专利名称：一种多西紫杉醇长循环脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种多西紫杉醇制剂及其制备方法。
背景技术：
多西紫杉醇为紫杉烷类抗肿瘤药物，是由浆果紫杉(Taxus baccata, Europeanyew)针叶中提取物或是由可再生的紫杉针状生物菌体提取的前体化合物经半合 成而来。目前上市的剂型为注射剂，该注射剂先将药物溶解于吐温80中，临床使用前，用 13%乙醇水溶液稀释至lmg/ml，而在给药时，进一步用5%葡萄糖溶液稀释，使最终药物浓 度达到0. 3 0. 9mg/L，稀释后的注射液应在4小时内使用，否则将可能会有沉淀产生。研 究发现，Tween-80诱导的短暂适中的超敏反应与Tween-80可能造成体液滞留有关。因此 在使用前均须使用抗组胺类药物和菲留体抗炎药物进行预处理，但药物的临床应用表明， 即使是经过预处理的患者，在临床应用紫杉烷类药物后，仍有3%左右的患者会出现不同程 度的过敏反应。另外Tween-80还具有轻微的溶血性，而且黏度大。多西紫杉醇作为细胞毒 性抗肿瘤药物，其全身毒性，特别是造成中性粒细胞减少症等免疫系统毒性，给患者的身心 造成了极大的损害，使其临床应用也因此受到了一定局限。因此，如何减轻多西紫杉醇注射 液的毒性，成为人们所十分关注的热点之一。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是公开一种多西紫杉醇脂质体及其制备方法，以克服 现有技术存在的上述缺陷，满足医药领域发展的需要。本发明的多西紫杉醇脂质体由治疗有效量的活性成分和包裹在类脂双分子层薄 膜构成；所说的活性成分为多西紫杉醇，优选的重量份为多西紫杉醇1 20，类脂双分子层薄膜10 330份；所说的类脂双分子层薄膜的组分和重量份包括磷脂 10 100份胆固醇1 10份表面活性剂 1 30份所述及的磷脂选自天然磷脂，如卵磷脂、蛋磷脂或合成磷脂，如磷脂酰胆碱或其混 合物；所述及的胆固醇为天然胆固醇，包括以蛋黄、动物脑髓、羊毛脂等为原料生产的胆 固醇；所说的表面活性剂选自泊洛沙姆类的一种或其混合物。上述多西紫杉醇脂质体的制备方法包括如下步骤将多西紫杉醇和磷脂、胆固醇溶于有机溶媒中，于40 70°C的温度下蒸发成膜，加入含表面活性剂的缓冲液在_4 4°C下冷藏10 60分钟，使膜充分水合，混合或搅拌， 最好采用涡旋混合，混合时间为10 200分钟，制得多西紫杉醇脂质体；所说的涡旋混合指的是载液容器置旋涡振荡器上进行混合的操作。有机溶媒选自甲醇、乙醇、氯仿、异丙醚、乙酸乙酯或乙醚中的一种或其混合物。所说的含表面活性剂的缓冲液中含表面活性剂的重量浓度为 30%，pH为 3. 0 10. 0，并可采用磷酸盐缓冲液体系；所获得的多西紫杉醇脂质体的粒径为70 500nm。可经冻干后制备成注射用多西 紫杉醇脂质体冻干粉。本发明的多西紫杉醇脂质体制剂为细胞类抗癌药物，可用于治疗卵巢癌、晚期乳 腺癌、非小细胞性肺癌、胰腺癌、软组织肉瘤、头颈癌、胃癌和前列腺癌等疾病，使用剂量为 每三周75mg/m2滴注1小时。本发明将多西紫杉醇包封于类脂双分子层形成的薄膜中，并以表面活性剂包裹脂 质体制成一种超微球状长循环脂质体制剂，能够充分改善多西紫杉醇在体内处置方式，减 少与血浆中调理成分的结合，从而增加其在血液中的稳定性。长循环脂质体能更持久地延 长药物在血流中的时间，避免网状内皮系统(RES)的吞噬，以获得更充足的时间到达靶向 部位，从而增加多西紫杉醇的疗效，减少多西紫杉醇的治疗剂量和降低药物毒副作用。
具体实施例方式实施例1将l.Omg的多西紫杉醇，100. Omg大豆磷脂，8. Omg胆固醇溶于IOml乙醇中，得溶液A。将A于40°C的水浴中通过旋转蒸发成膜，得膜B。将200mg泊洛沙姆溶于5ml pH = 6. 8的磷酸盐缓冲液，得溶液C。将溶液C加入膜B中，在4°C以下冷藏30分钟使膜充分水合，再涡旋混合15分钟
