用于治疗前列腺癌和与雄激素受体相关的疾病的雄激素受体调节剂的制作方法

专利名称：用于治疗前列腺癌和与雄激素受体相关的疾病的雄激素受体调节剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及式II的化合物、涉及使用这些化合物作为雄激素受体的调节剂的方法和涉及包含这种化合物和其盐的药物组合物。式II的化合物可用于促进(agonize)或拮抗核受体的功能。该化合物可用于拮抗雄激素受体。这种化合物的使用不限于影响雄激素受体，而是例如也可用于治疗与核受体功能相关的其它疾病。式II可表示为以下结构
式II 其中，Het是5和6个原子的杂环单元。优选的杂环单元选自由以下结构表示的化合物


等。
但是，不意图将本发明限于具有这些结构的化合物。
在此，R4、R5、R6和R7独立地选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、CN、NO2、OR11、SR11、NR11R12、NH(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11。R4优选为CN或NO2。R5优选为三氟甲基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基和卤素。R6和R7优选为氢、烷基或卤素。R4、R5、R6和R7可独立地连接以形成环，所述环可为芳香环、取代的芳香环、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基。X选自硫(S)、氧(O)、NR8，其中N是氮和R8选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、(CO)R11、(CO)OR11、(CS)R11、(CS)OR11。
R1选自氢、芳基、取代的芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基、SO2R11、NR11R12、NR12(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11。R1优选为芳基、取代的芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基。
R2和R3独立地选自氢、芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基。R2和R3可连接以形成环，所述环可为芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基。R1和R2可连接以形成环，所述环可为芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环。
A和B独立地选自氧(O)、硫(S)和N-R9。R9选自氢、芳基、取代的芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基、SO2R11、NR11R12、NR12(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11。
R11和R12独立地选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环。R11和R12可连接以形成环，所述环可为芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环、环烷基、取代的环烷基。
以下定义适用于本说明书所用的术语，除非在特定情况下另有限定。
本文所用的术语“烷基”表示支链或直链的烃链，优选具有约1至约8个碳，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、2-甲基戊基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基等。“取代的烷基”包括烷基，其被通常连接至这种链上的一个或多个官能团如羟基、溴、氟、氯、碘、巯基或硫代、氰基、烷基硫代、杂环基、芳基、杂芳基、羧基、烷氧羰基(carbalkoyl)、烷基、链烯基、硝基、氨基、烷氧基、酰氨基等任选取代以形成如三氟甲基、3-羟基己基、2-羧基丙基、2-氟乙基、羧甲基、氰基丁基等的烷基。
除非另有所指，本文单独或作为另一基团的部分所使用的术语“环烷基”包括包含1至3个环的饱和或部分不饱和(包含1或多个双键)环状烃基团，包括单环烷基、双环烷基和三环烷基，包含形成环的总共3至20个碳，优选3至10个碳，和其可如稠合至如对于芳基描述的1或2个芳香环上，其包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基和环十二烷基、环己烯基。“取代的环烷基”包括环烷基，其被一个或多个取代基如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、芳基烷基、环烷基、烷基酰氨基、烷酰基氨基、氧代、酰基、芳基羰基氨基、氨基、硝基、氰基、硫醇和/或烷基硫代和/或包括在“取代的烷基”定义中的任何取代基任选取代。例如，


等。
除非另有所指，本文单独或作为另一基团的部分所使用的术语“链烯基”是指在主链(normal chain)中有2至20个碳、优选2至12个碳和更优选2至8个碳的在主链中包括一个或多个双键的直链或支链基团，如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、4-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、3-辛烯基、3-壬烯基、4-癸烯基、3-十一烯基、4-十二烯基、4，8，12-十四碳三烯基等。“取代的链烯基”包括链烯基，其用一个或多个取代基如以上在定义“取代的烷基”和“取代的环烷基”中所包括的取代基任选取代。
除非另有所指，本文单独或作为另一基团的部分所使用的术语“炔基”是指在主链中有2至20个碳、优选2至12个碳和更优选2至8个碳的在主链中包括一个或多个三键的直链或支链基团，如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基、4-癸炔基、3-十一炔基、4-十二炔基等。“取代的炔基”包括炔基，其用一个或多个取代基如以上在定义“取代的烷基”和“取代的环烷基”中所包括的取代基任选取代。
单独或作为另一基团的部分所使用的术语“芳基烷基”、“芳基链烯基”和“芳基炔基”是指具有芳基取代基的如上所述的烷基、链烯基和炔基。芳基烷基的代表性例子包括，但不限于，苄基、1-和2-苯基乙基、2-和3-苯基丙基、二苯甲基和萘基甲基等。“取代的芳基烷基”包括芳基烷基，其中芳基部分用一个或多个取代基如以上在定义“取代的烷基”和“取代的环烷基”中所包括的取代基任选取代。
本文中单独或作为另一基团的部分使用的术语“卤素”或“卤代”是指氯、溴、氟和碘。
本文中单独或作为另一基团的部分使用的术语“卤代烷基”、“卤代链烯基”和“卤代炔基”是指被一个或多个选自氟、氯、溴和碘的原子取代的“烷基”、“链烯基”和“炔基”。
除非另有所指，本文中单独或作为另一基团的部分使用的术语“芳基”或“Ar”是指在环部分中包含6至10个碳的单环和多环芳香基团(如苯基或萘基，包括1-萘基和2-萘基)和可任选地包括稠合至碳环或杂环(如芳基、环烷基、杂芳基或环杂烷基环)上的一个至三个额外的环。
“取代的芳基”包括芳基，其用一个或多个官能团任选取代，该官能团如卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、链烯基、三氟甲基、三氟甲氧基、炔基、环烷基、环烷基烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、芳氧基、芳氧基烷基、芳基烷氧基、烷氧基羰基、芳基羰基、芳基链烯基、氨基羰基芳基、芳基硫代、芳基亚硫酰基、芳基偶氮、杂芳基烷基、杂芳基链烯基、杂芳基杂芳基、杂芳氧基、羟基、硝基、氰基、氨基、其中氨基包括1或2个取代基(其是烷基、芳基或在定义中提及的任何其它芳基化合物)的取代的氨基、氨基甲酰基、烷基氨基甲酰基、酰胺化羧基、酰胺化羧基烷基、烷基酰胺化羧基烷基、硫醇、烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳基硫代烷基、烷氧基芳基硫代、烷基羰基、芳基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基烷基、芳基磺酰基氨基或芳基磺氨基羰基和/或本文提出的任何烷基取代基。
