专利名称：：包含琥珀酸的胆碱盐的用于鼻内给药的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及琥珀酸的胆碱盐在用于鼻内给药的药物组合物中的应用，特别是在具有神经保护活性的组合物中的应用。
背景技术：
：琥珀酸的胆碱盐为生物活性物质。RU专利2228147公开了琥珀酸的二胆碱盐用于治疗血脂异常(dyslipidemia)、高血脂(hyperlipidemia)以及胰岛素抵抗(insulinresistance)。RU专利2281766公开了通过使用琥珀酸的二胆碱盐改善认知功能的方法。RU专利2281765公开了通过使用琥珀酸的二胆碱盐治疗脑缺血的方法。从现有技术可获知琥珀酸的单胆碱盐，例如已公布的US专利5，124，061公开了作为一种用于增强植物对由冷冻环境导致的损害的抵抗力的组合物的组分的琥珀酸的单胆碱盐。然而，在本领域中没有记载过将琥珀酸的单胆碱盐或二胆碱盐用作适于鼻内给药的药物组合物中的组分。令人惊讶地，本发明证明了通过鼻内给药，琥珀酸的胆碱盐在脑功能方面具有显著作用，并且获得这些作用所需的剂量为，在将这些盐进行腹膜内给药的情况下获得相同或甚至更低作用所需的剂量的几十分之一，甚至几百分之一。此外，琥珀酸的胆碱盐的鼻内给药途径可提供理想的中枢作用，并可避免不理想的全身作用(systemiceffect)，诸如应答于琥珀酸的胆碱盐的注射而导致的不理想的胰岛素的分泌。因此，由于琥珀酸的胆碱盐的鼻内给药，目前可能(1)减少这些盐的有效剂量并且还可达到达到所需的中枢治疗作用，以及(2)避免其它递送途径典型地具有的不良的全身副作用。本发明的目的在于提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的琥珀酸的胆碱盐。本发明的目的在于提供治疗神经变性疾病的方法，该方法包括将包含治疗有效量的琥珀酸的胆碱盐的药物组合物进行鼻内给药。发明详述本发明提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式⑴的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化学式(1)或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体。术语“可药用的盐”是指无毒的碱加成盐。本发明的可药用的盐通过本领域熟知的方法使化学式(I)的化合物与可药用的碱进行反应来制备。这样的碱包括但不限于氨；钠碱；钾碱；胆碱；硫胺碱；有机胺诸如三乙胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺、二乙醇胺以及三乙醇胺；2-乙基-6-甲基-3-羟基吡啶以及碱性氨基酸诸如精氨酸、鸟氨酸以及赖氨酸。本发明的可药用的盐优选选自胆碱盐(化学式II的化合物)、钠盐(化学式III的化合物)、钾盐(化学式IV的化合物)以及硫胺盐(化学式V的化合物)。本发明进一步提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(II)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>化学式(II)以及可药用和可鼻内给药的载体。本发明进一步提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(III)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>以及可药用和可鼻内给药的载体。本发明进一步提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(IV)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>以及可药用和可鼻内给药的载体。本发明进一步提供用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(V)的化合物<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>以及可药用和可鼻内给药的载体。所述术语“治疗有效量”是指提供所需治疗作用的活性制剂的无毒且充分的量。化学式(I)至(V)的化合物的治疗有效量优选为0.0130mg/本发明的组合物的单位剂型。更优选为515mg/单位剂型。术语“鼻内给药”是指将所述组合物递送至鼻上皮的任一部位。所述术语“可药用和可鼻内给药的载体”是指一种或多种相容性的并且适于给药于哺乳动物(优选为人)的鼻上皮的任一部位的、固态或液态的填充剂、稀释剂或胶囊化物质(encapsulatingsubstance)。所述载体典型地可为液体、溶液、悬浮液、凝胶、软膏、洗液或其组合。所述载体优选为可药用的含水载体。