专利名称：板蓝根和黄芩苷的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种用于抗菌、抗病毒以及解热镇痛的药物组合物，及其制备方法和制剂，制成该药物组合物所含药效组分的原料药的组成为板蓝根或其提取物和黄芩苷。
2、背景技术由于目前对如青霉素、阿莫西林等许多传统抗生素耐药性的蔓延已引起了医药界的高度关注和重视，多种耐药性菌株大量出现及新病毒的出现，使难治性感染越来越多。与此同时，由于传统中草药等天然药物的配伍或有效成分的组合物往往具有互补、协同增效作用，亦不产生耐药性，因而对天然药物的发掘和研究日益受到重视。
板蓝根(Radix Isatidis)，别名靛青根、蓝靛根、靛根，为十字花科菘蓝属植物菘蓝(Isatisindigotica Fort.)的干燥根，味苦、性寒，具有清热解毒、凉血利咽之功效。用于抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗炎、增强免疫功能等，主要用于治疗流感、腮腺炎、温病发热、发斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行性乙型脑炎、肝炎等为传统的抗病毒中药之一，始载于《神农本草经》，《中国药典》1985～2005年版一直有收载。板蓝根化学成分相当复杂，含有多种成分，如吲哚类化合物靛蓝、靛玉红等，喹唑类生物碱色氨酮等，芥子苷类化合物，含硫类化合物，有机酸类，碱基核苷类鸟嘌呤等，氨基酸类等。现代药理研究表明其抗菌主要活性成分为色氨酮等化合物，抗病毒有效成分有平嘌呤、嘧啶、吲哚等，抗内毒素活性物质为其中的有机酸类，具有免疫调节作用的为板蓝根多糖。
黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，味苦、性寒，归肺、胆、脾、大肠、小肠经，具有清热燥湿、泻火解毒之功效，用于湿温、暑温、胸闷呕恶，肺热咳嗽，高热烦渴等症。黄芩苷为黄芩中提取的有效活性成分，为β-D-葡萄糖酸-5，6-二羟基-4-氧-2-苯基-4H-苯并吡喃-7，已收加载国家药品监督管理局国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第10册239页(国家药典委员会编)，其中规定含黄芩苷(C21H18O11)不得少于90.0％(注射用)；不得少于83.0％(口服用)。黄芩苷为抗菌药，具有抑菌抗炎、清热解毒、螯合金属离子、镇静、降压、神经保护作用等药理作用，主要用于感染、肺炎、肝炎、高血压等疾病。目前黄芩苷原料国内已有5家上市。黄芩苷的结构式如下
黄芩苷结构式目前用于治疗细菌、病毒等致病微生物引起的感染和/或具有解热镇痛作用的药物虽有不少，但它们大多作用单一，或只有抗菌作用，或只有抗病毒作用，使其应用受到局限。目前急需一种同时具有抗菌、抗病毒作用的药物，且剂量小、显效快，毒副作用小。目前利用板蓝根或其提取物与黄芩苷的相互作用，配伍组方，用于抗菌、抗病毒等方面的药物，尚未见报道。
3、发明内容本发明提供了一种新的用于抗菌、抗病毒以及解热镇痛的药物组合物及其制备方法和制剂，制成该药物组合物所含药效组分的原料药的组成为板蓝根或其提取物和黄芩苷。本发明人经过大量的实验证明，板蓝根与黄芩苷二者合用在下述重量份数范围内都有协同增效的作用，其重量份数为板蓝根250～30000份、黄芩苷60～2000份；优选为板蓝根500～15000份、黄芩苷125～1000份；最佳优选为板蓝根1000～10000份、黄芩苷250～500份。
上文所述的板蓝根可以用适宜的溶剂经过提取加工得到板蓝根提取物，再与黄芩苷混合加工制成任一药学上可接受的制剂，其中的溶剂优选水或醇，板蓝根的提取方法可以为浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法或连续提取法。如可通过水提醇沉、乙醇渗漉、醇提上柱制备得到板蓝根提取物。
本发明提供了一种板蓝根的优选制备工艺，具体如下取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。
通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为0.5～2％，提取物中总氮的含量不低于10％。
板蓝根提取物还可由如下工艺制备，但不仅限于下述方法工艺一取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.15～1.20的浓缩液，放冷，加乙醇使含醇量达80％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.32～1.35的稠膏，真空干燥，即得。
通过本工艺制得的板蓝根提取物得率为10～12％，提取物中总氮的含量不低于2％。
工艺二取板蓝根药材，加水煎煮2次，第一次2小时加水12倍量，第二次1小时加水10倍量，合并煎液，滤过，减压浓缩至相对密度为1.03～1.11的浓缩液，加入乙醇使含醇量至70％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，滤液用氨试液调节pH值为8.0～8.5，搅匀，冷藏48小时，加热除去氨，加水适量，冷藏，滤过，滤液用1％氢氧化钠调节pH值为7.0～7.5，冷藏滤过，滤液减压浓缩至稠膏状，喷雾干燥即得板蓝根提取物。
通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为2～4％，提取物中总氮的含量不低于5％。
