专利名称：酶联免疫效果检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及在一种适合实验室外大样本量筛査的酶联免疫效果检测试剂盒。
技术背景疫苗是预防和控制传染性疾病的有效工具，接种疫苗后，机体的免疫细胞被激活并产生 免疫应答，产生相应保护性抗体(主要是IgG抗体)，从而增强抗体的抗病能力。疫苗的质量、 运输方式、保存条件、接种程序以及受种者的个体差异等诸多因素都可能会影响疫苗的免疫 效果。因此，对疫苗免疫效果的监测具有重要意义，对特异性IgG抗体的检测是评价疫苗免 疫效果的重要手段。 一直以来，疫苗接种后的免疫效果监测国内较少实施，主要原因是缺乏 简便有效的实验方法，传统的检测人血清中抗体的方法有血凝抑制试验(需要大量新鲜敏感 的猴红细胞)、中和试验(需要专门组织培养实验室和专业技术人员，而且费时，费力)，因 此，传统的检测方法有多种弊端难以普及，现有的检验器材都是互相分离开的，且效果亦不 理想，更主要的困难是静脉采血分离血清的方法使检测更难于推广应用。 发明内容本实用新型所要解决的技术问题是提供一种酶联免疫效果检测试剂盒，其配置齐全， 携带方便、无需辅助性采购、采样方便，检测灵活，能够通过肉眼目测快速获得结果。本实用新型解决上述技术问题所采用的技术方案是酶联免疫效果检测试剂盒，包括有 试剂箱，其特征在于所述的试剂箱内包含有采血附件和核心试剂盒。按上述方案，所述的采血附件包括有采血针，毛细采血管，带盖离心管、橡皮吸头和离 心管托架。按上述方案，所述的核心试剂盒包括有包被有抗原的预包被酶标板、酶标抗体、辅助检 测液和显色系统，所述的显色系统包括有底物A和底物B，所述的辅助检测液包括有浓縮洗 涤液，阴性血清，终止液，阳性血清，血清样本稀释液。所述的包被有抗原的预包被酶标板包括有包被有脊灰病毒的预包被板，包被有流脑病毒 的预包被板，包被有甲肝病毒的预包被板或包被有乙脑病毒的预包被板。本实用新型的使用方法是通过采血针收集手指血、耳垂血等末梢血，将所取末梢血置 于带盖离心管中，血球自然沉降，取上清血浆到检测试剂盒内，检测血清中是否产生抗体。 预包被酶标板上的抗原与人体血清中抗体产生特异性结合，酶标抗体又与血清中的抗体产生 特异性的结合，最后通过酶标抗体上的酶的催化作用使显色系统显色，根据颜色的有无来判 断产生抗体与否，根据颜色的深浅来判断产生抗体的多少。本实用新型利用免疫学方法在体外以末梢血作样本筛查接种人群是否产生抗体，适于实 验室外大样本量的接种后抗体筛査。本发明相比现有技术具有如下优点1、 配置齐，采用集成技术，产品融核心试剂与采样附件于一体，不需要其他的辅助性采 购，减短血清收集时间。利用抗原抗体之间的特异性的反应，通过他们之间免疫亲和力进行 快速结合，快速出结果，全程检测90分钟即可报告免疫抗体产生结果；2、 采样方便，检测灵活，直接采取人体末梢血(耳垂血或手指血)检测；.3、 能满足广泛的筛查，操作简便，能够通过目测法获得最后最终的结果，适于基层和缺 乏实验室条件的大规模普査用。
图1为本实用新型的结构示意图。 具体实施方案
