专利名称：：一种治疗肝病的药物的制作方法
技术领域：
：本发明属于一种中药药物。技术背景由于多种因素导致的以肝脏纤维结蒂组织弥漫性增生和肝细胞变性坏死为特征的疾病，称肝硬化，病因反复持续存在，最终产生腹水或水肿，当肝硬化患者腹腔内液体积蓄超过正常最大液体量(200mL)时，则形成肝硬化腹水。肝硬化腹水多发生于肝硬化失代偿期，是肝硬化已进入后期的标志。大量腹水本身常导致腹胀、腹痛、活动受限、呼吸困难，甚至形成各类腹疝。腹水属于中医的"臌胀"，为"风劳臌膈"四大难症之一，临床多见于肝硬化腹水，治疗颇为棘手。鼓胀，在《医门法律》中指出"胀病奕不外水裹、气结、血凝，……"。近代中医医家认为"鼓胀"的形成，肝、脾、肾功能失调是关键。肝气郁结，气滞血瘀，是形成鼓胀的基本条件；其次是脾功能受损，运化失职，遂致水湿停滞；肾脏的气化功能障碍，不能蒸化水液而加重水湿停滞，也是鼓胀形成的重要因素。其中气滞、血瘀、水停互为因果，是邪实的主要内容。正虚是气滞、血瘀、水停的必然趋势，所涉及的脏腑主要是肝、脾、肾。中医以特有的辨治方法，对消除腹水有较好效果，但因病机复杂，症状多变，辨证不易掌握，处方用药亦甚繁复，常致消除腹水有效率不高，故寻求治疗腹水的有效方药是亟需解决的问题。
发明内容本发明的目的是提供一种治疗肝病的中药药物。该药体现中医配伍理论的特点，舒肝健脾，益气消湿，可改善肝病消化道症状，增加食欲，提高免疫力，消除肝区疼痛，促进利尿，使肝硬化腹水消退明显。该药组成是在中医理论指导下，在方中使用益气健脾之菱角，以扶正健脾，使脾之运化功能较好发挥，进而三焦之清者上升，浊者下运，清浊分明，最终肝达疏泄，三焦水化，改善气结、水滞、血瘀，消除水凝。李时珍在《本草纲目》中记载称灵芝"可食用，味苦平，主胸中结，益心气，补中，增智慧，不忘，久食轻身不老，延年神仙"，因此用之辅助治疗肝硬化，可以增补肝气，疏达脾气，健脾和胃，护肝解毒，不仅可以治肝病，还有较突出的利尿作用。薏苡仁，甘，微寒，归脾、胃、肺经，利水渗湿健脾，除痹清热排脓，有利于腹水的排泄。陈皮是我国的传统中草药之一，具有行气健脾，和胃止呕，燥湿除胀之功效。肝硬化腹水，辨证为本虚标实，在本多为脾虚，在标多为肝郁气滞水停。治则正邪兼顾，攻补兼施，以菱角为主药，舒肝健脾，益气和胃，加用灵芝、薏苡仁以增强健脾补气之功、疏肝理气、清热利湿之效。诸药合用，舒肝健脾，益气消湿，可改善肝病消化道症状，增加食欲，提高免疫力，消除肝区疼痛，促进利尿，使肝硬化腹水消退明显。本发明药物各组分用量也是经发明人进行大量摸索总结得出，各组分用量在下述重量范围内都具较好疗效菱角150-200份，灵芝125-175份，薏苡仁75-125份，陈皮50-100份。优选为菱角175份，灵芝150份，薏苡仁100份，陈皮75份。本发明药物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何常规内服制剂。优选的本发明药物活性组分的制备方法如下将以上四味中的陈皮用80%乙醇回流提取2次，每次3h，每次加80%乙醇量为药材的6倍，合并提取液，滤过，滤液另器保存；将药渣与菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3h，每次加水量为药材的8倍，滤过，浓縮至相对密度为1.12(6(TC)的清膏，加入乙醇至含醇量为60%，充分搅拌，静止24h，滤过，滤液与上述陈皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至无醇味，浓縮至相对密度为1.30-1.35(8(TC)的稠膏，另器保存；将灵芝加水煎煮2次，每次3h，每次加水量为药材的IO倍，滤过，浓縮至相对密度为1.30-1.35(80°C)的稠膏，与上述稠膏合并，减压干燥。