专利名称：：一种紫杉醇/多烯紫杉醇脂质体组合药物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种紫杉醇/多烯紫杉醇脂质体组合药物及其制备方法。
背景技术：
：紫杉醇或多烯紫杉醇是广谱有效抗癌药物，其可作用于肿瘤细胞微管广微管蛋白系统,促进微管蛋白装配成微管，但同时抑制微管的解聚，从而导致微管束的排列异常，形成星状体，使纺锤体失去正常功能，从而导致肿癯细胞死亡。但是现有技术中，紫杉醇或多烯紫杉醇制剂是普通注射剂，47%的人在使用了此类药物后出现血液中性粒细胞的减少，62%的人在使用了此类药物后，因为神经系统毒害产生和四肢麻木，对肝脏、皮肤、消化系统的副反应比较普遍和明显。近年来，有一大批脂质体、可生物降解高分子毫微球、环糊精包含与脂质体结合制剂发明专利出现，使该药物的疗效有了明显的提高，毒副作用也有所减轻，但是仍有脂质体材料及药物本身在体内过氧化以及脂质体材料在体外氧化而产生的副作用。还有存在毫微球、脂质体、环糊精包含药物泄漏及在体内突释作用产生瞬间毒副作用的释放，危害病人身心健康。还有现有技术药物在使用前，病人需要提前服用苯海拉明和注射西米替丁防治毒副作用，比较麻烦。
发明内容为了克服现有紫杉醇或多烯紫杉醉药物存在的上述缺陷，本发明提供一种紫杉醇或多烯紫杉醉脂质体药物，本发明还提供所述药物的制备方法。本发明的技术方案如下本发明提供一种脂质体组合药物，其特征在于，所述脂质体组合药物的有效药物成分及其重量份数如下氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2:l的混合物300-550;胆固醇、硬脂酰胺、0—谷甾醇重量比l:1:O.l的混合物200—400;硫普罗宁、维生素E重量比4:l的混合物100—200;聚乙二醇一4000与聚乙二醉6000的任意比混合物150—200;维生素C150—180;叔丁醇、无水乙醇重量比1.5—2.2:0.01—0.05的混合物4000-7000;紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物20—40;苯海拉明、西米替丁重量比l:6的混合物350—500。本发明还提供上述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇、维生素E、紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全；(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合(4)将步骤(3)制备的混合液通过纳米超高压均质机(又称纳米对撞机，河北廊坊机械厂)进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为100MPa—300MPa，喷射口流速为450—500米/秒，发生髙频振荡，使物料达到纳米级，乳化，分散成平均粒径100nm的单室脂质体均匀分散液(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22um滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻干固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于2%;(6)将步骤(5)制备的冻干固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学上可以接受的剂型。本发明所提供药物的技术效果如下1.本发明所提供药物制成脂质体药物载体，因此可以减少药物剂量近一倍，而疗效可以提高15%以上，由于减少药物剂量，药物的毒副作用大大减少。2.本发明所提供药物由于是采用硬脂酰胺作为封堵脂质体的材料，使得脂质体表面带阳性电荷，而肿瘤细胞表面带阴性电荷，这样，本发明所提供药物不仅具有脂质体药物的被动靶向作用，更具有对肿癯细胞的主动靶向作用，所以在疗效上比一般脂质体药物要高15%,而剂量仅为一般脂质体制剂的二分之一以下。药物的毒副作用更小。3.本发明所提供的药物加入了维生素C、硫普罗宁、维生素E三种抗氧化剂，维生素C在体外抗氧化，而硫普罗宁在肝部抗氧化，这对于紫杉醇或多烯紫杉醇在肝脏内代谢具有保护作用，维生素E主要抗体内过氧化，而这三种抗氧化剂在体内都具备抗氧化作用，进一步减轻了紫杉醇或多烯紫杉醇的毒副作用。4.本发明药物为平均粒径lOOnm的纳米级脂质体，优势有本发明提供的脂质体药物仅在肿瘤细胞血管缝隙中渗透，纳米脂质体与肿瘤细胞亲和、融化、渗透等的能力强，因此药物剂量小，疗效指数高，毒副作用小，治疗成本低。5.本发明提供的药物加入维生素E和聚乙二醇，使脂质体在体内形成长循环脂质体，消除半衰期延长。6.本发明提供的药物，加入苯海拉明、西米替丁，因此在使用时，不需要预先口服或注射此两种药物，方便使用。7.在本发明提供的药物中，苯海拉明和西米替丁可溶于水，包封在脂质体中心，而紫杉醇或多烯紫杉醉属于脂溶性药物，包封在脂质体双分子层中，所以，苯海拉明和西米替丁以及紫杉醇和多烯紫杉醇共同存在于脂质体中，共同发挥作用，苯海拉明和西米替丁可即时协同消除紫杉醇和多烯紫杉醇的毒副作用和过敏反应。8.本发明所提供的药物组合物的组成成分及其制备方法制备的脂质体粒径较均一，而且较坚实。