专利名称：：格尔德霉素衍生物用于制备治疗化疗诱发脱发症的药物的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及格尔德霉素衍生物的新用途，尤其是格尔德霉素衍生物在化疗诱发脱发症领域的用途。
背景技术：
：头发是由毛根，毛球(生发中心)以及毛干所组成。细胞在毛球内增生，毛发从毛根处通过头皮生长出来。最后的结果也就是一股紧密的角蛋白。毛发的生长分为三个阶段。第一个阶段是毛发生长初期，它是生长期，85-90%的人类发囊处于毛发生长初期。每个发囊包含有有丝分裂活动的母细胞球状底部。从这些基础上，全部毛干细胞分化并生长。细胞成排的向毛球上部移动并垂直性的延长。最后它们被迫向上用力并钻出皮肤表面。人类的毛球细胞平均每12到24小时就会分裂。由于这种实质性的细胞有丝分裂活动，毛球细胞对细胞毒素药物极为敏感。人类的毛发生长初期持续2到6年。第二个阶段是毛发生长中期，人类要持续几周。在这个阶段毛根同毛球相分裂并结束色素贮存，发根末端钻出毛球。只有不到1%的人类头发会经历毛发生长中期。第三个阶段称为毛发生长终期，其特性是缺少了细胞有丝分裂活动。该阶段持续3到6个月。大约10%的人类毛发处于毛发生长终期。(Do".Sewf/J.Owco/.25:562-570.柳丄So威M^/.丄.S6..柳-概)化疗诱发脱发症化疗常常合并有脱发或毛发损失("on:Se/m'".0"co/.25:562-570.)。许多常用的化疗药物能够诱发毛发脱失，虽然不同的药引起脱发的能力有差异。环磷酰胺、道诺红菌素、多烯紫衫醇、阿霉素、足叶乙甙、异环磷酰胺、太平洋紫杉醇、替尼泊甙及托泊替康会产生许多严重的影响(Jom箏79S&ieceWCa"cer,777-"6.Pe^y)。在诱发脱发方面效果较差的药物有放线菌素、5-氟尿嘧啶、羟基脲、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托蒽醌、氮芥、长春碱、长春新碱、去乙酰长春酰胺和长春花(5"/"附ore,A^.，附/"ams在附仪z'叫7"6,/^.293-555，595-606.)。但是，这些细胞毒性化疗药物常常联合使用，这样会能够增加个别导致脱发的药物的风险。有关化疗诱发的脱发机制方面的进行的研究相当少。大概是由于细胞毒性剂能够采用消灭肿瘤细胞和其它增生性细胞的方式消灭毛囊细胞，这样的解释似乎合理的。然而，发明人发现阿霉素能够启动凋亡机制，消灭毛细胞(Cece.7嵐/匿"75,,-纖)。同样的研究也发现doxorubin毒性的目标是毛囊基质以及上毛根细胞。另一项研究也报道环磷酰胺能够明显的诱发毛发生长初期毛囊的细胞凋亡(Sc/u7/z'等.J./"veW.DennWo/.77/:)。现有治疗药物免疫疗法及相关药物治疗斑秃的治疗方法有局部免疫疗法、系统免疫疗法、光化学治疗、光动力学治疗和免疫调节剂治疗等，其中局部免疫疗法和免疫调节剂因其疗效肯定，副作用小而被广泛使用。局部免疫治疗又称接触致敏疗法。1976年Rosenberg等人开创了局部免疫治疗，即将接触致敏剂如二硝基氟苯。二苯环丙烯酮、二丁基酯角鲨烯酸等外用于秃发区，激发接触性过敏反应。致敏剂以DPCP最常用，该方法治疗斑秃的有效率通常在50%以上，但停药后仍有复发的可能。FK506是一种强效T细胞免疫抑制剂，是从tsukubaensis链酶菌中产生的大环内酯类抗生素，局部外用可直接刺激毛囊，促进头发再生。Mcelwee等利用Dundee实验秃毛大鼠体毛再生，毛囊炎症浸润明显减轻。由于FK506局部外用，可避免环孢菌素等系统免疫调节剂造成的对整体免疫系统的抑制，因此有望成为新型治疗斑秃的药物。5-a还原酶抑制剂及相关药物随着人们认识到DHT是体内一种对头发产生负性作用的激素，而5-a还原酶抑制剂可阻断睾酮转化为DHT，因此5-a还原酶抑制剂就成为治疗脂溢性脱发新的研究热点。非那甾胺是目前唯一用于临床的5-a还原酶的抑制剂。实验证明非那甾癌变可通过抑制头皮内5-a还原酶抑制睾酮向DHT转化，降低脱发区头皮的DHT，促进毛发生长。临床报道口服非那甾胺lmg/日，一年内有48%的病人头发再生，二年内有66%的病人头发再生，且治疗剂量的非那甾胺副作用小，耐受性好。