本发明药物组合物除可用上述药材直接投料制得外，还可以由板蓝根提取物和黄芩苷投料制成，按照提取物相对于药材的得率0.5～2％计算，本发明药物组合物按重量份数比为板蓝根提取物1～6000份、黄芩苷60～2000份；优选为板蓝根提取物2.5～3000份、黄芩苷125～1000份；最优为板蓝根提取物5～2000份、黄芩苷250～500份。板蓝根提取物可以通过上述工艺制得，其中板蓝根提取物中总氮的含量不低于2％，最好不低于10％。
以上组成是按重量份作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减小，如大规模生产可以以千克为原料，或以吨为单位，小规模生产也可以以克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间重量配比的比例不变。以上组成，若以克为单位，可以制成100～10000次用量的制剂，如作为注射剂，可制成100～10000支，每次用量1～10支。如作为片剂，可制成100～10000片，每次服用1～10片。以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，可以相应调整组成的比例，增加或者减少不超过100％。本发明药物组分的用量是经过发明人进行大量摸索总结得出的，各组分用量在上述重量份范围内都具有较好疗效。
本发明还提供了该药物组合物在用于制备抗菌、抗病毒以及解热镇痛等方面疾病的药物的应用。本发明药物组合物具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗炎、抗肿瘤、镇痛、镇咳化痰、解热、保肝、止血、降血脂、抗氧化、免疫调节等作用。主要用于急、慢性肝炎，上呼吸道感染、支气管肺炎、病毒性肺炎、流感、发热、腮腺炎等疾病。
本发明药物组合物可以口服或肠胃外给药等方式施用于需要这种治疗的患者，优选注射剂或口服制剂。用于肠胃外给药时，可将其制成注射剂，注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，包括注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，其标示装量可以为0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，一般不小于100ml的供静脉滴注用的大体积注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，无菌粉末可以用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。
用于口服给药时，可将其制成常规的固体制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂和口服溶液剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂；片剂以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂；胶囊剂依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂；颗粒剂可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂；丸剂包括滴丸、糖丸、小丸等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。
本发明药物组合物的制剂可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述的载体包括药学领域常规的渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。
本发明药物组合物在制成注射剂时，所用溶剂可以是水性溶剂和非水性溶剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。水性溶剂最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其它适宜的水溶液；非水性溶剂常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其它还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸+醋酸钠、乳酸、枸橼酸+枸橼酸钠、碳酸氢钠+碳酸钠等；常用的增容剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的抗氧剂包括亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂包括苯酚、甲酚、三氯叔丁醇、苯甲醇等。
本发明药物组合物在制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。
本发明经过药理学研究和药效动物实验研究结果表明，由板蓝根或其提取物与黄芩苷为主要成分制成的药物组合物，可以降低体外抑菌的最小抑菌浓度；对新鲜蛋清所致的大鼠足趾肿胀均有明显的保护作用；对被细菌感染的小鼠有明显的保护作用；对由松节油所致的耳肿胀的小鼠有明显的抗炎作用；对病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用；还可以对细菌内毒素引起的家兔体温升高有明显的抑制作用；还能显著抑制大鼠棉球肉芽肿组织增生。
本发明实验研究结果表明，板蓝根或其提取物与黄芩苷合并用药呈协同作用，药效明显增强。