9.本发明所提供的药物配方中，使用胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇作为脂质体封堵材料，使脂质体载药包封率高达95%,而且泄漏率低于6%，但在体内无明显突释效应。10.由于采用了叔丁醇和聚乙二醇，冷冻干燥后，脂质体药物重新溶解时，会形成粒径小于100nm的均匀脂质体，且由于脂质体表面都是正电荷，因而由于同性电荷相互排斥作用，脂质体在溶剂中不会发生聚集。具体实施方式实施例l:本实施例所采用的配方如下氨化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2:1的混合物胆固醉、硬脂酰胺、e—谷甾醉重量比l:1:O.l的混合物硫普罗宁、维生素E重量比4:l的混合物聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物维生素c叔丁醉、无水乙酵重量比1.5-2.2:0.01—0.05的混合物紫杉醉与多烯紫杉醇的任意比混合物300g;200g;100g;150g:150g:邻00g;20g;苯海拉明、西米替丁重量比l:6的混合物350g:混合于0.01M，pH6.0—7.5的璘酸盐缓冲液12000g中。本发明还提供上述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下步骤(1)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醉、维生素E、紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合；(4)将步骤(3)制备的混合液通过纳米超髙压均质机(又称纳米对撞机)进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为100MPa—300MPa，喷射口流速为450—500米/秒，发生髙频振荡，使物料达到纳米级，乳化，分散成平均粒径小于100nm的单室脂质体均匀分散液；(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22um滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻干固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于29^;(6)将步骤(5)制备的冻干固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学上可以接受的剂型。药效学试验验证如下选用小鼠乳腺癌模型，设髙、中、低剂量组，每组30只。使用本发明药物高剂量组2.5mgAkg,—周一次，腹腔注射；中剂量组2.0mg/.kg,—周一次，腹腔注射；低剂量组1.5mg/.kg，一周一次，腹腔注射；所用药物均为粉剂。对照组紫杉醇普通注射液组5mg/kg,—周一次，腹腔注射；紫杉醇普通脂质体药物组4.0mg/kg，一周一次，腹腔注射。给药周期为三周，停药24小时后处死动物，解剖剥离癯块，称瘤重。试验次数为3次。肿癯抑制率计算肿瘤抑制率(％)=(C-T)/CX100%T:本发明药物组平均瘤重；C对照组平均瘤重。试验结果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>实施例2:本实施例所采用的配方如下(用量克)氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2:l的混合物550;胆固醇、硬脂酰胺、0—谷甾醇重量比l:1:O.l的混合物400;硫普罗宁、维生素E重量比4:l的混合物200:聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物200;维生素C180;叔丁醇、无水乙醇重量比1.5-2.2:0.01—0.05的混合物7000;紫杉醇与多烯紫杉醉的任意比混合物40;苯海拉明、西米替丁重量比l:6的混合物500;混合于O.OIM，pH6.0—7.5的磷黢盐缓冲液12000g中。本发明还提供上述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下歩骤:(1)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、P—谷甾醇、维生素E、紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二酵一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全；(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合；(4)将步骤(3)制备的混合液通过纳米超高压均质机(又称纳米对撞机)进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为lOOMPa—300MPa，喷射口流速为450—500米/秒，发生髙频振荡，使物料达到纳米级，乳化，分散成粒径小于100nm的单室脂质体均匀分散液；(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22um滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻干固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于2%;(6)将步骤(5)制备的冻干固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学上可以接受的剂型。