除非另有所指，本文所用的术语“杂环”或“杂环”表示未取代的或取代的稳定5-至10-元单环体系，其可为饱和或不饱和的，和其由碳原子和选自N、O或S的1至4个杂原子组成，和其中氮和硫杂原子可任选地被氧化，和氮杂原子可任选地被季铵化。杂环可在导致产生稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接。这种杂环基团的例子包括，但不限于，哌啶基、哌嗪基、氧哌嗪基、氧哌啶基、氧吡咯烷基、氮杂革基、氧氮杂革基、吡咯基、吡咯烷基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、吡唑烷基、咪唑基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、噁唑基、噁唑烷基、异噁唑基、异噁唑烷基、吗啉基、噻唑基、噻唑烷基、异噻唑基、噻二唑基、四氢吡喃基、硫吗啉基、硫吗啉基亚砜、硫吗啉基砜和噁二唑基。本文中单独或作为另一基团的部分使用的术语“芳香杂环”是指包括1、2、3或4个杂原子如氮、氧或硫的5-或7-元芳香环和稠合至芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环的这种环(如苯并噻吩基、吲哚基)，和包括可能的N-氧化物。“取代的杂芳基”包括杂芳基，其用1至4个取代基如以上在定义“取代的烷基”和“取代的环烷基”中包括的取代基任选取代。杂芳基的例子包括以下


等。
式II的化合物可作为盐存在，这也在本发明的范围内。可药用(即，非毒性、生理可接受)盐是优选的。如果式II的化合物具有例如至少一个碱性中心，它们可形成酸加成盐。这些例如使用强无机酸、强有机羧酸或有机磺酸形成，该强无极酸如矿物酸例如硫酸、磷酸或氢卤酸，该强有机羧酸如未取代的或取代(例如被卤素取代)的1至4个碳原子的烷烃羧酸例如乙酸、如饱和或不饱和二羧酸例如草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、邻苯二甲酸或对苯二甲酸、如羟基羧酸例如抗坏血酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸、如氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸或赖氨酸或精氨酸)、或苯甲酸，该有机磺酸如未取代的或取代(例如被卤素取代)的(C1-C4)烷基或芳基磺酸例如甲基或对甲苯-磺酸而形成。如果需要，也可形成具有额外存在的碱性中心的相应酸加成盐。具有至少一个酸基团(例如COOH)的构式II的化合物也可与碱形成盐。与碱的合适的盐是例如，金属盐如碱金属或碱土金属盐例如钠、钾或镁盐，或与氨或有机胺的盐，该有机胺如吗啉、硫吗啉、哌啶、吡咯烷、单、二或三低级烷基胺例如乙基、叔丁基、二乙基、二异丙基、三乙基、三丁基或二甲基-丙基胺、或单、二或三羟基低级烷基胺例如单、二或三乙醇胺。此外，可形成相应内盐。也包括不适用于药物用途但可例如用于分离或纯化式II的游离化合物或其可药用盐的盐。包含碱性基团的式II的化合物的优选盐包括单盐酸盐、硫酸氢盐、甲磺酸盐、磷酸盐或硝酸盐。包含酸基团的式II的化合物的优选盐包括钠、钾和镁盐和可药用有机胺。
用于本发明的术语“调节剂”是指具有增强(如“激动剂”活性)或抑制(如“拮抗剂”活性)生物活性或过程(如，酶活性或受体结合)的功能性的能力的化合物；这种增强或抑制可视特殊事件的发生如信号转导路径的活化而定，和/或可仅在特定细胞类型中显示。
本文所用的术语“前药(prodrug)酯”包括通过采用本领域技术人员已知的过程将式II的化合物的一个或多个羟基与烷基、烷氧基或芳基取代的酰化剂反应以产生乙酸酯、新戊酸酯、甲基碳酸酯、苯甲酸酯等而形成的亚胺、酯和碳酸酯。可体内转化以提供生物活性剂(即，式II的化合物)的任何化合物是在本发明范围和精神内的前药。各种形式的前药是本领域公知的。前药和前药衍生物的全面说明描述于(1)The Practice of Medicinal Chemistry，Camille G.Wermuth et al.，Ch 31，(Academic Press，1996)；(2)Design ofProdrugs，edited by H.Bundgaard，(Elsevier，1985)；(3)A Textbook of DrugDesign and Development，P.Krogsgaard-Larson and H.Bundgaard，eds.Ch 5，pgs 113-191(Harwood Academic Publishers，1991)。
合成 本发明的式II的化合物可如以下反应方案和其说明以及可由本领域技术人员使用的相关公开文献过程中所示的制备。用于这些反应的示例性试剂和过程在以下和在工作实施例中给出。
方案1
如方案1所示，式A4的化合物可由中间体A3与合适的亲电子试剂制备。式A3的中间体可通过将中间体A1与A2在合适的溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中反应而得到。中间体A1和A2可商购得到，可通过文献中已知的方法而制备，或可由本领域技术人员容易地制备。式A3的化合物可用酸处理以提供式A5的化合物。式A5的化合物可用劳森试剂(Lawesson′s reagent)处理以得到式A6的化合物。
方案2A51的合成
合成3-(三氟甲基)吡啶-N-氧化物，A8 向3-(三氟甲基)吡啶A7(1.47g，10mmol)和甲基三氧代铼(methyltrioxorhenium)(0.0025g，0.01mmol)在二氯甲烷(2ml)中的混合物加入30％过氧化氢(4ml)。将混合物在室温下搅拌5小时。加入少部分MnO2(3mg)并将介质再搅拌1小时，随后加入二氯甲烷(50ml)。将介质用盐水洗涤，在MgSO4上干燥和浓缩以得到化合物A8作为灰白色粉末(1.56g，9.6mmol，96％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.22-7.23(m，2H)，8.15(d，J＝3.6，1H)，8.23(s，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ 120.50(q，J＝3.5Hz)，121.58(q，J＝271.4Hz)，126.48，130.10(q，J＝34.5Hz)，136.52(q，J＝3.7Hz)，141.89。
合成2-氰基-3-(三氟甲基)吡啶，A9 向3-(三氟甲基)吡啶-N-氧化物A8(1.3g，8mmol)在乙腈中的溶液加入三甲基氰化硅(0.99g，10mmol)和三乙胺(2.02g，20mmol)。将混合物在室温下搅拌24小时，随后用饱和Na2CO3洗涤和用二氯甲烷提取。将有机层在MgSO4上干燥和浓缩以得到棕色残余物，其用色谱法分离(EtOAc:戊烷，1:2)。得到化合物A9作为淡黄色固体(0.715g，4.16mmol，52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.73(dd，J1＝8.0Hz，J2＝4.8Hz，1H)，8.15(d，J＝8.0Hz，1H)，8.91(d，J＝4.8Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ 114.18，121.74(q，J＝272.3Hz)，126.65，130.45(q，J＝33.8Hz)，131.25，134.66(q，J＝4.2Hz)，153.44。
合成2-氰基-3-(三氟甲基)-5-硝基吡啶，A10 向A9(0.688g，4mmol)和四甲基硝酸铵(1.09g，8mmol)在1，2-二氯乙烷中的混合物加入三氟乙酸酐(1.68g，8mmol)。将混合物密封和加热至60℃48小时。将混合物用饱和碳酸氢钠洗涤和用乙酸乙酯提取。将有机层在MgSO4上干燥和浓缩以得到黄色残余物，其用色谱法分离(EtOAc:戊烷，1:4)以得到化合物A10(0.095g，0.44mmol，11％)和剩余起始材料。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.91(d，J＝2.4Hz，1H)，9.69(d，J＝2.4Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ 112.70，120.65(q，J＝273.5Hz)，129.11，130.40(q，J＝4.4Hz)，131.58(q，J＝35.5Hz)，144.22，148.23。
