专利名称：：一种含有独一味环烯醚萜苷的外用液体制剂及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种独一味环烯醚萜苷的外用液体制剂，特别是涉及一种独一味环烯醚萜苷的洗剂、擦剂、气雾剂、喷雾剂、膏剂。
背景技术：
：传统的镇痛药以吗啡为代表的阿片类镇痛药和以阿司匹林为代表的非甾体类抗炎镇痛药，但前者具有成瘾性、呼吸抑制等严重不良反应，后者也有损害胃肠道的副作用，不能成为理想的镇痛药物。近年来国内外学者对从天然药物中寻找高效、低毒、无依赖性的镇痛药物的研究十分活跃。独一味Lamiophlomisrotata(Benth.)Kudo为唇形科植物，原属糙苏属，现已从该属中分出成为独立的属，称独一味属，仅1种，又名独步通，藏语亦称"大巴"、"打布巴"。其根及根茎或全草入药，是我国藏、蒙及纳西等民族民间常用草药之一。藏、蒙及纳西民间经常用来治疗刀、枪伤、跌打损伤、浮肿后流黄水，关节炎等疾患的草药，具有止血止痛、抗菌消炎、活血化瘀的功效。目前独一味以水煎粗浸膏加淀粉制成胶囊剂，已被2005版药典所收载，独一味药材也被2005版药典所收载，均以黄酮类为其评价指标。研究表明.独一味含有黄酮、苯乙醇苷、环烯醚萜苷等成分。现代研究表明独一味总环烯醚萜苷类成分具有很好的止血、促凝血作用，是其中的止血活性成分。目前市场上的独一味剂型主要是以口服药为主，如独一味胶囊、独一味片、独一味颗粒等。由于口服制剂本身存在的缺点，存在剂量大、胃肠剌激、易引起肠道菌群失调、起效缓慢、生物利用度低、疗程长、病灶局部药物浓度低等缺点，不能满足独一味在临床上的应用。环烯醚萜苷类化合物是许多中药的活性成分，但目前为止，在国内外专利文献和非专利文献中，没有看到关于独一味环烯醚萜苷类的外用液体制剂的报道。
发明内容本发明的目的是一种含有环烯醚萜苷的外用液体制剂，它直接作用于患处，以局部给药的方式，直接作用于病症部位。与口服相比，药物不受胃肠ra或酶的破坏、可避免口服给药时肝脏首过效应的破坏，减少药物对肝脏的影响，对人体干扰少，此外，局部给药可显著减少用药剂量，提高病灶局部药物浓度、降低毒副反应和提高患者依从性。本发明的技术方案是制剂中含有的有效成分是环烯醚萜苷，独一味环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.99%，其余量为制作外用制剂的辅料和水。制剂的剂型为外用液体洗剂、外用液体擦剂、气雾剂、膏剂、喷雾剂。所述的液体洗剂、液体擦剂含环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.9%重量百分比，含药溶媒的重量百分比为99.90-50.01%。所述的气雾剂中含有效环烯醚萜苷的重量百分比为O.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒、乳化剂、抛射剂，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。所述的膏剂中含有效环3烯醚萜苷的重量百分比为O.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒、乳化剂，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。所述的喷雾剂中含有效环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。本发明公开了四种独一味环烯醚萜苷的提取方法提取方法1的具体步骤是取独一味药材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加1030倍量的水，煎煮12小时，第二次加1020倍量的水，煎煮0.51.5小时，合并药液，滤过。取部分滤液浓縮成稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过200目筛，备用；剩余滤液经聚酰胺柱，水及不同浓度乙醇洗脱、浓縮等步骤进行进一步分离，经鉴别，确定独一味总环烯醚萜苷。