本发明组合物具有以下优点(1)提供了一种新的用于抗菌、抗病毒以及解热镇痛的药物组合物及其制备方法和制剂，满足了临床急需；(2)对本发明组合物各配比进行了抑菌实验及抗炎实验的药效学研究，得出了本发明组合物的最优配比范围；(3)对板蓝根和黄芩苷的相互作用和配伍组方进行了药效学研究，发现了组合物具有明显的抗菌、抗病毒、抗炎及解热镇痛作用，表明两药协同增效，疗效显著，明显优于单用板蓝根或黄芩苷，其结果是本技术领域的普通人员所意想不到的；(4)可以板蓝根提取物直接投料，制备工艺简单，避免了提取时造成的药物损失和由于原药材质量差异造成的不同产品质量差异较大的缺点，使药品纯度更高，杂质少，安全性更高，且不同批次药品间质量差异小，药品质量更均匀稳定；(5)进行的稳定性实验表明本发明药物组合物注射液各项指针均比较稳定，保证了临床用药的安全；(6)板蓝根或其提取物和黄芩苷疗效确切，且减小了相对用药剂量，具有广泛的应用前景。
以下通过实验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些实验例包括本发明药物组合物的药效学实验和急性毒性实验，板蓝根或其提取物和黄芩苷的组合物以下简称板黄组合物。其中的板蓝根或其提取物的制备根据实施例1的制备方法制备。
实验例1 板黄组合物合并用药药效研究供试品生理盐水组生理盐水，市购；板蓝根组板蓝根注射液，每支装2ml，西安京西双鹤药业有限公司；黄芩苷组黄芩苷片，规格0.25g，承德颈复康药业集团有限公司；板黄组合物(板蓝根和黄芩苷不同份数比)组24组，自制；材料葡萄糖酚红培养基。
供试菌种金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、甲型副伤寒杆菌、肺炎双球菌、流感杆菌、溶血性链球菌。
供试液的制备取空白对照组、板蓝根组、黄芩苷组、板黄组合物(板蓝根黄芩苷不同份数比)组24组，份数比见表1，分别配制成浓度为1024mg/ml的供试液，系列稀释为512mg/ml、256mg/ml、128mg/ml、64mg/ml、32mg/ml、16mg/ml、8mg/ml、4mg/ml、2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml的供试液。
菌悬液的制备将上述供试菌种用适宜的斜面活化后，以无菌水制成含菌数约为108个/ml菌悬液。
最低抑菌浓度(MIC)的测定取上述药液，分别配制浓度为1024mg/ml、512mg/ml、256mg/ml、128mg/ml、64mg/ml、32mg/ml、16mg/ml、8mg/ml、4mg/ml、2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml系列浓度的药物，分别吸取1ml注入各试管中，每一个浓度重复3次，每一系列接种一种菌，每支试管准确注入0.1ml菌悬液，同时做空白对照。置培养箱中37℃培养18～24h。取出，观察细菌的生长情况，如药液仍为红色，表示无菌生长，否则为有菌生长，以完全无菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度。结果见表1。
实验结果及结论板黄组合物对各供试菌种的最低抑菌浓度分别与生理盐水组、板蓝根组、黄芩苷组的最低抑菌浓度相比较，前者对每一供试菌种的最低抑菌浓度均明显小于后面三者的。板黄组合物各个配比组都对供试的细菌均有明显的抑菌作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的MIC值均在4mg/ml～16mg/ml之间；对绿脓杆菌、甲副伤寒杆菌的MIC值均在32mg/ml～64mg/ml之间；对肺炎双球菌的MIC值在4mg/ml～8mg/ml之间；对溶血性链球菌、流感杆菌的MIC值均在8mg/ml～16mg/ml之间，实验结果提示板蓝根与黄芩苷配伍有协同增效作用。
表1 板黄组合物对供试菌的最低抑菌浓度(MIC)
注表中最低抑菌浓度为平均值。
实验例2 板黄组合物对蛋清致大鼠足趾肿胀的影响受试动物健康大鼠，270只，体重200～220g，雌雄兼用，随机分为27组，每组10只。
供试品对照组生理盐水，市购；板蓝根组板蓝根颗粒，每袋装5g，昆明云健制药有限公司；黄芩苷组黄芩苷片，规格0.25g，承德颈复康药业集团有限公司；板黄组合物(板蓝根和黄芩苷不同份数比)组24组，自制。
给药剂量对照组1ml，板蓝根组1.5g/kg，其余各组100mg/kg。
实验方法大鼠分别按表2灌胃给药生理盐水、板蓝根、黄芩苷和板黄组合物。给药后1h，每只大鼠分别在右后足跖皮下注射新鲜蛋清0.1ml致炎，注射蛋清前、注射后0.5h、1h、2h、4h用容积法各测足趾肿胀体积1次，计算注射前后足趾肿胀的差值。
表2 板黄组合物对蛋清致大鼠足趾肿胀的影响(平均值±标准偏差，n＝10)
注*p＜0.05，**p＜0.01，与对照组相比；#p＜0.05与板蓝根组相比；&p＜0.05，与黄芩苷组相比。
实验结果及结论实验结果见表2。与对照组相比较，板黄组合物各配比组对新鲜蛋清所致的大鼠足趾肿胀均有极显著的保护作用(p＜0.01)，板蓝根组、黄芩苷组对新鲜蛋清所致的大鼠足趾肿胀均有明显的保护作用(p＜0.05)。板黄组合物各配比组的效果均优于板蓝根或黄芩苷单独给药的效果(p＜0.05)，提示，板蓝根与黄芩苷合并用药具有协同增效作用，在抗炎等方面有显著疗效。
实验例3 板黄组合物小鼠体内抑菌实验供试品对照组0.9％氯化钠注射液，市购；
板蓝根组板蓝根注射液，每支装2ml，西安京西双鹤药业有限公司；黄芩苷组黄芩苷注射液，自制；板黄组合物(板蓝根和黄芩苷不同配比)组3组(板蓝根+黄芩苷＝1000mg+125mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+500mg)，自制。
受试动物健康小鼠180只，体重18～22g，雌雄兼用，随机分为对照组、板蓝根组、黄芩苷组、板黄组合物组(板蓝根+黄芩苷＝1000mg+125mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+500mg)各三组，共18组，每组10只。