药效学试验验证如下选用小鼠乳腺癌模型，设高、中、低剂量组，每组30只。使用本发明药物高剂量组2.5mg/.kg，一周一次，腹腔注射；中剂量组2.0mg/.kg,—周一次，腹腔注射；低剂量组1.5mg/.kg,—周一次，腹腔注射；所用药物均为粉剂。对照组紫杉醇普通注射液组5mg/kg,—周一次，腹腔注射紫杉醇普通脂质体药物组4.0mg/kg，一周一次，腹腔注射。给药周期为三周，停药24小时后处死动物，解剖剥离瘤块，称瘤重。试验次数为3次。肿癯抑制率计算肿癯抑制率(％)=(C-T)/CX100%T:本发明药物组平均癯重；C对照组平均癯重。试验结果如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例3:本实施例所采用的配方如下(用量克)氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2:l的混合物400;胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇重量比l:1:O.l的混合物300;硫普罗宁、维生素E重量比4:l的混合物150;聚乙二醉一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物180;维生素C165:叔丁醇、无水乙醇重量比1.5—2.2:0.01—0.05的混合物6000;紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物32;苯海拉明、西米替丁重量比l:6的混合物420;混合于O.OIM，pH6.0—7.5的磷酸盐缓冲液12000g中。本发明还提供上述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下步骤(i)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇、维生素E、紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全；(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合；(4)将步骤(3)制备的混合液通过纳米超髙压均质机(又称纳米对撞机)进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为lOOMPa—300MPa，喷射口流速为450—500米/秒，发生髙频振荡，使物料达到纳米级，乳化，分散成粒径小于100nm的单室脂质体均匀分散液；(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22um滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻干固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于2%;(6)将步骤(5)制备的冻干固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学上可以接受的剂型。药效学试验验证如下选用小鼠乳腺癌模型，设高、中、低剂量组，每组30只。使用本发明药物高剂量组2.5mg/.kg,—周一次，腹腔注射；中剂量组2.0mg/.kg,—周一次，腹腔注射；低剂量组1.5mgAkg,—周一次，腹腔注射；所用药物均为粉剂。对照组紫杉醇普通注射液组5mg/kg，一周一次，腹腔注射；紫杉醇普通脂质体药物组4.0mg/kg,—周一次，腹腔注射。给药周期为三周，停药24小时后处死动物，解剖剥离癯块，称瘤重。试验次数为3次。肿瘤抑制率计算肿瘤抑制率(％)=(C-T)/CX100%T:本发明药物组平均瘤重；c对照组平均癯重。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>实施例4:本实施例所采用的配方如下(用量克)氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2:l的混合物300;胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇重量比l:1:O.l的混合物400;硫普罗宁、维生素E重量比4:l的混合物100;聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物200;维生素C150;叔丁醇、无水乙醇重量比1.5—2.2:0.01—0.05的混合物7000;紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物20;苯海拉明、西米替丁重量比l:6的混合物500;混合于0.01M，pH6.0—7.5的磷酸盐缓冲液12000g中。