专利名称：超氧化物歧化酶微胶囊的制备方法
技术领域：
超氧化物歧化酶的微嚢化，产品适于医疗药品、保健食品和生物化工产 品等领域。
背景技术：
超氧化物歧化酶是体内 一种重要的氧自由基清除剂，能够平衡机体的氧 自由基，从而避免当体内超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应。将 超氧化物歧化酶与微嚢技术结合，制成超氧化物歧化酶微嚢在国内外尚未见 到相关文献报道。目前，由于天然超氧化物歧化酶稳定性差，使其应用面受 到限制。
将超氧化物歧化酶制成微嚢产品，既提高了超氧化物歧化酶的稳定性， 防止空气、水分、光线等因素引起活性成分的变化，利于人体吸收，又能减 少超氧化物歧化酶产品对胃肠道的直接刺激，更便于进一步制成便于运输的， 具有保健功能的药品、食品或生物化工产品等。
发明内容
本发明实现了超氧化物歧化酶的微嚢化，从而提高了超氧化物歧化酶的 稳定性与有效生物利用度，并改善了产品的加工性能。本发明首次以蒸馏水 作为反应体系，制备出的微胶嚢从圆整度、粒径分布、颗粒间粘连情况、表 面光滑程度，都符合产品化要求。
本发明提供一种超氧化物歧化酶的微嚢化的制备方法，其特征在于，包
括以下步骤
(l)将乙基纤维素和牛初乳粉碎，分别过筛；量取二氯曱烷；将过筛后 的60至120目的乙基纤维素加入到二氯曱烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，
得到混合液A;
(2 )将粉碎后的80至120目的牛初乳和超氧化物歧化酶按1: 4至4: 1 的质量比混合，得到二者混合物；将牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者 纯超氧化物歧化酶加入到混合液A,边加边搅拌，至完全溶胀，得到混合液B, 静置；牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶与乙基纤维 素的质量比为3: l至5: 1;
(3) 将十二烷基磺酸钠溶于蒸馏水中，搅拌至溶液澄清，得到溶液C， 水浴控温，搅拌；
(4) 将混合液B加入溶液C中，继续搅拌，直至二氯曱烷挥发完全， 微胶嚢形成；
(5) 微胶囊形成后，将其进行减压抽滤；所得到的微胶嚢用蒸馏水冲洗, 通风干燥，得到粉末状微胶嚢，干燥保存。
溶液C的量加到能使二氯甲烷挥发完全，且形成微胶嚢即可，没有严格 的质量要求。
本发明得到微胶嚢，与油相制备体系相比，微胶嚢表面较光滑，圆整度 较好，大小均一，无粘连现象，粒径范围分布在200 300nm。此外，由于超 氧化物歧化酶属于极性的蛋白质类物质，本法釆用的极性的水反应体系，有 利于保持超氧化物歧化酶的生物活性。
图1:实施例1的超氧化物歧化酶微胶嚢扫描电镜图 图2:实施例2的超氧化物歧化酶微胶嚢扫描电镜图 图3:实施例3的超氧化物歧化酶微胶嚢扫描电镜图
具体实施例方式
实施例1:分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过篩后的120目乙 基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。 将粉碎后的80目牛初乳和超氧化物歧化酶按1: 1的质量比混合，得到二者 混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物緩慢加入到混合液A，牛初乳 和SOD的混合物与乙基纤维素质量比为5: 1，边加边搅拌，至完全溶解， 得到混合液B静置。取十二烷基磺酸钠，溶于10mL蒸馏水中，搅拌至溶液 澄清，得到溶液C,》文入水浴中在转速为300rpm下搅拌，水浴温度32K。 将混合液B加入溶液C中，继续以转速为300rpm搅拌，直至十二烷基磺酸 钠挥发完全。微胶嚢形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶嚢用蒸馏水 冲洗，40'C下通风干燥1小时，得到粉末状孩t胶嚢。以转速为300rpm,嚢心 嚢材比分别为5: l条件下形成的微嚢颗粒饱满，粘连少，圆整度优良，平均 粒径约在205nm。
实施例2:分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过筛后的120目乙基纤维素加入到二氯曱烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。 将粉碎后的100目牛初乳和超氧化物歧化酶按l: 1的质量比混合，得到二者 混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物緩慢加入到混合液A,牛初乳 和超氧化物歧化酶的混合物与乙基纤维素质量比为3: 1，边加边搅拌，至完 全溶解，得到混合液B，静置。取十二烷基磺酸钠，溶于10mL蒸馏水中， 搅拌至溶液澄清，得到溶液C。放入水浴中在转速为300rpm下搅拌，水浴 温度32"C。将混合液B加入溶液C中，继续以转速为300rpm搅拌，直至十 二烷基磺酸钠挥发完全。微胶嚢形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶 嚢用蒸馏水冲洗，45'C下通风干燥1小时，得到粉末状微胶嚢。以转速为 300rpm,嚢心嚢材比分别为3: 1条件下形成的微胶嚢粘连度较好，圆整度 较好，平均粒径约在187^un。