菌液用5％胃膜素稀释金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎双球菌混悬液，含菌量均为1010个/ml。
实验方法每只小鼠腹腔注射菌液0.5ml感染，注射菌液后1、6小时分别腹腔注射氯化钠注射液、板蓝根注射液、黄芩苷注射液、板黄组合物(板蓝根+黄芩苷＝1000mg+125mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg；板蓝根+黄芩苷＝1000mg+500mg)，给药剂量均为100mg/kg。感染后观察24小时动物生存数，判断药品保护作用。结果见表3。
表3 板黄组合物对感染小鼠的保护作用
*小鼠处于濒死状态而被处死。
实验结果金黄色葡萄球菌感染小鼠各治疗组中，板黄组合物组(不同配比)对感染小鼠的保护作用明显强于板蓝根注射液、黄芩苷和对照组。大肠杆菌感染小鼠各治疗组的结果，与金黄色葡萄球菌实验组相似。肺炎双球菌感染小鼠各治疗组中，板黄组合物组(不同配比)的作用明显高于其它三组的，尤其是与黄芩苷组相比较，作用差异显著。
实验例4 板黄组合物对小鼠抗炎实验供试品对照组0.9％氯化钠注射液，市购；板蓝根组板蓝根注射液，每支装2ml，西安京西双鹤药业有限公司；黄芩苷组黄芩苷注射液，自制；板黄组合物组板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg，分为低、中、高三个剂量组，自制。
受试动物昆明种小鼠60只，雄性，体重18～22g，随机分为6组。
实验方法取昆明种小鼠60只，雄性，随机分为6组，每组10只，各组小鼠分别腹腔给与对照药及受试药。实验分为6组，分别给与板黄组合物50mg/kg、75mg/kg、100mg/kg，黄芩苷100mg/kg和板蓝根100mg/kg，另设一组阴性对照给予同体积生理盐水，间隔12h给药3次。末次给药后30min，以松节油接触右耳5s，15min后脱颈处死小鼠，用直径6mm的打孔器将双耳同等部位切下，称取左右耳片重量，计算致炎耳片增重。结果见表4。
实验结果各给药组都具有明显的抗炎作用(p＜0.05和p＜0.01)。其中板黄组合物的作用强于单用板蓝根或黄芩苷(p＜0.05)。实验结果表明板蓝根和黄芩苷配伍有很好的抗炎作用，且与组合物的给药剂量有关，高剂量时作用最好。
表4 板黄组合物对松节油所致小鼠耳肿胀的作用
注*p＜0.05，**p＜0.01，与对照组相比；#p＜0.05，与板蓝根组相比；&p＜0.05，与黄芩苷组相比。
实验例5 板黄组合物的解热实验供试品对照组0.9％氯化钠注射液，市购；板蓝根组板蓝根注射液，每支装2ml，西安京西双鹤药业有限公司；黄芩苷组黄芩苷注射液，自制；板黄组合物组板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg，分为低、中、高三个剂量组，自制。
受试动物健康大耳白家兔，雌雄兼用，体重2.4～2.8kg。
致热源细菌内毒素，市购。
实验方法在室温(20℃)环境下，安静1h后测体温，每次间隔30min，以两次温差不超过0.2℃的家兔静脉注射10EU/kg的细菌内毒素溶液，造成高热病理模型。2h后测体温，选取体温升高0.5℃以上家兔48只，随机分为6组，每组8只，灌胃给药后1、2、4、6h测体温，计算体温变化值。各组资料以X±S℃表示，作t检验。结果见表5。
表5 板黄组合物对细菌内毒素致热家兔的解热作用(X±S；n＝8)
注*p＜0.05，**p＜0.01，与对照组相比；#p＜0.05，与板蓝根组相比；&p＜0.05，与黄芩苷组相比。
实验结果各给药组都具有明显的解热作用(p＜0.05和p＜0.01)。其中板黄组合物对细菌内毒素引起的家兔体温升高有明显的抑制作用，且较单独使用板蓝根或黄芩苷持续时间长，用药6小时后仍有解热效果。且与组合物的给药剂量有关，高剂量时作用最好。
实验例6 板黄组合物体内抗病毒实验供试品感染对照组流感病毒液(FM1)，市购；板蓝根组板蓝根注射液，每支装2ml，西安京西双鹤药业有限公司；黄芩苷组黄芩苷注射液，自制；板黄组合物组板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg，分为低、中、高三个剂量组，自制。
受试动物昆明种小鼠70只，雌雄各半，体重14～15g，随机分为7组。
实验方法取昆明种小鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，分别为感染对照组、正常对照组、板蓝根组、黄芩苷组、板黄组合物组(板蓝根+黄芩苷＝1000mg+250mg)分为低、中、高剂量三组，每组10只。除正常组外，将小鼠用乙醚轻度麻醉，以1/5个LD50流感病毒液(FM1)滴鼻感染。从感染前一天开始腹腔注射给药，每天2次，连续5天，其中感染组与正常对照组给予同体积生理盐水。第6天称取小鼠体重后解剖，摘取全肺称重，逐个计算肺指数值，并求出肺指数抑制率。公式肺指数＝肺重(g)/体重(g)×100，肺指数抑制率％＝(病毒对照组肺指数均值-实验组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值×100％。实验结果见表6。(注肺指数大，表示肺重量大，肺病变程度严重。)表6 板黄组合物对流感病毒感染小鼠肺部炎症的影响(x±s；n＝10)
注*p＜0.05，**p＜0.01，与感染对照组相比；#p＜0.05与板蓝根组相比；&p＜0.05，与黄芩苷组相比。
