专利名称：由板蓝根和射干制成的药物组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，涉及一种由射干或其提取物和板蓝根或其提取物制成的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
目前，对如青霉素、阿莫西林等许多传统抗生素抗药性的蔓延已引起了医药界的高度关注和重视，多种耐药性菌株大量出现及新病毒的出现，使难治性感染越来越多。与此同时，传统中草药等天然药物的配伍或有效成分的组合物往往具有互补、协同增效作用，亦不产生耐药性，因而对天然药物的发掘和研究日益受到重视。
射干为鸢尾科植物射干Belamcanda chinensis(L.)DC.的干燥根茎。其味苦、性寒，入肝肺经，具有清热解毒、清热、利咽之功效，主要用于热毒痰火郁结、咽喉肿痛、痰涎壅盛、咳嗽气喘等症。射干始载于《神农本草经》，列为下品，为治疗喉痹咽痛之要药，且此类方剂大多以射干为君药组方，其效颇佳。《本草经疏》称“苦能下泻，故善降；兼辛，故善散，故主咳逆上气，喉痹咽痛”。《本草衍义补遗》称“射干行太阴，厥阴之积痰，使结核自消甚捷”。《本草纲目》称射干为“治疗喉痹咽痛之要药”。在中国许多经典方剂专著中，如《圣济总录》、《医方大成论》、《千金方》等多有收载。射干主要含有异黄酮类化合物，此外还含有酮类、醌类、酚类、二环三萜类、甾类化合物。其中，射干中的主要成分鸢尾苷及其苷元鸢尾黄素、芒果素、1，4-苯醌、白藜芦醇和茶叶花宁、异丹叶大黄素等具有抗炎作用，野鸢尾黄素在组织培养中抗流感病毒、延迟柯萨奇病毒、埃可病毒引起的细胞病变和具有抗肺炎球菌活性，鸢尾苷、鸢尾黄素可选择性地治疗和预防心血管疾病、骨质疏松和更年期综合征。此外，射干具有弱的抗溃疡作用，而利胆作用持久；对刺激大肠性及小肠性腹泻的作用且作用持久；抗血栓作用较强，10g/kg能明显延长血栓的形成时间；还具有抗过敏作用。射干是我国中医的传统用药。近年来国内外进行了大量研究，证明了射干具有确切的作用，前景乐观。
板蓝根(Radix Isatidis)别名靛青根、蓝靛根、靛根，为十字花科菘蓝属植物菘蓝(Isatisindigotica Fort.)的干燥根，味苦、性寒，具有清热解毒、凉血利咽之功效。用于抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗炎、增强免疫功能等，主要用于治疗流感、腮腺炎、温病发热、发斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行性乙型脑炎、肝炎等为传统的抗病毒中药之一，始载于《神农本草经》，《中国药典》1985～2005年版一直有收载。板蓝根化学成分相当复杂，含有多种成分，如吲哚类化合物靛蓝、靛玉红等，喹唑类生物碱色氨酮等，芥子苷类化合物，含硫类化合物，有机酸类，碱基核苷类鸟嘌呤等，氨基酸类等。现代药理研究证明其抗菌主要活性成分为色氨酮等化合物，抗病毒有效成分有平嘌呤、嘧啶、吲哚等，抗内毒素活性物质为有机酸类，具有免疫调节作用的为板蓝根多糖。
目前利用射干和板蓝根的相互作用，配伍组方用于制备治疗和/或预防感染性疾病方面的应用还未见报道。
发明内容为了满足临床需要，本发明提供了一种新的药物组合物及其制备方法和用途，其特征在于所含药效成分的原料药板蓝根与射干的重量配比为1∶0.01～250，优选为1∶0.05～50，最优配比为板蓝根1∶0.1～2。
上述药物组合物中板蓝根、射干可以用适宜的溶剂分别或混合经过提取加工得到其提取物，提取物再和药用辅料混合加工制成各种制剂。适宜的溶剂是指中药提取常用的溶剂，优选水或醇，尤其是水或乙醇。板蓝根和射干的提取方法可以采用中药提取的一般方法，如浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法。如板蓝根可通过水提醇沉、乙醇渗漉、醇提上柱等方法制备，射干可通过水提醇沉、醇提上柱等方法制备。其中所述的板蓝根提取物的指标成分为总氮，射干提取物的主要有效成分为总黄酮。
本发明进一步提供了上述射干和板蓝根的制备工艺，但不仅限于下述制备工艺。
板蓝根制备工艺取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。
通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为0.5～2％，提取物中总氮的含量不低于10％。
板蓝根提取物还可由如下工艺制备工艺一取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，放冷，加乙醇使含醇量达80％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度1.32～1.35稠膏，真空干燥，即得。
通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为10～12％，提取物中总氮的含量不低于2％。
工艺二取板蓝根药材，加水煎煮2次，第一次2小时加水12倍量，第二次1小时加水10倍量，合并煎液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.03～1.11，加入乙醇使含醇量至70％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，滤液用氨试液调节pH值为8.0～8.5，搅匀，冷藏48小时，加热除去氨，加水适量，冷藏，滤过，滤液用1％氢氧化钠调节pH值为7.0～7.5，冷藏滤过，滤液减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得板蓝根提取物。
通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为2～4％，提取物中总氮的含量不低于5％。