RU58841等人研究发现被移植了人类头发的睾酮模型裸鼠局部应用RU58841可引起毛发周期重新启动，毛发生长速率显著升高，而RU58841可能通过抑制雄激素受体活性来发挥作用。米诺地尔擦剂是目前美国FDA唯一批准上市的治疗秃发的非处方药。实验证明2%--5%米诺地尔均可促进雄激素性脱发患者头发再生且能阻止脱发，其中以5%米诺地尔疗效最好，长期外用该药安全性高，不会产生严重的副作用。毛囊体外培养实验表明，米诺地尔促进毛发生长是直接刺激毛囊，促进毛囊上皮生长的结果。最新研究又发现米诺地尔还可能通过对毛乳头细胞中的血管内皮生长因子的向上调节作用，而促进毛发生长。格尔德霉素的应用格尔德霉素(Geldanamycin，GA)的17位衍生物是目前研究最多的位点。利用烷基胺基取代17位的甲氧基，提高了17位基团与Asp40形成氢键的稳定性。格尔德霉素17位烷基胺基衍生物目前报道的有50多种，有体外活性的衍生物有40余种，其中多种衍生物有较高体内活性。17位甲氧基被烯丙胺基取代所得衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)在体外活性检测中对pl85erbB'2的IC50为31nmol/L，活性好于格尔德霉素(其IC50为70nmol/L)，目前17-AAG已经进入I1期临床。其化学分子式如下H17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)格尔德霉素的抗病毒作用中国专利申请"17-(四氢呋喃-2'-基)甲胺-17-去甲氧基格尔德霉素的抗病毒作用"(申请号200610072996.2，申请日2006年4月10日，公开号CN1827617，公开日2006年9月6日)公开了一种17-(四氢呋喃-2'-基)甲胺-17-去甲氧基格尔德霉素在抗病毒中的应用，抗病毒活性研究结果显示，所说化合物具有强抗病毒活性和广抗病毒谱，为今后深入研究与开发所说化合物成为临床有效的抗病毒药物奠定了良好的基础。格尔德霉素在治疗尖锐湿疣中的应用中国专利申请"格尔德霉素(C-3559)在制备治疗尖锐湿疣、疱疹病毒生殖道感染药物及制备抗脊髓灰质炎病毒药物中的应用"(申请号03134665.0，申请日2003年9月25日，公开号CN1600306,公开日2005年3月30日)公开了格尔德霉素在制备治疗尖锐湿疣药物中的应用。格尔德霉素对健康犊牛股内侧皮肤无刺激作用。格尔德霉素有抑制牛乳头状瘤病毒DNA复制作用，可使瘤体发生萎縮，老化，体积变小；格尔德霉素在制备治疗疱疹病毒生殖道感染药物中的应用。C-3559在细胞培养内有广谱抗病毒作用，对多种DNA及RNA病毒都有在微摩尔水平的抗病毒活性。经体外传41代，未分离出HSV-1对格尔德霉素的耐药毒株。HSV-1GA耐药训练第15代与野株具有相同的阿昔洛韦敏感性。对细胞无毒浓度格尔德霉素可特异抑制HSV-1DNA合成。在小白鼠疱疹病毒2型阴道感染模型内，可有效抑制疱疹病毒2型的复制，显著降低病毒排出量，降低小白鼠的死亡率，延长感染小白鼠的平均生活日，效果优于相同剂量的阿昔洛韦；所有剂量组对小白鼠体重增长无影响。格尔德霉素的抗肿瘤作用格尔德霉素作为一种新型强效的苯醌安莎类抗生素，为我国开发的一类新药，具有较广泛的抗菌谱，并具有抗肿瘤活性。格尔德霉素通过与HSP90特异性结合来发挥抗肿瘤作用，HSP90表达水平高的肿瘤细胞对格尔德霉素敏感。格尔德霉素特异性作用于HSP90氨基端的ATP/ADP结合位点，竞争性抑制HSP90的ATP酶活性，使HSP90处于ADP结合的构型，阻碍"关"状态HSP90多分子伴侣复合体形成，迅速使效应蛋白失活，失去稳定性，通过泛素化蛋白酶体途径降解，同时影响多条细胞信号传导通路实现多点攻击，摧毁肿瘤赖以生存的整个信号通路网络，使肿瘤细胞凋亡、生长抑制。
