抗病毒的胶体银组合物的制作方法

专利名称：：抗病毒的胶体银组合物的制作方法
技术领域：
：本发明总体上涉及胶体银，更具体地讲，涉及胶体银的组合物以及使用所述组合物作为抗对人健康有害的生物体-尤其是禽流感病毒(“鸟流感”)的试剂的方法。
背景技术：
：众所周知，某些银制品具有杀菌特性。在现代抗生素被开发之前，银被用作杀菌剂和抗生素。在前几个世纪，使用者将切碎的银颗粒放入他们的饮用水中、或者将整个银片淹没在饮用水中，以便通过饮水来摄取银。用银器具(即，银器)吃饭的习惯可能是源于人们相信银有益于健康的特性。给药悬浮于溶液中的银将会增强个体的健康可能有许多原因。一种可能是，这样一种溶液发挥了抑制细菌、病毒及其他不希望有的生物体生长、以及消灭这些存在的细菌、病毒及其他生物体的作用。另一种可能是，银溶液可能具有消炎效果，足以减小哮喘症状。本发明描述了在水中银组合物治疗特定的人类疾病的应用。在本发明的实施方式中，银组合物包含小颗粒银，该小颗粒银包含金属银内部和离子银外部，其中银颗粒被悬浮于水中。本发明优选的实施方式是一种包含银颗粒的银组合物，其中超过50%的银颗粒的尺寸小于0.015微米，并且银颗粒呈胶体状悬浮于水中。
发明内容本发明的总体目的在于提供一种在水中的含量水平为5至40ppm的银的应用，用于杀灭或灭活对人类有害的微生物比如禽流感病毒。本发明的目的尤其在于提供一种包含银颗粒和水的组合物，所述银颗粒内部为银单质、表面为氧化银，其中银颗粒以5-40ppm的总的银含量水平胶态悬浮于水中。本发明的实施方式包括以5-40ppm的浓度在水中的银颗粒，其中，超过50%的银颗粒具有小于0.015微米的最大尺寸。本发明的水中银组合物是一种有效的抗微生物剂。本发明的目的在于提供一种在水中银含量为5-40ppm的银组合物，其为有效的抗微生物剂。本发明的目的还在于提供一种使用所述银组合物作为抗微生物剂的方法。本发明的优选实施方式是一种水中银组合物，其通过使用改进的美国专利No.6，214，299所述的设备和方法而制备得到。该专利是本即时申请的母案，以可允许的程度将其引入本发明作为参考。专利No.6，214，299中的设备和工艺已经被改进和提高，用以提供本发明的银组合物。主要是，在专利中公开的八个银电极/一个普通电极的装置已经被改进，其大小适于75加仑的水箱。为了开始该工艺，大约70加仑的高纯度水被加入到水箱中。向该水箱中加入约五加仑的用已知生产方法预先制得的银组合物。这是必需的，因为高纯度水不能充分导电而使工艺适当地进行。该水箱安装有进气装置，允许在工艺期间气泡流流动穿过液体。已经发现，与专利中所述的叶轮混合机相比，本方法导致混合得到改进。如专利所述，电极装置在大约一万伏的交流电压下进行操作(各个银电极具有单个的电压馈送)。研究发现，明显低于10，000V的电压会生产出具有较大颗粒的组合物，其不具有在此描述的最优特性。显著高于10，000V的电压倾向于生产出其内溶有大量离子银的溶液。现有的组合物包含超过97%的金属银，并且在溶液中基本上没有游离的离子银。根据如下所述方法确定银浓度。主要是，连续地操作装置并且分析样本，直到获得期望的银浓度。IOppm的组合物大约需要一天半的操作。22ppm的溶液大约需要3天，而32ppm的组合物大约需要6天。当寻求更高的浓度时，该工艺的速度显得缓慢。更高的浓度要耗费极长的时间，而至少在当前的参数范围内，最终最高的浓度是约50ppm。组合物全部都具有如下所述的尺寸特性，并且不同于普通的银组合物，在没有使用任何添加剂的情况下它们是完全无色的并且对光和温度变化是稳定的。该组合物不会与加入的过氧化氢起反应。具体实施例方式提供下述内容，使本领域的技术人员能够制备并使用本发明；并且提供本发明人认为实施其发明的最佳实施方式。然而，可进行各种改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的，因为在此已经特别地限定本发明的一般原理，用于提供改进的具有显著的在体内和体外杀灭或者抑制人类病原体能力的胶体银产品。总之，本发明公开了一种新颖的方法，通过利用银浓度为5至40ppm的在水中的银颗粒来杀灭或者灭活对人类有害的微生物。取决于应用，该银组合物可以在体内或者外表上使用。