本发明的组合物通过本领域熟知的方法并依照公认的制药流程来制备，例如依照Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明登氏制药科学)，第十七版，编者AlfonsoR.Germaro，Mack出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州，第十八版(1990)中描述的流程来制备。本发明的组合物可以多种多样的单位剂型来制备。这样剂型包括但不限于鼻滴齐U、鼻喷剂、鼻凝胶剂、鼻软膏剂以及鼻散剂(nasalpowder)。化学式(I)至(V)的化合物的含量为占所述组合物重量的0.199%的范围，优选为0.510%。本发明进一步提供将化学式(I)的化合物递送于需要该化合物的哺乳动物的方法，<image>imageseeoriginaldocumentpage6</image>所述方法包括将药物组合物进行鼻内给药，所述药物组合物包含治疗有效量的所述化学式(I)的化合物或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体。所述可药用的盐优选选自胆碱盐、钠盐、钾盐以及硫胺盐。本发明进一步提供疾病的治疗方法，所述疾病选自阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨延顿氏舞蹈病(Huntington'sdisease)、由中风导致的脑缺血和神经损伤、糖尿病多发神经病变以及肌萎缩侧索硬化症；所述方法包括将药物组合物鼻内给药于需要该组合物的哺乳动物，所述药物组合物包含治疗有效量的所述化学式(I)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>化学式(I)或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体。所述可药用的盐优选选自胆碱盐、钠盐、钾盐以及硫胺盐。本文使用的术语“治疗疾病”表示对需要治疗的哺乳动物的疾病的一种或多种临床表现(即症状)进行的治疗、控制、预防及/或减轻。本发明的方法中的治疗有效量优选为0.015mg/kg(哺乳动物体重)，更优选为0.1lmg/kg0本发明的哺乳动物的非限制性实施例包括人和宠物(诸如猫和狗)。所述哺乳动物优选为人。下列实施例用来说明本发明。所述实施例仅为说明性的，并非用于以任何方式来限制本发明的范围。实施例1本实施例说明化学式⑴至(V)的化合物的制备。化学式(I)的化合物通过在室温下、不存在溶剂下将12.Ig胆碱与11.Sg琥珀酸进行混合来制备。在环境温度下将所得到的混合物溶解于丙酮；然后通过过滤器将溶液过滤。通过从所述溶液中蒸发丙酮，从而将化合物(I)作为离子性液体进行回收。1HNMR(溶剂为D2O)2.41(9H，s)，3.19(4H，s)，3.49(2H，t)，4.10(2H，t)。化学式=C9H19NO50测定值C48.82%,H8.69%以及N6.30%。理论值C48.86%,H8.66%以及N6.33%。化学式(II)的化合物通过在环境温度下、不存在溶剂下将2.2g所述化学式(I)的化合物与1.2g胆碱进行混合来制备。在真空下将混合物进行干燥，然后在异丙醇-丙酮中进行重结晶。将化合物(II)作为白色粉末来回收。1HNMR(溶剂为D2O):2.37(18H，s)，3.14(4H,s),3.49(4H,t),4.05(4H,t)。化学式=C14H32N2O6。测定值C51.79%,H9.98%以及N8.60%。理论值=C51.83%,H9.94%以及N8.63%。化学式(III)的化合物通过在环境温度下、不存在溶剂下将2.2g化学式(I)的化合物与0.04g氢氧化钠进行混合来制备。在真空下将混合物进行干燥，然后在异丙醇_丙酮中进行重结晶。将化合物(III)作为白色粉末来回收。1HNMR(溶剂为D2O):2.35(9H，s)，3.15(4H,s)，3.46(2H,t)，4.00(2H,t)。化学式C9H18NO5Na0测定值:C44.40%,H7.49%以及N5.72%。理论C44.44%,H7.46%以及N5.76%。化学式(IV)的化合物通过在环境温度下、不存在溶剂下将2.2g化学式(I)的化合物与0.056g氢氧化钾进行混合来制备。在真空下将混合物进行干燥，然后在异丙醇_丙酮中进行重结晶。将化合物(IV)作为白色粉末来回收。1HNMR(溶剂为D2O):2.31(9H,s),3.10(4H,s),3.45(2H,t),4.02(2H,t)。化学式=C9H18NO5K。测定值C41.63%,H7.02%以及N5.34%。理论值C41.68%,H6.99%以及N5.40%。化学式(V)的化合物通过在环境温度下、不存在溶剂下将2.2g所述化学式(I)的化合物与2.82g硫胺碱进行混合来制备。在真空下将混合物进行干燥，然后在异丙醇_丙酮中进行重结晶。将化合物(V)作为白色粉末来回收。化学式C21H35N506S。测定值C51.90%,H7.31%以及N14.39%。理论值C51.94%,H7.27%以及N14.42%。