合成2-氰基-3-(三氟甲基)-5-氨基吡啶，A11 将2-氰基-3-(三氟甲基)-5-硝基吡啶A10(0.095g，0.44mmol)和铁粉(0.112g，2mmol)在乙酸乙酯(1ml)和乙酸(1ml)中的混合物加热15小时。将固体颗粒滤过Celite并将滤液浓缩和用色谱法分离(EtOAc:戊烷，1:1)以得到化合物A11(0.075g，0.4mmol，91％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 6.36(bs，2H)，7.38(d，J＝2.4Hz，1H)，8.26(d，J＝2.4Hz，1H)。
或者，2-氰基-3-(三氟甲基)-5-硝基吡啶A10可与氢气在拉尼-Ni(Raney-Ni)上反应以得到2-氰基-3-(三氟甲基)-5氨基吡啶，A11。
合成5-异硫代氰酸基-3-三氟甲基吡啶-2-腈，A12 向2-氰基-3-(三氟甲基)-5-硝基吡啶A11(0.075g，0.4mmol)在水(2ml)中的非均匀混合物加入硫光气(50μl)。将混合物搅拌2小时，随后用水洗涤和用氯仿提取。将有机层在MgSO4上干燥和浓缩以得到化合物A12(0.087g，0.38mmol，95％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.85(d，J＝2.4Hz，1H)，8.72(d，J＝2.4Hz，1H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ 113.61，121.04(q，J＝273.1Hz)，127.41，130.38(q，J＝4.3Hz)，131.44(q，J＝34.4Hz)，133.55，144.75，150.30。
合成1-(4-甲基苯基)氨基环丁烷腈，B1 将三甲基氰硅烷(0.93ml，7mmol)滴加至对甲苯胺(0.535g，5mmol)和环丁酮(0.42g，6mmol)的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌6小时并随后在真空下浓缩以得到棕色液体，其经历色谱法(二氯甲烷)以得到B1(0.912g，4.9mmol，98％)作为带黄色的固体。
合成5-(8-氧代-6-硫代-5-(4-甲基苯基)-5，7-二氮杂螺[3.4]辛-7-基)-3-三氟甲基吡啶-2-腈，A51 将A12(0.057g，0.265mmol)和B1(0.05g，0.265mmol)在DMF(0.5ml)中的混合物在室温下搅拌24小时。向该混合物加入甲醇(2ml)和2N HCl水溶液(1ml)。将第二混合物回流2小时。在冷却至室温之后，将反应混合物倒入冷水(10mL)中和用乙酸乙酯(20mL)提取。将有机层在MgSO4上干燥、浓缩和用色谱法分离(二氯甲烷)，以得到化合物A51(0.066g，0.159mmol，60％)作为白色粉末。

1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.63-1.73(m，1H)，2.17-2.28(m，1H)，2.47(s，3H)，2.55-2.71(m，4H)，7.21(d，J＝8.4Hz，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，8.39(d，J＝2.0Hz，1H)，9.11(d，J＝2.0Hz，1H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ 13.70，21.38，31.46，67.61，113.88，121.36(q，J＝272.9Hz)，129.45，129.73，130.40(q，J＝34.3Hz)，130.86，132.14，132.53，134.04(q，J＝4.3Hz)，140.33，152.37，174.74，179.17。
N-甲基-4(1-氰基环丁基氨基)-2-氟苯甲酰胺，B2 将氰化钠(1.47g，30mmol)加入N-甲基4-氨基-2-氟苯甲酰胺(1.68g，10mmol)和环丁酮(1.4g，20mmol)在90％乙酸(20ml)中的混合物。将反应混合物在80℃下搅拌24小时。将混合物用水洗涤和用乙酸乙酯提取。将有机层在硫酸镁上干燥和在真空下浓缩至干燥。将固体用乙醚和己烷的50:50混合物(10ml)洗涤以除去环丁酮氰醇，以在过滤之后得到B2(2.19g，8.87mmol，89％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.87-1.95(m，1H)，2.16-2.27(m，1H)，2.35-2.41(m，2H)，2.76-2.83(m，2H)，2.97(d，J＝4.4Hz，3H)，4.68(bs，1H)，6.29(dd，J＝14.3，1.8Hz，1H)，6.48(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，6.75(q，J＝4.4Hz，1H)，7.90(dd，J＝8.3，8.3Hz，1H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ 15.7，26.7，33.9，49.4，100.2(d，J＝29.5Hz)，110.6，111.0(d，J＝11.8Hz)，133.1(d，J＝4.2Hz)，148.4(d，J＝12.0Hz)，162.0(d，J＝244.1Hz)，164.4(d，J＝3.6Hz)。
合成4-[7-(6-氰基-5-三氟甲基吡啶-3-基)-8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛-5-基]-2-氟-N-甲基苯甲酰胺，A52 将A12(0.03g，0.13mmol)和B2(0.032g，0.13mmol)在DMF(0.5ml)中的混合物在微波照射下在80℃下加热20小时。向该混合物加入甲醇(2ml)和2NHCl水溶液(1ml)。将第二混合物回流2小时。在冷却至室温之后，将反应混合物倒入冷水(10mL)中和用乙酸乙酯(15mL)提取。将有机层在MgSO4上干燥、浓缩和用色谱法分离(二氯甲烷:丙酮，95:5)，以得到A52(0.022g，0.046mmol，35％)作为白色粉末。

1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.66-1.76(m，1H)，2.19-2.31(m，1H)，2.51-2.60(m，2H)，2.67-2.75(m，2H)，3.07(d，J＝4.9Hz，3H)，6.75(q，J＝4.8Hz，1H)，7.17(dd，J＝11.4，1.9Hz，1H)，7.26(dd，J＝8.3，1.9Hz，1H)，8.31(dd，J＝8.3，8.3Hz，1H)，8.34(d，J＝2.1Hz，1H)，9.08(d，J＝2.1Hz，1H)；13C NMR(CDCl3，100MHz)δ 13.6，27.0，31.7，67.6，113.7，118.1，118.4，121.4(q，J＝272.9Hz)，126.5，130.0，130.5(q，J＝34.5Hz)，132.2，133.7，134.0，(q，J＝4.2Hz)，138.7(d，J＝10.7Hz)，152.2，160.5(d，J＝249.4Hz)，162.6，174.1，179.0；19FNMR(CDCl3，100MHz)δ-110.94，-62.57。
方案3合成A52 在其它实施方案中，本发明涉及如下所述合成A52的方法。在一些实施方案，实施例1-8可顺序地进行以合成A52。但是，如本领域技术人员所理解的，本发明不限于实施例1-8中的步骤，因为与以下那些等效的步骤也包括在本发明内。本领域技术人员将认识到可以采用类似的方法制备额外的化合物。
合成3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮，2