提取方法2的步骤是取独一味药材，粉碎成最粗粉，加水煎煮二次，第一次加1030倍量的水，煎煮12小时，第二次加1020倍量的水，煎煮0.51.5小时，合并药液，滤过，浓縮备用；将浓縮液过大孔树脂层析柱，用3050倍蒸馏水洗脱，收集部分洗脱液浓縮成稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过200目筛，备用；剩余滤液经聚酰胺柱，水及不同浓度乙醇洗脱、浓縮等步骤进行进一步分离，经鉴别，确定得到独一味总环烯醚萜苷。提取方法3的步骤是取独一味药材，粉碎成最粗粉，加70%99%的乙醇回流提取23次，第一次加乙醇812倍量，回流13小时，第2、3次加乙醇610倍量，回流12小时；合并回流液，减压浓縮，回收乙醇至无醇味，得到醇提浓縮液；醇提浓縮液加水混悬后，依次用石油醚、正丁醇萃取23次，回收溶剂，干燥，得到石油醚提取物A，正丁醇提取物B，提取剩余部分为水提取物C。经鉴别，正丁醇提取物B为独一味总环烯醚萜苷。提取方法4的步骤是取独一味药材，粉碎成最粗粉，置渗漉器中，用70%90%乙醇浸泡1236小时后，以5ml10ml/min速度渗漉，直至留出液经薄层层析检测无斑点为止；减压浓縮回收乙醇至无醇味，得到独一味渗漉液；将独一味渗漉液加水静置1236小时，得到沉淀物A;上清液过大孔树脂层析柱，分别用3050倍蒸馏水，3050倍15%45%乙醇洗脱，回收乙醇，干燥，得到提取物B、C;经鉴定，提取物C为独一味总环烯醚萜苷。本发明含有环烯醚萜苷的外用液体制剂的用途是活血散瘀，消肿止痛。用于跌打扭伤，软组织损伤。本发明所用的溶媒是水、乙醇、聚乙二醇、1，2—丙二醇，乙二醇一种或几种以任意比混合的混合物。本发明所用的乳化剂是吐温-80，聚氧乙烯烷基醚、十八烷基硫酸钠一种或几种以任意比混合的混合物。本发明所用的基质是甘油明胶、羧甲基纤维素钠、聚羧乙烯、聚乙二醇一种或几种以任意比混合的混合物。本发明所用的抛射剂是三氯一氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟甲烷、四氟乙烷中的一种或几种以任意比混合的混合物。本发明将独一味中的总环烯醚萜苷制成外用液体洗剂、外用液体擦剂、气雾剂、膏剂、喷雾剂。具有剂量小、起效快、病灶局部药物浓度高，毒副反应小、生产成本低、使用方便、患者依从性好等优点。体实施方式通过下面给出的具体实施例和实验数据材料，可以进一步清楚地了解本发明外用制剂及其用途。但它们不是对本发明的限定。实施例1独一味总环烯醚萜苷洗(擦)剂的实施方案1)配方(每100ml用量)独一味总环烯醚鹏苷0.lg(O.1%)无菌水99.9g(99.9%)2)制法将配方用量的独一味总环烯醚萜苷溶于水中，混匀。实施例2独一味总环烯醚萜苷洗(擦)剂的实施方案1)配方(每100ml用量)独一味总环烯醚鹏苷2g(2.0%)无菌水98g(98.0%)2)制法将配方用量的独一味总环烯醚萜苷溶于水中，混匀。实施例3独一味总环烯醚萜苷洗(擦)剂的实施方案1)配方(每100ml用量)独一味总环烯醚萜苷49.99g(49.99.0%)无菌水50.01g(50.01%)2)制法将配方用量的独一味总环烯醚萜苷溶于水中，混匀。实施例4独一味总环烯醚鹏苷软1)配方独一味总环烯醚鹏苷〖剂实施方案0.lg(O.1%)3.0g(3.0%)30.0g(30.0%)66.9g(66.9%)的各原辅料称量、溶融、混匀后分装、包装。明胶甘油水2)制法将配方用实施例5独一味总环烯醚萜苷软膏剂实施方案1)配方独一味总环烯醚鹏苷聚乙二醇4000聚乙二醇400水49.9g(49.9%)10.Og(lO.0%)30.0g(30.0%)10.lg(lO.1%)2)制法将配方用量的各原辅料称量、溶融、混匀后分装、包装。实施例6独一味总环烯醚鹏苷软1)配方独一味总环烯醚鹏苷聚羧乙烯940乙醇甘油水〖剂实施方案2.0g(2.0%)10.Og(lO.0%)5.0g(5.0%)5.0g(5.0%)88.0g(88.0%)二氯二二氯二2)制法将配方用量的各原辅料称量、溶融、混匀后分装、包装。实施例7独一味总环烯醚萜苷漱口液实施方案1)配方0.lg(O.1%)99.9g(99.85%)0.05g(0.05%):、溶解、混匀。独一味总环烯醚鹏苷水薄荷油2)制法将配方各原辅料称j实施例8独一味总环烯醚萜苷漱口液实施方案1)配方独一味总环烯醚鹏苷水玫瑰油2)制法将配方各原辅料称49.9g(49.9%)50.lg(50.05%)0.05g(0.05%)、溶解、混匀。实施例9独一味总环烯醚萜苷漱口液实施方案1)配方独一味总环烯醚鹏苷水丁香油2)制法将配方各原辅料称2.0g(2.0%)98.lg(97.95%)0.05g(0.05%)、溶解、混匀。