射干制备工艺取射干药材，加80％乙醇提取二次，第一次10倍量，第二次8倍量，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至近无醇味，加于已处理好的聚酰胺柱(100g，30～60目，柱内径3mm，乙醇湿法装柱，乙醇适量预洗，再用水洗至无醇味，备用)上，先用2倍柱体积的水冲洗，再用2倍柱体积的10％乙醇冲洗，弃去冲洗液，再用3倍柱体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.08～1.12的浓缩液，喷雾干燥，即得。
通过上述工艺制备的射干提取物中总黄酮的含量不低于50％，提取物得率为1～15％。
本发明药物组合物除可以药材投料外，还可以以提取物直接投料，即以板蓝根提取物与射干提取物投料制成，根据提取物的得率(板蓝根提取物得率为0.5％～12％，射干提取物得率为1～15％)进行换算，板蓝根提取物与射干提取物的重量配比为1∶0.001～3000，优选为1∶0.005～500，最优为1∶0.01～120。其中的板蓝根提取物中指标成分总氮的含量不低于2％，最好不低于10％；射干提取物中总黄酮的含量最好不低于50％。
上述药物可以制成任何一种药剂学上可以接受的剂型，优选注射剂或常用口服制剂。
用于肠胃外给药时，可将其制成注射剂，注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，包括注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，其标示装量可以为0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，一般不小于100ml的供静脉滴注用的大体积注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，无菌粉末可以用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。
用于口服给药时，可将其制成常规的固体制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂和口服溶液剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂；片剂以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂；胶囊剂依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂；颗粒剂可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂；丸剂包括滴丸、糖丸、小丸等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。
上述药物组合物，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、镇痛、镇咳化痰、解热、保肝、止血、降血脂、抗氧化、免疫调节等作用。
本发明的优点在于1、提供了一种新的抗菌、抗病毒、消炎的中药组合物，满足了临床的需要。
2、通过对射干和板蓝根的相互作用和配伍组方进行的药理试验，结果表明本发明药物组合物可明显抑制小鼠肺内流感病毒增值量、对绿脓杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠有保护作用、对二甲苯致小鼠耳肿胀有抑制作用，且疗效明显优于单用射干或板蓝根，提示两药有协同增效的作用。
3、通过对本发明药物组合物的不同配比的流感病毒感染小鼠肺部炎症的药效学试验，筛选出了本发明组合物各组分的优选配比。
4、本发明组合物既可由板蓝根和射干药材投料，也可由板蓝根提取物与射干提取物直接投料，可满足大生产的需求。
5、对射干提取物和板蓝根提取物的活性成分的含量进行了限定，便于产品的质量控制。
6、对本发明组合物进行了急性毒性试验，结果表明本发明组合物毒性小，安全范围大。
7、对本发明组合物注射液进行了稳定性试验，结果表明各项指标均比较稳定，说明产品质量稳定、可以长期存放。
8、射干和板蓝根二者合用后用药剂量现对减少，具有广阔的应用前景。
以下实验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些实验例包括本发明药物组合物的药效学试验，本发明药物组合物以下简称组合物。以下实验例中板蓝根与射干根据实施例1、实施例2的制备方法制备。
实验例1 药效学试验-组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症试验供试品 对照组0.9％氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)；射干组射干注射液，自制；板蓝根组板蓝根注射液，自制；组合物组板蓝根和射干重量配比见表1，各组注射液自制受试动物 昆明种小鼠160只，体重14～15g，雌雄各半，每组10只。
病毒 流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
表1 组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症的影响(x±s，n＝10)
注与感染对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01方法 除正常组外，将小鼠用乙醚麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，板蓝根组给药量为200mg/kg，射干组200mg/kg，组合物组为200mg/kg，每天1次，连续5天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。第6天称取小鼠体重后解剖，摘取全肺称重，逐个计算肺指数值，并求出肺指数抑制率。公式如下肺指数＝肺重(g)/体重(g)×100肺指数抑制率％＝(病毒对照组肺指数均值-试验组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值×100％实验结果与结论 由表1结果可以看出，小鼠感染后肺指数值明显增大，组合物各注射液组对流感病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用(p＜0.01)，肺指数值明显降低，抑制率增高肺组织病变程度明显减轻，其中板蓝根与射干重量配比为1∶0.05～50时肺指数值最小抑制率最高。板蓝根注射液和射干注射液对流感病毒感染小鼠引起的肺炎也有抑制作用(p＜0.05)，但组合物注射液抑制作用明显强于单独给予板蓝根注射液或射干注射液，提示两药有协同增效的作用。