将2-氯-3-(三氟甲基)吡啶1(5.00g，27.54mmol)在冰乙酸(50ml)和水(5ml)的混合物中的溶液回流7天。将混合物用水(100ml)稀释，并加入6N NaOH水溶液直至pH达到约5至约6。将混合物用乙酸乙酯(3 x 40ml)提取，将合并的有机相在Na2SO4上干燥，随后将所有的溶剂在减压下除去。将所得残余物溶解在乙酸乙酯中，并加入己烷以使产物沉淀。在过滤之后，得到3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮2作为灰白色粉末(4.16g，25.51mmol，93％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 12.31(bs，1H)，7.91(d，J＝7.1Hz，1H)，7.69(d，J＝6.4Hz，1H)，6.30(t，J＝6.7Hz，1H).1 合成5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮，3
将3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮2(2.00g，12.26mmol)和硫酸(H2SO4，3.5ml，30％)的混合物被加热至90℃，并加入硝酸(HNO3，2.5ml，65％)。将混合物在90℃下搅拌8小时，并加入另外的硝酸(1ml，65％)。将混合物在90℃下再搅拌6小时并随后倒入包含冰(30ml)的烧杯中。将混合物用水(30ml)稀释，并加入6N NaOH水溶液直至pH约4至约5。将混合物用乙酸乙酯(3x 40ml)提取，将合并的有机相在Na2SO4上干燥并将所有的溶剂在减压下除去。将残余物溶解在乙酸乙酯中，和通过加入己烷而沉淀产物。在过滤之后，得到5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮3作为黄色粉末(1.58g，7.59mmol，62％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 13.47(bs，1H)，8.95(d，J＝2.7Hz，1H)，8.46(d，J＝2.5Hz，1H).2 合成2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶，4
将5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮3(1.50g，7.21mmol)，POCl3(2.76g，18.02mmol)和PCl5(1.4g，10.09mmol)的混合物加热至约110-120℃8小时并随后倒入冰水中。将混合物用固体NaHCO3中和，并用乙酸乙酯(3 x 40ml)提取。将合并的有机相在Na2SO4上干燥和所有的溶剂在减压下除去以得到2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶4。
合成6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺，5
将2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶4(1.57g，6.93mmol)溶解在四氢呋喃(THF)(10毫升)中，并加入拉尼-Ni(200mg)在THF(20ml)的悬浮液中。使用气囊将氢气慢慢鼓泡通过该搅拌的溶液24小时。将混合物滤过

(得自World Minerals，Inc.，Lompoc，California)和溶剂在减压下除去以得到6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺5。
合成N-6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，6
将粗6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺5(1.3g粗产品，6.61mmol)溶解在吡啶(10ml)中，和加入4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(50mg)。滴加二碳酸二叔丁酯(2.17g)并将混合物在22℃下搅拌4小时。加入甲苯(20ml)并将所有的溶剂在减压下除去。将残余物滤过硅胶塞(己烷/乙酸乙酯2:1)以得到N-6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-基氨基甲酸叔丁酯6。
合成5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈，8
将粗N-6-氯-5-(三氟甲基)吡啶-3-基氨基甲酸叔丁酯6(2.4g，6.61mmol)溶解在二甲基乙酰胺(DMA)(25ml)中，和加入菲咯啉(120mg，0.66mmol)。将混合物加热至80℃，和加入KCN(0.47g，7.27mmol)。在搅拌混合物10分钟之后，加入CuCN(118mg，0.13mmol)并将混合物在110℃下搅拌2小时。将冷却的混合物倒入磷酸盐缓冲剂(150ml，pH7)，加入乙酸乙酯(50ml)并将混合物滤过

。将层分离并将水相用乙酸乙酯(3 x 40ml)提取。将合并的有机相用饱和NaCl水溶液(4 x 30ml)洗涤，在Na2SO4上干燥和所有的溶剂在减压下除去以得到粗N-叔丁氧基羰基腈7。
粗N-叔丁氧基羰基腈7溶解在二氯甲烷(20ml)中，和加入三氟乙酸(TFA)(4ml)。将混合物搅拌3小时和蒸发。将残余物通过在硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯2:1)纯化以得到5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈8。
合成5-异硫代氰酸基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈，9
将5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈8(1.141g，6.1mmol)与氯仿(5ml)和水(40ml)混合以得到白色悬浮液。加入硫光气(0.701ml，9.15mmol)并将反应在22℃下搅拌2小时以得到清澈的二相体系。加入氯仿(20ml)和将相分离。将水层用氯仿(30ml)提取并将合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液和水洗涤，在MgSO4上干燥和溶剂在减压下除去。将粗5-异硫代氰酸基-3(三氟甲基)吡啶-2-腈9在真空下干燥和原样用于下一步骤，例如，用于描述于以下实施例8的步骤。
合成4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺11，A52
将粗5-异硫代氰酸基-3-(三氟甲基)甲基吡啶腈9(1.390g，6.07mmol)放入50mL圆底烧瓶中，并将4-(1-氰基环丁基氨基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺10(0.5g，2.022mmol)加入烧瓶。将混合物在真空(使用油泵)下放置1小时。加入N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(6ml)，将烧瓶在氩气下用塞子密封并在CEM微波反应器中加热至80℃20小时。加入甲醇(10ml)和2N HCl(6ml)并将混合物回流2小时。将混合物用水(30ml)稀释，和加入饱和NaHCO3水溶液(30ml)。将混合物用乙酸乙酯(3 x 20ml)提取。
将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(20ml)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤和在减压下浓缩。将粗产品通过在硅胶上的柱色谱(二氯甲烷/丙酮95:5)纯化以得到4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-8-氧代-6-硫代-5，7二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺11。
方案4合成A52 实施例1合成2-溴-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶，21
5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮3通过以上在方案3的实施例1和2中提供的路径得到。