实施例2本实施例说明用于鼻内给药的组合物，所述组合物包含化学式(I)的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>化学式(I)的化合物磷酸二钠USP/PhEur使pH值为5.0的足够量用于注射的水USP/PhEur至1.Oml将化学式(I)的化合物溶解于用于注射的水达所需的体积，加入0.4M磷酸二钠至PH值为5.0。如此，制备出化学式(I)的化合物浓度为50mg/ml的溶液。将所述溶液通过灭菌级过滤器(0.2μm)进行过滤，然后装入USP/PhEur1型小玻璃瓶(额定喷雾体积100μL)，所述小玻璃瓶用氯化丁基塞子(chlorobutylstopper)来封闭。将所述小瓶装配入可商购的单位剂量型鼻腔喷雾设备中。装配后的设备可用于在单次给药时递送单位剂量5.Omg的化学式(I)的化合物。将已装填的鼻腔喷雾设备包装入塑料托盘中，并放置入纸盒以防止光照。实施例3本实施例说明用于鼻内给药的组合物，所述组合物包含化学式(II)的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>将化学式(II)的化合物溶解于用于注射的水达所需的体积，加入0.4M琥珀酸至PH值为5.0。如此，制备出化学式(II)的化合物浓度为50mg/ml的溶液。如实施例1所述，将所述溶液进行灭菌然后装入小玻璃瓶。将所述小瓶装配入可商购的单位剂量型鼻腔喷雾设备。所述装配后的设备可用于在单次给药时递送单位剂量5.Omg的化学式(II)的化合物。将已装填的鼻腔喷雾设备包装入塑料托盘，并放置入纸盒来防止光照。实施例4本实施例说明用于鼻内给药的组合物，所述组合物包含化学式(III)的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>将化学式(III)的化合物溶解于用于注射的水达所需的体积，加入0.4M琥珀酸至PH值为5.0。如此，制备出化学式(III)的化合物浓度为50mg/ml的溶液。如实施例1所述，将所述溶液进行灭菌，然后装入小玻璃瓶。将所述小瓶装配入可商购的单位剂量型鼻腔喷雾设备。所述装配后的设备可用于在单次给药时递送单位剂量5.Omg的化学式(III)的化合物。将已装填的鼻腔喷雾设备包装入塑料托盘，并放置入纸盒来防止光照。实施例5本实施例说明用于鼻内给药的组合物，所述组合物包含化学式(IV)的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>将化学式(IV)的化合物溶解于用于注射的水达所需的体积，加入0.4M琥珀酸至PH值为5.0。如此，制备出化学式(IV)的化合物浓度为50mg/ml的溶液。如实施例1所述，将所述溶液灭菌，然后装入小玻璃瓶。将所述小瓶装配入可商购的单位剂量型鼻腔喷雾设备。所述装配后的设备可用于在单次给药时递送单位剂量5.Omg的化学式(IV)的化合物。将已装填的鼻腔喷雾设备包装入塑料托盘，并放置入纸盒来防止光照。实施例6本实施例说明用于鼻内给药的组合物，所述组合物包含化学式(V)的化合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>将化学式(V)的化合物溶解于用于注射的水达所需的体积，加入0.4M琥珀酸至pH值为5.0。如此，制备出化学式(V)的化合物浓度为50mg/ml的溶液。如实施例1所述，将所述溶液灭菌，然后装入小玻璃瓶。将所述小瓶装配入可商购的单位剂量型鼻腔喷雾设备。所述装配后的设备可用于在单次给药时递送单位剂量5.Omg的化学式(V)的化合物。将已装填的鼻腔喷雾设备包装入塑料托盘，并放置入纸盒来防止光照。实施例7本实施例说明组合物的鼻内给药方法，所述组合物包含化学式⑴至(V)的化合物。患者去除所述鼻腔喷雾设备的包装，所述鼻腔喷雾设备包含化学式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物中的一种的无菌溶液，然后将所述设备的喷嘴插入鼻孔，该物品用于给予单次剂量。实施例8本实施例说明针对需要治疗的哺乳动物进行的、治疗神经退行性紊乱的方法。如HarkanyT等在BehavBrainRes.199890(2)133-45中所描述，可通过将β-淀粉状蛋白肽25-35(0-淀粉状蛋白)注射入大鼠脑的基底大细胞核(灿(161181^仰1化magnocellularis,NBM)来诱导出与人的阿尔茨海默氏病相关的疾病。将β-淀粉状蛋白两侧地给药于雄性威斯达大鼠(wistarrat)的NBM，剂量为每侧2μg。在注射淀粉状蛋白后的第16天，使大鼠每天一次地通过鼻内给药或腹膜内给药方式来接受组合物达7天，所述组合物包含化学式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物的水溶液(lmg/kg)。使对照大鼠通过鼻内给药方式接受盐水。在治疗的最后一天的次日，对大鼠进行连续两天的被动回避能力测试。使用了一种双隔室、阶梯连通的(step-through)被动回避装置，其包含亮室(25X40X25cm)和暗室(25X40X25cm)，该亮室和暗室附带有可通电的栅格地板(electrifiedgridfloor)并且被闸门(8X8cm)所隔离。