制得广品。将产品应用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和未包封的游离药物，加甲醇溶解，取甲醇 溶液应用高效液相色谱仪测定峰面积，将峰面积代入回归方程求浓度，计算出包封率为 90. 3%。取约10. Omg原料药，精密称定，置IOml量瓶中，加甲醇超声溶解，放冷，定容至刻 度作为储备液，精密吸取储备液适量以甲醇为溶剂分别稀释成浓度为2. 503μ g/ml，5. 06g/ ml, 10. 12 μ g/ml，25. 03 μ g/ml，50. 60 μ g/ml，250. 3 μ g/ml 的浓度系列。取上述标准溶液各 20 μ 1注入色谱仪，在上述色谱条件下进样分析，记录峰面积，结果见下表 以峰面积平均值对浓度c进行直线回归，得A 平=c 28122. 92-7284. 22 r = 0. 9999实施例2将4mg多西紫杉醇，80mg磷脂酰胆碱，IOmg胆固醇溶于IOml乙醇与氯仿混合物中 (1 1，体积比)，得溶液A。将A于40°C的水浴中通过旋转蒸发成膜，得膜B。将200mg泊洛沙姆溶于5ml pH = 9的磷酸盐缓冲液，得溶液C。将溶液C加入膜B中，在_4°C以下冷藏30分钟使膜充分水合，再涡旋混合15分钟 制得广品°实施例3将实施例1和多西紫杉醇注射液的通过尾静脉给药，测定两种剂型半数致死量 (LD5tl),采用改良寇氏法计算，结果如下多西紫杉醇长循环脂质体的急性毒性明显小于多 西紫杉醇注射液，LD5tl剂量是多西紫杉醇注射液的2倍多，表明所制备的多西紫杉醇碱长循 环脂质体能降低药物的毒性。结果见下表多西紫杉醇注射液和多西紫杉醇长循环脂质体LD5tlU士 S)
权利要求
多西紫杉醇长循环脂质体，其特征在于，由治疗有效量的活性成分和包裹在类脂双分子层薄膜构成，所说的活性成分为多西紫杉醇，所说的类脂双分子层薄膜的组分和重量份包括磷脂 10～100份胆固醇1～10份表面活性剂1～10份。
2.根据权利要求1所述的多西紫杉醇长循环脂质体，其特征在于，重量份为多西紫杉 醇1 4，类脂双分子层薄膜10 110份。
3.多西紫杉醇长循环脂质体，其特征在于，由治疗有效量的活性成分和包裹在类脂双 分子层薄膜构成，所说的活性成分为多西紫杉醇，所说的类脂双分子层薄膜的组分和重量 份包括磷脂10 100份胆固醇1 10份表面活性剂 1 10份
4.根据权利要求3所述的多西紫杉长循环醇脂质体，其特征在于，重量份为多西紫杉 醇1 4，类脂双分子层薄膜10 110份。
5.根据权利要求1 4任一项所述的多西紫杉醇长循环脂质体，其特征在于，所述及的 磷脂选自天然磷脂或磷脂酰胆碱或其混合物。
6.根据权利要求1 4任一项所述的多西紫杉醇长循环脂质体，其特征在于，所说的表 面活性剂选自泊洛沙姆类中一种或其混合物。
7.根据权利要求1 6任一项所述的多西紫杉醇长循环脂质体的制备方法，其特征在 于，包括如下步骤将多西紫杉醇和磷脂、胆固醇溶于有机溶媒中，蒸发成膜，加入含表面活 性剂的pH为3. 0 10. 0的缓冲液在-4 4°C下冷藏10 60分钟，混合或搅拌，制得多西 紫杉醇环脂质体，有机溶媒选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、异丙醚或乙醚中的一种或其混 合物。
8.根据权利要求7所述的多西紫杉醇长循环脂质体的制备方法，其特征在于，于40 70°C的温度下蒸发成膜。
9.根据权利要求7所述的多西紫杉醇长循环脂质体的制备方法，其特征在于，采用超 声波混合，混合时间为10 200分钟。
全文摘要
本发明的目的在于提供一种多西紫杉醇长循环脂质体的制备方法。它是通过将多西紫杉醇和磷脂、胆固醇等载体材料共同溶于有机溶媒中，于40～70℃的水浴中通过旋转蒸发成膜，加入含表面活性剂的缓冲液在4℃以下冷藏10～60分钟使膜充分水合，再混合或搅拌制得多西紫杉醇脂质体。本发明将多西紫杉醇制成70～500nm脂质体，可经冻干后制备成注射用多西紫杉醇长循环脂质体冻干粉。
文档编号A61K9/127GK101884616SQ20091005725
公开日2010年11月17日 申请日期2009年5月14日 优先权日2009年5月14日
发明者奉建芳, 罗远, 黄盼华 申请人:上海基赛生物医药科技有限公司;上海市计划生育科学研究所