实施例10独一味总环烯醚萜苷泡沫气雾剂实施方案1)配方独一味总环烯醚鹏苷1，2-丙二醇乙二醇二氯二氟甲烷(F12)纯化水0.lg(2.0%)10.4g(10.4%)16.7g(16.7%)7.0g(7.0%)65.8g(65.8%)2)制法除二氯二氟甲烷以外，将配方各原辅料称量、溶解、混匀、分装，最后灌入氟甲烷，即得。实施例11独一味总环烯醚萜苷泡沫气雾剂实施方案1)配方独一味总环烯醚鹏苷1，2-丙二醇乙二醇二氯二氟甲烷(F12)纯化水49.9g(49.9%)10.4g(10.4%)16.7g(16.7%)7.0g(7.0%)15.5g(15.5%)2)制法除二氯二氟甲烷以外，将配方各原辅料称量、溶解、混匀、分装，最后灌入氟甲烷，即得。实施例12独一味总环烯醚萜苷泡沫气雾剂实施方案1)配方6独一味总环烯醚鹏苷1，2-丙二醇乙二酉享二氯二氟甲烷(F12)纯化水49.9g(49.9%)10.4g(10.4%)16.7g(16.7%)7.0g(7.0%)15.5g(15.5%)2)制法除二氯二氟甲烷以外，将配方各原辅料称量、溶解、混匀、分装，最后灌入二氯二氟甲烷，即得。实施例13独一味总环烯醚萜苷喷雾剂实施方案2)制法将配方各原辅料称量、溶解、混匀。本发明独一味总环烯醚鹏系列产品的药效学试验如下独一味总环烯醚萜苷喷雾剂，批号20080601;以无菌水溶解成含主药10mg/ml的供试液。本品为外用制剂，通过观察家兔皮肤接触受试药物后，所产生的剌激反应，考察本制剂对机体的剌激性；通过醋酸致小鼠疼痛作用与对小鼠断尾出血时间的影响等实验，考察本发明喷雾剂的药效。—、皮肤剌激性试验1.l受试动物的处理取健康家兔(2.l士0.2kg)8只，雌雄各半，分为完整皮肤组及破损皮肤组。于给药前48小时，用10%硫化钠溶液将动物脊柱两侧毛脱掉，每册面积约为50cm2，去毛后24小时检查去毛皮肤是否因去毛而受伤。破损皮肤的制作，用手术刀将去毛消毒皮肤划破，以渗血为度，控制左右两侧皮肤的破损程度基本保持一致。1.2试验方法试验采用同体左右侧自身对照法。左、右侧去毛区分别喷雾给予批号为20080601的独一味总环烯醚萜苷喷雾剂和空白微乳2ml。每天二次，连续给药一周，于第8天用温水洗去残留受试药物及空白微乳。分别于去除药物后1、24、48、72小时观察给药部位有无红斑及水肿等情况，同时注意观察涂抹部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况，记录发生及恢复情况、时间，给予评分。试验结果见表1.表1喷雾剂家兔剌激性试验结果(n=4)独一味总环烯醚鹏苷0.lg(O.1%)无菌水99.9g(99.9%)2)制法将配方各原辅料称量、溶解、混匀。实施例14独一味总环烯醚萜苷喷雾剂实施方案独一味总环烯醚鹏苷49.9g(49.9%)无菌水50.lg(50.1%)2)制法将配方各原辅料称量、溶解、混匀。实施例15独一味总环烯醚萜苷喷雾剂实施方案独一味总环烯醚鹏苷2g(2.0%)无菌水98g(98.0%)7完整皮肤破损皮肤时间平均样品刺激反应刺激反应级刺激反应级平均分(<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果表明，本发明中的独一味总环烯醚萜苷喷雾剂用药连续3天后，在7小时内观察，家兔完整皮肤组未发现红斑、水肿等过敏性反应。而破损皮肤组有少量红斑形成，并且损伤部位水肿现象，个别出现较严重的水肿，红斑可在72小时后逐渐消退或减轻，水肿程度亦可减轻，总的剌激程度评分值在2.00-4.00之间，轻度到中度剌激。说明独一味总环烯醚萜苷喷雾剂对家兔完整皮肤无剌激作用，对破损皮肤有轻度剌激，可出现少量红斑、轻度水肿等过敏性反应。二、对醋酸致小鼠扭体反应的影响选取健康小鼠60只，雌雄各半，按体重随机分为6组，分别为生理盐水组、阳性对照组(对乙酰氨基酚0.23g/kg体重)、独一味胶囊、植物油对照组、跌打扭伤灵喷雾剂(广西桂西制药有限公司)、独一味总环烯醚萜苷喷雾剂，每组10只。生理盐水组每鼠口服灌胃生理盐水10ml/kg体重，阳性对照组每鼠口服灌胃阳性对照药，独一味胶囊组每鼠口服灌胃独一味胶囊(规格O.3g/粒)，批号071117，临用前用生理盐水配制成适当浓度(按照2005版药典方法制备)；植物油对照组、跌打扭伤灵喷雾剂和独一味总环烯醚萜苷喷雾剂在实验前剃去小鼠腹部毛，与小鼠腹部涂O.lml相应的药液或植物油。