专利名称：一种含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂及其制备方法。
背景技术：
中医认为肿瘤是全身疾病的局部反应，病机本身是本虚标实，在临床上以辩证论治为指导原则，在治疗上强调扶助正气，主要以稳定瘤体、改善临床症状、提高生存质量、延长生存期，从而达到“带瘤生存”的目的。在肿瘤治疗中，中药配合肿瘤放化疗应用可以减轻放化疗毒性，提高放化疗完成率，增加疗效；用于肿瘤手术后的患者不但可以促进康复，更重要的是在一定程度上可以控制肿瘤术后的复发、转移；对于不适于手术及放化疗的患者，可以在一定程度上控制肿瘤发展，减轻临床症状；在肿瘤高危险潜伏期人群中用药，可以预防和减少肿瘤的发生率。
而由红豆杉、红参、甘草通过现代制药工艺技术提取物组成的现有复方紫杉醇制剂符合君臣佐使中药配伍的要点，君药红豆杉为高寒植物，具解毒通络及驱邪作用；臣药红参扶正固本；佐使药甘草具解毒调和，三药合用则可使结散痰消、毒去正安、诸症自愈。在确定肿瘤多为邪毒蕴热、湿聚痰结、气滞血瘀和正气虚亏所致，治宜解毒驱邪、扶正固本。现代药理研究证实，红参中的三萜类人参皂苷具有抗肿瘤及提高人体免疫力的作用；甘草中的甘草酸具有抗肿瘤及降低药物毒副作用；而红豆杉中的紫杉醇(paclitaxe1)是目前临床治疗非小细胞肺癌、卵巢癌和乳腺癌的有效抗肿瘤药物，其抗癌机制是通过刺激微管的聚合，促进微管双聚体装配成微管，使微管超稳定，最终使细胞增殖停止在有丝分裂期的G/M期，由于独特的作用机制和确切疗效，紫杉醇已成为最具应用价值的抗癌药物之一。现临床应用的紫杉醇注射液(商品名为泰素，Taxo1)是以聚氧乙烯蓖麻油(cremophor EL)∶无水乙醇(50∶50)制成的无色粘稠溶液，使用时经用氯化钠注射液或5％葡萄糖注射液稀释后静脉滴注。紫杉醇注射液中的cremophorEL易引起过敏反应和低血压，极大地限制了临床应用，再加上紫杉醇口服难以吸收，给口服制剂的开发带来了困难。为此，近年来研究低毒、高效的紫杉醇制剂已成为紫杉醇的研究热点之一。
许多疗效确切的药物由于其自身性质上存在的弱点使其应用受到了限制。近年来研究表明，将药物制备成磷脂分散物或结合物后，使其一些理化性质发生变化，能增强药物的药理作用，延长作用时间，增加药物在胃肠道中的吸收，提高药物的生物利用度，提高疗效，并降低药物的不良反应。如江波等利用高效液相色谱法分别测定了家兔灌胃给予水飞蓟宾及其磷脂复合物后血浆中的药物浓度(江波等，中国医药工业杂志，2002，33(12)598)，测定结果发现水飞蓟素磷脂复合物的达峰时间由原药的1和4小时提前到0.5和2小时，而最大峰浓度提高到近3倍，血药浓度曲线下面积AUC由5.55提高到11.95um/h/mL-1。可见水飞蓟素与磷脂形成的复合物提高了其在胃肠道中的吸收。
现有复方紫杉醇制剂中的甘草酸、人参皂苷无论是口服或注射均易被人体吸收，但紫杉醇在水中的溶解度很小，几乎不溶于水(＜0.004mg/ml)，在胃肠道中几乎不被吸收，故口服给药生物利用度差，从而影响了复方紫杉醇口服制剂的临床应用。据此，为了改善现有的复方紫杉醇制剂的不足，我们将其开发成一种新的复方紫杉醇制剂，主要是为了改善紫杉醇的口服生物利用度，保证复方紫杉醇制剂中君药的有效成分紫杉醇被人体充分吸收，从而满足临床用药要求。
发明内容
本发明提供一种含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂及其制备方法。
本发明含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂中的活性成分是复方紫杉醇磷脂分散物，它是由紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂组成，其中三个组分的重量％含量为紫杉醇3.5-50％、甘草酸49.5-86％、人参皂苷0.5-10.5％；它们三者之和与磷脂以重量比例为1∶1-70组成复方紫杉醇磷脂分散物，复方紫杉醇制剂中活性成分占重量比为5-100％，常用辅料占重量比为0-95％。所述常用辅料可以是乳糖、滑石粉、淀粉、羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁、微粉硅胶、微晶纤维素或其它辅料。