实验例2 组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量影响试验供试品 对照组氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)射干组射干注射液，自制板蓝根组板蓝根注射液，自制组合物组板蓝根和射干重量配比为1∶0.1(相当于原药材1g+0.1g)、1∶1(相当于原药材1g+1g)、1∶2(相当于原药材1g+2g)，自制受试动物 昆明种小鼠60只，体重14～15g，雌雄各半，每组10只。
病毒 流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
表2 组合物对小鼠肺肺内流感病毒增殖量的影响(x±s，n＝10)
注与感染对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01方法 将小鼠随机分为感染对照组，射干注射液组，板蓝根注射液组，组合物三个剂量组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，板蓝根组给药量为200mg/kg，射干组200mg/kg，组合物组为200mg/kg，每天1次，连续2天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。病毒感染后48小时处死小鼠，解剖取肺，摘取左侧中叶肺固定，按病理切片常规脱水、包埋、制作石蜡切片。以间接免疫荧光法染色，观察感染鼠内特异性的病毒抗原，判断药物对病毒增殖的作用，荧光阳性数越多，表明病毒颗粒增殖多。上述试验结果数据以x±s表示，采用t检验，比较组间差异性。试验结果见表2。
实验结果与结论 由表2结果可以看出组合物注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量有明显的抑制作用(p＜0.01)，板蓝根注射液和射干注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量也有抑制作用(p＜0.05)。且组合物注射液对流感病毒的增殖及引起的肺炎有较显著的作用，明显优于单用板蓝根注射液或射干注射液，提示两者有协同增效的作用。
实验例3 组合物对二甲苯致小鼠耳肿胀影响试验供试品 对照组氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)板蓝根组板蓝根注射液，自制射干组射干注射液，自制组合物组板蓝根和射干重量配比为1∶0.1(相当于原药材1g+0.1g)、1∶1(相当于原药材1g+1g)、1∶2(相当于原药材1g+2g)，各组注射液自制受试动物 昆明小鼠，60只，雌雄各半随机分为6组，每组10只方法 将小鼠随机分为生理盐水对照组、板蓝根注射液组、射干注射液组、组合物注射液三组，每组10只，雌雄各半。分别按下表所示剂量灌胃给药或生理盐水，每日1次，连续7天，最后一次给药1小时后，各鼠右耳滴0.04ml二甲苯致炎，30分钟后处死动物，剪下双耳，用内径4mm打孔器在双耳相同部位取耳片，静脉称重，以左右耳片重量差值表示肿胀度，并根据下式计算肿胀抑制率。试验结果见下表。
肿胀抑制率(％)＝(生理盐水组肿胀度-给药组肿胀度)/生理盐水组肿胀度×100％表3 组合物对小鼠耳肿胀的影响(x±s，n＝10)
注与对照组相比，*p＜0.05，**p＜0.01实验结果与结论 由表3结果可知板蓝根注射液组、射干注射液组和组合物注射液组对二甲苯致小鼠的耳肿胀均有抑制作用(p＜0.05，p＜0.01)，抑制率也明显增高。组合物注射液抑制作用明显强于板蓝根注射液、射干注射液，提示两药有协同增效的作用。
实验例4 小鼠体内抑菌试验供试品 对照组氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)；板蓝根组板蓝根射液，自制；射干组射干注射液，自制；组合物组板蓝根和射干重量配比为1∶0.1(相当于原药材1g+0.1g)、1∶1(相当于原药材1g+1g)、1∶2(相当于原药材1g+2g)，各组注射液自制。
受试动物健康小鼠240只，体重23～29g，雌雄兼用，随机分为对照组组、板蓝根注射液组、射干注射液组、组合物注射液组，共24组，每组10只。
菌液用5％胃膜素稀释绿脓杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌混悬液，含菌量均为1010个/ml。
方法每只小鼠腹腔注射菌液0.5ml感染，注射菌液后1、6小时分别腹腔注射板蓝根注射液200mg/kg、射干注射液200mg/ml、组合物注射液200mg/ml，氯化钠注射液同体积，感染后观察24小时动物生存数，判断药品保护作用。
结果绿脓杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠各治疗组中，组合物注射液组对感染小鼠的保护作用明显强于板蓝根注射液、射干射液组，提示两药有协同增效的作用。
表4 组合物注射液对感染小鼠的保护作用
*小鼠处于濒死状态而被处死。
实验例5 组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量影响试验1供试品 对照组氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)；射干组射干注射液，自制；板蓝根组板蓝根注射液，自制；组合物组板蓝根和射干重量配比见表5，各组合物组注射液自制。