优选的实施方式非限制性的优选实施方式陈述如下一种包含呈胶体状悬浮于水中的银颗粒的组合物，其中银的总含量在5和40ppm之间，该组合物可杀灭或者灭活对人体有害的病毒。一种包含呈胶体状悬浮于水中的银颗粒的组合物，其中银的总含量是约10士2ppm，该组合物可杀灭或者灭活对人体有害的病毒。一种包含呈胶体状悬浮于水中的银颗粒的组合物，其中银的总含量是约22士2ppm，该组合物可杀灭或灭活对人体有害的病毒。一种包含呈胶体状悬浮于水中的银颗粒的组合物，其中银的总含量是约32士3ppm，该组合物可杀灭或灭活对人体有害的病毒。可预期地，指定银颗粒组合物中的银总含量不会完全地限定材料。包含于组合物中的颗粒被制备得越小，则给定浓度的银将代表越大的颗粒数。另外，对于给定的银浓度的总表面积将增大。因此，颗粒大小和颗粒大小范围是用于限定有效的发明组合物的重要参数。另一类实施方式是任何上述组合物，其中，超过50%的银颗粒具有小于0.015微米的最大尺寸。另一类实施方式是任何上述组合物，其中银颗粒既包含零价银即金属态、氧化态的银[Ag(0)]、以及选自下组的呈离子氧化态的银涂层:Ag(I)、Ag(II)以及Ag(III)。另一类实施方式是任何上述组合物，其中银颗粒既包含零价银即金属态、氧化态的银[Ag(0)]、以及选自下组的呈离子氧化态的银涂层:Ag(I)、Ag(II)以及Ag(III)。实验证据显示，在本发明颗粒中的AgO至少部分地呈Ag404形式，即，银二价氧化物。在这种材料的分子中，两个银原子为1+价态(银I)，同时另两个银分子为3+价态(银III)。在特定的条件下，这些分子可能使银原子呈2+(银II)价态。实施例1.组合物的形成根据美国专利No.6，214，299中阐述的工序，可以制备出水中银组合物，在此将其内容并入本文作为参考。用于生产根据本发明的包含银的组合物的优选方法使用包含电极的电化学电池，并且包括下述步骤(a)设置银电极与大量高纯度水接触；(b)通过银电极传送电流，从而以足以导致在水中产生悬浮的银颗粒的方式将银颗粒从所述银电极中分离；以及(c)在所述悬浮的银颗粒的产生期间搅拌水，从而将银颗粒以更为均一的浓度分散在所述水内，以使得每批均可以生产出更大量的悬浮的银颗粒。另一个优选的用于生产包含银的组合物的方法使用电化学电池，并且包括下述步骤(a)建立电路，该电路包含电源、以及电连接至所述电源的第一导体和电连接至所述电源的第二导体，其中所述第一导体被设置得与所述第二导体间隔开来，并且其中至少一个导体由元素银制成；(b)通过设置第一导体和第二导体与液体电阻相连接来闭合电路；(c)开启电源以便将交流电同时供给第一导体和第二导体，使得在第一导体和第二导体内的电压交替地提高和降低，从而引起银颗粒从第一电极上分离并且进入液体电阻从而悬浮在所述液体电阻内部；以及(d)通过将电极朝向液体电阻移动来选择性地调节电极，用于补偿由于银颗粒从电极中逐渐分离而造成的电极长度降低，从而抑制在电极和所述液体电阻之间产生电弧。本发明的银组合物中的银含量的分析可以通过原子吸收(AA)、感应耦合等离子体/原子发射(ICP/AES)、或者本领域的普通技术人员所熟知的对适当浓度范围内的银灵敏的其他技术进行。如果银组合物的颗粒较小并且大小均勻(例如，0.01微米以下)，则通过AA或ICP/AES直接地检测胶体，可以取得相当精确的测定。这是因为用于AA的样品制品可以基本上离子化所有的银，使其易于检测。如果组合物包含的颗粒大至0.2微米，则优选使用溶解工艺。该溶解工艺对于在制造或储存阶段与卤化物或其他阴离子种类接触的银组合物不一定是理想的，所述卤化物或其他阴离子种类可以与精细分散的银反应，或者与蛋白质或其他凝胶状材料相结合。溶解工艺的实施方式如下所述1取IOmL等分的经彻底混合或摇动的待分析的银组合物，并且将其放置在具有密封安装盖子的清洁的聚碳酸酯瓶子或者其他合适材料的容器中(一般是瓶子)。优选30-IOOmL的大小。2用微吸管或滴管将0.ImL的试剂级硝酸加入瓶子内的银组合物中。3用瓶子的盖子紧紧盖好，加热银组合物至80°C，同时轻微搅动一段时间以充分溶解银一溶解基本上是即时的。4将得到的混合物在盖着盖子的条件下冷却至室温。充分摇动瓶子。5使用AA、ICP/AES、或者相当的手段来分析银混合物中的银含量。优选用户使用新近制备的标准或标准系列，优选根据设备制造商的说明书，视需要用适当的稀释液进行制备。