本发明含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂的制备方法包括下列步骤(1)按所述配方量称取紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂；(2)将紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂溶于有机溶剂中，加热回流0.5～5小时；(3)将所得溶液在-0.01～-0.1MPa真空压力和温度35～85℃下减压浓缩到原体积的5～50％，继续在温度30～60℃干燥，以全部除去溶剂，得到复方紫杉醇磷脂分散物；(4)取复方紫杉醇磷脂分散物，加入辅料混合，配制成含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂。
上述人参皂苷选自人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3或伪人参皂苷-F11中一种或一种以上的混合物。
上述磷脂选自口服大豆卵磷脂、注射大豆卵磷脂、口服蛋黄卵磷脂、注射蛋黄卵磷脂、合成磷脂、磷脂酰乙胺醇、注射用Pluronic F68、注射用聚甘油棕榈酸二醇酯、甘油单油酸酯或脱羧磷脂酰胆碱中一种或一种以上的混合物。
本发明含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂，包括但不限于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂或口服干混悬剂等制剂，制备方法步骤(2)中所述的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮或乙酸乙酯中的一种或一种以上的混合物，溶剂用量为磷脂重量的1～100倍。
制备方法步骤(3)中继续干燥的干燥方式包括但不限于减压干燥、流化床干燥或加热鼓风干燥等。
对复方紫杉醇磷脂分散物相对于紫杉醇的大鼠口服生物利用度采用高效液相法进行了测试，结果如图1所示，以紫杉醇30mg/kg的相同剂量分别给大鼠灌胃复方紫杉醇磷脂分散物混悬液与紫杉醇混悬液后的血药浓度-时间曲线显示出，将紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂制备成复方紫杉醇磷脂分散物后，大大提高了紫杉醇的口服生物利用度。复方紫杉醇磷脂分散物给药组达峰时间为2小时，对应血药浓度为5.44μg/ml；而紫杉醇给药组达峰时间为1小时，对应血药浓度为0.77μg/ml；由此可见，复方紫杉醇磷脂分散物给药组最大吸收时间点的血药浓度是紫杉醇给药组血药浓度的7倍，显著提高了紫杉醇在胃肠道中的吸收，提高了疗效，使药物在低剂量下发挥作用，可减少给药剂量和给药次数，增加了临床用药的安全性，降低了不良反应，更加符合临床用药指导原则。另外，将紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂制备成分散物后，紫杉醇在胃肠液中自发形成磷脂囊泡，药物镶嵌在磷脂囊泡当中，一方面药物不与胃肠道直接接触，降低了紫杉醇本身对胃肠道的刺激性；另一方面有一定减缓药物消除的缓释作用，复方紫杉醇磷脂分散物的达峰时间比紫杉醇的达峰时间晚1小时，延长作用时间，提高疗效。证实本发明复方紫杉醇制剂中所含有的复方紫杉醇磷脂分散物显著的提高了紫杉醇的口服吸收，克服了紫杉醇口服生物利用度低的难题。这样在治疗肿瘤时，以中药配伍中的君臣佐使为要点，充分利用君药紫杉醇、臣药人参皂苷、佐使药甘草酸三药合用之优势，既注重肿瘤的控制和消除，又注重到病人抵抗力的恢复，还兼顾到减少药物的毒副作用。本发明含有复方紫杉醇磷脂分散物的制剂是一种安全、高效的新复方紫杉醇制剂，其制备方法简单，成本低，具有很大的开发前景。
图1大鼠分别灌胃复方紫杉醇磷脂分散物混悬液与紫杉醇混悬液后的血药浓度-时间曲线图。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但对本发明没有限制。
实施例1复方紫杉醇磷脂分散物片剂的制备称取紫杉醇20g、甘草酸77g、人参皂苷Rd 3g、口服大豆卵磷脂250g，加入1000mL无水乙醇在加热搅拌下回流45分钟；将其在真空压力-0.09MPa、60℃水浴加热下减压浓缩至150mL；然后将该浓缩液用减压干燥法在在真空压力为-0.05MPa、40℃下继续干燥，即得，复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得的复方紫杉醇磷脂分散物中加入乳糖500g、滑石粉10g，羧甲基淀粉纳15g，混合均匀，按照常规片剂制备工艺将其制备成片剂。
实施例2复方紫杉醇磷脂分散物胶囊剂的制备称取紫杉醇12g、甘草酸84g、人参皂苷Re 4g、口服蛋黄卵磷脂7000g，加入70000mL乙酸乙酯在加热搅拌下回流5小时；将其在真空压力-0.07MPa、55℃水浴加热下减压浓缩至550mL；然后将该浓缩液用流化床干燥法在35℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得的复方紫杉醇磷脂分散物中加入淀粉60g、硬脂酸镁37g，混合均匀，将其直接装入胶囊，制备成胶囊剂。