在获得试验(acquisitiontrial)中，将大鼠放置于所述亮室达2分钟以熟悉所述装置，并且其放置位置为尾巴朝向关闭的门。将所述闸门打开，并记录进入暗室的次数。当大鼠完全进入暗室(四只脚在暗室中)，所述闸门便关闭，然后通过所述栅格地板向所述大鼠传送电击(0.8mA，持续3秒)。在电击后，立即将大鼠放置于室笼中。在所述获得试验完成后进行24小时的保持试验(retentiontrial)中，将大鼠放置于所述亮室，然后，在过去180秒之前记录下进入所述暗室的保持潜伏期(retentionlatency)。如果大鼠不进入所述暗室达180秒，那么就可认为潜伏期为180秒。数据表示为保持潜伏期平均值士SD(n=8)。H潜伏期，秒对照48士11化学式(I)的化合物，鼻内给药103士18*化学式(I)的化合物，腹膜内给药55士18化学式(II)的化合物，鼻内给药98士21*化学式(II)的化合物，腹膜内给药45士16化学式(III)的化合物，鼻内给药87士19*化学式(III)的化合物，腹膜内给药53士28化学式(IV)的化合物，鼻内给药65士16*化学式(IV)的化合物，腹膜内给药49士17<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>*表示与对照有显著差异(P<0.05)。因此，相比于腹膜内给药而言，包含化学式⑴至(V)的化合物的组合物的鼻内给药更加有效。与对照大鼠相比而言，采用鼻内给药方式治疗的大鼠在学习和记忆方面显示出显著改进，而采用腹膜内给药方式治疗的大鼠则没有显示出显著改进。权利要求用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(I)的化合物化学式(I)或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体。FPA00001010388400011.tif2.用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(II)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化学式(II)以及可药用和可鼻内给药的载体。3.用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(III)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化学式(III)以及可药用和可鼻内给药的载体。4.用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(IV)的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>化学式(IV)以及可药用和可鼻内给药的载体。5.用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(V)的化合物以及可药用和可鼻内给药的载体<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化学式(V)。6.将化学式(I)的化合物递送给需要该化合物的哺乳动物的方法，所述方法包括将包含治疗有效量的化学式(I)的化合物或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体的药物组合物鼻内给药<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化学式(ι)。7.权利要求6的方法，其中，所述可药用的盐选自胆碱盐、钠盐、钾盐以及硫胺盐。8.治疗疾病的方法，所述疾病选自阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨延顿氏舞蹈病、由中风导致的脑缺血和神经损伤、糖尿病多发神经病变以及肌萎缩侧索硬化；所述方法包括将包含治疗有效量的化学式(I)的化合物或其可药用的盐以及可药用和可鼻内给药的载体的药物组合物鼻内给药于需要该药物组合物的哺乳动物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>化学式(I)。9.权利要求8的方法，其中，所述可药用的盐选自胆碱盐、钠盐、钾盐以及硫胺盐。全文摘要本发明涉及用于鼻内给药的药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的化学式(I)的化合物或其可药用的盐。所述可药用的盐优选选自胆碱盐、钠盐、钾盐以及硫胺盐。本发明进一步涉及化学式(I)的化合物及其可药用的盐的鼻内递送方法。本发明进一步涉及通过使用本发明的组合物来治疗神经变性疾病的方法。文档编号A61P25/28GK101801368SQ200780100092公开日2010年8月11日申请日期2007年8月2日优先权日2007年8月2日发明者伊戈尔·安那托利维奇·波米特金申请人:布达生物制药有限公司