6当报告结果时，用户必须考虑在制备期间的所有稀释，包括因添加硝酸导致的稀释度。1.银的物理/化学形态的分析A.简介为确定组合物中银的存在形式，通过飞行时间-二次离子质谱(TOF-SIMS)分析了在水中名义上含有22ppm银的组合物样本。结论是，大部分银作为银(0价)[即，金属银]存在，并且存在平均为银(II价)氧化物[AgO]的组合物的表面涂层。如上所述，银(II价)氧化物通常是银(I)和银(III)的化学计量组合。B.实验步骤室温下，将几滴本发明的22ppm的银组合物在硅基片上蒸干。通过TOF-SIMS分析了残余物，并且将其作为样本。通过将一些来源于供应商的参照粉末颗粒放置在硅基片上，来分析参比银(II)氧化物(AgO)材料，并且将其作为参比材料。飞行时间-二次离子质谱技术(TOF-SIMS)基于下述原理用脉冲的精细聚焦的初级离子光束轰击固体试样，然后用飞行时间质谱仪分析样本表面中产生的二次离子。该分析技术是表面敏感的，其信息来源于延伸至表面下方约20至40A(1埃=1X10_4微米)的层。TOF-SIMS技术通常被用作测量工具来识别未知样品的组成。如果可用适当的微量分析标准进行校准，那么该技术能够进行量化。通过使用标准的高质量_分辩率条件，进行该分析。C.结果分别得到了Ag(II)O参比材料和制品试样的阴离子质量。两个光谱的质谱区域显示了AgO种类的存在。数据表明，银(II)是存在于样本颗粒表面上的银的平均氧化态。参比样品中的氧化银(AgO)信号显示出比制品试样明显更高的强度，这可能是因为金属银在试样中是主要部分之故。可预期地，随试样中平均粒度减小，银对氧化银的比率因将有更多的氧化银存在也将减小。2.尺寸分析在此描述的银制品的不寻常的效果很可能起因于颗粒的表面特性/内部特性(即，氧化物/金属)和颗粒的尺寸分布之间的关系。平均粒度越小，表面面积越大，特定的表面化学的贡献就越大。然而，如果颗粒过小，则可能有稳定性和/或其他相互作用的损失，从而会消极地影响产品。本发明的银组合物是值得注意的，因为它们在无表面活性剂等的实质上为纯水的水中是稳定的。而且，该材料基本上是无色的，而其他的胶体银制品(特别是具有较大粒度的制品)则通常显示出某种颜色。这些特性是上述讨论的精确制造条件的结果。组合物的数据分析显示，其平均粒径为0.0106微米，粒径范围为0.005微米至0.0851微米。然而，粒径分布分析显示，超过95%的颗粒直径为约0.005微米至约0.015微米。3.胶体银溶液的抗病毒特性体外该研究的目的是，评估当暴露(在悬浮液中)一段限定的暴露期时，本发明的银胶体(lOppm和32ppm)抗甲型流感(H1N1)病毒或者甲型禽流感(H3N2)病毒(“鸟流感”)的抗病毒特性。使用的方案是为特定应用设计的杀病毒试剂效力的标准试验方法(ASTM(美国材料试验学会)E1052)的改进型。该体外杀病毒的悬浮液测定被设计成用于评估产品抗甲型流感((H1N1)和(H5N1))病毒或甲型禽流感(H3N2)病毒的抗病毒特性。通过在适当的指示剂细胞系一恒河猴肾细胞系上监控病毒特异性细胞病变效应(CPE)来确定病毒(传染性)的存在。挑选的指示剂细胞系能够支持病毒的生长。方案概要将病毒悬浮液暴露于使用产品的稀释液。在各个预定暴露时间处，取出一等分，通过逐级稀释进行中和，并且测定病毒的存在。平行地测定阳性病毒对照、细胞毒性对照、以及中和对照。评估测试产品的抗病毒特性，并且在限定的浓度和时间间隔处进行比较。试验参数待测定的稀释液培养物/稀释细胞对照物4病毒对照物(各个暴露时间)10_2至4测试物(各个暴露时间和/或浓度)10_2至4细胞毒性对照(各个产品浓度)10_2至10+4中和对照(各个产品浓度)10_2至10_4*4*当通过保藏液病毒滴度确定时，可以测定交替的稀释度。通过收集来自75-100%被感染的培养细胞的培养液上清来制备病毒保藏液。裂解细胞，并且通过离心除去细胞碎片。移出上清液并等分，在<-70°C下储存高滴度的病毒保藏液，直到使用之日。作为另一种选择，使用在9-11天的老的含胚的授精鸡蛋中繁殖的病毒。在使用之日，移出等分的冷冻病毒、解冻并且保持冷藏，直到在测定中使用。如果需要有机质负载试验，可以将胎牛血清(FBS)加入病毒保藏液等分，并且调节其以产生要求的有机质负载百分比。细胞培养物和试验培养基从ViroMed实验室公司细胞培养物部门得到了恒河猴肾(RMK)细胞。