发明内容本发明的目的在于提供一种格尔德霉素衍生物的新用途，即17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)用于制备治疗化疗诱发脱发症的药物的用途。本发明所述的17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)为商品化产品，例如，可购买自SIGMA公司。将17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)制备成化疗诱发脱发症的药物，其应用剂量约为0.1415pM/m2。在以下的实施例中，通过化疗脱发发生的小鼠模型，在脱毛的小鼠背部皮内注射50pM的格尔德霉素50ul，可以有效的治疗化疗诱发的突发并发症。因而初步验证了本发明所述的格尔德霉素衍生物可用于制备治疗化疗诱发脱发症的药物的用途。通过本发明所述的格尔德霉素衍生物17-AAG，可以开发出一种新的治疗化疗后脱发药物，而且具有可靠的安全性，可以大大提高化疗病人的生活质量，减轻病人的心理压力，从而可以更好的配合癌症的治疗。图1为三组实验小鼠的对比照片，图中，A为紫杉醇化疗组，B为正常对照组，C为环磷酰胺化疗组；图2为五组实验小鼠的对比照片，图中，A为正常对照组；B为经环磷酰胺化疗后脱毛治疗组，C为经紫杉醇化疗后脱毛治疗组，D为经环磷酰胺化疗后脱毛无治疗组；E为经紫杉醇化疗后脱毛无治疗组；图3为用药前后各组小鼠的体重变化图；图4为五组实验小鼠的毛囊组织切片图(IOX)，图中，a为正常对照组，b为紫杉醇化疗后治疗组，c为环磷酰胺化疗后治疗，d为环磷酰胺化疗无治疗组，e为紫杉醇化疗无治疗组。具体实施方式实施例化疗后脱发的动物模型及治疗1、实验材料实验用动物为4-6周龄SPF级Km小鼠，由中山大学实验动物中心提供，室温环境下伺养。注射用环磷酰胺、紫杉醇，购于中山大学肿瘤医院，也可用其它市售产品；治疗药物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)，购自SIGMA公司。其他生理盐水；水合氯醛；水浴锅等加热设备。2、实验方法和结果将实验小鼠随机分为五组对照组、环磷酰胺化疗实验组(无药物治疗)、环磷酰胺化疗+药物治疗组、紫杉醇化疗组(无药物治疗)、紫杉醇化疗+药物治疗组。将上述各组小鼠背部毛发剪掉，待新毛长出后在腹腔内分别注射环磷酰胺120mg/kg体重、紫杉醇50mg/kg体重诱导小鼠毛发脱落(对照组除外)，每隔七天注射一次，连续注射三次。结果经环磷酰胺和紫杉醇化疗组的小鼠和对照组相比出现了明显的脱毛现象。如图1所示。在第三次注射后对小鼠进行治疗。将小鼠背部剩余的所有毛发剪掉，在背部进行皮内注射0.05ml50jiM药物(格尔德霉素17-AAG)，处理面积约7-8cm2。用组织化学HE染色进行检测毛囊变化情况。结果经过一周后，背部经过注射格尔德霉素17-AAG的部位及周围长出新生毛发，其他部位不长，形成圆形斑点，效果明显，如图2所示。该药物用药前后体重的变化可用于分析该药物对小鼠的毒副作用，经检测，各组小鼠平均体重数据如表1和图3所示表l:用药前后各组小鼠的体重变化<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结论该药物对小鼠无明显的毒副作用。将各组小鼠拉尾断颈处死，分别取背部皮肤组织用组织化学HE染色方法进行染色，观察毛囊变化。如图3所示，a为正常对照组，毛囊数量为正常数量；b为紫杉醇化疗后治疗组，其毛囊数量和正常组无异；c为环磷酰胺化疗后治疗，其毛囊数量和正常组无异；d为环磷酰胺化疗无治疗组，毛囊数量较少；e为紫杉醇化疗无治疗组，毛囊数量也较少。权利要求1.格尔德霉素衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素用于制备治疗化疗诱发脱发症的药物的用途。全文摘要本发明涉及格尔德霉素衍生物的新用途，尤其是格尔德霉素衍生物在化疗诱发脱发症领域的用途。本发明提供了格尔德霉素衍生物17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)用于制备治疗化疗诱发脱发症的药物的用途。通过本发明所述的格尔德霉素衍生物17-AAG，可以开发出一种新的治疗化疗后脱发药物，而且具有可靠的安全性，可以大大提高化疗病人的生活质量，减轻病人的心理压力，从而可以更好的配合癌症的治疗。文档编号A61P17/14GK101254188SQ20081002707公开日2008年9月3日申请日期2008年3月28日优先权日2008年3月28日发明者帷周,林锦梅,坤赖,邹江鹰,鄂顺梅,陈清彬申请人:邹江鹰