将5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2(1H)-酮3、POBr3(1.5当量)、PBr3(4当量)和Br2(2当量)的混合物加热至约90-110℃并随后倒入冰水中。将混合物中和和提取。将合并的有机相在Na2SO4上干燥和所有的溶剂在减压下除去以得到2-溴-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶21，产率88％。
或者，POBr3被POCl3替代以得到溴与氯取代基的比率6:1或更好的产物。
合成5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈，22
将粗2-溴-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶21溶解在二甲基乙酰胺(DMA)中，和加入菲咯啉(0.2当量)。将混合物加热至160℃，和加入CuCN(2当量)。将混合物搅拌40分钟。进行色谱法以得到5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈22，产率67％。
合成5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈，8
将5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈22和铁粉在乙酸中的混合物加热。得到5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈8，产率91％。
合成4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺11，A52 将5-氨基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈8如以上方案3的实施例7所述的处理以得到5-异硫代氰酸基-3(三氟甲基)吡啶-2-腈9。
将5-异硫代氰酸基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈9与4-(1-氰基环丁基氨基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺10如以上方案3的实施例8所述的进行反应以得到4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺11(A52)。
方案5A52的替代合成 合成3-(三氟甲基)-5-异硫代氰酸基吡啶-2-腈(A)
将2-羟基-3-(三氟甲基)吡啶C在N-碘代琥珀酰亚胺(NIS)、乙腈和二甲基甲酰胺(DMF)的混合物中的溶液在80℃下加热2小时以生成2-羟基-3-三氟甲基-5-(碘代)吡啶I(大于80％产率)。将2-羟基-3-三氟甲基-5-(碘代)吡啶I随后与POCl3在DMF中混合和在微波中加热至130℃20分钟以生成2-氯-3-三氟甲基-5-(碘代)吡啶J(产率50至55％)。将2-氯-3-三氟甲基5-(碘代)吡啶K在pMBnNH2、乙酸钯(II)、2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-联萘(BINAP)、三乙胺和碳酸铯在甲苯中的溶液中反应以生成5-((4-甲氧基苯基))甲基氨基)-2-氯-3-(三氟甲基)吡啶K(产率40％)。将5-((4-甲氧基苯基))甲基氨基)-2-氯-3-(三氟甲基)吡啶K在氰化锌、三(二亚苄基丙酮合)二钯(Pd2(dba)3)和1，1′-二(二苯基膦基)二茂铁(dppf)在DMF中的溶液中反应以提供5-(4-甲氧基苄胺)-2-氰基-3-(三氟甲基)吡啶K(产率92％)。将5-(4-甲氧基苄胺)-2-氰基-3-(三氟甲基)吡啶K在二氯甲烷和三氟乙酸的溶液中反应以提供2-氰基-3-三氟甲基-5-(氨基)吡啶H(产率大于95％)。将2-氰基-3-三氟甲基-5-(氨基)吡啶H与硫光气在水中在25℃下反应2小时以提供5-异硫代氰酸基-3(三氟甲基)吡啶-2-腈A(产率74％至95％)。
合成4-(1-氰基环丁基氨基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺中间体B
将2，4-二氟-苯甲酰氯D在甲胺和四氢呋喃(THF)溶液中的溶液反应以得到2，4-二氟-N-甲基苯甲酰胺M(定量产率)。将2，4-二氟-N-甲基苯甲酰胺M与乙腈和4-甲氧基-苯甲胺的溶液中混合和在微波中在190℃下加热20分钟以生成2-氟-4-(4-甲氧基苄基氨基)-N-甲基苯甲酰胺S(产率40％)。将2-氟-4-(4-甲氧基苄基氨基)-N-甲基苯甲酰胺S在二氯甲烷和三氟乙酸的溶液中反应以生成2-氟-4-氨基-N-甲基苯甲酰胺T(产率大于95％)。将2-氟4-氨基-N-甲基苯甲酰胺T与氰化钠和环丁酮的溶液反应以生成4-(1-氰基环丁基氨基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺B。
A和B偶联以得到4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺，A52
将5-异硫代氰酸基-3-(三氟甲基)吡啶-2-腈，9，A与4-(1-氰基环丁基氨基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺B在DMF溶液中通过在微波中在80℃下加热20小时而反应。随后加入甲醇和氢氯酸并使反应进行2小时以生成4-(7-(6-氰基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-8-氧代-6-硫代-5，7-二氮杂螺[3.4]辛烷-5-基)-2-氟-N-甲基苯甲酰胺，A52(产率35至87％)。
活性 效用 本发明化合物调节核激素受体，尤其是雄激素受体的功能，和包括例如为雄激素受体(AR)的选择性激动剂或选择性拮抗剂的化合物。因此，本化合物可用于治疗与AR相关的病况。本文所用的“与AR相关的病况”表示可通过调节患者中的AR的功能或活性而治疗的病况或病症，其中治疗包括该病况或病症的预防、部分减轻或治愈。调节可局部地例如在患者的某些组织内发生，或更广泛地在为这种病况或病症治疗的患者全身发生。优选，具有有效的拮抗活性的化合物用于治疗与雄激素相关的前列腺癌。
组合 本发明在其范围内包括药物组合物，该药物组合物包含单独的作为活性成分的治疗有效量至少一种式II的化合物，或包含其与药物载体或稀释剂的组合。任选地，本发明化合物可单独使用、或与本发明其它化合物组合使用、或与一种或多种其它治疗剂如抗生素或其它药物活性材料组合使用。
药理学分析 本发明中的化合物通过在激素敏感的和激素难治的前列腺癌细胞上对拮抗活性和激动活性进行筛选而确定。具有拮抗活性的化合物是用于治疗前列腺癌(激素敏感的和激素难治的两者)的潜在药物。
式II的化合物的生物活性由前列腺特异性抗原(PSA)的分泌水平而测定。充分确定的是，PSA水平是前列腺癌中AR活性的指示物。为了检查该化合物在生理环境中是否影响AR功能，我们确定由R1881在激素敏感的(HS)和激素难治的(HR)癌细胞中引起的内源性PSA的分泌水平。HR细胞是改造成用于表达雄激素受体蛋白质(LNCaP/AR细胞)的升高水平的LNCaP细胞，该升高水平类似于在服用目前的抗雄激素如比卡鲁胺时复发的具有HR癌的患者中所观察到的水平，该目前的抗雄激素在AR高度表达时发挥激动剂性能。LNCaP细胞(或LNCaP/AR细胞)保持在包含10％ FBS的Iscove介质(Iscove’s medium)中。在药物治疗前五天，使细胞在包含10％ CS-FBS的Iscove介质中生长以去雄激素。使细胞在包含10％ CS-FBS以及合适浓度的R1881和试验化合物的Iscove介质中分裂和生长。在5天培养之后，使用PSA ELISA试剂盒(American Qualex，San Clemente，CA)分析分泌的PSA水平(参见

图1和图3)。还使用MTS分析以检查式II的化合物的生长抑制(参见图2)。
药代动力学数据 使用购自Charles River Laboratories的8周龄FVB小鼠体内评估A52的药代动力学。小鼠对于每一时间点分成三组(参见图4)。两只小鼠未用药物治疗，和另两只小鼠用载体溶液治疗。每组用10mg/千克体重进行治疗。药物溶解在DMSO:羧甲纤维素:T Tween 80:H2O的50:10:1:989混合物(载体溶液)中并口服给药。在给药之后，对动物在以下不同的时间点通过CO2吸入进行无痛致死1分钟、5分钟、15分钟、30分钟、2小时、4小时、8小时、16小时。在暴露于CO2后经由心脏穿刺(1ml BD注射器+27G5/8针)，对动物立即放血。