培养物被保持，并且在5-7%CO2的湿润环境中，在36-38°C下的组织培养实验室器皿中用作单细胞层。用于杀病毒测定的试验培养基是补充有1-10%(ν/ν)热失活的FBS的最低必需培养基(MEM)。该培养基也可以补充以一种或多种下述物质10μg/ml庆大霉素、100单位/mL青霉素、以及2.5μg/ml两性霉素B。方法受测物质的制备在受测物质被平衡至暴露温度之后直接使用。病毒悬浮液的处理将4.5mL等分的各个浓度的受测物质分配入单独的试管，并且将它们各个与0.5mL等分保藏的病毒悬浮液相混合。将混合物涡旋混合至少10秒钟，并且混合物在适当的温度下经历剩下的限定暴露时间。在进行0.1m(分钟)的各个暴露期之后，立即从各个试管中移出等分试样，并且用10倍逐级稀释液(0.lmL+0.9mL试验培养基)滴定混合物，并且测定病毒的存在。应注意为了减小产品细胞毒性，可以用试验培养基中剩余的稀释液在胎牛血清或者其他适当的中和剂中制备第一稀释液。如果对指示剂细胞培养物的过度细胞毒性起因于受测物质或疑似物质，则可以将受感染的稀释液穿过单个的S印hadex凝胶过滤柱，接着进行滴定从而有助于减小毒性。在这种情况下，对照物的相同稀释液也必须穿过单个的柱子。病毒对照物的处理将0.5mL等分的保藏的病毒悬浮液暴露于代替受测物质的4.5mL等分的试验培养基，并且按照此前“病毒悬浮液的处理”部分描述的方法处理。病毒对照物进行各个暴露时间的测试。所有对照物使用相同的在测试中使用的中和剂。病毒对照物滴度被用作基线来比较在暴露于受测物质后各个测验参数的百分率和对数减小值。细胞毒性对照物将4.5mL等分的各个浓度的受测物质与0.5mL等分含有任何要求的用于代替病毒的有机质负载的试验培养基混合，并且按照此前描述的方法处理。给同时作为病毒_受测物质和病毒对照培养物的细胞培养物的细胞毒性打分数。基于按照显微镜下确定的细胞成活力对细胞毒性进行分级。对由于毒性引起的细胞变化进行分级，并且如果大于或等于50%的单细胞层受感染则报告为有毒性(T)。中和对照用低滴度的病毒保藏液对各个(上述的)细胞毒性对照物混合物进行挑战实验，以确定杀病毒活性被保持时的受测物质的稀释度。在通过受测物质确定病毒的减少中，不考虑显示出杀病毒活性的稀释度。中和反应按照此前描述的方法，将暴露期后的0.ImL的各个测试物和对照参考物加至0.9mL等分的中和剂中，随后立即在试验培养基中进行10倍逐级稀释以便终止受测物质的作用。为了确定被挑选用于测定的中和剂是否在减小受测物质杀病毒活性中有效果，将低滴度的病毒保藏液加至各个受测物质_中和剂混合物的稀释液中。测定该混合物，以确定病毒是否存在(上述中和对照)。传染性测定在传染性测定中，将当存在甲型流感(H1N1)或者甲型禽流感(H3N2)病毒时显示出细胞病变效应(CPE)的RMK细胞系用作指示剂细胞系。在多孔培养皿中用0.lmL由测试组和对照组制备的稀释液将细胞一式四份地接种。用单独的试验培养基将未被感染的指示剂细胞培养物(细胞对照物)接种。在灭菌的可任意处理的细胞培养实验室器皿中，将培养物在5-7%C02的湿润环境中于36-38°C下保温。对于有没有CPE、细胞毒性和成活力，周期性地给培养物打分大约七天。检验标准有效的测试将需要1)从病毒对照物中回收保藏的病毒；2)细胞对照物对于病毒呈阴性；并且3)阴性培养物能存活。计算病毒的滴度和细胞毒性滴度将分别表达为通过SpearmanKarber方法计算的50百分率滴定端点的-loglO传染性(TCID50)或细胞毒性(TCD50)。-Log接种的第一稀释度-在各个稀释度处％死亡率之和、、umAM^恥、100二八+、^,仏八减小=1-TCID5o试验物百裤(%)减小的公式[-TCI病毒对照物-]x100Log减小的公式病毒对照物的TCID5(1-试验物的TCID5Q结果病毒对照物在37.0°C下两小时的暴露时间后，对照物的病毒滴度是5.OloglO。对于所有暴露两小时的受测物质，由该结果计算出百分率和Log减小计算值。在37.0°C下六小时的暴露时间后，对照物的病毒滴度是5.251ogl0。对于所有暴露六小时的受测物质，由该结果计算出百分率和Log减小计算值。在37.0°C下十二小时的暴露时间后，对照物的病毒滴度是4.751ogl0。