l小时后分别重复涂药一次。然后立即在以上6组动物腹腔注射0.7%醋酸溶液0.lml/10g，观察小鼠的疼痛扭体反应，以典型的后肢伸展，腹部扭曲，腹肌收縮为标准，记录15分钟内各组动物的扭体次数。试验结果如下，用T检验进行统计学分析。表2喷雾剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与阴性对照组比较:p*<0.05，p**<0.01结论表明本发明的独一味总环烯醚萜苷喷雾剂具有显著的镇痛作用。权利要求一种含有独一味的外用液体制剂，其特征在于制剂中含有的有效成分是环烯醚萜苷，独一味环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.99％，其余量为制作外用制剂的辅料和水。2.根据权利要求1所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其特征是该制剂的剂型为外用液体洗剂、外用液体擦剂、气雾剂、膏剂、喷雾剂。3.根据权利要求2所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中液体洗剂、液体擦剂的特征在于按含环烯醚萜苷的重量百分比为O.10-49.9%重量百分比，含药溶媒的重量百分比为99.90-50.01%。4.根据权利要求2所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中气雾剂的特征在于含有效环烯醚萜苷的重量百分比为O.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒、乳化剂、抛射剂，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。5.根据权利要求4所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中的抛射剂是指三氯一氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟甲烷、四氟乙烷中的一种或几种以任意比混合的混合物。6.根据权利要求2所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中膏剂的特征在于含有效环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒、乳化剂、基质，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。7.根据权利要求6所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中基质是指甘油明胶、羧甲基纤维素钠、聚羧乙烯、聚乙二醇一种或几种以任意比混合的混合物。8.根据权利要求2所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中喷雾剂的特征在于含有效环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.9%重量百分比，其余量为辅料溶媒，辅料共含有的重量百分比为99.90-50.01%。9.根据权利要求3-8中任一权利要求所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中的辅料溶媒是水、乙醇、聚乙二醇、l，2-丙二醇，乙二醇一种或几种以任意比混合的混合物。10.根据权利要求4或6中权利要求所述的一种含有独一味的外用液体制剂，其中的乳化剂是指吐温-80，聚氧乙烯烷基醚、十八烷基硫酸钠一种或几种以任意比混合的混合物。全文摘要本发明属于医药领域，特别是涉及一种含有独一味环烯醚萜苷的外用液体制剂及其应用，本发明中的外用制剂含有的有效成分是环烯醚萜苷，独一味环烯醚萜苷的重量百分比为0.10-49.99％，其余量为制作外用制剂的辅料和水，制剂的剂型为外用液体洗剂、外用液体擦剂、气雾剂、膏剂、喷雾剂。文档编号A61K47/32GK101744873SQ200810147750公开日2010年6月23日申请日期2008年12月2日优先权日2008年12月2日发明者向妮,李育飞,阙文彬申请人:甘肃独一味生物制药股份有限公司