实施例3:分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过筛后的60目乙 基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。 将粉碎后的120目牛初乳和超氧化物歧化酶按l: 4的质量比混合，得到二者 混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物緩慢加入到混合液A，牛初乳 和超氧化物歧化酶的混合物与乙基纤维素质量比为5: 1，边加边搅拌，至完 全溶解，得到混合液B,静置。取十二烷基磺酸钠，溶于10mL蒸馏水中， 搅拌至溶液澄清，得到溶液C。放入水浴中在转速为300rpm下搅拌，水浴 温度28X:。将混合液B加入溶液C中，继续以转速为300rpm搅拌，直至十 二烷基磺酸钠挥发完全。微胶嚢形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶 嚢用蒸馏水冲洗，35X:下通风干燥2小时，得到粉末状微胶囊。以转速为 300rpm，嚢心嚢材比分别为5: 1条件下形成的微胶嚢，粘连少，圆整度良 好，平均粒径约253nm。
实施例4:分别将乙基纤维素和牛初乳粉碎、过筛。将过筛后的卯目乙 基纤维素加入到二氯曱烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。 将粉碎后的80目牛初乳和超氧化物歧化酶按4: 1的质量比混合，得到二者 混合物。将牛初乳和超氧化物歧化酶的混合物緩慢加入到混合液A，牛初乳 和超氧化物歧化酶的混合物与乙基纤维素质量比为5: 1,边加边搅拌，至完 全溶解，得到混合液B，静置。取十二烷基磺酸钠，溶于lOmL蒸馏水中， 搅拌至溶液澄清，得到溶液C。放入水浴中在转速为400rpm下搅拌，水浴
温度32'C。将混合液B加入溶液C中，继续以转速为400rpm搅拌，直至十 二烷基磺酸钠挥发完全。微胶嚢形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶 嚢用蒸馏水冲洗，45C下通风干燥2小时，得到粉末状微胶囊。以转速为 400rpm，嚢心嚢材比分别为5: 1条件下形成的微嚢颗粒饱满，粘连少，圓 整度良好，平均粒径约在270nm。
实施例5:将粉碎、过筛后的120目乙基纤维素加入到二氯曱烷中，边加 边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A。将纯超氧化物歧化酶加入到混合液 A,超氧化物歧化酶与乙基纤维素质量比为5: 1，边加边搅拌，至完全溶解， 得到混合液B，静置。取十二烷基磺酸钠，溶于lOmL蒸馏水中，搅拌至溶 液澄清，得到溶液C。放入水浴中在转速为400rpm下搅拌，水浴温度32"C。 将混合液B加入溶液C中，继续以转速为400rpm搅拌，直至十二烷基磺酸 钠挥发完全。微胶嚢形成后，将其进行减压抽滤。所得到的微胶嚢用蒸馏水 冲洗，40'C下通风干燥1小时，得到粉末状微胶嚢。以转速为400rpm，嚢心 嚢材比分别为5: l条件下形成的微嚢颗粒饱满，粘连少，圆整度良好，平均 粒径约在220pm。
权利要求
1、一种超氧化物歧化酶的微囊化的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将乙基纤维素和牛初乳粉碎，分别过筛；量取二氯甲烷；将过筛后的60至120目的乙基纤维素加入到二氯甲烷中，边加边搅拌，使其完全溶解，得到混合液A；(2)将粉碎后的80至120目的牛初乳和超氧化物歧化酶按1∶4至4∶1的质量比混合，得到二者混合物；将牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶加入到混合液A，边加边搅拌，至完全溶胀，得到混合液B，静置；牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶与乙基纤维素的质量比为3∶1至5∶1；(3)将十二烷基磺酸钠溶于蒸馏水中，搅拌至溶液澄清，得到溶液C，水浴控温，搅拌；(4)将混合液B加入溶液C中，继续搅拌，直至二氯甲烷挥发完全，微胶囊形成；(5)微胶囊形成后，将其进行减压抽滤；所得到的微胶囊用蒸馏水冲洗，通风干燥，得到粉末状微胶囊，干燥保存。
全文摘要
超氧化物歧化酶微胶囊的制备方法属生物化工产品领域。天然超氧化物歧化酶稳定性差应用受限。本发明步骤将乙基纤维素和牛初乳粉碎过筛；将60至120目的乙基纤维素加到二氯甲烷中，搅拌溶解得混合液A；将80至120目的牛初乳和超氧化物歧化酶按质量比1∶4至4∶1混合；将牛初乳和超氧化物歧化酶混合物或纯超氧化物歧化酶加入A，搅拌至完全溶胀得混合液B静置；牛初乳和超氧化物歧化酶混合物，或者纯超氧化物歧化酶与乙基纤维素的质量比3∶1至5∶1；将十二烷基磺酸钠溶于蒸馏水中，搅拌至溶液澄清得溶液C；B加C中搅拌至二氯甲烷挥发完全；减压抽滤蒸馏水冲洗，通风干燥。本发明提高超氧化物歧化酶稳定性与生物利用度并改善加工性能。
文档编号A61K38/44GK101181632SQ200710177979
公开日2008年5月21日 申请日期2007年11月23日 优先权日2007年11月23日
发明者果 于, 宁 唐, 强 林, 凯 王, 博 王, 平 龚 申请人:北京联合大学生物化学工程学院