以下结合附图和实施例对本实用新型做进一步的说明，但是此说明不能构成对本实用新 型的限制。一种适合实验室外大样本量筛查的酶联免疫效果检测试剂盒，如图1所示，其组成结构 如下包括有试剂箱，所述的试剂箱内包含有采血附件、核心试剂盒，所述的采血附件包括有采血针2，毛细采血管l，带盖离心管4、橡皮吸头5和离心管托架，所述的核心试剂盒包 括有包被有抗原的预包被酶标板3、酶标抗体12、辅助检测液和显色系统，所述的显色系统 包括有底物A8和底物B11，所述的辅助检测液包括有浓縮洗涤液6，阴性血清7，终止液9， 阳性血清10,血清样本稀释液13，所述的包被有抗原的预包被酶标板可以为包被有脊灰病毒 的预包被板，包被有流脑病毒的预包被板，包被有甲肝病毒的预包被板或包被有乙脑病毒的 预包被板。具体检测步骤A:用一次性采血针采集末梢血(手指血或耳垂血)，用一次性定量采血管取20ul，加到预 先盛有180 ul生理盐水的0.5ml带盖离心管中，待血球全部自然沉降到管底后，便可直接取 上清液检测。B:血清样本应新鲜、无污染、无溶血、无血脂。检验方法1. 实验前，将试剂盒从冰箱取出，室温放置30分钟后使用。2. 将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释20倍后使用。3. 每次试验设阳性对照、阴性对照各1孔，每孔加对照液100ul;空白1孔(不加血清酶标抗体，只加底物A、 B和终止液)；其余为样品孔，每孔加血清样品 稀释液2滴(50ul/滴，下同)和样品10ul，贴上封口膜置37。C温育30分钟。4. 弃去孔中液体，拍干，每孔加洗涤液300ul，静置1分钟后弃去，拍干，重复洗涤5 次，拍干。5. 加入酶标抗体2滴，贴上封口膜，置37'C温育30分钟。6. 弃去孔中液体，拍干，每孔加洗涤液300ul，静置1分钟后弃去，拍干，重复洗涤5 次，拍干。7. 每孔滴加底物A、底物B各1滴，37"C避光显色15分钟。检验结果的解释目测在白色背景下，观察各孔显色情况，蓝色者为阳性，无色或微蓝色者为阴性。
权利要求1、酶联免疫效果检测试剂盒，包括有试剂箱，其特征在于所述的试剂箱内包含有采血附件和核心试剂盒。
2、 按权利要求1所述的酶联免疫效果检测试剂盒，其特征在于所述的采血附件包括有采 血针(2)，毛细采血管(1)，带盖离心管(4)、橡皮吸头(5)和离心管托架。
3、 按权利要求1或2所述的酶联免疫效果检测试剂盒，其特征在于所述的核心试剂盒包 括有包被有抗原的预包被酶标板(3)、酶标抗体(12)、辅助检测液和显色系统，所述的显色 系统包括有底物A (8)和底物B (11)，所述的辅助检测液包括有浓縮洗涤液(6)，阴性血清(7),终止液(9)，阳性血清(10),血清样本稀释液(13)。
4、 按权利要求3所述的酶联免疫效果检测试剂盒，其特征在T所述的包被有抗原的预包 被酶标板包括有包被有脊灰病毒的预包被板，包被有流脑病毒的预包被板，包被有甲肝病毒 的预包被板或包被有乙脑病毒的预包被板。
专利摘要本实用新型涉及在一种适合实验室外大样本量筛查的酶联免疫效果检测试剂盒，包括有试剂箱，其特征在于所述的试剂箱内包含有采血附件和核心试剂盒。本实用新型相比现有技术具有如下优点1.配置齐，采用集成技术，产品融核心试剂与采样附件于一体，不需要其他的辅助性采购，减短血清收集时间。利用抗原抗体之间的特异性的反应，通过他们之间免疫亲和力进行快速结合，快速出结果，全程检测90分钟即可报告免疫抗体产生结果；2.采样方便，检测灵活，直接采取人体末梢血(耳垂血或手指血)检测；3.能满足广泛的筛查，操作简便，能够通过目测法获得最后最终的结果，适于基层和缺乏实验室条件的大规模普查用。
文档编号A61B5/15GK201316269SQ200820192419
公开日2009年9月30日 申请日期2008年11月13日 优先权日2008年11月13日
发明者慧 孙, 军 安, 燕 王, 王帮洲, 蔡圣明, 琰 陈, 龚镇奎 申请人:湖北楚冠生物药业有限公司