組水痘带状疱疹病毒，其中上述BAC载体序列含有腮腺炎病毒的基因、麻渗病毒的基因、和风疹病毒的基因。8.权利要求6的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上迷腮腺炎病毒的基因选自HN基因、F基因、和N基因。9.权利要求6的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上i^Nf病毒的基因选自H基因、F基因、和N基因。10.权利要求6的重组水痘带状疱疹病毒，其中上述风渗病毒的基因选自C基因、El基因、和E2基因。11.权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述水痘带状疱瘆病毒基因組来自野生株。12.权利要求1的重组水疽带状疱渗病毒，其中上迷水痘带状疱渗病毒基因组来自变异林。13.权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因组来自Oka疫苗抹。14.权利要求1的重组水痘带状疱瘆病毒，其中上迷水痘带状疱渗病毒基因組在基因62和基因6上具有变异。15.权利要求14的重组水痘带状疱渗病毒，其中上述基因62是在SEQIDNCU的tt序列中至少具有以下(a)(d)的碱基置换(a)2110位减基置换为G;(b)3100位碱基置换为G;(c)3818位碱基置换为C;和(d)4006位4tt置换为G,以及上述基因6是在SEQIDN0.4的碱基序列中至少具有5745位碱基置换为G的碱基置换。16.药物组合物，该药物组合物含有权利要求1的病毒。17.权利要求16的药物組合物，其中该药物组合物是疫苗形态。18.载体，该栽体从权利要求1的重组水痘带状疱渗病毒中分离。19.细胞，该细胞含有权利要求18的载体。20.权利要求19的细胞，其中该细胞为细菌。21.权利要求20的细菌，其中该细菌为大肠杆菌。22.权利要求19的细胞，其中该细胞为哺乳动物细胞。23.权利要求22的哺乳动物细胞，其中该哺乳动物细胞为来自人的细胞。24.病毒，该病毒由4又利要求22的哺乳动物细胞生产。25.药物组合物，该药物组合物舍有权利要求24的病毒。26.重組水痘带状疱渗病毒的制备方法，该方法包含以下步骤将权利要求18的栽体导入到哺乳动物宿主细胞中的步骤；以及培养该哺乳动物宿主细胞，生产重組水痘带状疱渗病毒的步骤。27.权利要求26的方法，其中上述哺乳动物宿主细胞是来自人的细胞。28.权利要求26的方法，该方法进一步包含在上述2个重組蛋白依赖性重组序列之间发生重组的步骤。29.向权利要求18的载体导入变异的方法，该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细胞的步骤；将含有由水痘带状疱渗病毒基因组的一部分形成的片段的质粒栽体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中该片段至少具有一个变异；培养该细菌宿主细胞的步骤；以及从该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC栽体序列的栽体的步骤。30.向权利要求18的载体导入变异的方法，该方法包含以下步骤将该载体导入到细菌宿主细J3包的步骤；将含有由水痘带状疱渗病毒基因组的一部分形成的第1片段的第l质粒载体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中该第l片段具有至少l个变异；将含有由水痘带状疱疹病毒基因组的一部分形成的第2片段的笫2质粒栽体导入到该细菌宿主细胞的步骤，其中该第2片段具有至少l个变异，该第2片段与该第l片段不同；培养该细菌宿主细胞的步骤；以及从该培养的细菌宿主细胞中分离具有BAC载体序列的栽体的步骤.。31.核酸盒，该核酸盒含有在细菌细胞内可以与水痘带状疱渗病毒基因组同源重組的第1片段、BAC载体序列、以及在细菌细胞内可以与水痘带状疱渗病毒基因组同源重组的第2片段，其中该BAC序列的两端分别与第1片段和第2片段连接，这里，上述第1和第2片段各自独立，来自选自水痘带状疱渗病毒基因组的以下区域的区域基因13的ORF内的区域、基因56的ORF内的区域、基因57的ORF内的区域、基因58的ORF内的区域、与基因13的ORF相邻的区域、与基因56的ORF相邻的区域、与基因57的ORF相邻的区域、与基因58的ORF相邻的区域、以及基因56、57和58的连续的区域。32.权利要求31的核酸盒，其中上述第1片段和第2片段至少为lkb。33.权利要求31的核酸盒，其中上述第1片段和第2片段至少为1.5kb。34.权利要求31的核酸盒，其中上迷第1片段和第2片段至少为2kb。35.权利要求31的核酸盒，其中上述第1片段和第2片段与水痘带状疱渗病毒基因组的序列至少80%同一。36.权利要求31的核酸盒，其中上述第1和第2片段来自不同的区域。37.权利要求31的核酸盒，其中上述BAC栽体序列含有重组蛋白依赖性重组序列。38.权利要求31的核酸盒，其中上述BAC载体序列含有选择标志。39.权利要求31的核酸盒，其中上迷水痘带状疱發病毒基因组来自野生林。40.4又利要求31的核酸盒，其中上述水痘带状疱渗病毒基因組来自变异株。41.权利要求31的核酸盒，其中上迷水痘带状疱渗病毒基因组来自Oka疫苗株。42.权利要求31的核酸盒，其中上述BAC载体序列具有SEQIDN0.3的核酸序列。全文摘要本发明的课题在于提供重组水痘带状疱疹病毒；及其制备方法；含有重组水痘带状疱疹病毒的药物组合物；在水痘带状疱疹病毒基因组基因的特定基因上含有BAC载体序列的载体；含有该载体的细胞；可以与水痘带状疱疹病毒基因组同源重组的片段；含有BAC载体序列的核酸盒；以及多价疫苗。通过开发在特定的病毒基因上插入BAC载体序列的重组水痘带状疱疹病毒的制备方法，可以解决上述课题。文档编号A61P37/04GK101360823SQ20058005251公开日2009年2月4日申请日期2005年11月24日优先权日2005年11月24日发明者P·索姆布恩图姆,五味康行,吉井洋纪,山西弘一,森康子,高桥理明申请人:财团法人阪大微生物病研究会;独立行政法人医药基盘研究所