通过配有Alltima C18柱(3μ，150mm x 4.6mm)的HPLC(Waters 600泵，Waters 600控制器和Waters 2487检测器)分析血清样品以确定药物浓度。所有RD化合物在254nm波长处检测和比卡鲁胺在270nm波长处检测。
用于HPLC分析的样品根据以下程序制备 -通过离心从血清分离血液细胞。
-向400μl血清中加入80μl作为内标的RD75在乙腈中的10μM溶液和520μl乙腈。发生沉淀。
-将混合物涡旋3分钟并随后在超声下放置30分钟。
-将固体颗粒滤出或通过离心分离。
-将滤液在氩气流下干燥至干燥状态。在通过HPLC分析确定药物浓度之前将样品用乙腈重构成80μl。
-使用药物的标准曲线以改善精确度。
体内分析 所有动物实验依照洛杉矶的加利福尼亚大学的动物研究委员会(theAnimal Research Committee of the University of California at Los Angeles)的指导方针进行。动物来自Taconic和养在规定的菌群菌落的层流塔中。LNCaP-AR和LNCaP-载体细胞(vector cell))保持在补充有10％ FBS的RPMI介质中。在100μl 1:1的Matrigel:RPMI介质中的106细胞皮下注入未受损伤或去势的雄性SCID小鼠的胁腹中。每周使用测径器在三维上(长度x宽度x深度)测量肿瘤尺寸。当肿瘤尺寸达到约100mm3时，小鼠被随机选择至各治疗组。在剂量10mg/kg下每日口服给药。(参见图5和图6)在每日剂量10mg/kg下，发现化合物A51和A52完全延缓肿瘤生长。
还试验了其它剂量。在每日剂量1mg/kg下，发现化合物A51和A52具有轻度作用。在每日剂量25-50mg/kg下，发现化合物A51和A52诱发一些肿瘤细胞毒性。
将前列腺癌细胞用于异种移植。例如，制备LNCaP异种移植、LAPC4异种移植、LAPC9异种移植和这些细胞系的激素难治的对应物的异种移植。其它细胞系包括V-cap、CWR22和LAPC4细胞系。产生过度表达雄激素受体的两种细胞系，LNCaP AR和LAPC4AR。发现在这些改造细胞系中的前列腺癌发展不同于其亲本对应物。在雄激素消融(ablation)下，LNCaP AR和LAPC4 AR系继续生长，因此表现类似激素难治的细胞。
发现一些细胞系在异种移植时在小鼠中肿瘤形成中成活(take)不好。但采用LNCaP，2百万个细胞得到95％成活。可以使用少至1百万个细胞。这些细胞需要至少25％ Matrigel但不超过50％。因为对于良好的肿瘤成活率需要高浓度的细胞，发现27G针是最小的合适的针。
发现LAPC4细胞系非常难以在动物中生长。细胞需要被再悬浮和滤过微米网孔过滤器，例如，40-100微米网孔过滤器，因为它们常常形成大的聚集体。再悬浮和通过过滤器有助于使各动物之间的细胞数标准化和因此得到更一致的结果。LAPC4需要约25％-50％ Matrigel，例如，50％ Matrigel，但可成功地在105个细胞的较低浓度下移植。
发现SCID小鼠的肿瘤成活优于裸小鼠。例如，发现在裸小鼠中对于个体动物的肿瘤成活非常不一致。CB 17 SCID小鼠用于该研究。
在鼠的右胁腹进行皮下注射。发现缓慢注射有助于产生圆肿瘤，其较容易测量和可更精确地测量。另外，由于Matrigel的使用，发现注射不超过200μl的注射是合适的。发现注射100-200μl是合适的。注射太大的体积在针收回时产生漏出。
有助于防止在拔针时漏出的替代方法可为将Matrigel介质细胞填充的注射器加温几秒以产生凝胶状形式。当注射凝胶状液体时，不应发生泄漏。但将Matrigel加热太长时间可导致悬浮液凝固和变得不可注射。
药物组合物和给药 本发明化合物可用作使用治疗有效量的本文所限定的本发明化合物和可药用载体或稀释剂制备的药物组合物。
本发明化合物被配制成药物组合物和以适于所选择的给药途径的各种形式向需要治疗的患者例如哺乳动物如人患者给药，例如口服给药、鼻内给药、腹膜内给药、或非消化道给药、通过静脉内、肌内、局部或皮下路径给药、或通过注射入组织给药。这种组合物和制剂应该包含至少0.01％的一种或多种本发明化合物。组合物和制剂的百分数当然可以变化和可以例如是给定单元剂型的约0.05％至约2％重量。化合物在这种治疗有用的组合物中的量使得获得有效的剂量水平。
因此，本发明化合物可全身给药，如口服、与可药用载体如惰性稀释剂或可同化的食用载体组合、或通过吸入或吹入。它们可被包封在硬或软壳胶囊中、可被压成片剂、或可与病人饮食的食品直接混合。对于口服治疗给药，化合物可与一种或多种赋形剂组合和以可摄取的片剂、口含片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、干胶片(wafer))等的形式使用。化合物可与细的惰性粉状载体组合和由患者吸入或吹入。这种组合物和制剂应该包含至少0.1％的一种或多种本发明化合物。组合物和制剂的百分数当然可以变化和可适宜地在给定单元剂型的约2％至约60％重量之间。化合物在这种治疗有用的组合物中的量使得获得有效的剂量水平。
片剂、锭剂、丸剂、胶囊等也可包含以下粘合剂如西黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂如磷酸二钙；崩解剂如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸等；润滑剂如硬脂酸镁；和甜味剂如蔗糖、果糖、乳糖或阿司帕坦，或可加入芳香剂如薄荷、冬青油或樱桃调味剂。当单元剂型是胶囊时，除了以上类型的材料，它还可包含液体载体如植物油或聚乙二醇。各种其它材料可存在作为涂层或以其它方式改变固体单元剂型的外形(physicalform)。例如，片剂、丸剂或胶囊可涂有明胶、蜡、虫胶、糖等。糖浆或酏剂可包含活性化合物、作为甜味剂的蔗糖或果糖、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、染料、和调味剂如樱桃或橙子调味剂。当然，用于制备任何单元剂型的任何材料在用量上应该是可药用的和实质上无毒的。另外，本发明化合物可引入持续释放制剂和设备。例如，化合物可引入延时释放(time release)胶囊、延时释放片剂和延时释放丸剂。
本发明化合物也可通过输注或注射而静脉内或腹膜内给药。化合物的溶液可在水中制备，任选地与非毒性表面活性剂混合。分散体也可在甘油、液体聚乙二醇、三醋汀、和其混合物中和在油中制备。在普通的储存和使用条件下，这些制剂可包含防腐剂以防止微生物生长。
适用于注射或输注的药物剂型可包括无菌水溶液或分散体或无菌粉末，其包含任选地包封在脂质体中的适用于即时制备无菌的可注射或可输注的溶液或分散体的本发明化合物。在所有情况下，最终剂型在制造和储存条件下应该是无菌的、流动的和稳定的。液体载体可以是溶剂或液体介质，包括例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)、植物油、非毒性甘油酯、和其合适的混合物。合适的流动性可例如通过形成脂质体、在分散体情况下通过保持所需颗粒尺寸或通过使用表面活性剂而保持。可通过各种抗细菌和抗真菌剂例如对羟苯甲酸酯类、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等产生预防微生物的作用。在许多情况下，优选包括等渗剂例如糖、缓冲剂或氯化钠。可注射组合物的延长吸收可通过在组合物中使用延迟吸收剂例如单硬脂酸铝和明胶而产生。
无菌可注射溶液可通过将所需量的本发明化合物与以上列举的各种其它成分(根据需要)一起引入合适溶剂中，随后过滤杀菌而制备。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，其产生活性成分加上存在于之前无菌过滤溶液中的任何其它的所需成分的粉末。
对于局部给药，本发明化合物可以纯的形式使用。但是，通常期望将它们作为组合物或制剂与可以是固体或液体的皮肤学上可接受载体一起向皮肤给药。
有用的固体载体包括细分散的固体如滑石、粘土、微晶纤维素、硅石、矾土等。其它固体载体包括非毒性聚合物纳米颗粒或微颗粒。有用的液体载体包括水、醇或二醇或水/醇/二醇共混物，其中本发明化合物可在有效的水平下任选地借助于非毒性表面活性剂而溶解或分散。可加入助剂如香料和另外的抗微生物剂以针对给定用途而优化性能。所得液体组合物可由吸收剂垫施用、用于浸渍绷带和其它敷料、或使用泵-型或气溶胶喷雾器喷雾到受影响的区域上。