实施例3复方紫杉醇磷脂分散物丸剂的制备称取紫杉醇10g、甘草酸85g、人参皂苷Rb14g、人参皂苷Rb21g、注射用大豆卵磷脂4000g，加入4000mL氯仿在加热搅拌下回流3小时；将其在真空压力-0.04MPa、40℃水浴加热下减压浓缩至650mL；然后将该浓缩液用减压干燥法在真空压力-0.06MPa、50℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得的复方紫杉醇磷脂分散物中加入微晶纤维素10000g，混合均匀，按照常规的丸剂制备工艺将其制备成丸剂。
实施例4复方紫杉醇磷脂分散物颗粒剂的制备称取紫杉醇15g、甘草酸84g、人参皂苷Rc 1g、口服大豆卵磷脂210g、磷脂酰胆碱55g，加入12000mL甲醇、6550mL异丙醇在加热搅拌下回流4.2小时；将其在真空压力-0.03MPa、82℃水浴加热下减压浓缩至7000mL；然后将该浓缩液用流化床干燥在55℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得的复方紫杉醇磷脂分散物中加入乳糖5500g、淀粉500g，微粉硅胶125g，混合均匀，按照常规的颗粒剂制备工艺将其制备成颗粒剂。
实施例5复方紫杉醇磷脂分散物散剂的制备称取紫杉醇3.5g、甘草酸86g、人参皂苷Rg19.5g、伪人参皂苷-F111g、合成磷脂100g，加入10000mL丙酮在加热搅拌下回流2小时；将其在真空压力-0.05MPa、75℃水浴加热下减压浓缩至200mL；然后将该浓缩液用加热鼓风干燥在60℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得的复方紫杉醇磷脂分散物中加入乳糖58g、滑石粉10g，混合均匀，按照常规散剂制备工艺将其制备成散剂。
实施例6复方紫杉醇磷脂分散物片剂的制备称取紫杉醇30g、甘草酸68g、人参皂苷Rg21g、人参皂苷Rg31g、注射用蛋黄卵磷脂2000g，加入10000mL二氯甲烷在加热搅拌下回流2小时；将其在真空压力-0.08MPa、55℃水浴加热下减压浓缩至150mL；然后将该浓缩液用减压干燥法在真空压力为-0.05MPa、35℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；在所制得复方紫杉醇磷脂分散物中加可溶性淀粉10g、滑石粉5g，混合均匀，按照常规的片剂制备工艺将其制备成片剂。
实施例7复方紫杉醇磷脂分散物胶囊的制备称取紫杉醇50g、甘草酸49.5g、人参皂苷Rg10.5g、口服蛋黄卵磷脂330g，加入9900mL乙酸乙酯在加热搅拌下回流1.2小时；将其在真空压力-0.07MPa、50℃水浴加热下减压浓缩至500mL；然后将该浓缩液用流化床干燥法在37℃下继续干燥，即得复方紫杉醇磷脂分散物；粉碎，将其直接装入胶囊，制备成胶囊剂。
实施例8用高效液相法测定复方紫杉醇磷脂分散物与紫杉醇的大鼠口服相对生物利用度1.色谱条件分析柱为KromasilC18分析柱(5μm，4.6mm×25mm)；流动相为甲醇-乙腈-水(24∶36∶40)；流速1.0ml/min，进样量20μl，检测波长227nm，室温操作。
2.标准溶液的配制精称取紫杉醇标准品10mg，用250ml甲醇溶解，得到40μg/ml的标准溶液，置4℃冰箱保存备用。
3.大鼠空白血浆的制备取大鼠，以毛细管由眼眶静脉采血适量置于肝素的试管中，离心10min(5000r/min)，分离得到空白血浆，置4℃冰箱保存。
4.标准曲线和线性范围分别取0.2ml空白大鼠血浆，加入适量预先配置好的紫杉醇标准溶液，配成浓度分别为0.1、0.2、0.5、1、5、10、20μg/ml的标准血浆样品，按样品处理方法处理后进样测定，以峰面积(A)对浓度(C)作图，得到回归方程C＝0.0106A+0.01(r＝0.9998)，在0.1～20μg/ml浓度范围内线性关系良好。以S/N(信号/噪音)≥3计，紫杉醇的最低检测浓度为4ng/ml。
5.样品的处理方法以实施例1所制得的复方紫杉醇磷脂分散物为模型药物，将两组大鼠给药前12小时禁食后，将复方紫杉醇磷脂分散物与紫杉醇分别用水配成紫杉醇浓度为7mg/ml的混悬液，以紫杉醇30mg/kg的相同剂量分别给其灌胃，给药后分别在15min、30min、1h、2h、3h、4h、6h、8h、10h、12h后，眼眶取血0.5mL，置于含有肝素的1.5ml的离心管中，然后离心10min(5000r·min)分离血浆；精密吸取给药后的大鼠血浆0.2ml于1.5ml的离心管中，加入1ml的叔丁基甲醚，置旋涡振荡器上振荡1min后，离心5min(4000r·min)，吸取上层醚液，于30℃恒温下氮气吹干，残渣用100μl甲醇溶解，取20μl进样，记录峰面积，将峰面积代入回归方程C＝0.0106A+0.01中，得出血药浓度。结果见图1。