本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液等。本发明的积极效果是本药物发明是根据中医理论组方，通过现代药理学实验方法充分证明该药在每日每千克体重0.8g生药的剂量下，对肝硬化腹水大鼠的腹水消退作用明显，治疗效果显著。本药物发明能舒肝健脾，益气消湿，可改善肝病消化道症状，增加食欲，提高免疫力，消除肝区疼痛，促进利尿，使肝硬化腹水消退明显。本发明药物用法用量，口服剂量以生药量计算为每日10g-30g。以下通过试验例来进一步阐述本发明药物的有益效果，这些试验例包括了本发明药物(以下简称扶正肝康颗粒)的药效学试验。实验例l:扶正肝康治疗大鼠肝硬化腹水1.实验动物ICR小鼠，清洁级，20只，雌雄各半，体重19.6g-22.0g;纯系Wistar大鼠，清洁级，110只，雄性，体重250g-300g。2.药物扶正肝康颗粒，实验室自制，热水溶解，配制为浓度0.16g'L"溶液；戊巴比妥钠，德国进口分装；四氯化碳CCL4，天津光复精细化工研究所；无水乙醇，北京化工厂；氢氯噻嗪，山西省临汾云鹏药业有限公司。3.肝硬化腹水模型建立IIO只Wistar大鼠，于实验室常规喂养一周，以适应环境。随机取出10只作为空白对照组，其余进行肝硬化腹水模型复制。采用四氯化碳复合灌胃方法，进行大鼠肝硬化腹水模型的复制。以350mg'L"戊巴比妥钠水溶液作为唯一饮用水对所有造模大鼠进行诱导，共10d。然后用10。/。CCL4大豆油溶液给予灌胃，给药剂量为每100g体重0.2mL。前12w，每5d—次；第12w至14wCCL4浓度提高至15%，每4d—次；18w改为每3d—次，同时将饮水换为5%乙醇，直至形成腹水为止。4.实验流程将所有模型鼠随机分为模型组；氢氯噻嗪阳性药组，给药量为每100g体重0.25g;扶正肝康颗粒给药组，给药量为每100g体重0.8g。每组10只动物。按分组情况给药，各处理组大鼠称体重并量腹围，然后置于大鼠代谢笼内，正常饮食，次日留尿，并称量体重及腹围后开始灌胃给药，连续4w。各组给药剂量如下模型组正常饮食；阳性药组每100g体重0.25g;扶正肝康颗粒复方药组每100g体重0.8g。在给药后的第4w末处死动物，处死前一天，将各处理组大鼠重新放置在代谢笼内，再次收集并记录24h尿量，同时称体重、测腹围。然后在0.3%戊巴比妥钠麻醉下解剖，无菌条件下快速取所有腹水，记录腹水量，然后立即进行腹主动脉采血，于室温条件下放置lh后，3000r'min"离心10min，取血清，置于-20。C冰箱密封冻存备用，用以检测ALT、AST、ALP、LDH、TP、ALB、TBIL、DBIL和肾功能CRE、BUN等指标。取肝脾肾脏器，称重量，统一留取肝叶大部分、左肾和部分脾脏，置于10%福尔马林溶液中，用以HE染色和免疫组化研究。5.实验结果5.1各组大鼠症状学观察和腹水消退情况正常组10只大鼠，整个实验期间，毛色光润，精神状态活动度正常，体重增加，无一只死亡，存活率为100%。所有造模鼠与对照组相比，体重增长缓慢，后期体重明显减轻，皮毛蓬乱无光泽，活动少，嗜睡，饮食较少，出现腹水者较严重，且腹部膨隆明显。