增稠剂如合成聚合物、脂肪酸、脂肪酸盐和酯、脂肪醇、改性的纤维素或改性的矿物材料也可与液体载体一起使用以形成可铺展的糊、凝胶、软膏、皂等，用于直接施用到使用者的皮肤上。
可用于将本发明化合物传输至皮肤上的有用的皮肤组合物的例子是本领域已知的；例如，参见Jacquet等人(美国专利No.4,608,392)、Geria(美国专利No.4,992,478)、Smith等人(美国专利No.4,559,157)和Wortzman(美国专利No.4,820,508)，其全部在此作为参考并入本发明。
式II的化合物的有用剂量可通过比较其体外活性和通过在动物模型中比较其体内活性而确定。用于将在小鼠和其它动物中的有效剂量外推至人体的方法是本领域已知的；例如，参见美国专利No.4,938,949，其在此作为参考并入本发明。
例如，化合物在液体组合物如洗剂中的浓度可以是约0.1至约25％重量，或约0.5至约10％重量。在半固体或固体组合物如凝胶或粉末中的浓度可以是约0.1至约5％重量，或约0.5至约2.5％重量。
本发明化合物用于治疗所需的量不仅随着所选的特定盐变化，而且随着给药路径、正在治疗的病况的性质以及病人的年龄和病况而变化，且最终由主治医师(attendant physician)或临床医师决定。
本发明试剂给药的有效剂量和路径是常规的。试剂的精确量(有效剂量)因患者不同而变化，取决于例如患者的种类、年龄、重量和一般或临床状态、正在治疗的任何病症的严重性或机理、所用的特定试剂或载体、给药的方法和进度等。治疗有效剂量可通过本领域技术人员已知的常规程序经验地确定。参见如The Pharmacological Basis of Therapeutics，Goodman andGilman，eds.，Macmillan Publishing Co.，New York。例如，有效剂量可起始在细胞培养物分析中或在合适的动物模型中估计。动物模型也可用于确定给药的合适浓度范围和路径。这种信息可随后用于确定用于人体给药的有用剂量和路径。治疗剂量也可对类似的治疗剂的剂量用类推的方法选择。
特殊给药模式和给药方案由主治临床医师考虑到情况的详情(如患者、疾病、所涉及的疾病状态和该治疗是否是预防性的)而选择。治疗可涉及在几天至数月或甚至数年内化合物的日剂量或多-日剂量(multi-daily dose)。
但一般来说，合适的剂量可以是约0.01至约500mg/kg/天，如约0.1至约500mg/kg体重/天，如约0.1至约100mg/千克受者体重/天。例如，合适的剂量可以是约1mg/kg、10mg/kg或50mg/kg体重/天。
本发明化合物便利地以单元剂型给药；例如，每单元剂型包含约0.0005至约500mg、约0.01至约50mg、约0.05至约10mg、或约5mg活性成分。
本发明化合物可给药以实现例如约0.5至约75μM、约1至50μM、约2至约30μM、或约5至约25μM的血浆浓度峰值。示例性的期望血浆浓度包括至少或不超过(at least or no more than，大约)0.25、0.5、1、5、10、25、50、75、100或200μM。这可例如通过以下实现静脉注射本发明化合物的0.05-5％溶液(任选地在盐水中)，或以包含约1-1000mg该化合物的大丸剂口服给药。期望的血液水平可通过连续输注以提供约0.0005至约25mg/kg体重/小时，例如至少或不超过0.0005、0.005、0.05、0.5、5或25mg/kg/小时而保持。或者，这种水平可通过包含约0.002至约100mg/kg体重，例如至少或不超过0.002、0.02、0.2、2、20、50或100mg化合物/kg体重的间歇输注而得到。
本发明化合物可便利地以单剂量供给或作为在合适的间隔给药的分剂量例如作为2、3、4或更多子剂量(sub-dose)/天供给。子剂量自身可进一步例如分成许多离散的松散分开的给药；如从吹入器多次吸入。
实施例静脉内制剂 目前公开的化合物例如化合物A51或A52可在适用于静脉内剂量给药的制剂中。在实施方案中，化合物溶解在约10％至约25％二甲亚砜(DMSO)中。1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)随后作为余量混合入该溶液，并将该溶液用水浴声波器进行声处理直至其变为均质。
在1.5mg/mL的化合物浓度下，5分钟声处理可足以溶解该化合物。在2mg/ml的化合物浓度下，可需要超过5分钟的声处理以溶解该化合物和可加入聚乙二醇以使化合物保持悬浮。例如，可以加入5至40％ PEG-400(聚乙二醇)如5-10％ PEG-400。
发现包括A51或A52的以上溶液在室温下稳定至少1周。
在给药之前，以上溶液应该声处理几分钟。发现用于小鼠的最大合适的给药体积是0.2mL。
当向小鼠给药时，观察到注射部位周围的皮肤硬化和皮肤刺激，且这归因于DMSO的使用。尽管化合物A51和A52可溶于乙醇，但发现乙醇降低化合物的体内稳定性。
在以上溶液给药之后2周内，观察到小鼠损失15％体重。
实施例口服制剂 目前公开的化合物例如化合物A51或A52可在适用于口服给药的制剂中。在实施方案中，化合物溶解在100％ DMSO中。
可以加入另外的化学品如羧甲纤维素、聚山梨酯或水。例如，溶液的除A51或A52之外的组分可以约10％至约20％ DMSO、约1％至约2％羧甲纤维素(CMC)和0.1％ Tween.80(聚山梨酯)的浓度存在，余量是水。化合物A51或A52在口服基础(foundation)中的浓度可以是约1.5mg/mL。将该溶液机械均质化至少30秒。发现化合物A51或A52保持悬浮仅几小时，因此口服制剂必须在制备的几小时内给药。
当超过2％羧甲纤维素(CMC)被包括在溶液中时，发现该制剂非常粘稠，使得当用管饲法注射器向试验动物给药时，大量制剂留在注射器壁上，阻止了精确的给药。发现包括CMC和Tween 80的10％ DMSO的溶液在施加机械均质化时保持化合物悬浮。即，不需要超过10％ DMSO。应该使用最少的DMSO，因为发现它刺激小鼠，其与小鼠在给药之后2周内体重损失最高10％有关。
发现用于小鼠的最大合适的给药体积是0.2mL。
发现该化合物的半寿期在静脉内给药时长于口服给药时。但是，每日口服剂量给药产生该化合物可接受稳定态血清浓度，可与比卡鲁胺所观察到的稳定态浓度比较。口服给药可比静脉内给药更方便。
化合物A51和A52在按照所述给药的体内分析中对肿瘤具有有益作用。
在该说明书中说明和讨论的实施方案仅意味着向本领域技术人员教导发明人所知晓的制备和使用本发明的最佳方法。该说明书的内容不应被看作对本发明范围的限定。所给出的所有实施例是代表性和非限定性的。本发明的上述实施方案可改进或变化，而不背离本发明，如本领域技术人员根据以上教导所理解的。因此应理解在权利要求和其等同物的范围内，本发明可以具体描述之外的方式实现。
权利要求
1.根据式II的化合物
式II
其中Het包括5或6个原子的杂环单元，
其中A和B独立地选自氧、硫和N-R9，
其中R9选自氢、芳基、取代的芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基、SO2R11、NR11R12、NR12(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12或NR12(CS)OR11，
其中R11和R12独立地选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基或取代的链烯基、炔基或取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、或取代的芳香杂环或非芳香杂环，
其中R11和R12可连接以形成环，所述环可以是芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环、环烷基、或取代的环烷基，
其中R1选自氢、芳基、取代的芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、取代的环烷基、SO2R11、NR11R12、NR12(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11，
其中R2和R3独立地选自氢、芳基、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基或取代的环烷基，或R2和R3与它们所连接的碳一起形成环，所述环可以是环烷基、取代的环烷基、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环；