实验结果感染后小鼠肺指数值明显增大。各给药组都具有明显的抗病毒感染作用(p＜0.05，p＜0.01)，其中板黄组合物的作用强于单用板蓝根或黄芩苷(p＜0.05)。实验结果表明板蓝根和黄芩苷配伍对病毒感染小鼠引起的肺炎有明显的抑制作用，肺指数值明显降低，肺组织病变程度明显减轻，且与组合物的给药剂量有关，高剂量时作用最好。
实验例7 板黄组合物对大鼠棉球肉芽组织增生的影响受试动物健康大鼠，280只，体重200～220g，雌雄兼用，随机分为28组，每组10只。
供试品对照组生理盐水，市购；乙酰水杨酸组乙酰水杨酸片，规格0.5g，扬州市三药制药有限公司；板蓝根提取物组板蓝根提取物，自制，制备方法参加实施例1；黄芩苷组黄芩苷片，规格0.25g，承德颈复康药业集团有限公司；板黄组合物(不同份数比)组板蓝根提取物+黄芩苷(相当于板蓝根原药材和黄芩苷的份数比)24组，自制。
实验方法取大鼠320只，随机分为28组，分别按表7所示剂量灌胃给药或生理盐水。动物在乙醚麻醉下背部剪毛消毒，切开皮肤，用眼科镊向左右腋部皮下各植入1个10mg重的灭菌棉球，于手术当日给药，每日1次，连续7d后断头处死动物，剥离肉芽组织，于80℃烘箱中干燥后称重，其重量减去原棉球重作为肉芽肿重，并计算抑肿率。
实验结果及结论实验结果见表7。与对照组相比较，各给药组都能显著抑制大鼠棉球肉芽肿组织增生(p＜0.05，p＜0.01)，板黄组合物各个份数配比组与板蓝根组或黄芩苷组相比抑制大鼠棉球肉芽肿组织增生更为显著(p＜0.05)，但与乙酰水杨酸组相比没有显著差异(p＞0.05)。实验结果表明板蓝根或其提取物与黄芩苷配伍应用能够显著抑制大鼠棉球肉芽肿组织增生，且比板蓝根提取物或黄芩苷单独用药效果好。提示板蓝根或其提取物与黄芩苷配伍应用有协同增效作用。
表7 板黄组合物对大鼠棉球肉芽组织增生的影响
实验例8 小鼠注射给药急性毒性实验(1)实验方法供试品板黄组合物注射液(自制，1ml相当于生药材1g的板蓝根提取物和黄芩苷250mg)。
受试动物小鼠，每组雌雄各5只，雄性体重25～28g，雌性体重21～24g。
给药途径静脉注射、腹腔注射。
观察项目死亡数、一般状态、体重、剖检、半数致死剂量。
(2)实验结果按照急性毒性试验要求进行预试，腹腔注射及静脉注射两给药途径皆无法测出药物的半数致死量，也未见明显的毒性反应，故进行一日内最大给药量试验。给药剂量尾静脉注射0.1ml/10g，腹腔注射0.1ml/10g，一日2次。
死亡数未出现死亡。
一般状态未见异常变化。
体重于给药前1天，给药日，给药后1、3、7、14天测量；未见异常变化。
剖检心、肝、肺、肾等组织未见异常变化。
(3)结论本实验中未出现死亡，推测板黄组合物注射液对雌雄小鼠静脉和腹腔注射给药的最大耐受量为0.2ml/10g，相当于50kg体重人日最大用量10ml的100倍。表明本品低毒，安全性高。
实验例9 板黄组合物注射液稳定性实验供试品板黄组合物注射液(自制，板蓝根1000mg，黄芩苷250mg)；考察项目性状、pH值、澄明度；长期稳定性实验方法及结果将本品置温度25℃±2℃、相对湿度60％±10％的条件下放置6个月、12个月，各项指针均无明显变化，实验结果表明组合物注射液长期放置基本稳定。
综上所述，本发明提供的板蓝根与黄芩苷组合物具有协同增效作用，明显优于板蓝根或黄芩苷单独给药的药效。对板黄组合物注射液(自制，板蓝根1000mg，黄芩苷250mg)进行的稳定性实验结果表明，本发明提供的板蓝根与黄芩苷组合物制成的注射剂的各项指针均比较稳定，可以用于放大生产。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。实施例2～11中的板蓝根提取物的制备方法可以参见实施例1。
实施例1 板蓝根提取物的制备板蓝根提取物的制备方法取板蓝根药材，粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.15～1.20浓缩液，加1％盐酸调pH值至5～6，加于强酸性阳离子交换树脂柱上，加2倍量水冲柱，弃去冲洗液，再加1％氨试液冲柱，收集洗脱液，再加1％盐酸调pH值至7～7.5，静置过夜，滤过，浓缩，干燥，即得。
板蓝根提取物鉴别实验取本品0.1g，加乙醇10ml，超声处理15min，蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml同法制成对照药材溶液。再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照片色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点。
板蓝根提取物含量测定总氮的含量测定总氮量测定，照药典氮测定法测定即可。
根据上述工艺，制得板蓝根提取物三批样品，其含量和得率见下表。通过本工艺制备的板蓝根提取物得率为0.5～2％，其中总氮的含量不低于10％。
板蓝根提取物总氮含量和得率
实施例2 板黄组合物粉针剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物15.1g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 250g氢氧化钠适量甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方2板蓝根提取物7.5g(相当于板蓝根原药材500g)黄芩苷 250g氢氧化钠适量甘露醇 300g无菌注射用水加至3000ml共制备 1000支处方3板蓝根提取物 22.5g(相当于板蓝根原药材1500g)黄芩苷 250g氢氧化钠 适量甘露醇 300g无菌注射用水 加至3000ml共制备 1000支2、具体步骤1)首先将配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，胶塞等进行无菌处理。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)取配液量40％的注射用水加入处方量的板蓝根提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。合并上述溶液，再加入甘露醇加热搅拌溶解完全，补加无菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.22um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)分装于抗生素玻璃瓶中，半压塞。将样品放入冻干机中冷冻干燥。预冻-45℃5小时，低温真空干燥-45℃～0℃20小时，然后升温至25℃真空干燥3小时。