除了出现疾病和不适应生存而死亡者，至第24w经检测有40只出现了腹水，其绝对成模率为40%(存在腹水大鼠数/参与造模的大鼠数)，相对成模率为66.7%(存在腹水大鼠数/存活大鼠数)。治疗组开始治疗后，摄食增加，体重亦增加，毛色逐渐光润，活动趋于正常。用药4w后，经解剖，模型组10只大鼠腹水均未消除；扶正肝康颗粒组10只大鼠有8只腹水消除，其余仅有少量腹水，腹水消除率为80%;氢氯噻嗪组10只大鼠有6只腹水消除，消除率为60%。运用精确卡方检验，扶正肝康颗粒组对腹水清除率与模型组相比具统计学意义(尸O.Ol)，与阳性药组比较差别无统计学意义(尸>0.05)。见表l。表l治疗组治疗4w后各组大鼠腹水消除率(n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>**P<0.05vs模型组5.2肝功能比较扶正肝康颗粒与阳性药组比较，各指标值均相当，差异不存在统计学意义(尸>0.05)。肝硬化腹水大鼠给予扶正肝康颗粒后，其肝功能明显改善，反映肝脏功能的血清酶学指标ALT、AST、LDH和ALP等水平变化如表2所示；反映蛋白质合成功能的指标如ALB、GLO和TP，见表3;反映胆红素代谢功能的血清TBIL和DBIL水平，见表4。表2反映肝脏功能的血清酶学指标变化比较(n=10,5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*尸<0.05vs正常组，**P<0.01正常组，aa尸O.01vs模型组表3反映肝脏细胞蛋白质合成功能的指标变化比较(n=10，5±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表4反映胆红素代谢功能的血清学指标变化比较(n=10,3f士S)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表5反映肾脏功能的血清学指标变化比较(n=10，3f±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>总之，肝硬化腹水大鼠模型组除了TP和GLO之外，血清ALT、AST、ALP、LDH、TBIL、DBIL较正常组均有明显升高(PO.Ol)，其中以LDH升高最为明显(PO.Ol)，ALB较正常组明显下降(PO.Ol)。说明该方法对大鼠造成了明显的肝损伤，结合后面的肝组织病理切片染色可以说明已经形成了肝硬化腹水模型。而扶正肝康颗粒组使肝硬化腹水大鼠血清AST、ALT、LDH、ALP和ALB水平较模型组有一定的改变(P<0.05)，提示扶正肝康颗粒对肝功能有所改善，能够降低血清中反映肝脏功能的相关酶水平，提升肝脏ALB的合成。5.3血清ALD、Na+、K+、SOD、MDA和NO水平比较与正常组比较，三处理组ALD水平皆升高；模型组K+水平降低，两治疗组K+有所升高；模型组Na+升高，两治疗组Na+降低。阳性药氢氯噻嗪组和扶正肝康组分别与正常组比较，ALD水平均无显著性差别(P>0.05);而K+水平差异皆有显著性(PO.Ol)。阳性药氢氯噻嗪组和扶正肝康组分别与模型组比较，ALD水平均有统计学差别(PO.01);K+水平增高具统计学意义(PO.05);Na+水平降低具统计学意义(P<0.05)。扶正肝康颗粒可降低肝硬化腹水大鼠血清ALD和Na+水平，而对K+水平有增加作用。各处理组除了阳性药氢氯噻嗪组血清NO水平较正常组升高不明显外，其余皆明显升高，以模型组的NO最显著，统计学比较差异皆有统计学意义(PO.05);阳性药氢氯噻嗪组和扶正肝康组，分别与模型组比较，NO均明显降低，差异具有统计学意义(PO.01),提示复方药可使肝硬化腹水大鼠血清NO水平明显降低。