其中R1和R2可连接以形成环，所述环可以是芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环。
2.权利要求1的化合物，其中R1选自烷基、取代的烷基、链烯基和取代的链烯基。
3.权利要求1的化合物，其中R1选自芳基和取代的芳基。
4.权利要求3的化合物，其中R1是被至少一个氟原子取代的芳基。
5.权利要求1的化合物，其中R1是5-至8-元芳香杂环或非芳香杂环。
6.权利要求1的化合物，
其中R2和R3独立地选自甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、氟甲基、氯甲基和溴甲基。
7.权利要求1的化合物，
其中A和B独立地选自氧和硫。
8.权利要求1的化合物，
其中Het包括6个原子的杂环单元，
其中该杂环单元包含1或2个独立地选自氮、氧或硫的杂原子，
其中Het在杂环单元上包含0或1个选自氧和硫的双键取代基；
其中Het在杂环单元上包含3至4个选自以下的单键取代基氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、CN、NO2、OR11、SR11、NR11R12、NH(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11，
其中单键取代基可连接至另一单键取代基以形成环，所述环是芳香环、取代的芳香环、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基、或取代的环烷基。
9.权利要求8的化合物，
其中Het选自以下化合物的6-元环
其中R4、R5、R6和R7独立地选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、CN、NO2、OR11、SR11、NR11R12、NH(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11，
其中R4、R5、R6和R7中的任一个可连接至R4、R5、R6和R7中的任一个上以形成环，所述环可以是芳香环、取代的芳香环、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基或取代的环烷基。
10.权利要求9的化合物，
其中R4选自CN和NO2，
其中R5选自三氟甲基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基和卤素，和
其中R6和R7独立地选自氢、烷基、和或卤素。
11.权利要求10的化合物，
其中R5选自三氟甲基和碘，和
其中R6和R7独立地选自氢和卤素。
12.权利要求9的化合物，
其中Het选自
13.权利要求12的化合物，具有式
14.权利要求1的化合物，
其中Het包括5个原子的杂环单元，
其中该杂环单元包含1或2个独立地选自硫、氧、氮和NR8的杂原子，
其中R8选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、(CO)R11、(CO)OR11、(CS)R11、(CS)OR11，
其中Het在杂环单元上包含2至3个选自以下的单键取代基氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、CN、NO2、OR11、SR11、NR11R12、NH(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11，
其中单键取代基可连接至另一单键取代基以形成环，所述环是芳香环、取代的芳香环、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基或取代的环烷基。
15.权利要求14的化合物，
其中Het选自以下化合物的5-元环
其中R4、R5和R6独立地选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、CN、NO2、OR11、SR11、NR11R12、NH(CO)OR11、NH(CO)NR11R12、NR12(CO)R11、O(CO)R11、O(CO)OR11、O(CS)R11、NR12(CS)R11、NH(CS)NR11R12、NR12(CS)OR11，
其中R4、R5和R6中的任一个可连接至R4、R5和R6中的任一个以形成环，所述环可以是芳香环、取代的芳香环、芳香杂环或非芳香杂环、取代的芳香杂环或非芳香杂环、环烷基或取代的环烷基，
其中X选自硫、氧和NR8，和
其中R8选自氢、烷基、取代的烷基、链烯基、取代的链烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、芳基链烯基、芳基炔基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基、卤素、(CO)R11、(CO)OR11、(CS)R11和(CS)OR11。
16.权利要求15的化合物，
其中R4选自CN和NO2，
其中R5选自三氟甲基、卤代烷基、卤代链烯基、卤代炔基和卤素，和
其中R6选自氢、烷基和卤素。
17.药物组合物，包含治疗有效量权利要求1的化合物或其可药用盐，以及和可药用载体、稀释剂或助剂。
18.一种治疗与核受体活性相关的疾病或病症的方法，包括给药根据权利要求17的药物组合物。
19.一种治疗过度增生病症的方法，包括向有此需要的患者给药权利要求1的化合物或其可药用盐，从而治疗过度增生病症。
20.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物或其可药用盐以约0.01mg/kg体重/天至约500mg/kg体重/天的剂量给药。
21.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物或其可药用盐以剂量约0.1mg/kg体重/天至约200mg/kg体重/天的剂量给药。
22.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物或其可药用盐以约1mg/kg体重/天至约50mg/kg体重/天的剂量给药。
23.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物或其可药用盐以约10mg/kg体重/天的剂量给药。
24.权利要求19的方法，其中该过度增生病症是激素敏感的前列腺癌或激素难治的前列腺癌。
25.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物通过静脉注射给药、通过注射到组织给药、腹膜内给药、口服给药、或鼻内给药。
26.权利要求19的方法，其中权利要求1的化合物具有选自溶液、分散体、悬浮液、粉末、胶囊、片剂、丸剂、延时释放胶囊、延时释放片剂和延时释放丸剂的形式。
27.任何一项前述权利要求的化合物或方法，其中所述化合物是核受体的拮抗剂。
28.任何一项前述权利要求的化合物或方法，其中所述化合物是雄激素受体的拮抗剂。
29.权利要求17的药物组合物，其中所述化合物是A51。
30.权利要求17的药物组合物，其中所述化合物是A52。
31.权利要求17的药物组合物，包含二甲亚砜和磷酸盐缓冲盐水溶液的溶液。
32.权利要求17的药物组合物，包含聚乙二醇。
33.权利要求17的药物组合物，其中所述化合物浓度是约0.15mg/mL至约15mg/mL和其中二甲基亚砜是约10％至约25％的溶液。
34.权利要求17的药物组合物，其中所述化合物浓度是约1.5mg/mL。
35.权利要求17的药物组合物，包含二甲亚砜、羧甲纤维素、聚山梨酯和水的溶液。
36.权利要求35的药物组合物，其中二甲亚砜是溶液的约10％至20％，其中羧甲纤维素是溶液的约1％至约2％，和其中聚山梨酯是溶液的约0.05％至约0.2％。
37.一种治疗过度增生病症的方法，包括向有此需要的患者给药化合物A51或A52或其可药用盐，从而治疗过度增生病症。
全文摘要
用于预防或治疗过度增生疾病或病症的乙内酰脲化合物。
文档编号A61K31/4166GK101454002SQ200780019654
公开日2009年6月10日 申请日期2007年3月27日 优先权日2006年3月27日
发明者迈克尔·E·琼, 查尔斯·L·索耶斯, 塞梅蒂·乌克, 克里斯·特兰, 约翰·旺维帕特 申请人:加利福尼亚大学董事会