9)冻干结束，压塞，轧盖。
10)成品全检，包装入库。
实施例3 板黄组合物水针剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物 15.2g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷250g氢氧化钠 适量注射用水 加至1000ml共制备1000支处方2板蓝根提取物 7.8g(相当于板蓝根原药材500g)黄芩苷500g氢氧化钠 适量注射用水 加至1000ml共制备1000支处方3板蓝根提取物 22.1g(相当于板蓝根原药材1500g)黄芩苷125g氢氧化钠 适量注射用水 加至1000ml共制备1000支2、具体步骤1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的板蓝根提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)将溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽灭菌30分钟。
10)趁热将样品放入0.01％的亚甲蓝溶液中检漏。
11)灯检，成品全检，包装入库。
实施例4 板黄组合物氯化钠输液的制备1、处方处方1板蓝根提取物 15.0g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 250g氢氧化钠 适量氯化钠 900g注射用水 加至100000ml共制备 1000瓶处方2板蓝根提取物 13.0g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 250g氢氧化钠 适量氯化钠 900g注射用水 加至100000ml共制备 1000瓶处方3板蓝根提取物 16.5g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 500g氢氧化钠 适量氯化钠 900g注射用水 加至100000ml共制备 1000瓶2、具体步骤1)前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的板蓝根提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。将氯化钠用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例5 板黄组合物葡萄糖输液的制备1、处方处方1板蓝根提取物15.4g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 250g氢氧化钠适量葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方2板蓝根提取物15.2g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 125g氢氧化钠适量葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶处方3板蓝根提取物15.1g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷 500g氢氧化钠适量葡萄糖 5000g注射用水加至100000ml共制备 1000瓶2、具体步骤1)提前一天处理配液用的管道及容器等，临用前再用新鲜的注射用水冲洗。
2)取配液量40％的注射用水，加入处方量的板蓝根提取物，加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量注射用水，加热后用适量氢氧化钠溶解。将葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并上述溶液，补加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的针用活性炭，加热搅拌15分钟。
5)经砂滤棒过滤脱炭。测定并调节溶液的pH值。
6)经0.45um的微孔滤膜精滤。
7)检查溶液的澄明度，半成品化验。
8)灌装于100ml的输液瓶中。
9)115℃热压灭菌30分钟。
10)灯检，成品全检，包装入库。