本发明还提供上述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下歩骤(1)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、e—谷甾醇、维生素E、紫杉醉与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全；(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合(4)将步骤(3)制备的混合液通过纳米超高压均质机(又称纳米对撞机)进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为100MPa—300MPa,喷射口流速为450—500米/秒，发生高频振荡，使物料达到纳米级，乳化，分散成粒径小于100nm的单室脂质体均匀分散液；(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22um滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻干固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于2%;(6)将步骤(5)制备的冻干固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学上可以接受的剂型。药效学试验验证如下选用小鼠乳腺癌模型，设髙、中、低剂量组，每组30只。使用本发明药物高剂量组2.5mgAkg，一周一次，腹腔注射；中剂量组2.0mg/.kg，一周一次，腹腔注射；低剂量组1.5mg/丄g，一周一次，腹腔注射；所用药物均为粉剂。对照组紫杉醇普通注射液组5mg/kg，一周一次，腹腔注射；紫杉醇普通脂质体药物组4.0mg/kg，一周一次，腹腔注射。给药周期为三周，停药24小时后处死动物，解剖剥离瘤块，称瘤重。试验次数为3次。肿瘤抑制率计算肿癯抑制率(％)=(C-T)/CX100%T:本发明药物组平均瘤重；C对照组平均癯重。试验结果如下<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>权利要求1.一种脂质体组合药物，其特征在于，所述脂质体组合药物的有效药物成分及其重量份数如下氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2∶1的混合物300-550；胆固醇、硬脂酰胺、β-谷甾醇重量比1∶1∶0.1的混合物200-400；硫普罗宁、维生素E重量比4∶1的混合物100-200聚乙二醇-4000与聚乙二醇6000的任意比混合物150-200；维生素C150-180；叔丁醇、无水乙醇重量比1.5-2.2∶0.01-0.05的混合物4000-7000；紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物20-40；苯海拉明、西米替丁重量比1∶6的混合物350-500。2.权利要求1所述组合药物的制备方法，其特征在于包括如下歩骤(1)将所述量的氢化大豆磷脂、羊脑卵磷脂、胆固醇、硬脂酰胺、P-谷溢醇、维生素E、紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物加入到所述量的叔丁醇和乙醇的混合液中，溶解完全；(2)将所述量的硫普罗宁、聚乙二醇一4000与聚乙二醇6000的任意比混合物、维生素C、苯海拉明、西米替丁加入到磷酸盐缓冲液中，溶解完全；(3)将步骤(1)和步骤(2)制备的混合液混合均匀(4)将/歩骤(3)制备的混合液通过纳米超高压均质机进行破碎，分散，乳化和冷杀菌，压力为100MPa—300MPa,喷射口流速为450—500米/秒，使物料达到纳米级，乳化，分散成平均粒径小于100nm的脂质体均匀分散液；(5)将步骤(4)制备的分散液经0.22皿滤膜过滤，将过滤液冻干，至冻千固体中叔丁醇和乙醇无残留，水分含量小于2%;(6)将步骤(5)制备的冻千固体在低温下粉碎成80—100目的粉末，测定紫杉醇或多烯紫杉醇含量，按药剂学上允许的剂量添加药学上可接收的辅料制成药剂学i:可以接受的剂型。全文摘要本发明涉及一种脂质体组合药物及其制备方法。本发明提供的脂质体组合药物的有效药物成分重量份如下氢化大豆磷脂与羊脑卵磷脂重量比2∶1的混合物300-550；胆固醇、硬脂酰胺、β-谷甾醇重量比1∶1∶0.1的混合物200-400；硫普罗宁、维生素E重量比4∶1的混合物100-200；聚乙二醇-4000与聚乙二醇6000的任意比混合物150-200；维生素C150-180；叔丁醇、无水乙醇重量比1.5-2.2∶0.01-0.05的混合物4000-7000；紫杉醇与多烯紫杉醇的任意比混合物20-40；苯海拉明、西米替丁重量比1∶6的混合物350-500。本发明还提供上述组合药物的制备方法。本发明所提供药物减少药物剂量近一倍，而疗效可以提高15％以上，药物的毒副作用大大减少。文档编号A61K9/127GK101176719SQ200610137900公开日2008年5月14日申请日期2006年11月9日优先权日2006年11月9日发明者蔡海德申请人:刘祥华;蔡海德