对于所有暴露十二小时的受测物质，由该结果计算出百分率和Log减小计算值。银lOppm在任何测定的稀释度中未观察到受测物质的细胞毒性(<1.51ogl0)。中和对照显示，受测物质在彡1.51ogl0处被中和。在37.0°C下两小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在4.51ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银lOppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)两小时后68.4%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是0.51ogl0。在37.0°C下六小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在4.751ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银lOppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)六小时后68.4%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是0.51ogl0。在37.0°C下十二小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在2.751ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银IOppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)十二小时后99.0%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是2.01ogl0。银32ppm。在任何测定的稀释度中未观察到受测物质的细胞毒性(<1.51ogl0)。中和对照显示，受测物质在彡1.51ogl0处被中和。在37.0°C下两小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在4.51ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银32ppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)两小时后68.4%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是0.51ogl0。在37.0°C下六小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在3.751ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银32ppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)六小时后96.8%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是1.51ogl0。在37.0°C下十二小时的暴露期后，在病毒-受测物质混合物中检测在1.751ogl0处的试验病毒传染性。在这些研究条件下，当不存在有机质负载时，银32ppm显示出在暴露于甲型禽流感(H3N2)病毒(鸟类重配)十二小时后99.9%的病毒滴度的减小。病毒滴度的Log减小值是3.01ogl0。对于鸟类病毒的结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(+)=阳性，存在试验病毒(0)=未回收到试验病毒和/或未显示细胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(+)=阳性，存在试验病毒(0)=未回收到试验病毒和/或未显示细胞毒性鸟类病毒的结果概要<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>细胞毒性对照和中和对照<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(+)=阳性，存在试验病毒(0)=未回收到试验病毒和/或未显示细胞毒性胶体银还显示出显著的抗人类甲型流感菌株的活性。