受试动物 昆明种小鼠160只，体重14～15g，雌雄各半，每组10只。
病毒 流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
方法 将小鼠随机分为感染对照组，射干注射液组，板蓝根注射液组，组合物不同配比组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，板蓝根组给药量为200mg/kg，射干组600mg/kg，组合物组为600mg/kg，每天1次，连续2天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。病毒感染后48小时处死小鼠，解剖取肺，摘取左侧中叶肺固定，按病理切片常规脱水、包埋、制作石蜡切片。以间接免疫荧光法染色，观察感染鼠内特异性的病毒抗原，判断药物对病毒增殖的作用，荧光阳性数越多，表明病毒颗粒增殖多。上述试验结果数据以x±s表示，采用t检验，比较组间差异性。试验结果见表5。
表5 组合物对小鼠肺肺内流感病毒增殖量的影响(x±s，n＝10)
注与感染对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01；与板蓝根组相比，ap＜0.05；与射干组相比，bp＜0.05。
实验结果与结论 实验结果见表5。
与感染对照组相比，板蓝根注射液、射干注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量有明显的抑制作用(p＜0.05)，各配比组合物组注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量有显著的抑制作用(p＜0.01)。分别与板蓝根注射液、射干注射液相比，各配比组合物注射液对小鼠肺内流感病毒增殖量有明显的抑制作用(p＜0.05)，提示两者有协同增效的作用。
上述实验结果表明板蓝根与射干重量配比为1∶0.01～250的组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量有显著的抑制作用，且板蓝根与射干重量配比为1∶0.05～50的组合物作用更显著实验例6 组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量影响试验2供试品 对照组氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)；射干组射干颗粒，自制；板蓝根组板蓝根颗粒，自制；组合物组板蓝根和射干重量配比见表6，各组合物组颗粒自制。
受试动物 昆明种小鼠160只，体重14～15g，雌雄各半，每组10只。
病毒 流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
方法 将小鼠随机分为感染对照组，射干组，板蓝根组，组合物不同配比颗粒组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始灌胃给药，板蓝根组给药量为200mg/kg，射干组200mg/kg，组合物组为200mg/kg，每天1次，连续2天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。病毒感染后48小时处死小鼠，解剖取肺，摘取左侧中叶肺固定，按病理切片常规脱水、包埋、制作石蜡切片。以间接免疫荧光法染色，观察感染鼠内特异性的病毒抗原，判断药物对病毒增殖的作用，荧光阳性数越多，表明病毒颗粒增殖多。上述试验结果数据以x±s表示，采用t检验，比较组间差异性。试验结果见表6。
表6 组合物对小鼠肺肺内流感病毒增殖量的影响(x±s，n＝10)
注与感染对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01；与板蓝根组相比，ap＜0.05；与射干组相比，bp＜0.05。
实验结果与结论 实验结果见表6。
与感染对照组相比，板蓝根颗粒、射干颗粒对小鼠肺内流感病毒增殖量有明显的抑制作用(p＜0.05)，各配比组合物组颗粒对小鼠肺内流感病毒增殖量有显著的抑制作用(p＜0.01)。分别与板蓝根颗粒、射干颗粒相比，各配比组合物颗粒对小鼠肺内流感病毒增殖量有明显的抑制作用(p＜0.05)，提示两者有协同增效的作用。
上述实验结果表明板蓝根与射干配比为1∶0.01～250的组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量有显著的抑制作用，板蓝根与射干配比为1∶0.05～50的组合物对小鼠肺内流感病毒增殖量的抑制作用更为明显。
实验例7 组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症试验供试品 对照组0.9％氯化钠注射液(山东长富洁晶药业有限公司)；射干组射干颗粒，自制；板蓝根组板蓝根颗粒，自制；组合物组板蓝根和射干重量配比见表7，各组颗粒自制。
受试动物 昆明种小鼠160只，体重14～15g，雌雄各半，每组10只。
病毒 流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1，-70℃保存备用。
方法 除正常组外，将小鼠用乙醚麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，板蓝根组给药量为200mg/kg，射干组200mg/kg，组合物组为200mg/kg，每天1次，连续5天，其中感染对照组与正常对照组给予同体积生理盐水。第6天称取小鼠体重后解剖，摘取全肺称重，逐个计算肺指数值，并求出肺指数抑制率。公式如下肺指数＝肺重(g)/体重(g)×100肺指数抑制率％＝(病毒对照组肺指数均值-试验组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值×100％注肺指数大，表示肺重量大，肺病变程度严重。