表6各组血清ALD、K+、Na+、NO、NOS水平比较(n=10,5±s)组别ALD(pgU1)K+(mmolL-1)Na十(mmolL-1)NO(,lL")正常组204.393±57.7696.35±1.54136.59±1.6035.58±6.63模型组687.995±152.117"3.87±2.92238.71±8.1960.45±18.26"氢氯噻嗪262.473±89.452"5.08±0.59"A140.59土2.36"36.68±12.29"扶正肝康241.993±37.539"5.67±2.36*"140.98土6.04"40.23±11.25*"*尸<0.05,**P<0.01,*/"<0.05，**尸<0.015.4尿量比较三处理组初始尿量经两两比较，差异无统计学意义(P>0.05)。氢氯噻嗪、扶正肝康两给药组各自进行组内比较，终末尿量与初始尿量均有统计学差别(PO.Ol)，显示复方药和阳性药可以使肝硬化腹水大鼠尿量增加。氢氯噻嗪和扶正肝康，分别与模型组比较，终末尿量、以及终末尿量与起始尿量差值，都具统计学差别(PO.Ol)。扶正肝康、氢氯噻嗪两组比较，终末尿量具统计学差异(PO.Ol)。见表7。表7三处理组尿量比较(n=10,i±s)组别初始尿量(mL)终末尿量(mL)终末-初始(mL)模型组4.94±2.605.81±2,100.88土2.88氢氯噻嗪4.81±2.5513.44士6,98""8.63士6.20"扶正肝康7.81±5.0420.50±5.38**""12.69±3.36""**P<0.01vs组内比较，ApO.05vs氢氯噻嗪，"P〈0.01vs氢氯噻嗪，"PO.05vs模型组，'"PO.01vs模型组5.5肝脏病理组织形态观察5.5.1大体标本观察正常鼠，大体标本外观无明显异常，各肝叶色泽均匀暗红，表面光滑无结节，肝脏大小在正常范围内。模型组大体标本外形可见明显縮小，色泽呈黄褐色或土黄色且不均匀，质硬而脆，边缘钝，外表凹凸不平，布满大小不一的颗粒状结节，或者分布全叶，或者分布某一叶或多叶。肝脏与网膜之间、肝叶与叶之间有粘连，且均有腹水，平均腹水量为16.67mL。切面包膜外翻，可见大块坏死灶，坏死灶周围有血块。阳性药组和扶正肝康颗粒组的肝脏病理组织观察与模型组比较，大体标本可见大小形态接近正常，表面光滑，边缘较齐，颜色红润，质地韧而软，结节明显减少。肝叶之间、肝脏与腹膜之间少量粘连，腹水明显减少，阳性药组平均约为6mL，而扶正肝康颗粒组平均约为4mL。5.5.2光学显微镜观察正常组大鼠，肝细胞形态结构正常，肝小叶清晰，中央静脉位置、数量正常，汇管区正常。而模型组大鼠镜下可见正常肝小叶结构已不存在，肝细胞脂肪变性较明显，排列较乱，有的成单层板状，有的为双层或多层，纤维结蒂组织弥漫增生形成纤维条索，增生的结缔组织包绕肝细胞再生结节，构成假小叶，多无中央静脉和汇管区，炎细胞侵润。扶正肝康颗粒组肝细胞索围绕中央静脉呈近似放射状排列，肝细胞变性坏死较少，肝细胞形态结构几乎正常，排列较整齐，假小叶数量减少，汇管区炎症细胞浸润少见。肝脏大体标本和光镜观察，显示模型组大鼠较正常组大鼠肝脏组织结构有明显改变，符合肝硬化腹水大鼠肝脏病理组织学，造模成功。而扶正肝康颗粒组大鼠虽说比正常组大鼠肝脏组织结构稍差，但与模型组相比其改善还是较明显的。