实施例6 板黄组合物片剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 250g预胶化淀粉 120.0g微晶纤维素 60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁4.0g羧甲淀粉钠 8.0g共制备 1000片处方2板蓝根提取物 210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷250g预胶化淀粉120.0g微晶纤维素60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 6.0g羧甲淀粉钠8.0g共制备1000片处方3板蓝根提取物 153g(相当于板蓝根原药材10000g)黄芩苷250g预胶化淀粉120.0g微晶纤维素60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 6.0g羧甲淀粉钠8.0g共制备1000片处方4板蓝根提取物 225g(相当于板蓝根原药材15000g)黄芩苷250g预胶化淀粉120.0g微晶纤维素60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 8.0g羧甲淀粉钠8.0g共制备1000片处方5板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷500g预胶化淀粉120.0g微晶纤维素60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 4.0g羧甲淀粉钠6.0g共制备1000片处方6板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 125g预胶化淀粉 120.0g微晶纤维素 60.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 4.0g羧甲淀粉钠 4.0g共制备 1000片2、具体步骤1)将板蓝根提取物和黄芩苷粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将板蓝根提取物、黄芩苷、预胶化淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的片重压片。
10)成品全检，包装入库。
实施例7 板黄组合物胶囊剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷125g预胶化淀粉60.0g微晶纤维素40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 4.0g共制备1000粒处方2板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷250g预胶化淀粉60.0g微晶纤维素40.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 4.0g共制备1000粒处方3板蓝根提取物 15.2g(相当于板蓝根原药材1000g)黄芩苷250g预胶化淀粉60.0g微晶纤维素20.0g2％HPMC水溶液 适量硬脂酸镁 2.0g共制备1000粒2、具体步骤1)将板蓝根提取物和黄芩苷粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。
4)将板蓝根提取物、黄芩苷、预胶化淀粉、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。
5)过20目筛制颗粒。
6)颗粒在60℃的条件下烘干。
7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁，过18目筛整粒，混合均匀。
8)取样，半成品化验。
9)按照化验确定的装量装入胶囊。
10)成品全检，包装入库。
实施例8 板黄组合物软胶囊剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 250g大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方2板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 125g大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方3板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 500g大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒处方4板蓝根提取物 210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 250g大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蜡 50g共制备 1000粒2、具体步骤将板蓝根提取物和黄芩苷分别粉碎过100目筛，将处方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蜡加热熔融，混匀，放冷，加入板蓝根提取物和黄芩苷研匀，压制成软胶囊即可。
实施例9 板黄组合物颗粒剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 250g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 适量共制备 1000包处方2板蓝根提取物 210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 125g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液 适量共制备 1000包处方3板蓝根提取物 210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 500g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液适量共制备 1000包2、具体步骤1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将板蓝根提取物和黄芩苷粉碎过100目筛备用。