表7 组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症的影响(x±s，n＝10)
注与感染对照组相比*p＜0.05，**p＜0.01；与板蓝根组相比，ap＜0.05；与射干组相比，bp＜0.05。
实验结果与结论 实验结果见表7。
实验结果表明小鼠感染后肺指数值明显增大，与感染对照组相比板蓝根组、射干组及组合物各颗粒组对流感病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用(p＜0.05，p＜0.01)，肺指数值明显降低，抑制率增高肺组织病变程度明显减轻。分别与板蓝根组、射干组相比，各组合物颗粒组对流感病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用(p＜0.05)，提示两药有协同增效的作用。且组合物中板蓝根和射干重量配比为1∶0.05～50的组合物时肺指数值最小抑制率显著。
实验例8 小鼠注射给药急性毒性试验(1)试验方法供试品组合物注射液，来源于实施例3处方2，规格2ml。
受试动物小鼠，每组雌雄各60只，雄性体重25～28g，雌性体重21～24g。
给药途径静脉注射、腹腔注射。
观察项目死亡数、一般状态、体重、剖检、半数致死剂量。
(2)试验结果按照急性毒性试验要求进行预试，腹腔注射及静脉注射两给药途径皆无法测出药物的半数致死量，也未见明显的毒性反应，故进行日最大给药量试验。给药剂量尾静脉注射0.1ml/10g，腹腔注射0.1ml/10g，一日2次。
死亡数未出现死亡。
一般状态未见异常变化。
体重于给药前1天，给药日，给药后2、4、6、8、10、12、14天测量；未见异常变化。
剖检心、肝、肺、肾等组织未见异常变化。
(3)结论本实验中未出现死亡，本组合物注射液对雌雄小鼠静脉和腹腔注射给药的最大耐受量为0.2ml/10g，相当于70kg体重人日最大用量10ml的140倍。表明本品低毒，安全性高。
试验例9 组合物注射液稳定性试验供试品组合物注射液，来源于实施例3处方2，规格2ml。
考察项目性状、pH值、澄明度、有关物质、标示含量；并在加速试验6个月和长期试验期末增加无菌和热原检查。
1、影响因素试验强光照射试验取供试品，置照度为4500Lx的光照箱内放置10天。
高温试验取供试品，分别置于40℃、60℃条件下放置10天。
低温试验取供试品，在4℃冰箱中放置10天。
上述试验，分别于第5、10天取样测定。比较性状后测试各项指标，并将结果与0天比较。
结果光照4500Lx条件下放置10天，除有关物质略有升高外，其它各项指标均无明显变化。高温60℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。高温40℃、低温4℃条件下放置10天，各项指标无明显变化。
2、加速试验方法置温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月。在试验期间分别于第1个月、2个月、3个月、6个月末取样，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在6个月末增加无菌和热原检查。
结果温度40℃±2℃、相对湿度75％±5％的条件下放置6个月，除有关物质略有增加，标示含量略有下降外，其它各项指标均无明显变化，加速试验6个月末，热原、无菌检查均符合规定。
3、长期试验方法置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月。分别于第3个月、6个月、9个月、12个月、18个月，比较外观后，测试各项指标，将结果与0个月比较；并在18个月末增加无菌和热原检查。
结果温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置18个月，各项指标均无明显变化，长期试验18个月末，热原、无菌检查均符合规定。
结论由上述考察结果得出结论，各项试验中，组合物注射液均比较稳定。
具体实施方式以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。
实施例1 板蓝根提取物的制备取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。
板蓝根提取物鉴别实验取本品0.1g，加乙醇10ml，超声处理15min，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml同法制成对照药材溶液。再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照片色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。
板蓝根提取物含量测定总氮的含量测定总氮量测定，照药典氮测定法测定即可。
根据上述工艺，制得板蓝根提取物三批样品，其含量和得率见下表。通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为0.5～2％，其中总氮的含量不低于10％。
根据上述工艺，制得板蓝根提取物三批样品，其含量和得率见下表。
表5 板蓝根提取物总氮含量和得率
实施例2 射干提取物的制备总黄酮含量测定对照品溶液的制备 精密称取在105℃干燥至恒重的射干苷对照品10mg，置于10ml量瓶中，加80％乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
最大吸收波长的选择 精密量取对照品溶液0.3ml，置于100ml量瓶中，加80％乙醇稀释至刻度，摇匀。以80％乙醇作空白，于紫外分光光度计上，在200～400nm波长范围内绘制吸收曲线，结果表明对照品在266±1nm波长处有最大吸收。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液1ml置于10ml量瓶中，加80％乙醇稀释至刻度，摇匀，以80％乙醇作空白，于266nm波长处测定吸收度。以浓度为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