权利要求
1.一种含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂，其特征在于制剂中的活性成分是复方紫杉醇磷脂分散物，它是由紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂组成，其中三个组分的重量％含量为紫杉醇3.5-50％、甘草酸49.5-86％、人参皂苷0.5-10.5％；它们三者之和与磷脂以重量比例为1∶1-70组成复方紫杉醇磷脂分散物，复方紫杉醇制剂中活性成分占重量比为5-100％，常用辅料占重量比为0-95％。
2.如权利要求1所述的复方紫杉醇制剂，其特征在于所述人参皂苷选自人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3或伪人参皂苷-F11中一种或一种以上的混合物。
3.如权利要求1所述的复方紫杉醇制剂，其特征在于所述磷脂选自口服大豆卵磷脂、注射大豆卵磷脂、口服蛋黄卵磷脂、注射蛋黄卵磷脂、合成磷脂、磷脂酰乙胺醇、注射用Pluronic F68、注射用聚甘油棕榈酸二醇酯、甘油单油酸酯或脱羧磷脂酰胆碱中的一种或一种以上的混合物。
4.如权利要求1所述的复方紫杉醇制剂，其特征在于所述复方紫杉醇制剂，包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂或口服干混悬剂制剂。
5.权利要求1所述含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂的制备方法，其特征在于包括下列步骤(1)按权利要求1配方量称取紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂；(2)将紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂溶于有机溶剂中，加热回流0.5～5小时；(3)将所得溶液在-0.01～-0.1MPa真空压力和温度35～85℃下减压浓缩到原体积的5～50％，继续在温度30～60℃干燥，得到复方紫杉醇磷脂分散物；(4)取复方紫杉醇磷脂分散物，加入辅料混合，配制成含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述人参皂苷选自人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rg3或伪人参皂苷-F11中一种或一种以上的混合物。
7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于所述磷脂选自口服大豆卵磷脂、注射大豆卵磷脂、口服蛋黄卵磷脂、注射蛋黄卵磷脂、合成磷脂、磷脂酰乙胺醇、注射用Pluronic F68、注射用聚甘油棕榈酸二醇酯、甘油单油酸酯或脱羧磷脂酰胆碱中的一种或一种以上的混合物。
8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮或乙酸乙酯中一种或一种以上的混合物，溶剂用量为磷脂重量的1～100倍。
9.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述继续干燥的干燥方式包括减压干燥、流化床干燥或加热鼓风干燥。
全文摘要
一种含有磷脂分散物的复方紫杉醇制剂及其制备方法。该制剂的活性成分是由紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂组成的复方紫杉醇磷脂分散物，它是由紫杉醇、甘草酸、人参皂苷和磷脂在有机溶剂中加热回流，再将溶液浓缩，干燥而成。可配制成含有磷脂分散物的各种口服剂型复方紫杉醇制剂。动物试验证实，复方紫杉醇磷脂分散物显著提高了紫杉醇的口服生物利用度。在治疗肿瘤时，以中药配伍中的君臣佐使为要点，充分利用君药紫杉醇、臣药人参皂苷、佐使药甘草酸三药合用之优势，既注重肿瘤的控制和消除，又注重到病人抵抗力的恢复，还兼顾到减少药物的毒副作用。本发明含有复方紫杉醇磷脂分散物的制剂是一种安全、高效的新复方紫杉醇制剂。
文档编号A61K9/48GK101015548SQ20071003759
公开日2007年8月15日 申请日期2007年2月15日 优先权日2007年2月15日
发明者黄成安 申请人:黄成安