抗甲型流感(H5N1)的杀病毒效力<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>抗流感结果表明，本发明的胶体银的广谱抗菌的特性可以延伸至流感病毒，并且尤其延伸至禽流感病毒。如同上述所示，银胶体是无毒的，并且因此是用于或许会被流感病毒污染的表面消毒的理想产品。在体内前述内容证实，本发明的胶体银在杀灭表面上的流感病毒方面是有效的。在下述实验中研究了胶体银作为体内治疗剂的效力。实验目标是用lOppm或者32ppm胶体银预处理小鼠，然后用H5W禽流感进行挑战实验。从CharlesRiver实验室(Wilmington，麻萨诸塞州)得到了无病原体的各个具有18-21g体重的雌性BALB/c小鼠。甲型流感/Duck/MN/1525/81(H5N1)通过两个经过刚断奶的动物的通道而适合于小鼠。被采用的病毒库然后在MDCK(Madin-Darby犬的肾)细胞上生长，并且在使用之前对其进行抗年轻的成年小鼠的滴定。使用OhmedaBiox脉冲血氧定量计的耳用探针附件，确定动脉血氧饱和度(Sa02)。该探针被设置于动物的大腿处，并且在30seC稳定期后进行读数。取出实验动物的肺，称重，然后置于具有预定数量部分(一个肺/每部分)的培养皿中。然后对该肺从0(正常)到4(在100%的整个肺上为最大梅红色)记分。然后各个肺被均质化，接着一式三份地测定均质物的稀释液的传染性病毒。通过用32ppm或者lOppm的胶体银溶液每12hr口服填喂7天，对19个小鼠的组进行治疗。然后用LD70剂量的传染性流感病毒在鼻内感染这些动物(阴性对照物通过鼻腔给药无菌水被“感染”)，并且保持21天。作为对照，类似组的小鼠用抗病毒药物三氮唑核苷治疗(75mg/kg每天两次，共五天，开始的4hr预病毒暴露)。在3_11天(其为Sa02测量参数在被感染的动物体内通常会下降的时间)进行Sa02测量。通过用耶茨校正(Yates’scorrection)的卡方分析(chisquareanalysis)，统计学地评估存活性。通过使用研究者t_测验，分析了至死平均天数的增加值、平均Sa02数值的差异、平均肺重量和平均病毒滴度。Wilcoxon等级总和分析被用于肺的打分。实验结果被总结于下表中，结果显示，病毒挑战实验对于20个安慰剂治疗的动物中的14个是致命的，至死平均天数是8.4天。用32ppm胶体银治疗显示出未影响因流感致死的动物数量，虽然可看到至死平均天数延迟了半天。虽然令人感兴趣的是，在第一天测定该Sa02参数时，可看到高度显著(P<0.001)的差异，但该组被治疗的小鼠体内Sa02下降的速度几乎与安慰剂对照物中的速度相同。Sa02下降是肺功能下降的表现，其表明在肺中的肺实变在用32ppm胶体银治疗的动物体内不会发展得如用安慰剂对照物治疗的动物所显示的那样快速。从每次评估时更低的肺记分来看，这些治疗显示出可适度地减小肺实变，第6天的平均肺记分明显地(P<0.05)小于用安慰剂治疗的对照物中的情况。肺重量一在肺中形成的引起动物肺炎的液体的另一个指示，在各个时间点处也比使用安慰剂的情况中看到的要小。在感染的第3天和第6天，用32ppm胶体银治疗的小鼠体内平均肺病毒滴度低于安慰剂对照物的肺病毒滴度。用lOppm胶体银治疗也提供了一些令人感兴趣的结果。存活率有明显的提高，与用安慰剂治疗的对照小鼠的30%的存活率相比，60%的用lOppm银溶液治疗的感染小鼠存活。尽管由于在后者对照物中存活的数量而在统计学上不显著，但该效果强烈地暗示可能已经产生疾病抑制效果。在Sa02测定期间的两个时间点第3天和第6天，通常可看到的Sa02下降明显地减小(P<0.01)，并且整个测定时间内有一般减小的SaO2下降。在该治疗组中同样可看到在肺记分中适度的抑制，尤其在第6天。当用32ppm胶体银治疗时，可看到肺病毒滴度轻微的抑制。在感染流感的小鼠上的试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>任何一个胶体银溶液都没有显示出不良副作用。