测定法 精密量取样品液10ml，置于50ml量瓶中，加80％乙醇稀释至刻度，摇匀。以80％乙醇作空白，于266nm波长处测定吸收度。
射干提取物鉴别试验取本品0.1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取射干对照药材1g，同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各2ul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以三氯甲烷-丁酮-甲醇(3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
按照上述工艺制得三批射干提取物，其含量和得率见表。
表8 射干提取物总黄酮含量和得率
实施例3 本发明组合物水针剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物5.44g(相当于射干0.1kg)注射用水 加至2000ml共制备1000支处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物54.4g(相当于射干1kg)注射用水 加至2000ml共制备1000支处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物108.8g(相当于射干2kg)注射用水 加至2000ml共制备1000支处方4板蓝根100kg射干 5kg注射用水 加至2000ml共制备1000支处方5板蓝根1kg射干 50kg注射用水 加至2000ml共制备1000支制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量80％的注射用水，加入处方量的板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)，加热搅拌溶解完全。
3)补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)将溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽灭菌30分钟。
10)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。
11)灯检，成品全检，包装入库。
实施例4 本发明组合物粉针剂的制备处方处方1板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方2板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方3板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方4板蓝根 100kg射干5kg甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方5板蓝根1kg射干 50kg甘露醇300g无菌注射用水 加至3000ml共制备1000支制备工艺1)先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)取配液量80％的无菌注射用水，将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)加入加热搅拌溶解完全。再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.22um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。
9)冻干结束，压塞，轧盖。
10)成品全检，包装入库。
实施例5 本发明组合物输液的制备氯化钠输液处方1板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方2板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方3板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方4板蓝根 100kg射干5kg氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方5板蓝根提取物1kg射干提取物 50kg氯化钠 900g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量20％的注射用水将板蓝根提取物、射干提取物(或射干和板蓝根混提物)加入加热搅拌溶解完全。将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并两溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
葡萄糖输液处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物5.44g(相当于射干0.1kg)葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制备1000瓶处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物54.4g(相当于射干1kg)葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制备1000瓶处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物108.8g(相当于射干2kg)葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制备1000瓶处方4板蓝根100kg射干 5kg葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制备1000瓶处方5板蓝根1kg射干 50kg葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制备1000瓶制备工艺1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量20％的注射用水将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)加入加热搅拌溶解完全。