5.6扶正肝康颗粒干预肝组织NOS、NF—KB表达的免疫组化分析正常组肝脏NOS免疫组化结果为阴性；模型组、阳性药组为阳性，而复方药组大鼠NOS则为阴性。NF—KB阳性细胞为胞核染成棕黄色。正常组大鼠肝组织有微弱表达；模型组阳性细胞多分布于汇管区、炎症坏死区及纤维间隔区，且阳性细胞数量高于正常对照组(PO.01);而复方药组NF-KB阳性细胞的数量显著低于模型组(PO.Ol)。可见扶正肝康颗粒对肝硬化腹水大鼠的肝脏NF—KB表达具有一定的抑制作用。具体实施方式实施例l:本发明胶囊剂的制备菱角175克，灵芝150克，薏苡仁100克，陈皮75克。以上四味中的陈皮用80%乙醇回流提取2次，每次3小时，加醇量为6倍，合并提取液，滤过，滤液另器保存；药渣与菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3小时，每次加水量为药材的8倍，滤过，浓縮至相对密度为1.12(60°C)的清膏，加入乙醇至含醇量为60%，充分搅拌，静止24小时，滤过，滤液与上述陈皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至无醇味，浓縮至相对密度为1.30-1.35(80°C)的稠膏，另器保存；将灵芝加水煎煮2次，每次3小时，每次加水量为药材的10倍，滤过，浓縮至相对密度为1.30-1.35(80°C)的稠膏，与上述稠膏合并，减压干燥；粉碎成细粉，加入淀粉，混匀，用乙醇制粒，干燥，装胶囊，制成IOOO粒。实施例2:本发明片剂的制备菱角200克，灵芝175克，薏苡仁125克，陈皮100克。按实施例1制得活性成份后，加入制备片剂的常规辅料，压片。实施例3:本发明颗粒剂的制备菱角150克，灵芝125克，薏苡仁75克，陈皮50克。按实施例l制得活性成份后，加入淀粉，混匀，用乙醇制粒，干燥。权利要求1.一种治疗肝病的药物，其特征在于它是由下列重量份数比的原料药制成的菱角150-200份，灵芝125-175份，薏苡仁75-125份，陈皮50-100份。2、一种一种治疗肝病的药物，其特征在于它是由下列重量份数比的原料药制成的菱角175份，灵芝150份，薏苡仁100份，陈皮75份。3、如权利要求1或2所述的治疗肝病的药物的制备方法，包括下列步骤取四味原料药中的陈皮用80%乙醇回流提取2次，每次3小时，加醇量为6倍，合并提取液，滤过，滤液另器保存；药渣与菱角、薏苡仁加水煎煮2次，每次3小时，每次加水量为药材的8倍，滤过，浓縮至相对密度为1.12(60°C)的清膏，加入乙醇至含醇量为60%，充分搅拌，静止24小时，滤过，滤液与上述陈皮的乙醇提取液合并，回收乙醇至无醇味，浓縮至相对密度为1.30-1.35(80°C)的稠膏，另器保存；将灵芝加水煎煮2次，每次3小时，每次加水量为药材的IO倍，滤过，浓縮至相对密度为1.30-1.35(80°C)的稠膏，与上述稠膏合并，减压干燥。全文摘要本发明涉及一种治疗肝病的药物，属于中药药物。它是由下列重量份数比的原料药制成的菱角150-200份，灵芝125-175份，薏苡仁75-125份，陈皮50-100份。本发明的积极效果是本药物发明是根据中医理论组方，通过现代药理学实验方法充分证明该药能舒肝健脾，益气消湿，可改善肝病消化道症状，增加食欲，提高免疫力，消除肝区疼痛，促进利尿，使肝硬化腹水消退明显。文档编号A61K36/8994GK101264257SQ200810050669公开日2008年9月17日申请日期2008年4月29日优先权日2008年4月29日发明者牛凤兰申请人:吉林大学