难以将该实验中看到的效果全部归因于病毒失活，因为两种试验材料通过直接的鼻腔吸入而被口服给药于感染的动物。因为在病毒暴露之前，治疗开始了一周，有可能胶体银的一部分已经可以达到暴露于病毒的肺组织附近。关于胶体银的作用机制和效力有许多假设，包括该材料在动物身上发挥温和的免疫调节效果的可能性，其中该材料将提供适度的抗感染的保护作用。假如这样一种机制的确与看到的活性有关，那么或许将治疗量限制到每天一次、或者每隔一天一次的不同的治疗程序可以增强任何免疫调节效果，因为人们认为太频繁的给药可能会使免疫系统负担过重。通过IOppm银材料看到的更大的保护作用可以通过免疫调节进行解释，因为最大的免疫效果不一定是在最高的使用剂量处。在此，在这些研究中银材料已经可以抑制流感病毒感染的另一个机制简单地是，用胶体银涂敷病毒子从而抑制连接和渗透。而且，当开始被感染时，银材料需要在暴露的肺组织附近。或许给药量或者一般的剂量方案会影响胶体银在动物身体内部再分布的能力。胶体银材料还可以在抑制急性肺炎期间诱发的肺的上皮内层的程序性细胞死亡中起作用。程序性细胞死亡在由于上皮细胞损失而造成的急性肺损伤中扮演着成因性角色。考虑到口服银材料和鼻腔内滴注的合并使用，在病毒暴露时间附近处，将确定看见的效果是否的确与银材料的直接杀病毒效果有关。研究发现，胶体银在体外抗流感病毒方面是高度有效的，同时在体内有显然较小的效果，这一现象会带来在体内给药的剂量和途径问题。因为胶体银基本上是无毒的，故在流感病毒进入或者复制的位置处获得足够高浓度的材料似乎有可能是有效的，而不会引起副作用。此时，用含有胶体银的合剂对鼻部通道和肺的周期性治疗似乎有可能是较好的治疗选择。因此，应理解下述权利要求包括如上所述具体地显示和描述的内容，包括概念等价的方案，包括明显可以替换的内容，并且包括符合本发明基本构思的方案。在不背离本发明范围的情况下，本领域的技术人员可以获知上述优选实施方式的多种改进和变形。本文所示实施方式仅用于阐明本实施例的目的，不应将其视为对本发明的限制。因此，应当理解，在附后的权利要求书限定的范围内，可以用除在此具体描述之外的形式实施本发明。权利要求一种消灭甲型流感病毒的方法，包括下述步骤提供包含银总浓度为约5至40ppm的水中银组合物，其中所述银呈内部为银单质、表面为氧化银的胶体银颗粒形式，其中大多数胶体银颗粒的最小直径大于0.005微米、且最大直径小于0.015微米；以及使甲型流感病毒与组合物相接触。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲型流感是甲型禽流感。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述甲型禽流感是甲型禽流感(H3N3)。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲型流感是人类甲型流感。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述人类甲型流感是人类甲型流感(H5N1)。6.一种改善甲型流感病毒感染的方法，包括下述步骤提供包含银总浓度为约5至40ppm的水中银组合物，其中所述银呈内部为银单质、表面为氧化银的胶体银颗粒形式，其中大多数胶体银颗粒的最小直径大于0.005微米、且最大直径小于0.015微米；以及在所述感染发生之前，将所述组合物给药于可能被甲型流感病毒感染的动物。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述甲型流感是甲型禽流感。8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述甲型禽流感是甲型禽流感(H3N3)。全文摘要公开了一种包含银颗粒和水的无色的组合物。该银颗粒内部为银单质、表面为氧化银，其中银颗粒以约5-40ppm的含量水平存在于水中。该组合物显示出显著的抗病毒特性并且可有效地抗禽流感病毒。对组合物的使用方法进行了描述。文档编号A61P31/16GK101801393SQ200780044209公开日2010年8月11日申请日期2007年10月3日优先权日2006年10月3日发明者威廉·D·莫勒,罗伯特·J·霍拉迪申请人:美国白银有限公司(犹他有限责任公司)