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并两溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例6 本发明组合物片剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)淀粉 120.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g羧甲淀粉钠 4.0g共制备 1000片处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)淀粉 120.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g羧甲淀粉钠 4.0g共制备 1000片处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)淀粉 120.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g羧甲淀粉钠 4.0g共制备 1000片处方4板蓝根 100kg射干 5kg淀粉 120.0g微晶纤维素 40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g羧甲淀粉钠 4.0g共制备 1000片处方5板蓝根1kg射干 50kg淀粉 120.0g微晶纤维素40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g羧甲淀粉钠4.0g共制备1000片制备工艺1)将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的片重压片。
10)成品全检，包装入库。
实施例7 本发明组合物胶囊剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物5.44g(相当于射干0.1kg)淀粉 60.0g微晶纤维素20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 1.0g共制备1000粒处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物54.4g(相当于射干1kg)淀粉 60.0g微晶纤维素20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 1.0g共制备1000粒处方3板蓝根提取物15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)淀粉60.0g微晶纤维素 20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁1.0g共制备 1000粒处方4板蓝根 100kg射干5kg淀粉60.0g微晶纤维素 20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁1.0g共制备 1000粒处方5板蓝根 1kg射干50kg淀粉60.0g微晶纤维素 20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁1.0g共制备 1000粒制备工艺1)将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)、淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的装量装入胶囊。
10)成品全检，包装入库。
实施例8 本发明组合物软胶囊剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方4板蓝根 100kg射干 5kg大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方5板蓝根 1kg射干 50kg大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒制备工艺将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)分别粉碎过100目筛，备用。将处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷，加入板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)研匀，压制成软胶囊即可。
实施例9 本发明组合物颗粒剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包处方4板蓝根 100kg射干 5kg糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包处方5板蓝根 1kg射干 50kg糖粉 1000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包制备工艺1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材，4)过20目筛制颗粒。