2)按照处方量称取原料和辅料。
3)将板蓝根提取物、黄芩苷与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC50％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材，4)过20目筛制颗粒。
5)颗粒在60℃的条件下烘干。
6)干颗粒过18目筛整粒。
7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。
8)包装，成品全检，包装入库。
实施例10 板黄组合物滴丸剂的制备1、处方处方1板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 250g聚乙二醇6000 600g处方2板蓝根提取物 210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 250g聚乙二醇6000 600g处方3板蓝根提取物 105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 500g聚乙二醇6000 600g2、具体步骤将聚乙二醇6000在水浴中加热熔融，待全部熔融后加入板蓝根提取物和黄芩苷，搅拌溶解，60目筛过滤，保持60℃滴入冷至10℃以下的液体石蜡中制成丸。
实施例11 板黄组合物口服液制备1、处方
处方1板蓝根提取物105g(相当于板蓝根原药材7000g)黄芩苷 250g聚山梨酯80 50g氢氧化钠适量苯甲酸钠15g甜菊甙 20g水 加至10000ml共制备 1000支处方2板蓝根提取物210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 250g聚山梨酯80 50g氢氧化钠适量苯甲酸钠15g甜菊甙 30g水 加至10000ml共制备 1000支处方3板蓝根提取物210g(相当于板蓝根原药材14000g)黄芩苷 125g聚山梨酯80 50g氢氧化钠适量苯甲酸钠15g甜菊甙 20g水 加至10000ml共制备 1000支2、具体步骤1)先将聚山梨酯80用配液量40％的水溶解完全，再将板蓝根提取物加入加热搅拌溶解完全。黄芩苷加少量水加热后加适量氢氧化钠溶解完全。
2)将苯甲酸钠和甜菊甙用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述溶液，补加水至全量。
4)过0.8um的微孔滤膜过滤。
5)半成品化验。
6)灌装。成品全检，包装入库。
权利要求
1.一种药物组合物，其特征在于制成该药物组合物所含药效组分的原料药的组成为板蓝根和黄芩苷，其重量份数为板蓝根250～30000份、黄芩苷60～2000份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于板蓝根和黄芩苷的重量份数为板蓝根500～15000份、黄芩苷125～1000份。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于板蓝根和黄芩苷的重量份数为板蓝根1000～10000份、黄芩苷250～500份。
4.权利要求1～3所述的任一药物组合物的制备方法，其特征在于所述的板蓝根可以用适宜的溶剂经过提取加工得到板蓝根提取物，再与黄芩苷混合加工制成任一药学上可接受的制剂。
5.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，板蓝根提取物中所含的指标成分为板蓝根总氮，其含量不低于2％。
6.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物还可以由板蓝根提取物和黄芩苷制成，其重量份数为板蓝根提取物1～6000份、黄芩苷60～2000份，其中板蓝根提取物中所含的指标成分为板蓝根总氮，其含量不低于2％。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，板蓝根提取物和黄芩苷的重量份数为板蓝根提取物2.5～3000份、黄芩苷125～1000份。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，板蓝根提取物和黄芩苷的重量份数为板蓝根提取物5～2000份、黄芩苷250～500份。
9.根据权利要求1～3、6～8所述的任一药物组合物，其特征在于该组合物可以与药学上可接受的辅料混合制成任何一种临床上或药学上可接受的剂型。
10.根据权利要求9所述的药物组合物，其特征在于临床上或药学上可接受的剂型为注射剂或口服制剂。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，公开了一种用于抗菌、抗病毒以及解热镇痛的药物组合物及其制备方法和制剂，制成该药物组合物所含药效组分的原料药的组成为板蓝根和黄芩苷，其重量份数为板蓝根250～30000份、黄芩苷60～2000份。该组合物还可以由板蓝根提取物和黄芩苷制成，其重量份数为板蓝根提取物1～6000份、黄芩苷60～2000份。该药物组合物可制成各种药学上可接受的剂型。该药物组合物具有协同增效作用，稳定性好，比单用同剂量的板蓝根或黄芩苷的效果大大提高。
文档编号A61P31/04GK1947735SQ20061013584
公开日2007年4月18日 申请日期2006年10月9日 优先权日2005年10月10日
发明者黄振华 申请人:黄振华