5)颗粒在60℃的条件下烘干。
6)干颗粒过18目筛整粒。
7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。
8)包装，成品全检，包装入库。
实施例10 本发明组合物滴丸剂的制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物5.44g(相当于射干0.1kg)聚乙二醇6000 600g处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物54.4g(相当于射干1kg)聚乙二醇6000 600g处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物108.8g(相当于射干2kg)聚乙二醇6000 600g处方4板蓝根100kg射干 5kg聚乙二醇6000 600g处方5板蓝根1kg射干 50kg聚乙二醇6000 600g制备工艺将聚乙二醇6000在水浴中加热熔融，待全部熔融后加入板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)，搅拌溶解，60目筛过滤，保持60℃滴入冷至10℃以下的液体石蜡中制成丸。
实施例11 本发明组合物口服液制备处方处方1板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 5.44g(相当于射干0.1kg)苯甲酸钠 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制备 1000支处方2板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 54.4g(相当于射干1kg)苯甲酸钠 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制备 1000支处方3板蓝根提取物 15.3g(相当于板蓝根1kg)射干提取物 108.8g(相当于射干2kg)苯甲酸钠 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制备 1000支处方4板蓝根 100kg射干 5kg苯甲酸钠 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制备 1000支处方5板蓝根 1kg射干 50kg苯甲酸钠 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制备 1000支制备工艺1)先将EDTA-2NA用配液量60％的水溶解完全，再将板蓝根提取物和射干提取物(或射干和板蓝根混提物)加入加热搅拌溶解完全。
2)将苯甲酸钠和甜蜜素用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述两个溶液，补加水至全量。
4)过0.8um的微孔滤膜过滤。
5)半成品化验。
6)灌装。成品全检，包装入库。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于制成该药物所含药效成分的原料药板蓝根与射干的重量配比为1∶0.01～250。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于制成该药物所含药效成分的原料药板蓝根与射干的重量配比为1∶0.05～50。
3.如权利要求1～2所述的任一药物组合物，其特征在于所述的板蓝根、射干可以用适宜的溶剂分别或混合经过提取加工得到其提取物，提取物再和药用辅料混合加工制成各种制剂。
4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，其中的板蓝根提取物的指标成分为总氮，射干提取物的主要有效成分为总黄酮。
5.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该组合物还可以由板蓝根提取物和射干提取物组成，其重量配比为1∶0.001～3000。
6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，其中的板蓝根提取物的指标成分为总氮，射干提取物的主要有效成分为总黄酮。
7.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，其中的板蓝根提取物中指标成分总氮的含量不低于2％；射干提取物中总黄酮的含量不低于50％。
8.如权利要求1、2、5所述的任一药物组合物，其特征在于该组合物可制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。
9.如权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，该组合物剂型为注射剂或口服制剂。
10.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该组合物在用于制备治疗和/或预防感染性疾病药物方面的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，公开了一种药物组合物及其制备方法和用途，包括板蓝根或其提取物和射干或其提取物，制成该药物所含药效成分的原料药的板蓝根与射干的重量配比为1∶0.01～250。该药物组合物还可由板蓝根提取物和射干提取物制成，其重量配比为1∶0.001～3000；该药物组合物可制成各种临床或药学上可接受的剂型，优选为注射剂和口服制剂；具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、镇痛、镇咳化痰、解热、保肝、止血、降血脂、抗氧化、免疫调节等作用。
文档编号A61P31/00GK1947765SQ200610135840
公开日2007年4月18日 申请日期2006年10月9日 优先权日2005年10月10日
发明者黄振华 申请人:黄振华